支气管哮喘HLA—DRB1等位因素分析

目的：用分子生物学的方法探讨LA－DRB1等位基因与免疫遗传的关系。方法：应用序列特异性引物聚合酶链反应（PCR－SSP）基因分型方法鉴定HLA－DRB1与天津地区支气管哮喘（asthmaAS)的相关性。结果：表明支气管哮喘患者的DR3较健康对照明显升高（11．76％vs33%,x^2=4.25,P&;lt;0.05);而DR^6(13)在支气管哮喘患者中虽有升高,但无统计学意义（8．82％vs4.44%,x^2=1.25,P&;gt;0.05);支气管患者DR2（15）频率明显降低（5．88％vs16.67%,x^2＝4．26,P＜0．05）。结论：表明DR3与支气管哮喘易感性呈正相关,而DR2(15)与支气管哮喘抗性相关。     

支气管哮喘HLA-DRB1等位基因分析

目的 :用分子生物学的方法探讨HLA DRB1 等位基因与免疫遗传的关系。方法 :应用序列特异性引物聚合酶链反应 (PCR SSP)基因分型方法鉴定HLA DRB1 与天津地区支气管哮喘 (asthmaAS)的相关性。结果 :表明支气管哮喘患者的DR3 较健康对照明显升高 (11 76 %vs3 33% ,χ2 =4 2 5 ,P<0 0 5 ) ;而DR6(1 3 ) 在支气管哮喘患者中虽有升高 ,但无统计学意义 (8 82 %vs 4 44 % ,χ2 =1 2 5 ,P >0 0 5 ) ;支气管患者DR2 (1 5) 频率明显降低 (5 88%vs 16 6 7% ,χ2 =4 2 6 ,P <0 0 5 )。结论 :表明DR3 与支气管哮喘易感性呈正相关 ,而DR2 (1 5) 与支气管哮喘抗性相关     

β2肾上腺素受体基因多态性和支气管哮喘的关系

目的探讨β2肾上腺素受体(β2-adenergic receptor, β2AR)基因多态性与我国北方汉族支气管哮喘遗传易感性及与哮喘临床表型间的关系.方法采用聚合酶链反应(PCR)—限制性内切酶片段长度多态性(RFLP)和等位基因特异性PCR(ASP)检测16、27、164位β2AR基因多态性在125名哮喘患者和96名健康对照者间的分布;并测定哮喘患者血清的TIgE、肺通气功能(FEV1,FEV1%,FEV1/FVC)、支气管舒张试验、乙酰甲胆碱(Mch)气道激发试验(如果FEV1%>70%). 结果 Gly16纯合基因型在哮喘组的频率较健康对照组的频率明显升高(22.4% vs 8.3%,P<0.05),优势比(OR)为2.918(95%CI 1.256~6.781);等位基因Gly16的频率在哮喘组明显高于健康对照组(0.26 vs 0.16,P<0.05);Gly16纯合子在夜间哮喘患者的频率分布较非夜间哮喘患者明显增高(35.3% vs 13.5%,P<0.01);Gln27纯合子的个体较Glu27纯合子和Glu/Gln27的杂合子个体气道激发试验所用Mch剂量明显低[(0.205(0.275) vs β2.11(3.00) vs (1.575(0.828)(mol,P<0.05);16,27位β2AR基因型对哮喘患者的气道可逆性的改善、总IgE水平、肺功能的损害无影响.结论 Gly16/β2AR纯合基因型与我国北方汉族哮喘患者的遗传易感性有关,并与哮喘患者夜间症状加重明显有关,但不是哮喘发病的独立危险因素;Glu27/β2AR纯合基因型与哮喘患者气道高反应性有关.     

支气管哮喘发作期红细胞膜ATP酶SOD、XOD的变化及意义

目的探讨支气管哮喘发作期红细胞膜ATP的变化及其与SOD、XOD的相关性.方法对28例支气管发作患者和50例正常健康人采用Hanahan测定Na+-K+-ATP酶;采用Lathral测定Ca2+-ATP酶;采用Pyragllal-ABT法测定SOD;采用分光光度法测定XOD.结果患者Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性明显低于正常对照组(P<0.01);患者XOD明显高于正常对照组(P<0.01),SOD明显低于正常对照组(P<0.01);红细胞膜Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性与血XOD呈高度负相关性(r=-0.871,P<0.01,r=-0.685,P<0.01).结论支气管哮喘患者体内自由基生成增加,体内清除氧自由基的功能降低,从而引起细胞膜ATP酶的损伤,干扰了细胞内外Ca2+,Mg2+的交换,这可能是哮喘发病的重要环节之一.     

脑梗死患者血浆神经肽Y、降钙素基因相关肽、神经降压素、胃动素动态变化及其临床意义

观察脑梗死(CI)患者神经肽Y(NPY)、神经降压素(NT)、胃动素(MTL)、降钙素基因 相关肽(CGRP)浓度变化及其临床意义。方法选择C162例,用放免法检测血浆NPY、NT、MTL与CGRP浓度。结果NPY、NT与MTL浓度显著高于对照组(P<0.0001);于发病后24h内显著升高,7d内达高峰,8～15d开始下降,15d后仍在较高水平。NPY浓度重型与大灶组显著高于轻型(P<0.05)与小灶组(P<0.01);发病积分≥6分组显著高于<6分组(P<0.05);高血压组显著高于正常血压组(P<0.05)。NT与MTL浓度重型组显著高于中(P<0.05)、轻型组(P<0.01);高血糖组显著高于正常血糖组(P<O.01)。CGRP浓度显著低于对照组(P<0.0001),发病24h内即显著降低,2～7d进一步降低,8～15d开始升高,15d后逐渐升至正常水平。重型与大灶组显著高于轻型(P<0.0001)、中型(P<0.01)与小灶组(P<0.01);伴发病积分≥6分组显著低于<6分组(P<0.05)。结论CI患者NPY、NT、MTL、CGRP浓度变化以7d内最显著,15d后逐渐恢复正常水平;四种浓度监测可作为判断CI患者病情严重程度、病灶大小及伴发病的实验室指标。     

人类白细胞抗原-DRB基因与儿童哮喘的相关性

目的 调查人类白细胞抗原(HLA)-DRB等位基因在哮喘患儿中的分布频率及其与哮喘严重程度的相关性.方法 采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)对北京市117例哮喘患儿和120名健康儿童进行HLA-DRB基因分析,计算HLA-DRB各等位基因在哮喘患儿和正常儿童的分布频率、比值比(OR)值,筛查出与哮喘相关的易感基因或抗性基因.结果 HLA-DR2(15)等位基因在哮喘息儿组的频率显著高于对照组[12.0%(28/234)比5.4%(13/240),P=0.011,OR=2.590];而DR4、DR6(1402)、DR9、DR53等位基因在哮喘患儿组的频率[9.4%(22/234)、0.9%(2/234)、17.1%(40/234)、29.5%(69/234)]均显著低于对照组[16.3%(39/240)、5.0%(12/240)、31.3%(75/240)、44.2%(106/240),P=0.026、0.008、0.000、0.001,OR=0.481、0.157、0.312、0.190)];其他等位基因分布差异均无统计学意义.以DR2(15)、DR4、DR6(1402)、DR9、DR53及性别、家族史为自变量,进行哮喘发病相关因素的Logistic回归分析,各等位基因OR值的95%CI分别为1.010～2.245,0.757～1.116,0.603～1.054,0.855～1.014,0.971～1.010.对HLA-DR2(15)等位基因阳性和阴性的患儿与哮喘严重程度进行相关分析,差异无统计学意义.结论 HLA-DR2(15)为儿童哮喘的易感基因,但其与哮喘严重程度无关.     

重型再生障碍性贫血免疫抑制治疗疗效预测指标的研究

目的 探索可能用于重型再生障碍性贫血(再障)免疫抑制治疗(IST)疗效预测的指标.方法 收集37例重型再障患者的静脉血标本,20例健康献血员作为正常对照.采用酶联免疫吸附实验检测血浆内白介素-2(IL-2)及干扰素-γ(IFN-γ)水平,采用序列特异引物聚合酶链反应检测HLA-DRB1*15及HLA-DRB1*1501,结合年龄、性别及粒细胞和红细胞膜表面CD55、CD59表达情况等,对各项指标与疗效的关系进行统计分析.结果 治疗前IL-2水平升高者有效率高于水平降低者(66.7% vs 28.6%,P<0.05);治疗前IFN-γ水平升高者有效率高于水平降低者(73.7% vs 25 0%,P<0.05);HLA-DRB1*15阳性者有效率与阴性者差异无统计学意义(62.5% vs 44.4%,P>0.05);HLA-DRB1*1501阳性者与阴性者有效率均为50%;CD55、CD59表达降低者有效率与表达未降低者差异无统计学意义(80.0% vs 40.0%,P>0.05);年龄≤40岁者有效率高于年龄>40岁者(60.0% vs 14.3%,P<0.05);女性患者有效率高于男性患者(62 5% vs 42 9%,P<0 05).结论 重型再障患者治疗前血浆IL-2、IFN-γ水平、性别及年龄可作为IST疗效预测指标,而HLA-DRB1*15、HLA-DRB1*1501及CD55、 CD59在本研究中不具有预测作用.     

不同亚型Smads信号蛋白在慢性支气管哮喘小鼠肺组织表达的意义

目的 观察慢性支气管哮喘小鼠肺组织内Smads不同亚型信号蛋白的表达,探索不同亚型Smads蛋白及其传导的信号通路在慢性支气管哮喘小鼠慢性气道炎症及气道重塑过程中的作用。 方法 建立急性哮喘及慢性哮喘小鼠动物模型,行肺组织病理切片,分别以免疫组织化学法和Western-blot法检测肺组织Smad 1,3,4,5,7的表达。 结果 慢性哮喘组小鼠的肺组织病理可见杯状细胞顶部空泡化明显,支气管黏膜下及肺实质血管旁多种炎症细胞浸润,支气管黏膜皱襞明显增多,上皮细胞增生紊乱。免疫组织化学法和Western-blot法检测结果显示,急性哮喘组小鼠的R-Smads(Smad 1,3,5)及Co-Smad(Smad 4)表达较正常对照组均明显升高(P<0.05),I-Smad(Smad 7)表达减少(P<0.05); 慢性哮喘组BMP/Smads信号通路Smads蛋白(Smad 1,5)表达较急性哮喘组降低(P<0.05),Smad 7较急性哮喘组明显升高(P<0.05),而TGF-β1/Smads信号通路Smads蛋白(Smad 3)及Co-Smad(Smad 4)表达则较急性哮喘组进一步升高(P<0.05)。 结论 转导不同上游信号分子的Smads蛋白所介导的信号通路在慢性支气管哮喘活化状态不同,TGF-β1/Smads信号通路在慢性支气管哮喘活化,BMP/Smads信号通路在急性哮喘中活化,但在慢性哮喘中活化降低。     

腺苷、白介素-1及茶碱对哮喘患者外周血单核细胞A2腺苷受体mRNA表达的影响

目的通过研究腺苷、白介素(IL)-1、茶碱对哮喘患者外周血单个核细胞(PBMCs)表达A2a及A2b腺苷受体(A2aAR及A2bAR)mRNA的影响,探讨A2aAR及A2bAR在哮喘发病中的作用,为临床使用茶碱提供理论依据。方法11例正常人及哮喘患者PBMCs经Ficoll液分离,分对照组、腺苷组、腺苷+IL-1组及腺苷+茶碱4组,体外培养18小时,收集细胞,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法和图象分析半定量法检测A2aAR及A2bARmRNA表达。结果正常人及哮喘患者各组PBMCs表达A2aARmRNA无明显差异(P>0.05)。哮喘患者PBMCsA2bARmRNA表达较正常人增加(P<0.01);腺苷、IL-1促进哮喘患者PBMCs表达A2bARmRNA(P<0.05);茶碱对正常人及哮喘患者PBMCs表达A2bARmRNA均有抑制作用(P<0.01)。腺苷及IL-1对哮喘患者PBMCsA2bARmRNA表达的影响与血清TIgE水平呈正相关(P<0.05),与FEV1%呈负相关P<0.05)。结论哮喘患者PBMCs表达A2bARmRNA增加,腺苷及IL-1促进其表达,且与患者机体过敏状态及气道阻塞程度相关,茶碱能抑制A2bARmRNA表达;腺苷、IL-1及茶碱对PBMCs表达A2aARmRNA无明显影响。     

HLA-DRB1 allele in 35 patients with alveolar echinococcosis in Gansu Province of China

Objective To investigate the association between histocompatibility leukocyte antigen (HLA)-DRB1 alleles and alveolar echinococcosis (AE).Methods Thirty-five patients with AE in high prevalence areas in Gansu Province of China were tested for the HLA-DRB1 gene using the polymerase chain reaction with sequence-specific primer (PCR-SSP) technique. The results were compared with those of 104 healthy individuals.Results The frequency of the HLA-DRB1*040x gene was 26% in the patient group, which was significantly higher than that in the control group (9.62%) with a relative risk (RR) of 4.45 (χ2 =13.67, P&lt;0.01), and an etiological fraction (EF) of 0.20. The frequency of the HLA-DRB1*0701 allele was significantly lower in the patient group (2.86%) as compared to the control group (13.94%; χ2=6.67, P&lt;0.05) with a preventable fraction (PF) of 0.30. The frequencies of other DRB1 alleles were not significantly different.Conclusion Susceptibility to AE is significantly associated with the HLA-DRB1*040x. HLA-DRB1*0701 gene might confer protection against AE in humans.