血管内皮细胞生长因子受体结构与功能分析

血管内皮细胞生长因子受体(VEGFR)是VEGF特异性的受体,属于酪氨酸激酶亚家庭中的一个新成员,具有特征性的胞外区和酪氨酸激酶区,因其在刺激血管内皮细胞增殖、促进新生血管生成,特别是在促进肿瘤生长及转移中的作用,已越来越成为人们研究的热点。本文概括了3种VEGF受体在体内的不同分布,分析了不同VEGF受体在碱基序列及蛋白质功能结构域的异同,并介绍了可溶性VEGF受体功能差异,以及在肿瘤及与血管生成有关等疾病上的应用。     

血管内皮细胞生长因子受体2作为恶性血管源性肿瘤和间皮瘤的标记:262例血管内皮源性及1640例非血管源性肿瘤免疫组化研究

血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)是KDR基因编码的、主要表达于血管内皮细胞的Ⅴ型酪氨酸激酶受体,对VEGF通路信号起反应并调节内皮细胞的迁移和增殖。VEFGR2主要表达于肿瘤新生血管的内皮细胞及血管源性肿瘤,也有大量表达于乳腺癌、结肠癌、非小细胞肺癌及尿路     

VEGF及其受体在肿瘤抗血管治疗中的应用

血管内皮生长因子 (VEGF)及其受体 (VEGFR)在肿瘤治疗中的研究日渐深入 ,通过抑制VEGF及其受体的表达 ;阻止VEGF与其受体的结合 ;阻断VEGF与其受体结合后的信号传递等可抑制肿瘤生长 ,为肿瘤的治疗提供了新的方法和方向     

血管内皮生长因子研究进展

血管内皮生长因子(VEGF)是一种能特异地作用于血管内皮细胞的生长因子。在生理和病理情况下均有表达。本文就VEGF的分子特征、VEGF受体及信号传导机制、表达调节和生物学特征作一综述。     

人脑胶质瘤血管内皮细胞生长因子受体表达的研究

目的研究人脑胶质瘤血管内皮细胞生长因子受体(Vascular endot helial growth factor receptors, VEGFR)的表达及意义.方法应用免疫组织化学技术,检测52例手术切除的脑胶质细胞瘤组织中两种VEGFR(flt-1和fl k-1)的表达.结果①胶质细胞瘤组织中有flt-1和flk-1的表达 , 主要表达于肿瘤血管内皮细胞, 同时巨噬细胞的胞浆中也有表达;② 3组胶质细胞瘤中,VEGFR的表达率分别为16.0%、58.8%、90.0%,3组间有差异(p<0.05 );③脑胶质细胞瘤中, flt-1的表达与flk-1 的表达相关(R=0.993,p<0.01).结论正常脑组织中无VEGFR表达,脑胶质细胞瘤中有VEGFR表达,主要表达于血管内皮细胞中,VEGF通过旁分泌途径刺激脑胶质细胞瘤的血管发生; VEGF的促血管发生作用既可通过血管内皮细胞的VEGFR直接产生,又可通过促进巨噬细胞的局灶浸润间接产生;VEGFR表达与脑胶质瘤恶性程度呈正相关.     

人脑胶质瘤血管内皮细胞生长因子受体表达的研究

目的　研究人脑胶质瘤血管内皮细胞生长因子受体 (Vascularendothelialgrowthfactorreceptors,VEGFR)的表达及意义 .方法　应用免疫组织化学技术 ,检测 5 2例手术切除的脑胶质细胞瘤组织中两种VEGFR(flt- 1和flk - 1)的表达 .结果　①胶质细胞瘤组织中有flt- 1和flk- 1的表达 ,主要表达于肿瘤血管内皮细胞 ,同时巨噬细胞的胞浆中也有表达 ;② 3组胶质细胞瘤中 ,VEGFR的表达率分别为 16 .0 %、5 8.8%、90 .0 % ,3组间有差异 (p <0 .0 5 ) ;③脑胶质细胞瘤中 ,flt- 1的表达与flk - 1的表达相关 (R =0 .993,p<0 .0 1) .结论　正常脑组织中无VEGFR表达 ,脑胶质细胞瘤中有VEGFR表达 ,主要表达于血管内皮细胞中 ,VEGF通过旁分泌途径刺激脑胶质细胞瘤的血管发生 ;VEGF的促血管发生作用既可通过血管内皮细胞的VEGFR直接产生 ,又可通过促进巨噬细胞的局灶浸润间接产生 ;VEGFR表达与脑胶质瘤恶性程度呈正相关     

血管内皮生长因子受体flk同源新基因的克隆及序列分析

肿瘤血管的形成受到多种因素的影响[1],目前已知血管内皮生长因子受体 (vascularendothelialgrowthfactorreceptor ,VEGFR) :flt(fms liketyrosinekinase ,VEGFR 1)和flk(fetalliverkinase ,VEGFR 2 )在其中起着重要的作用[2 ]。在血管内皮细胞表面是否还存在着其他血管内皮生长因子受体尚未可知。为了更进一步地研究VEGFR在内皮细胞膜上的表达 ,寻找影响肿瘤血管形成的其他分子 ,探讨肿瘤血管形成的多分子作用机制 ,我们以flk胞外 2～ 4区的免疫球蛋白样袢 (Ig likeloop)的cDNA作为模板设计引物[3 ,4],从小鼠骨髓干细胞中利用PC…     

VEGF及其受体的生物学特性

血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)及其受体(VEGFR1-VEGFR3)在血管生成中占有重要作用,VEGF有五个成员:VEGF-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGFD、以及胎盘生长因子(PlGF);三种受体:VEGFR1-VEGFR3。VEGF-A主要结合在VEGFR-1和VEGFR-2,VEGF-B和PlGF只结合在VEFGR-1上,VEGF-C和VEGF-D只结合在VEGFR-3上。不同的受体在不同的细胞上表达不一致,VEGFR-1主要表达在造血干细胞上;VEGFR-2主要表达在血管内皮细胞上;VEG-FR-3主要表达在淋巴内皮细胞上。VEGF的表达受到低氧转录因子HIF-1的调控,HIF-1是具有PAS环状结构的异二聚体,有三个亚单位:HIF-1α、HIF-2α、HIF-1β,HIF-1蛋白的稳定与降解受上游脯氨酰-4-羟化酶(PHDs)以及抑制因子FIH的调节。VEGF诱导肿瘤血管生成,促进肿瘤的播散、转移。拮抗VEGF的表达则成为抑制肿瘤血管生成的重要策略。     

人工合成VEGF表位模拟7肽的生物学功能研究

目的: 检测人工合成血管内皮细胞生长因子(VEGF)表位模拟 7肽特异抑制VEGF促进人脐静脉内皮细胞(HUVEC)生长的活性。方法: 通过噬菌体展示技术, 筛选获得了表达模拟肽的阳性噬菌体克隆, 经测序得到VEGF表位模拟肽序列: GWYYDAX。人工合成该短肽, 用体外细胞培养的方法检测其对HUVEC的生长抑制作用。结果: 表位模拟肽GWYYDAX可剂量依赖性抑制VEGF促进HUVEC生长的活性。结论: VEGF表位模拟肽可能模拟了VEGF的部分结构, 竞争结合HUVEC细胞VEGF受体 (KDR), 阻断了VEGF VEGFR的信号传递而抑制细胞生长, 具有潜在的应用前景。     

抗人VEGF受体Ⅱ胞外Ⅲ区单克隆抗体的制备

目的 制备人血管内皮细胞生长因子受体Ⅱ(Kinase insert domain tontaining receptor,KDR)胞外Ⅲ区的单克隆抗体(McAb)，探讨其抑制VEGF诱导的体外活性。方法 在大肠杆菌中表达重组KDR胞外Ⅲ区融合蛋白。融合蛋白经抗E—tag柱分离纯化后免疫Balb/c小鼠，采用传统杂交瘤技术制备抗KDR胞外Ⅲ区McAb，采用ELISA和Western免疫印迹鉴定其亚类和抗原结合特异性，并测定单克隆抗体对VEGF165刺激脐静脉内皮细胞株ECV304增殖的中和活性。结果 成功筛选出一株能稳定分泌KDR胞外Ⅲ区单克隆抗体的杂交瘤细胞株(1D3)，其分泌抗体亚类为IgGl。该McAb可明显阻断VEGF165对脐静脉内皮细胞株ECV304的刺激增生作用。结论 抗人血管内皮细胞生长因子受体KDR胞外Ⅲ区McAb可通过封闭KDR而抑制VEGF活性，McAb 1D3具有潜在治疗肿瘤的活性。     

VEGF与鼻咽癌

血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor,VEGF）是一种分子量约为20.000-～23.000、具有肝素结合活性的同源二聚体多肽,VEGF的生物学效应是通过其特异性受体VEGFR来介导实现的。VEGF具有多种生物学功能，是一种内皮细胞特异性有丝分裂原，促进内皮细胞增殖，提高血管通透性，改变细胞外基质，对组织器官的发生、正常状态的维持起重要作用，更为重要的是VEGF能促进肿瘤血管的形成，     

高氧对新生大鼠肺血管内皮生长因子及其受体表达的影响

目的研究高浓度氧持续吸入后新生大鼠肺部VEGF及其受体VEGFR1和VEGFR2的表达规律,探讨高氧性BPD肺血管发育异常的损伤机制;方法采用新生Wister大鼠制作BPD模型,免疫组化方法观察实验组和对照组在生后1d、4d、7d、14d、21d肺组织内VEGF、VEGFR1、VEGFR2的合成和分布情况;结果新生鼠肺部VEGF及其受体VEGFR1和VEGFR2表达生后随日龄增长而增加,高氧造成肺泡简化和肺纤维化的病理改变,导致上述血管因子表达减少;结论肺血管的生长是正常肺泡发育重要环节,推测高氧诱导的VEGF信号通路的改变可能是BPD病理改变的重要成因.     

核苷类逆转录酶抑制剂对血管生成和淋巴管生成的作用和机制研究

目的:鸡尾酒疗法使得HIV阳性病人面对的临床挑战从免疫缺陷转移到心血管疾病等慢性疾病。然而,鸡尾酒疗法在生理性血管生长中的作用并不清楚。本文研究了鸡尾酒疗法骨干药物——核苷类逆转录酶抑制剂(NRTIs)对血管和淋巴管生成的影响。方法:利用体外细胞生长检测研究内皮细胞的凋亡、增殖和迁移,体内耳部和胶栓模型研究血管/淋巴管生成,Western blot检测信号通路,免疫荧光显微镜技术检测膜受体内吞。结果:药理浓度下,3种不同类型的NRTIs药物(TDF、AZT和3TC)在体内和体外都可以通过影响内皮细胞的增殖与迁移抑制血管和淋巴管生成。相对应的,NRTIs显著抑制了血管内皮中VEGFR2和FGFR1信号通路以及淋巴管内皮中VEGFR3信号通路,并且NRTI对受体酪氨酸激酶(RTK)信号通路的调控具有专一性。但是,3种NRTIs对RTK信号通路的负调控作用机制不同:AZT通过抑制RTK蛋白的成熟;而TDF和3TC则通过抑制RTK受体进入EEA1内吞小泡调控RTK的内吞。另一方面,我们发现NRTIs直接引起线粒体功能的紊乱,导致内皮细胞产生过量的线粒体来源ROS。线粒体ROS清除剂Mn TMPy P可以有效逆转NRTIs导致的内皮细胞血管生成和淋巴管生成的功能障碍。结论:NRTIs引起细胞线粒体中产生过量的ROS,从而损伤内皮细胞的RTK信号通路,最终负向调控血管生成和淋巴管生成。     

VEGF及受体与白血病研究进展

血液系统恶性肿瘤患者多种血管生成因子含量升高 ,其含量变化与预后相关。血管内皮细胞生长因子(VEGF)是参与血管形成的主要细胞因子 ,并与内皮细胞的多种功能相关 ,VEGF含量变化与白血病临床转归有关 ,以VEGF VEGFR为靶向的治疗可促进肿瘤细胞凋亡发挥治疗作用。     

血管生长因子及其相关受体与原因不明复发性流产潜在发病机制的研究进展

血管内皮生长因子(VEGF)是重要的促血管形成因子,血管内皮生长因子受体(VEGFR)属于酪氨酸激酶受体,包括VEGFR-1,VEGFR-2,VEGFR-3。VEGF主要通过两种高亲和力受体VEGFR-1和VEGFR-2发挥作用。近年来对可溶性VEGF受体-1(sFlt-1)的研究越来越多,其是VEGFR-1的可溶形式,通过与VEGF膜受体竞争结合VEGF,阻断VEGF促血管生成的信号转导通路,从而抑制VEGF诱导血管生成的作用。原因不明复发性流产(URSA)的发病机制至今仍未明确,有研究表明其与血管形成障碍密不可分。而血管内皮生长因子及其相关受体是血管形成的重要调节因子,它们与URSA的发生密切相关。近年来研究表明VEGF、VEGFR-1、VEGFR-2功能异常,表达缺乏,或s Flt-1表达增加都可能导致URSA的发生。     

miR-210对血管内皮细胞VEGF-Notch信号通路的调控

目的: 观察过表达miR-210对血管内皮细胞中血管内皮生长因子(VEGF)-Notch信号通路相关分子表达的影响,探讨miR-210调控血管新生的分子机制。方法: 采用常规方法培养人脐静脉内皮细胞(HUVE-12)。通过转染LV- miR-210-GFP重组慢病毒载体上调内皮细胞miR-210表达,实验分为miR-210过表达组(LV- miR-210-GFP)和对照组(LV-GFP)。采用real-time PCR检测miR-210的表达变化,流式细胞术检测ephrin-A3的表达,采用real-time PCR、Western blotting、免疫荧光细胞化学染色法分别检测VEGF-Notch信号通路相关分子VEGF、VEGF 2(VEGFR 2)、Notch1的mRNA和蛋白表达水平。结果: Real-time PCR结果显示,与对照组相比,miR-210过表达组miR-210表达水平上调了(32.10±1.26)倍;流式细胞术结果显示,miR-210过表达组阳性细胞率 较对照组 明显增加(P<0.05)。Real-time PCR结果显示,miR-210过表达组 VEGF、VEGFR2、Notch1 mRNA分别较对照组上调了(7.40±0.67)、(2.50±0.10)、(9.70±0.72)倍,P<0.05;免疫荧光结果显示,miR-210过表达组VEGF和VEGFR2红色荧光信号均显著强于对照组(P<0.05)。Western blotting 结果显示,miR-210过表达组血管内皮细胞中Notch1的蛋白表达量(4.22±0.60)较对照组明显升高(P<0.05)。结论: miR-210过表达可显著上调VEGF-Notch信号通路分子的表达水平。     

胰岛素对牛胸主动脉内皮细胞血管内皮生长因子及其受体表达的影响

目的:评价胰岛素对培养的牛胸主动脉内皮细胞血管内皮生长因子(VEGF)及其受体表达的影响。方法: 取新生的小牛胸主动脉,做血管内皮细胞原代及传代培养,取4-6代培养细胞分组,应用不同浓度的胰岛素(30 mU/L、300 mU/L、3 000 mU/L)干预培养过程,48 h后应用免疫组化法测定内皮细胞VEGF及其受体(flt-1、flk-1/KDR)的表达水平。结果: 低浓度胰岛素组(30 mU/L、300 mU/L)内皮细胞VEGF表达明显高于不用胰岛素组(P<0.01);高浓度组(3 000 mU/L)内皮细胞VEGF表达明显低于不用胰岛素组(P＜0.05);各组内皮细胞VEGF受体(flt-1及flk-1/KDR)的表达无明显差异(P＞0.05)。结论: 低浓度胰岛素促进小牛主动脉血管内皮细胞VEGF表达;高浓度胰岛素可抑制血管内皮细胞VEGF表达;胰岛素对小牛主动脉血管内皮细胞VEGF受体(flt-1、flk-1/KDR)的表达无直接影响。     

血管内皮生长因子及其受体在子宫内膜异位症中的表达和意义

目的:研究血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)及其受体(Vascular endothelial growth factor receptor1,VEGFR1)在子宫内膜异位症(内异症)患者子宫在位内膜、异位内膜及正常对照组内膜组织中的表达,探讨其在子宫内膜异位症中的作用机制.方法:采用免疫组织化学及Western blot方法检测34例异位症患者在位内膜、异位内膜(内异症组)及34例正常内膜(对照组)组织中VEGF及其受体VEGFR1蛋白的定位及表达.结果:异症组在位及异位子宫内膜组织腺上皮细胞及间质细胞中均有VEGF及VEGFR1蛋白表达,且均高于同期对照组内膜,差异有统计学意义;对照组分泌期内膜VEGF及VEGFR1蛋白表达高于增生期,呈现周期性变化,而内异症组在位及异位内膜VEGF及VEGFR1蛋白表达失去周期性变化,分泌期与增生期均高表达,差异无统计学意义.Western blot检测结果与免疫组化结果一致.结论:内异症患者在位及异位内膜组织中VEGF、VEGFR1蛋白高表达可能与内异症的发生发展有关.     

HIF-1α在结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤血管生成中的作用及意义

目的: 研究缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤血管生成中的作用及意义。方法: 采用免疫组化法检测50例人结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤中HIF-1α、血管内皮生长因子(VEGF)和血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)的表达情况,用CD34单克隆抗体标记血管内皮细胞,并计算肿瘤微血管密度(MVD),用SPSS 13.0软件分析HIF-1α与VEGF、VEGFR2及肿瘤MVD的相关性。结果: (1)50例中有39例(78%)肿瘤细胞HIF-1α阳性,27例(54%)VEGFR2阳性,与淋巴结反应性增生组织中淋巴细胞的表达情况比较均有显著差异(P<0.05);(2)HIF-1α蛋白阳性表达组VEGF和VEGFR2的阳性表达率分别为72%和64%,明显高于HIF-1α蛋白阴性表达组(P<0.05);(3)HIF-1α、VEGFR和VEGFR2蛋白表达与肿瘤MVD相关(P<0.01);(4)15例伴有血管中心性浸润的结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤病例均表达HIF-1α。结论: HIF-1α可促进结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤肿瘤血管生成,其作用机制可能与VEGF/VEGFR2通路有关。     

血管内皮生长因子及其受体在子宫内膜癌中的表达

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)及其受体fms样酪氨酸受体-1 (flt-1)和含插入区的激酶受体(KDR)在子宫内膜癌血管生成中的作用及其与内膜癌分化程度的关系.方法采用免疫组织化学及原位杂交方法对23例子宫内膜癌及6例正常绝经期子宫内膜中VEGF、flt-1、KDR蛋白质及其mRNA进行检测,并对少数病例行Western印迹分析,以检测VEGF亚型在内膜癌组织的分布,用内皮细胞标志Ⅷ因子标记内膜癌组织中的微血管密度.结果 VEGF、flt-1、KDR蛋白质及其mRNA主要分布在子宫内膜癌组织血管内皮细胞及癌细胞胞质内.VEGF蛋白质在中分化(G2)、低分化(G3)内膜癌血管内皮细胞及癌细胞上的表达高于高分化内膜癌(G1)及正常绝经期子宫内膜(P<0.05), VEGF mRNA在不同分化程度内膜癌组织的表达差异无显著性意义(P>0.05),但均大于正常绝经期子宫内膜(P<0.05);flt-1蛋白质及flt-1mRNA在G3内膜癌血管内皮细胞的表达高于G1、G2及正常绝经期子宫内膜(P<0.05),在癌细胞的表达差异无显著性意义(P>0.05) ,但均高于正常绝经期子宫内膜(P<0.05);KDR蛋白质在子宫内膜癌组织血管内皮细胞及癌细胞上的表达较强,但不随分化程度发生变化,其mRNA在中分化(G2)、低分化(G3)内膜癌血管内皮细胞及癌细胞上的表达高于正常绝经期子宫内膜(P<0.05).G3子宫内膜癌组织的血管密度(48个±12个)高于G1(27个±14个)、G2(26个±16个)及正常绝经期子宫内膜(26个±11个,P<0.05).结论 VEGF、flt-1、KDR及mRNA在子宫内膜癌中的表达形式提示其与癌组织血管生成及血管通透性相关,VEGF及其受体是与子宫内膜癌旺盛生长相关的因子之一.