不同剂量左旋多巴对帕金森病大鼠行为学影响实验研究

目的　观察不同剂量左旋多巴 (L - dopa)治疗帕金森病 (PD)的效果 ,探讨 L - dopa治疗帕金森病的合理方法。方法　通过 6- OHDA脑立体定向注射术建立大鼠 PD模型 ,采用行为学、TUNEL、原位杂交的方法观察左旋多巴小、中、大 3种不同剂量 [10 mg/(kg· d)、5 0 mg/(kg· d)、10 0 mg/(kg· d) ]、不同的作用时间 (1d、3 d、5 d、7d)对 PD大鼠黑质细胞的毒性作用 ,并观察治疗后 7天各项指标的变化。结果　与对照组比较 ,小剂量组大鼠旋转圈数随 L- dopa使用计量和时间增加而减少 ,中、大剂量组相反 ,旋转启动时间随 L- dopa使用剂量和时间增加而加速 ,最高转速及持续时间则相反。结论　我们应尽可能小剂量、间隔使用 L - dopa治疗 PD。     

不同剂量左旋多巴对帕金森病运动并发症大鼠模型行为学的影响

目的：比较不同剂量左旋多巴长期注射对帕金森病（PD）运动并发症大鼠模型异常不自主运动（AIM）和疗效减退的影响,以确定合适的左旋多巴用药剂量和行为学评价标准。方法：立体定向SD大鼠右侧前脑内侧束,注射6羟基多巴建立PD大鼠模型。成模PD大鼠随机分为3组,分别腹腔注射左旋多巴酯：小剂量组（20mg·kg（-1）·d（-1））、中剂量组（50mg·kg（-1）·d（-1））和大剂量组（100mg·kg（-1）·d（-1））,每天2次,持续21d。比较3组PD大鼠模型AIM各组份的评分情况及对侧旋转反应时间。结果：左旋多巴3种剂量均可诱发PD大鼠出现相似程度的口面、前肢、轴向AIM,但大剂量组大鼠旋转AIM的评分高于小剂量组（P〈0.05）,且旋转反应时间缩短幅度大于中剂量组和小剂量组（P〈0.05）。结论：小剂量左旋多巴就可诱发PD大鼠出现明显的AIM,又能避免过于剧烈的旋转运动对AIM评分的干扰;但观察疗效减退现象需要选用大剂量左旋多巴以诱导出稳定下降的旋转反应时间。     

左旋多巴对帕金森病大鼠黑质多巴胺能神经元及纹状体多巴胺递质的影响

目的　研究长期应用左旋多巴对帕金森病 (PD)大鼠黑质多巴胺 (DA)能神经元和DA递质的影响。方法　采用 6 羟基多巴胺 (6 OHDA)制备部分损毁和严重损毁的PD大鼠模型 ,给两种模型口服不同剂量左旋多巴 /苄丝肼 3个月 ,通过观察大鼠旋转行为、酪氨酸羟化酶 (TH)免疫组化染色和高效液相色谱 电化学检测仪 (HPLC ECD)检测纹状体单胺类递质 ,研究左旋多巴对PD大鼠残存的黑质DA能神经元的影响。结果　 (1)左旋多巴对PD大鼠的旋转行为无明显影响 ;(2 )TH阳性细胞数损毁侧 /非损毁侧比值在左旋多巴喂药组和不喂药对照组的差异无显著意义 (P >0 0 5 ) ;(3)在严重损毁组 ,大剂量左旋多巴使PD大鼠损毁侧DA和 3,4二羟基苯乙酸 (DOPAC)水平明显升高(P <0 0 1)。结论　长期使用左旋多巴对 6 OHDA单侧损毁的PD大鼠残存的黑质DA能神经元无毒性作用。     

侧脑室微量注射左旋多巴治疗大鼠帕金森病

目的观察经侧脑室注射左旋多巴对帕金森病（PD）大鼠的影响。方法应用“羟基多巴胺立体定向脑内注射制备偏侧损毁的PD大鼠模型，并用阿扑吗啡（APO）皮下注射诱发大鼠向健侧旋转。将24只PD大鼠随机分为4组（n=6），经侧脑室注入生理盐水组为对照组，余3组分别经侧脑室注射浓度为0．1μg／μl、1μg／μl和5μg／μl的左旋多巴1μl，4μl／d，连续1周；观察在注射后不同时间大鼠旋转行为以及中脑黑质多巴胺能神经元数量的变化。结果经侧脑室注射1μg/μl和5μg/μl的左旋多巴后。与对照组相比，PD大鼠向健侧的旋转圈数明显减少（P〈0．01），左旋多巴效果在2h左右达到高峰，且中脑黑质多巴胺能神经元的数量也明显增多（P〈0．01）。结论经侧脑室注射适当剂量的左旋多巴可有效地改善PD大鼠的旋转行为，并增加中脑黑质多巴胺能神经元数量。     

慢性左旋多巴治疗对帕金森病大鼠行为及基底节Fos表达的影响

目的：研究帕金森病大鼠左旋多巴诱导异动症模型的行为学特征及其基底节区神经元活性的变化。方法：帕金森病大鼠给予左旋多巴治疗28d，观察其行为学，并用免疫组织化学方法观察纹状体、苍白球区Fos表达情况。结果：慢性左旋多巴治疗后，帕金森病大鼠出现异常不自主运动，包括刻板运动和增加的对侧旋转行为。急性左旋多巴治疗帕金森病大鼠损毁侧尾壳核和苍白球区Fos表达均增加，慢性左旋多巴治疗与急性治疗组比较损毁侧尾壳核区Fos明显减少，而苍白球区表达增加。结论：慢性间断性左旋多巴治疗诱导帕金森病大鼠异常不自主运动是帕金森病患者左旋多巴诱导异动症的啮齿类动物模型，纹状体苍白球神经元活性增强可能参与其发生机制。     

左旋多巴对帕金森病大鼠毒性作用的实验研究

目的　研究左旋多巴 (L dopa)对帕金森病 (PD)模型大鼠异常行为、黑质抗氧化系统、线粒体呼吸链功能和神经递质代谢的影响及其机制。方法　应用 6 羟基多巴胺 (6 OHDA)立体定向注射制作PD大鼠模型 ,给PD大鼠L dopa 2 5mg/ (kg·d)灌胃 ,共 4 5d。给药前后分别进行行为学测试 ,给药后测定黑质区谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH Px)、丙二醛 (MDA)、活性氧 (ROS)及线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ水平 ,测定尾状核头部多巴胺 (DA)、高香草酸 (HVA)、单胺氧化酶 B(MAO B)的水平。结果　 (1)L dopa组大鼠旋转速度给药前为(13.1± 1.5 )r/min ,给药后为 (7.2± 1.6 )r/min,给药前后比较差异有显著性 (P <0 .0 1) ;(2 )L dopa组GSH Px活性、呼吸链酶复合体Ⅰ水平降低 ,MDA含量、ROS活性升高 ,与对照组比较差异均有显著性 (均P <0 .0 1) ;(3)L dopa组MAO B活性、DA、HVA含量及DA/HVA比值与对照组比较均显著升高 (P <0 .0 5～ 0 .0 1)。结论L dopa能有效改善PD大鼠的旋转行为 ,但可加重黑质区氧化应激损伤 ,抑制线粒体呼吸链酶活性。     

慢性左旋多巴治疗对帕金森病大鼠行为及基底节Fos表达的影响

目的:研究帕金森病大鼠左旋多巴诱导异动症模型的行为学特征及其基底节区神经元活性的变化.方法:帕金森病大鼠给予左旋多巴治疗28 d,观察其行为学,并用免疫组织化学方法观察纹状体、苍白球区Fos表达情况.结果:慢性左旋多巴治疗后,帕金森病大鼠出现异常不自主运动,包括刻板运动和增加的对侧旋转行为.急性左旋多巴治疗帕金森病大鼠损毁侧尾壳核和苍白球区Fos表达均增加,慢性左旋多巴治疗与急性治疗组比较损毁侧尾壳核区Fos明显减少,而苍白球区表达增加.结论:慢性间断性左旋多巴治疗诱导帕金森病大鼠异常不自主运动是帕金森病患者左旋多巴诱导异动症的啮齿类动物模型,纹状体苍白球神经元活性增强可能参与其发生机制.     

不同剂量左旋多巴对正常大鼠黑质细胞作用的研究

目的　研究不同剂量左旋多巴对正常大鼠黑质细胞作用 ,探讨左旋多巴合理治疗帕金森病的方法。方法　采用TUNEL、Nissl染色 ,电镜观察手段 ,观察小、中、大 3种不同剂量 [10mg/(kg·d)、5 0mg/(kg·d)、2 0 0mg/(kg·d) ]左旋多巴 ,不同作用时间 (1天、7天、14天 )对正常大鼠黑质细胞作用。结果　对照组 ,小、中剂量左旋多巴给药组黑质细胞凋亡数 ,黑质细胞超微结构 ,尼氏细胞数无显著差异 ;大剂量给药组大鼠黑质细胞数随着左旋多巴使用时间、剂量的增加而增加 ,尼氏细胞则随左旋多巴使用时间、剂量增加而减少。结论　大剂量左旋多巴对正常大鼠黑质细胞有神经毒性作用 ,临床用左旋多巴宜尽可能小剂量     

左旋多巴治疗对实验性帕金森病大鼠黑质纹状体TNF—a表达的影响

目的　研究左旋多巴 (L - dopa)治疗对实验性帕金森病 (PD)大鼠黑质纹状体肿瘤坏死因子(TNF-α)表达的影响。方法　黑质定位注射 6 -羟多巴胺 (6 - OHDA )制备偏侧 PD大鼠模型 ,经 5 0～ 10 0 mg/ kg体重 L - dopa灌胃治疗 4周后 ,检测双侧额叶皮质、黑质和纹状体区域 TNF-α的表达。结果　 6 - OHDA损毁侧黑质和纹状体 TNF-α含量和阳性细胞面密度分别显著高于健侧 (均 P<0 .0 5 )。损毁侧与健侧 TNF-α含量的比率随 L - dopa治疗用量的增加而增高 ,且均显著高于对照组 (P<0 .0 5 )。结论　 L - dopa治疗进一步加剧了PD大鼠黑质纹状体区域 TNF-α的高表达。     

长期应用不同剂量左旋多巴对帕金森病大鼠模型学习记忆能力和同型半胱氨酸的影响

目的观察长期应用不同剂量左旋多巴(L-dopa)对帕金森病(PD)模型大鼠的学习记忆能力和同型半胱氨酸的影响。方法应用6-羟多巴胺制作PD大鼠模型。将288只成功PD模型大鼠分为两组(对照组,实验组)。实验组(三小组)分别用不同剂量的L-dopa(10mg.kg-1.d-1,20mg.kg-1.d-1,30mg.kg-1.d-1)腹腔注射,连续28d,分别于不同时点(1d、3d、5d、7d,14d和28d)作行为学测定;抽血测定同型半胱氨酸、叶酸。同时分离大鼠海马区制作冰冻切片,左侧海马进行刚果红染色并测定海马区β淀粉样蛋白阳性斑块的积分吸光度,右侧海马测定大鼠海马区乙酰胆碱酯酶(AChE)活力。结果随着应用L-dopa剂量的增大,时间的增加可使PD模型大鼠:(1)学习记忆能力明显下降(P<0.001);(2)血浆同型半胱氨酸浓度升高,叶酸浓度降低(P<0.001);(3)海马区β淀粉样蛋白阳性斑块增多(P<0.05);(4)降低大鼠海马区AChE活力(P<0.001)。结论长期大量使用L-dopa能使PD模型大鼠学习记忆能力明显下降,血浆同型半胱氨酸浓度升高,引起β淀粉样蛋白阳性斑块增多,海马区AChE活力下降,推测长期大量使用L-dopa导致的帕金森病痴呆(PDD)可能与同型半胱氨酸升高有关。     

雌激素对帕金森病保护作用的实验研究

目的探讨雌激素对帕金森病是否具有保护作用.方法利用免疫组化染色(ABC)法计数酪氨酸羟化酶(TH)的阳性细胞数,用TUNEL法观察每视野下凋亡细胞的数目,比较各组的差异.结果正常雌性小鼠造模(A)组比去势后造模(B)组中只给予生理盐水(B1)组、造模后去势(C)组中只给予生理盐水(C1)组的TH阳性细胞数目多,凋亡细胞数目少(P＜0.05);B1组与C1组差异无显著性(P＞0.05);B2组(B组中给予雌激素组)比B1组及C2组(C组中给予雌激素组)比C1组TH阳性细胞多,凋亡细胞数目少(P＜0.05).结论雌激素对帕金森病具有保护作用和损伤修复作用,且与凋亡有关.     

葛根素对帕金森病保护作用的实验研究

目的 :探讨葛根素能否对雌激素水平降低的帕金森小鼠提供保护作用 ,为开发具有雌激素替代作用的药物预防和治疗 PD提供新的线索。方法 :采用免疫组化染色 (ABC法 )计数酪氨酸羟化酶 (TH)的阳性细胞数 ,TUNEL法观察每视野下凋亡细胞数目 ,比较各组的差异。结果 :正常雌性小鼠 MPTP造模组 (A组 )比去势后 MPTP造模组 (B组 )中给予生理盐水组 (B1组 )、 MPTP造模后去势组 (C组 )给予生理盐水组 (C1组 )的 TH阳性细胞数目明显增多 ,凋亡细胞数目减少 (P<0 .0 5 ) ;B组中给雌激素组 (B2组 )与给葛根素组 (B3组 )相比无显著性差异 (P>0 .0 5 ) ;B2组、 B3组与 B1组相比有显著性差异 (P<0 .0 5 ) ;B1组与 C1组相比无显著性差异 (P>0 .0 5 ) ;在 C组中 ,给雌激素组 (C2组 )和给葛根素组 (C3组 )比对照组 (C1组 ) TH阳性细胞数目增多 ,凋亡细胞数目减少 (P<0 .0 5 ) ,C2组与 C3组相比无显著性差异 (P>0 .0 5 )。结论 :葛根素对帕金森病具有保护作用 ,并与凋亡有关     

大鼠树突状细胞疫苗治疗脑胶质瘤的实验研究

目的研究树突状细胞疫苗对C6荷瘤大鼠的免疫治疗效应,并比较免疫治疗策略的异同。方法将成年健康SD大鼠40只平均分为4组,分别经RN A致敏和C6冻融抗原致敏的DC免疫以及对照组经未致敏D C和R PM I1640免疫,采用LD H试剂盒检测CTL的体外杀伤活性。建立大鼠C6脑胶质瘤颅内肿瘤模型,观察其生存期,并进行病理学检查。结果肿瘤RN A致敏的D C疫苗活性最强,与C6冻融抗原致敏的DC疫苗相比,CTL杀伤活性差异不显著(P>0.05),但与对照组相比,差异非常显著(P<0.01)。治疗组荷瘤大鼠生存时间与对照组相比,差异非常显著(P<0.01);两治疗组之间差异不显著(P>0.05)。治疗组肿瘤生长明显抑制。结论C6冻融抗原和肿瘤细胞R NA致敏的树突状细胞疫苗均是有效的免疫治疗方法。     

盐酸多奈哌齐、西酞普兰对局灶性脑缺血再灌注大鼠认知功能的影响

目的观察盐酸多奈哌齐、西酞普兰对局灶性脑缺血再灌注大鼠认知功能的影响,方法将36只SD大鼠雌雄各半随机分为假手术组(A组),缺血90 min再灌注0．9%氯化钠溶液治疗组(B组)、盐酸奈哌齐治疗组(C组)和西酞普兰治疗组(D组)。采用Zea Longa's线栓法制备SD大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,评定术后B、C、D组大鼠神经行为学评分,观察A组、B组术后14 d红四氮唑(TTC)染色以及各组水迷宫实验及听觉事件相关电位(P300)测试。结果术后大鼠神经行为学评分均＞2分。B组大鼠术后第14 d TTC染色的结果显示了模型的可靠性。定位航行试验:实验的第2～5 d,B组大鼠逃避潜伏期显著长于A组(P＜0．01);C组、D组大鼠逃避潜伏期显著短于B组(P＜0．01);实验的第3～5 d,C组大鼠逃避潜伏期显著短于D组(P＜0．05)。空间探索试验:C组、D组大鼠平台象限游泳时间和总游泳时间的比值(tP/tT)、平台象限距离和总距离的比值(dP/dT)均显著大于B组(P＜0．05);B组大鼠的dP/dT、tP/tT值均显著小于A组(P＜0．01);C组dP/dT、tP/tT值均显著大于D组(P＜0．05)。4组大鼠听觉事件相关电位间差别有显著性意义(P＜0．01)。结论大鼠大脑中动脉闭塞90 min后再灌注能导致认知功能下降,盐酸多奈哌齐和西酞普兰均能改善大鼠认知障碍,前者的效果可能更好。     

BDNF rs6265 Variant Alters Outcomes with Levodopa in Early-Stage Parkinson’s Disease

Disease outcomes are heterogeneous in Parkinson’s disease and may be predicted by gene variants. This study investigated if the BDNF rs6265 single nucleotide polymorphism (SNP) is associated with differential outcomes with specific pharmacotherapy treatment strategies in the “NIH Exploratory Trials in PD Long-term Study 1” (NET-PD LS-1, n = 540). DNA samples were genotyped for the rs6265 SNP and others (rs11030094, rs10501087, rs1491850, rs908867, and rs1157659). The primary measures were the Unified Parkinson’s Disease Rating Scale (UPDRS) and its motor component (UPDRS-III). Groups were divided by genotype and treatment regimen (levodopa monotherapy vs levodopa with other medications vs no levodopa). T allele carriers were associated with worse UPDRS outcomes compared to C/C subjects when treated with levodopa monotherapy (+ 6 points, p = 0.02) and to T allele carriers treated with no levodopa treatment strategies (UPDRS: + 8 points, p = 0.01; UPDRS-III: + 6 points, p = 0.01). Similar effects of worse outcomes associated with levodopa monotherapy were observed in the BDNF rs11030094, rs10501087, and rs1491850 SNPs. This study suggests the levodopa monotherapy strategy is associated with worse disease outcomes in BDNF rs6265 T carriers. Pending prospective validation, BDNF variants may be precision medicine factors to consider for symptomatic treatment decisions for early-stage PD patients.Supplementary InformationThe online version contains supplementary material available at 10.1007/s13311-020-00965-9.     

促红细胞生成素治疗帕金森病的新进展

促红细胞生成素（EPO）已被证实具有明确的神经保护、促进神经再生等作用,在多种神经系统疾病的体内外实验中有明确疗效。对于EPO治疗帕金森病（PD）的研究也在不断地开展。目前,EPO虽然不作为治疗PD的一线用药,但有广泛运用的前景。因此,本文回顾EPO治疗PD的相关文献,结合近年来EPO治疗PD的一些新作用机制作一综述。     

左旋多巴对帕金森病大鼠模型学习记忆能力的影响及其机制

目的 观察左旋多巴(levodopa, L-dopa)对帕金森病(Parkinson disease, PD)模型大鼠学习记忆能力的影响,并探讨其机制.方法 应用6-羟多巴胺(6-hydroxydopamine, 6-OHDA)制作PD大鼠模型.将228只造模成功的PD大鼠分为对照组和实验组.对实验组大鼠分别按体质量10、20、30 mg/(kg·d)腹腔注射L-dopa,连续28 d,然后分别于腹腔注射L-dopa后1、3、5、7、14、28 d测定其行为学及血浆同型半胱氨酸(Homocysteine,Hcy)和叶酸水平.同时测定大鼠海马区乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)活力.结果 (1)随L-dopa剂量增大、应用时间延长可明显降低大鼠学习记忆能力(P<0.01),降低大鼠海马区AChE活力(P<0.01),升高血浆Hcy水平,降低叶酸水平(P<0.01).结论 大量使用L-dopa可造成大鼠学习记忆能力明显下降,引起海马区AChE活力下降,其机制可能与升高Hcy有关.