应用RT-PCR和SSCP分析食管癌组织中p73基因的表达

目的：观察p73基因在食管癌中的表达与突变状况，探讨p73基因在食管癌发生、发展中的意义。方法：采用RT－PCR和SSCP检测37例食管鳞状细胞癌肿瘤组织、癌旁组织、区域淋巴结和相应正常食管组织中p73mRNA的表达和基因的突变情况。结果：37例食管肿瘤组织中有21例（51．8％）p73 mRNA检测到过度表达，其阳性表达率显著高于相应的癌旁组织、区域淋巴结和正常组织（P＜0．05），与食管癌临床病理分期、细胞分化程度和病理类型均无显著性差异（P＞0．05）；未发现食管癌组织中p73基因有任何突变。结论：p73 mRNA在食管癌组织中有较高的表达率和表达水平，本研究未发现p73在食管癌中有突变。p73基因在食管癌中的过表达和正常基因型没有能够阻止癌症的发生及恶化，可能没有主要的抑癌作用。     

p73基因在肺腺癌组织中的表达

目的：p73基因在肺腺癌与癌旁正常组织中表达情况及突变的研究。方法：采用竞争性定量RT－PCR和PCR－SSCP方法检测62例肺腺癌及其癌旁非癌组织中p73基因突变情况。结果：（1）通过定量PCR分析，肺腺癌组织中p73的表达量与正常对照组表达量存在显差异（P＜0．01）。（2）在21例中高分化标本中检出9例呈中高表达，在41例低分化标本中检出32例呈中高表达，两之间存在显差异（P＜0．01）；（3）p73基因表达程度在29例Ⅰ-Ⅱ期标本中检出14例呈中高表达，33例Ⅲ-Ⅳ期标本中检出18例呈中高表达，两之间无显差异（P＞0．05）。（4）PCR－SSCP未检测出基因突变。结论：p73基因mRNA的表达可能与肺腺癌发生，发展和分化程度有关，与临床分期无关。     

原发性胰腺癌中p16基因突变及其蛋白表达的研究

目的：探讨p16基因与胰腺癌发生的关系。方法：采用PCR基础缺失分析，PCR－SSCP及免疫组织化学方法检测28例胰腺癌组织，相应癌旁组织和4例正常胰腺组织中p16基因缺失，突变及其蛋白表达状况，并结合临床病理资料进行分析，结果：28例原发性胰腺癌组织中4例发生p16基因纯合缺失。5例发生p16基因突变，p16基因变异频率为32．1％，28例癌旁组织和4例正常胰腺组织中未发现纯合缺失及突变。p16基因变异频率与淋巴结转移（P＜0．025），转移淋巴结个数（P＜0．01）及临床分期（P＜0．05）密切相关。28例原发性胰腺癌的癌组织，癌旁组织和4例正常胰腺组织p16蛋白阳性表达率分别为57．1％（16／28），85．7％（24．28）和100％（4／4），癌组织中p16蛋白阳性表达率与组织学分化（P＜0．05），淋巴结转移（P＜0．05），转移淋巴结个数（P＜0．05）及临床病理分期（P＜0．05）密切相关。结论：p16基因变异及其蛋白失表达可能是胰腺癌发生发展过程中重要因素之一，而且二者均可作为评估胰腺癌恶性程度及其侵袭能力的有用指标，存在p16基因变异及蛋白失表达的原发性胰腺癌具有更强的恶性潜能。     

食管癌及癌旁组织中p53、MDR基因改变的研究

目的：探讨食管癌及癌旁组织中p53、MDR基因的表达及其临床意义。方法：采用免疫组化ABC法及逆转录－聚合酶链反应的方法。对50例食管癌和37例癌旁组织中p53、MDR基因的表达情况进行检测。结果：p53基因蛋白在食管癌中有显表达70％（35／50），癌旁组织中有表达62％（23／37）；其中在正常组织中占36％（5／14），在非典型增生中占78％（18／23），MDR基因在食管癌高、中、低分化中的表达水平有极显意义。癌与正常组织中有极显意义。有不同年龄，性别、肿瘤大小上p53、MDR基因的表达无显意义，结论：p53、MDR基因在食管中均呈高水平表达，癌旁组织中MDR有表达，p53基因突变早于组织形态学改变。     

应用RT-PCR分析食管癌组织中lrig1基因的表达

目的：观察lrigl基因在食管鳞癌中的表达及意义．方法：采用RT．PCR检测36例食管鳞状细胞癌癌组织、相应的癌旁组织和远癌组织中lriglmRNA的表达情况．PCR产物经凝胶电泳，比较3种组织中ragl与GAPDH条带的灰度值之比，半定量分析IriglmRNA的表达水平．结果：36例食管癌组织中有15例（42％）lriglmRNA检测到阳性表达，21例（58％）lriglmRNA表达缺失，其阳性表达率低于相应的癌旁组织（92％）和远癌组织（100．0％，P〈0．05）；癌组织中lriglmRNA表达水平（0．76±0．22）低于相应的癌旁组织（0．89±0．33）和远癌组织（1．13±0．40）；随着肿瘤分化程度的升高，lriglmRNA在癌组织中的阳性表达率也增加（P〈0．05），但lriglmRNA表达缺失与食管癌临床分期（TNM），淋巴结有无转移和病理类型均无统计学差异（P〉0．05）．结论：lriglmRNA在食管癌组织中存在表达缺失和低表达，提示Irigl基因在食管癌的发生发展中可能具有抑癌基因的作用．     

nm23-H1蛋白在食管癌组织中的表达及意义

目的：探讨肿瘤转移抑制基因（nm-23H1）蛋白在不同食管癌组织中表达及与临床的意义。方法：选取收治的60例食管癌患者,取患者手术标本包括食管癌组织、食管癌旁1cm粘膜（癌旁）、食管正常粘膜（切缘）及食管癌区域淋巴结,采用流式细胞仪检测不同组织标本中nm23-H1蛋白表达水平。结果：癌组织与癌旁组织、组织切缘之间nm23-H1蛋白表达比较,差异具有统计学意义（P〈0．05）;nm23-H1蛋白在癌组织与淋巴结表达比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;在有、无淋巴结转移两组对应组织间,癌与癌、癌旁与癌旁、淋巴结与淋巴结比较,差异具有统计学意义（P〈0．05）;nm23-H1蛋白在切缘与切缘间表达比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。nm23-H1蛋白表达与食管癌组织病理分期有关,呈逐级降低趋势（P〈0．05）。结论：nm23-H1蛋白检测可作为食管癌判断肿瘤淋巴结转移的重要指标,有助于对食管癌患者术后转移的判断。     

食管癌组织中基质金属蛋白酶—2mRNA的表达

目的：探讨食管癌组织中基质蛋白酶－2（MMP-2)mRNA的表达。方法：用反转录PCR（RT－PCR）法检测41例食管癌患者的癌组织、癌旁组织MMP－2mRNA的表达。结果：食管癌患者的癌组织MMP-2 mRNA的表达率（25／41）与癌旁组织的表达率（15／41）比较差异有显著性（P＜0．05）。有淋巴结转移的食管癌患者癌组织MMP－2mRNA的表达率（15／19）与无淋巴结转移者的表达率（10／22）比较差异有显著性（P＜0．05）。侵及浆膜层者的表达率（13／18）高于未侵及浆膜层者（12／23），但差异无显著性。结论：MMP－2在食管癌的侵袭和转移中起到十分重要的作用。     

肺癌中细胞凋亡水平和p73基因的转录表达的研究

目的：通过观察肺癌癌组织,对应癌旁组织和远癌肺组织中细胞凋亡及p73基因转录表达水平的变化,探讨细胞凋亡及P73基因转录表达水平与肺癌发生,发展的关系。方法：采用TUNEL及RT－PCR技术检测32例非小细胞肺癌癌组织,癌旁组织和7例肺良性病变组织,以及对应正常肺组织细胞凋亡和P73 mRNA的表达水平,并结合临床病理学资料进行统计学分析,结果：（1）肺癌组织中的凋亡指数明显高于癌旁肺组织和远癌肺组织（P＜0．01）,细胞凋亡水平与肺癌组织学类型,分化程度和P－TNM分期无明显关系（P＞0．05）;（2）肺癌组织中p73 mRNA表达水平和表达率明显高于癌旁肺组织,远癌肺组织和肺良性病变组织（P＜0．01）;（3）组织中凋亡指数的升高和P73基因转录表达水平的增加呈显著的正相关（P＜0．01）。结论：肺癌组织中存在细胞凋亡水平的升高和P73基因的过度转录表达。     

Rb、p21在食管鳞癌中的表达与侵袭和转移的关系

目的：探讨Rb,p21在食管鳞癌中的表达与侵袭和转移的关系。方法：应用免疫组分S－P法检测Rb、p21基因蛋白在食管鳞癌、癌旁、侵及肌层和淋巴结转移中的表达。结果：p21在癌组织的表达高于癌旁组织，分化Ⅲ级高于Ⅰ、Ⅱ级，有淋巴结转移组高于无淋巴结转移组，具有显性差异（分别为P＜0．001、P＜0．01）。而p21的表达与肿瘤浸润的深度有明显差异（P＜0．05）。Rb的表达与肿瘤浸润的深度、分化程度和淋巴结转移呈负相关（分别为P＜0．05、P＜0．01）。结论：抑癌基因Rb的失表达和p21蛋白的过表达与食管鳞癌的分化程度、浸润和转移关系密切。检测Rb、p21有助于食管鳞癌的生物学行为及预后的评价。     

LRIG1和EGFR在食管鳞状细胞癌中的表达与意义

目的探讨富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1（LRIG1）和表皮生长因子受体（EGFR）在食管鳞癌中的表达与意义。方法应用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）方法检测46例食管癌肿瘤组织LRIG1和EG—FR基因的表达情况,并与46例癌旁正常组织进行比较分析。结果食管癌组织中LRIGImRNA的表达水平（0．35±0．04）低于相应癌旁正常组织（0．67±0．07）,P〈0．05;食管癌组织中EGFRmRNA的表达水平（2．23±0．25）高于相应癌旁正常组织（1．88±0．21）,P〈0．05;食管癌组织、相应癌旁正常组织中LRIG1mRNA和EGFRmRNA的表达水平呈负相关,差异有统计学意义（r=-0．662,P〈0．05）。结论LRIG1mRNA在食管癌组织中存在低表达,提示其有可能具有抑癌作用。EGFRmRNA在食管癌组织中存在高表达,且LRIG1mRNA和EGFRmRNA二者之间呈负相关,提示LRIGmRNA表达下降可能导致EGFR活化,从而促进食管癌的发生发展。