TGF-β_1对人前列腺上皮细胞增殖与凋亡的调节作用

目的　观察TGF β1对体外培养人前列腺上皮细胞增殖与凋亡的调节作用。　方法　建立原代人前列腺上皮细胞株 13例 ,角化蛋白、PSA等免疫组织化学染色鉴定培养细胞 ,绘制细胞生长曲线、运用BrdU方法和细胞凋亡原位染色观察传代后细胞生长状况及不同剂量TGF β1对细胞增殖与凋亡的作用。　结果　培养细胞角化蛋白、PSA染色阳性。TGF β1抑制细胞增殖并诱导细胞凋亡 ,作用与剂量成正比 ,EGF与TGF β1相互减弱对方的作用。　结论　TGF与TGF β1对前列腺上皮细胞增殖与凋亡状态起重要的调节作用。     

雄激素和转化生长因子β1协同调节前列腺基质细胞增殖和分化

目的：探讨双氢睾酮（DHT）和转化生长因子β1（TGF－β1）对体外培养的前腺基质细胞增殖和分化的影响及前列腺基质增生的机制。方法：体外培养人前列腺基质细胞，加入DHT和TGF－β1，采用MTT法检测细胞增殖，免疫组化、RT－PCR方法检测平滑肌细胞特异性标记蛋白的表达。结果：对平顶期的前列腺基质细胞，单独应用DHT或TGF－β1无显著刺激增殖作用（P＞0．05）；DHT和TGF－β1联合应用时，可显著刺激基质细胞增殖（P＜0．01），TGF－β1可使前列腺基质细胞中平滑肌细胞特异性标记蛋白的表达增加（P＜0．05），与DHT联合应用时这种作用更强。结论：DHT和TGF－β1具有协同促进前列腺基质细胞增殖和分化的作用。TGF－β1和雄激素可能是前列腺基质增生和平滑肌细胞过度增殖的重要诱因。     

钾通道与SD大鼠前列腺上皮细胞增殖和凋亡关系的实验研究

目的观察钾通道在SD大鼠前列腺上皮细胞增殖和凋亡中的作用。方法采用胶原酶消化SD大鼠前列腺组织建立原代SD大鼠前列腺上皮细胞株，角化蛋白免疫组织化学染色鉴定培养细胞，将SD大鼠前列腺上皮细胞分为对照组、钾通道阻断剂（四乙胺，TEA）组、开放剂（尼可地尔，Nicorandil）组，TEA的浓度为1、5、15mmol／L，Nicorandil的浓度为10、25、100μmol／L，各作用于细胞24、48、72h绘制细胞生长曲线，运用MTT方法、Hoechst33258细胞核染色法和流式细胞仪（FCM）观察传代后细胞增殖和凋亡状况。结果培养的细胞具有典型的上皮细胞形态特征，Pan-Keratin染色阳性，与对照组相比，MTT法和Hoechst33258染色法均显示，15mmol／L的钾离子通道阻滞剂TEA显著增加前列腺上皮细胞数（P〈0．01）；25μmol／L～100mol／L／Nicorandil显著减少前列腺上皮细胞数（P〈0．01），且FCM显示前列腺上皮细胞有明显的凋亡峰。Hoechst33258染色法显示细胞核固缩、裂解，呈现明显的凋亡形态特征。结论钾离子通道对体外培养的SD大鼠前列腺上皮细胞增殖与凋亡状态起重要的调节作用。     

正常前列腺基质细胞抑制前列腺癌细胞系PC-3增殖的体外实验研究

目的 探讨前列腺癌发病的基质－上皮相互作用机制。方法 体外培养前列腺基质细胞和前列腺癌（Pca)细胞系PC－3。分别取已用于培养液作为另一种细胞的条件培养液,观察条件培养液对细胞增殖的影响。用双层软琼脂分析法混合培养前列腺基质细胞和PC－3细胞。用MTT法检测不同浓度TGFβ1对PC－3细胞增殖率的影响。用免疫组化SP法研究基质中平滑肌细胞的比例。用RT－PCR方法检测基质细胞TGFβ1的表达。结果 PC－3细胞的增殖在混合培养时受到抑制。混合培养3周PC－3细胞的增殖率对照组的41％（P＜0．01）。PC－3细胞的增殖在加入TGFβ1后受到抑制,随TGFβ浓度的增加,对PC－3细胞的抑制作用增强。随TGFβ1作用时间的延长,相同浓度的TGFβ1抑制效应更显著（P＜0．01）。前列腺基质细胞表达大量的TGFβ1。结论 前列腺基质细胞可以通过分泌TGFβ1抑制PC－3的增殖。前列腺癌的基质可能存在病变,使癌变的上皮逃脱基质的抑制作用。     

雄激素和转化生长因子β_1协同调节前列腺基质细胞增殖和分化

目的　探讨双氢睾酮 (DHT)和转化生长因子 β1(TGF β1)对体外培养的前列腺基质细胞增殖和分化的影响及前列腺基质增生的机制。　方法　体外培养人前列腺基质细胞 ,加入DHT和TGF β1,采用MTT法检测细胞增殖 ,免疫组化、RT PCR方法检测平滑肌细胞特异性标记蛋白的表达。　结果　对平顶期的前列腺基质细胞 ,单独应用DHT或TGF β1无显著刺激增殖作用 (P >0 .0 5 ) ;DHT和TGF β1联合应用时 ,可显著刺激基质细胞增殖 (P <0 .0 1)。TGF β1可使前列腺基质细胞中平滑肌细胞特异性标记蛋白的表达增加 (P <0 .0 5 ) ,与DHT联合应用时这种作用更强。　结论　DHT和TGF β1具有协同促进前列腺基质细胞增殖和分化的作用。TGF β1和雄激素可能是前列腺基质增生和平滑肌细胞过度增殖的重要诱因     

加热对人前列腺增生上皮细胞的作用

目的: 探讨不同温度作用下及作用后不同时间人前列腺增生上皮细胞的生物学特性变化。　方法: 原代培养前列腺增生上皮细胞,经 45℃、60℃分别加热 15min后继续培养 1h和 12h,行细胞增殖实验、细胞形态学观察、流式细胞仪分析、热休克蛋白 70(HSP70)和前列腺特异性抗原 (PSA)的免疫细胞化学检测。　结果: 45℃组作用后以细胞凋亡为主, 60℃组以细胞坏死为主。两组作用后均有显著的生长抑制作用, 60℃组较 45℃组显著(P<0. 01)。加热主要导致G0 /G1期为主的细胞周期阻滞,主要在加热后 12h组出现 (P<0. 01)。加热后HSP70和PSA的表达有显著的上调(P<0. 01)。　结论: 加热可以致前列腺增生上皮细胞凋亡、坏死和生长抑制,其作用机制与加热阻滞细胞周期、上调HSP70和PSA的表达相关。     

转化生长因子 - β1对肌腱细胞增殖的调控作用

目的：探讨转化生长因子－β1（TGF－β1）对人胚腱细胞增殖的调控作用。方法：采用^3H-TdR掺入法观察TGF-β1人胚腱细胞的DNA合成剂量效应和时间效应;采用流式细胞仪观察TGF－β1对细胞周期及增殖指数PI值（S＋G2M）的影响。结果：在0．5％胎牛血清条件下TGF－β1可刺激腱细胞增殖,其作用在0．5－10ng/ml之间呈剂依赖性增强,当剂量为10ng/ml时,促NDA合成作用达到饱和。10ng/mlTGF-β1作用36h时开始增殖显著,并可持续到72h。细胞周期分析表明：在TGF－β1作用,G0／G1%呈降低趋势,而S％呈升高趋势,反映细胞增殖活力的PI值也呈升高趋势,尤以5ng/ml以上浓度时为显著。结论：TGF－β1可能通过促进腱细胞增殖参与肌腱的修复。     

钾离子通道阻滞剂对SD大鼠前列腺上皮细胞的增殖作用

目的:观察钾离子通道阻滞剂四乙胺(TEA)、四氨基吡啶(4-AP)、格列本脲(Glib)对体外培养SD大鼠前列腺上皮细胞增殖的调节作用。方法:胶原酶消化组织建立原代SD大鼠前列腺上皮细胞株,角化蛋白免疫组织化学染色(Pan-keratin)鉴定培养细胞,分别加入TEA(1、5、10mmol/L)、4-AP(1、5、10mmol/L)、Glib(10、50、100mol/L),培养24、48、72h后计数并绘制细胞生长柱形图,运用MTT方法和Hoechst33258细胞核染色法观察传代后细胞生长状况。对照组不加钾离子通道阻制剂。结果:培养细胞具有典型的上皮细胞形态特征,Pan-Keratin染色阳性,MTT法和Hoechst33258染色法均显示随着TEA、4-AP及Glib浓度的递增,作用于细胞24、48、72h后,与对照组相比,前列腺上皮细胞有不同程度的增殖(P<0.05或P<0.01)。结论:钾离子通道阻滞剂对体外培养的SD大鼠前列腺上皮细胞有增殖作用。     

三维培养的人皮肤成纤维细胞的实验研究

目的探讨三维培养的人皮肤成纤维细胞的生物学特性,为其在皮肤组织工程中的应用提供进一步的实验依据。方法培养人皮肤成纤维细胞,制备鼠尾胶原;对人皮肤成纤维细胞进行三维培养,流式细胞仪检测细胞的增殖和凋亡,RTPCR检测TGFβ1、层粘连蛋白(fibronectin,Fn)mRNA的表达,电镜观察细胞的形态学特征。结果三维培养的人皮肤成纤维细胞增殖缓慢,未见明显细胞凋亡。RTPCR检测二维、三维培养的人皮肤成纤维细胞TGFβ1、FnmRNA的表达无明显差异。电镜观察细胞染色质多,细胞器丰富。结论三维培养的人皮肤成纤维细胞增殖缓慢,但生物学活性良好。     

反义TGF-β1抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖的研究

目的 应用反义技术抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞（KF）体外增殖,为应用基因治疗手段改善创伤愈合提供实验依据。方法 应用脂质体将反义TGF－β1转染至KF,通过细胞计数绘制细胞生长动力学曲线,流式细胞仪检测细胞的凋亡情况。结果 ①转染反义TGF－β1的KF体外增殖明显降低。②与未转染反义TGF－β1的KF相比,转染反义TGF－β1的KF凋 亡发生率明显增高（差异有显著性意义,P＜0．05）。结论 反义TGF－β1可抑制体外培养的KF增殖,并促进KF的凋亡。