益肾降浊化瘀方对肾间质纤维化大鼠肾组织Smad2、CHIP水平的影响

目的 观察益肾降浊化瘀方对肾间质纤维化大鼠的治疗作用及肾组织中Smad2及CHIP水平的影响.方法 采用腺嘌呤灌胃的方法建立肾间质纤维化大鼠模型,分空白组、模型组、尿毒清组、益肾降浊化瘀方组.造模8周后,采用免疫组化法和Western Blot法分别检测肾组织中Smad2及CHIP蛋白的表达.结果 与模型组比较,益肾降...     

温肾活血化湿方对肾间质纤维化大鼠肾组织NF-κB表达的影响

目的:探讨温肾活血化湿方对单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)法致肾间质纤维化大鼠肾组织核转录因子-κB(NF-κB)表达的影响,初步揭示该方防治肾间质纤维化的作用机制。方法:采用UUO建立大鼠肾间质纤维化模型,将雄性SD大鼠80只随机分为假手术组、UUO组、氯沙坦组和温肾活血化湿方组,每组20只;于造模后第2天开始灌胃,假手术组、UUO组给予等量生理盐水,氯沙坦组灌胃氯沙坦[10 mg/(kg·d)],温肾活血化湿方组灌温肾活血化湿方汤剂[9.8 mg/(kg·d)]。于造模后第7、14、21天留取梗阻侧肾组织行HE、Masson染色,观察肾组织病理变化,免疫组化法检测肾组织NF-κB的表达。结果:第7、14、21天UUO组中NF-κB表达较假手术组高(P0.05),治疗组在第7天较UUO组低(P0.05)。结论:温肾活血化湿方可能通过抑制NF-κB的过度表达从而延缓肾间质纤维化的进程。     

虫草益肾方对肾纤维化大鼠Hippo信号通路表达的影响

目的 研究虫草益肾方对单侧输尿管梗阻(UUO)模型大鼠的治疗效果,并探讨其分子机制.方法 将40只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、咪达普利组及虫草益肾方组,每组10只.其中,模型组、咪达普利组和虫草益肾方组采用UUO法制备肾间质纤维化(RIF)模型.每日分别灌服生理盐水、咪达普利水溶液及虫草益肾方水煎液,持续灌胃14...     

益肾降浊化瘀方对肾间质纤维化大鼠肾组织HGF、TGF-β_1、CTGF表达的影响

目的:观察益肾降浊化瘀方及其拆方对肾间质纤维化大鼠肾组织中肝细胞生长因子(HGF)、转化生长因子-β1(TGF-β1)及结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法:采用腺嘌呤灌胃的方法建立肾间质纤维化大鼠模型,分空白组、模型组、尿毒清组、益肾降浊化瘀方组、补肾健脾组、益气活血组、化湿祛浊组。造模8周后,检测各组大鼠血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)指标;HE染色观察肾组织病理变化,Masson染色观察肾组织胶原沉积;免疫组化技术检测肾组织中HGF、TGF-β1及CTGF的表达。结果:1益肾降浊化瘀方组Scr、BUN水平明显低于补肾健脾组、益气活血组、化湿祛浊组、模型组;益肾降浊化瘀方组与尿毒清组无明显差别;2益肾降浊化瘀方组HGF表达明显高于补肾健脾组、益气活血组、化湿祛浊组、模型组;益肾降浊化瘀方组TGF-β1及CTGF表达明显低于补肾健脾组、益气活血组、化湿祛浊组、模型组;益肾降浊化瘀方组HGF、TGF-β1及CTGF表达与尿毒清组均无明显差别;3各组TP、ALB水平与空白组相比均无明显差别。结论:益肾降浊化瘀方可能通过调节HGF、TGF-β1及CTGF在肾组织的表达,减轻肾间质纤维化,从而延缓慢性肾衰竭的进展。     

扶正化瘀方抗大鼠肾间质纤维化的作用

目的观察扶正化瘀方抗氯化汞(HgCl_2)诱导的大鼠肾间质纤维化病变的作用,并初步探讨其作用机制。方法将大鼠随机分为正常组、模型组、扶正化瘀方(FZHY)组及维生素E(VitE)组,模型组用HgCl_2 8 mg/kg灌胃9周,FZHY组(4.6 g/kg)和VitE组(100 mg/kg)分别给予相应的药物干预。检测肾功能情况(Cr和BUN),盐酸水解法检测肾组织羟脯氨酸(Hyp)含量,HE染色、Masson染色和六胺银(PASM)染色观察肾组织病理形态,Western blot观察Ⅰ型胶原(ColⅠ)、纤维连接蛋白(FN)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。结果与模型组比较,FZHY组及VitE组大鼠肾体比(双肾质量/体重)明显下降(P0.05)、肾组织Hyp含量明显下降(P0.05),血清Cr和BUN含量明显下降(P0.01),肾脏纤维化程度明显减轻。其中FZHY组比VitE组轻。FZHY组和VitE组肾组织ColⅠ和FN表达均较模型组减弱(ColⅠ,P0.05;FN,P0.01)。FZHY组α-SMA表达较模型组减弱(P0.01),VitE组则无明显变化(P0.05)。结论FZHY可改善HgCl_2诱导模型大鼠的肾功能损伤,减少细胞外基质沉积,减轻肾间质纤维化病变,其作用机制与抑制肌成纤维细胞活化有关。     

益肾软坚散对慢性马兜铃酸肾病大鼠模型肾间质纤维化的保护作用

目的研究中药方剂益肾软坚散能否对慢性马兜铃酸肾病（CAAN）大鼠的肾损害起到保护作用。方法雄性SD大鼠18只分为3组,每组6只。模型组予关木通浸膏水溶液间断灌胃制成CAAN动物模型,中药组在造模基础上同步予益肾软坚散水煎剂灌胃,对照组予自来水灌胃。于1、4、8、12、16周分别检测大鼠体重、24h尿蛋白定量、尿β2,微球蛋白、血清肌酐（SCr）;并于第16周末处死大鼠,取肾脏组织,切片做Masson染色观察肾脏病理变化;用RT—PCR及免疫组化方法检测肾组织中转化生长因子-β1（TGF—β1）、结缔组织生长因子（CTGF）、纤溶酶原激活物抑制物-1（PAI-1）、金属蛋白酶组织抑制物-1（TIMP-1）和Ⅰ型胶原（Col Ⅰ）mRNA及蛋白质表达．结果与对照组比较,模型组大鼠24h尿蛋白定量、尿β2微球蛋白、SCr自造模后1周出现不同程度的上升（P〈0．01,P〈0．05）;16周时肾间质纤维化面积显著扩大（P〈0．01）;肾组织内TGF-β1、CTGF、PAI-1、TIMP—1及Col Ⅰ各指标的mRNA及蛋白质表达均显著上调（P〈0．01）。中药干预后,上述上调指标除24h尿蛋白定量外均被显著抑制（P〈0．01,P〈0．05）。结论益肾软坚散可抑制肾间质内细胞外基质蓄积,从而改善CAAN的肾间质纤维化及肾功能。     

通络益肾方对单侧输尿管结扎大鼠肾纤维化及肾上腺髓质素表达的影响

目的：探讨通络益肾方对单侧输尿管结扎大鼠肾间质纤维化及肾上腺髓质素（ADM）表达的影响,并探究其可能的机制。方法：将50只雄性SD大鼠按随机数字表法分为5组：假手术组、模型组、通络益肾方组、缬沙坦组、ADM观察组,每组10只。分别采取相应的干预措施。Masson染色观察大鼠肾脏的病理改变;免疫组织化学法检测大鼠肾脏E-钙黏蛋白（E-cadherin）的表达;放射免疫法检测大鼠血清ADM水平;ELISA检测大鼠血清Ⅲ型前胶原（PCⅢ）、肾组织ADM水平,并对肾组织ADM和E-cadherin进行相关性分析。结果：与假手术组比较,模型组血清ADM、PCⅢ水平明显升高（P<0.01）,肾组织E-cadherin、ADM水平降低（P<0.01）。与模型组比较,通络益肾方组和缬沙坦组血清ADM、PCⅢ水平降低（P<0.01、P<0.05）,肾组织E-cadherin、ADM水平升高（P<0.01、P<0.05）;ADM观察组血清PCⅢ水平降低（P<0.05）,血清ADM、肾组织E-cadherin、ADM水平升高（P<0.05）。其中肾组织ADM与E-cadherin水平呈显著正相关（r=0.62,P<0.01）。结论：通络益肾方能够改善肾间质纤维化模型（UUO）大鼠肾间质纤维化,抑制纤维化指标PCⅢ的表达,上调E-cadherin的表达,其作用机制可能是通过上调肾脏局部ADM蛋白表达而实现的。     

痰瘀同治方对肾间质纤维化大鼠肾组织CTGF表达的影响

目的:观察痰瘀同治方对肾间质纤维化大鼠肾组织结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响,探讨其对肾间质纤维化的保护作用及作用机制。方法:实验采用UUO大鼠模型,将40只SD大鼠随机分为4组:假手术组、模型组、洛汀新治疗组、痰瘀同治方组。药物治疗14天后测定大鼠血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)水平;肾组织HE、Masson染色观察病理改变;采用RT-PCR检测肾组织CTGFmRNA的表达;Western-blot检测肾组织CTGF蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠血清SCr、BUN水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);肾组织CTGF表达显著升高(P<0.01,P<0.05),痰瘀同治方能够明显降低实验大鼠血清肌酐、尿素氮水平,能降低肾组织中CTGF表达,与模型组比较有显著性差异(P<0.01,P<0.05);形态学观察也显示其肾脏损害轻于模型组,效果优于洛汀新。结论:痰瘀同治方能通过下调CTGF的表达,延缓肾间质纤维化的进展。     

健脾益肾方对5/6肾切除大鼠肾组织Lox-1 mRNA表达的影响

目的:探讨健脾益肾方治疗CRF及其抗肾纤维化的作用机制,为临床应用提供实验依据.方法:将Wistar雄性大鼠随机分为正常对照组(N组)、模型组(M组)、低剂量治疗组(L组)、高剂量治疗组(H组),除N组外均行5/6肾切除手术制作CRF动物模型.于造模后一周开始干预,干预8周后取血清及肾组织标本,全自动生化分析仪检测血清尿素氮(BUN)、肌酐(Scr);RT-PCR法检测肾组织血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1(Lox-1)mRNA的表达.结果:各组大鼠肾脏均有Lox-1 mRNA表达,N组有较弱表达,M组、L组及H组大鼠肾组织表达较N组均明显增加(M组及L组-N组:P＜0.01,H组-N组:P＜0.05);L组及H组表达较M组明显减少(P＜0.01);H组表达较L组均明显减少(P＜0.05).结论:健脾益肾方可以降低CRF大鼠血清BUN和Cr,抑制肾脏组织Lox-1 mRNA的表达,表明健脾益肾方是治疗CRF的有效方剂,其机理可能与抑制大鼠肾组织内Lox-1等细胞因子的表达,从而抑制参与肾纤维化的细胞增殖和转分化,延缓肾纤维化的进展,达到治疗和延缓CRF进展的目的.     

慢肾康宁对肾间质纤维化大鼠的影响

目的 观察慢肾康宁对肾间质纤维化大鼠肾组织Smad2、P-smad2及SARA蛋白表达的影响。方法 选用健康雄性Wistar大鼠60只,腺嘌呤灌胃21 d建立肾间质纤维化模型,将其随机分为正常模型组和(按1 ml/100 g体质量给予生理盐水经口灌服)氯沙坦组,慢肾康宁高、中、低剂量组。于治疗第30天大鼠腹主动脉取血。生化检测血清肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白定量。行HE染色观察实验大鼠肾脏组织形态学改变并用Western blot检测Smad2、P-smad2及SARA表达水平。结果 模型组Scr、BUN和24 h MTP均明显高于正常组(P <0.05);各治疗组Scr、BUN和24 h MTP均明显低于模型组(P <0.05);慢肾康宁高剂量组与氯沙坦组Scr、BUN和24 h MTP差异均无统计学意义(P> 0.05);各治疗组与模型组比较,Smad2、P-smad2蛋白显著下降,SARA蛋白显著升高;慢肾康宁高剂量组SARA蛋白显著高于氯沙坦组(P <0.05)。结论 慢肾康宁可降低肾间质纤维化大鼠的Scr、BUN,减少24 h MTP,具有肾功能保护作...     

益肾活血清利方对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的防治作用

目的探讨依据益肾活血清利法组方对进展性肾间质纤维化的防治作用。方法制备单侧输尿管梗阻大鼠模型,随机分为假手术组、模型组、益肾活血清利方低剂量组、益肾活血清利方高剂量组、苯那普利组。观察用药21d对大鼠血肌酐、尿素氮,大鼠肾间质病理变化及大鼠肾组织羟脯氨酸含量的影响。结果用药组较模型组对血肌酐、尿素氮,大鼠肾间质病理变化及大鼠肾组织羟脯氨酸含量的作用均有显著差异,其中中药高剂量组优于苯那普利组。结论益肾活血清利方对肾间质纤维化具有良好的防治作用。     

芪归益肾方对小鼠肾脏纤维化的延缓作用

目的探讨芪归益肾方对小鼠肾脏纤维化的延缓作用。方法建立单侧输尿管梗阻模型后,40只ICR小鼠随机分为假手术组、模型组、芪归益肾方组(10 g/kg)、贝那普利组(10 mg/kg)、川芎嗪组(100 mg/kg)。HE、Masson染色观察肾小管间质损伤情况;免疫组化、蛋白质印迹检测FN、TGF-β1、PAI-1、TM表达。结果与模型组比较,芪归益肾方组、贝那普利组、川芎嗪组明显改善肾小管间质纤维化,抑制FN、TGF-β1、PAI-1表达,升高TM表达,以芪归益肾方组更显著(P0.05)。结论芪归益肾方可有效延缓单侧输尿管梗阻小鼠肾脏纤维化,其作用机制可能与减少PAI-1表达,增加TM表达或减少其代谢有关。     

益肾活血汤抗单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化作用及机制的研究

目的 探讨益肾活血汤对大鼠肾间质纤维化的拮抗作用及机制.方法 将60只大鼠随机分为假手术组、模型组、益肾活血汤治疗组、贝那普利治疗组.制备单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠模型,在术后第21日处死大鼠留取梗阻侧肾组织观察肾间质病理变化,并用免疫组化法测定肾组织中纤溶酶原激活剂抑制物-1（PAI-1）、转化生长因子-β（TGF-β）及结缔组织生长因子（CTGF）的表达,处死前留取24 h尿测定尿蛋白,心腔穿刺取血测定血清尿素氮（BUN）、血清肌酐（Scr）.结果 益肾活血汤组24h尿蛋白、BUN、Scr水平、肾间质纤维化程度及PAI-1、TGF-β、CTGF的表达量均明显低于模型组（P＜0.05）,但与贝那普利组差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 益肾活血汤对肾间质纤维化具有拮抗作用,其机制可能为通过减少PAI-1、TGF-β、CTGF等致纤维化因子在肾组织中的过度表达来抑制肾间质纤维化.     

扶正化瘀方对大鼠肾间质纤维化肾组织基质金属蛋白酶活性调节的作用

目的:探讨扶正化瘀方影响肾间质纤维化大鼠肾组织基质金属蛋白酶(MMPs)活性调节的抗肾纤维化作用机制。方法:大鼠分为正常组、模型组与扶正化瘀方组,以氯化汞灌胃诱导大鼠肾间质纤维化模型,扶正化瘀方组以4g/kg扶正化瘀方灌胃。生化检测血清肾功能、肾组织羟脯氨酸(Hyp)含量;病理染色观察肾组织病理形态改变;蛋白印迹法分析肾组织MMP-13、MMP-2、膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)及金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP-1/2)蛋白表达;明胶酶谱法测定MMP-2活性;荧光底物反应法检测MMP-13活性。结果:与模型组比较,扶正化瘀方组明显改善大鼠血清肾功能指标,降低肾组织Hyp含量,减轻肾组织胶原沉积,降低大鼠肾组织的MMP-2、MT1-MMP、TIMP-1/2蛋白表达,降低MMP-2活性,但增加MMP-13活性。结论:扶正化瘀方抗肾间质纤维化的作用机制在于:抑制MMP-2活性,保护肾组织基底膜;抑制TIMP-1表达,提高MMP-13活性与促进病理沉积间质性胶原的降解。     

益气活血方对肾间质纤维化大鼠血清IL-10、IFN-γ含量的影响

目的 观察益气活血中药对肾间质纤维化大鼠血清白细胞介素10(IL-10)、干扰素(IFN-γ)含量的影响.方法 诱导建立单侧输尿管梗阻致肾小管间质纤维化模型,模型成功后随机分为模型组,中药大剂量组、中药中剂量组、中药小剂量组和西药组,另设正常对照组.中药治疗3周后留取大鼠动物血清,采用酶联免疫吸附反应(ELISA)方法 检测各组动物血清IL-10、IFN-γ含量.结果 肾间质纤维化模型组大鼠造模后,其血清IL-10、IFN-γ含量显著高于假手术组(P<0.001),经中药治疗后,IL-10、IFN-γ含量明显降低,与西药对照组比较,中药对IFN-γ的影响优于西药组,而对IL-10的影响则不如西药组.结论 益气活血中药抑制肾间质纤维化模型组大鼠炎症状态可能是其发挥治疗肾纤维化作用的靶点之一.     

益气活血方对肾间质纤维化大鼠血清IL-10、IFN-γ含量的影响

目的观察益气活血中药对肾间质纤维化大鼠血清白细胞介素10（IL-10）、干扰素（IFN-γ）含量的影响。方法诱导建立单侧输尿管梗阻致肾小管间质纤维化模型,模型成功后随机分为模型组,中药大剂量组、中药中剂量组、中药小剂量组和西药组,另设正常对照组。中药治疗3周后留取大鼠动物血清,采用酶联免疫吸附反应（ELISA）方法检测各组动物血清IL-10、IFN-γ含量。结果肾间质纤维化模型组大鼠造模后,其血清IL-10、IFN-γ含量显著高于假手术组（P〈0.001）,经中药治疗后,IL-10、IFN-γ含量明显降低,与西药对照组比较,中药对IFN-γ的影响优于西药组,而对IL-10的影响则不如西药组。结论益气活血中药抑制肾间质纤维化模型组大鼠炎症状态可能是其发挥治疗肾纤维化作用的靶点之一。     

益肾化瘀方对单侧输尿管结扎模型大鼠波形蛋白表达的影响

目的：动态观察单侧输尿管结扎（unilateral ureteral obstruction,UUO）模型大鼠肾组织中波形蛋白（Vimentin）的表达及益肾化瘀方对其影响,探讨Vimentin在肾间质纤维化进程中的表达变化和益肾化瘀方对其影响以及防治肾间质纤维化可能的机制。方法：将清洁级雄性大鼠150只随机分为假手术组、模型组、益肾化瘀方低剂量组、益肾化瘀方高剂量组和洛汀新组,采用单侧输尿管结扎的方法建立肾间质纤维化模型（UUO模型）,分别于UUO术后第3天、第7天、第14天、第21天、第28天采用光学显微镜观察肾间质病理形态学改变,采用免疫组化（PV二步法）观察大鼠肾组织Vimentin的表达变化。结果：造模3 d后即可见肾间质水肿,随时间延长逐渐出现炎细胞浸润,部分小管消失,皮质变薄。同时,Vimentin表达增高,与时间呈相关性。用药干预后,Vimentin表达较模型组有所降低,（P〈0.01或P〈0.05）,益肾化瘀方高剂量组与洛汀新组差异不显著。结论：益肾化瘀方组可能通过降低肾组织中Vimentin表达,减轻细胞外基质沉积,从而延缓肾间质纤维化进程。     

羊栖菜对UUO大鼠肾间质纤维化的影响

目的:观察羊栖菜对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾脏病变的影响。方法:建立UUO大鼠模型,用羊栖菜治疗3周,观察大鼠血肌酐、尿素氮、肾重、相对肾重,同时作病理学检查,并计算肾间质相对容量(Vv)。结果:UUO大鼠出现肾功能损害,病理显示出现明显的肾小管间质纤维化,羊栖菜治疗对肾功能减退有轻度抑制作用,能减少肾间质相对容量。结论:羊栖菜可能具有一定的抗肾间质纤维化作用。     

益肾降浊化瘀方及其拆方对肾间质纤维化大鼠TNF-α及IL-8表达的影响

目的:观察益肾降浊化瘀方及其拆方对腺嘌呤致肾间质纤维化模型大鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-8(IL-8)表达的影响,探讨益肾降浊化瘀方对肾间质纤维化的作用机制。方法:将SPF级雄性SD大鼠70只分正常组,模型组,尿毒清组,全方组,拆方1组,拆方2组,拆方3组,除正常组比较,用腺嘌呤ig法制作肾间质纤维化模型。正常组,模型组予生理盐水(10 m L·kg~(-1)·d~(-1)),尿毒清组(2.5 g·kg~(-1)·d~(-1)),全方组(20.2 g·kg~(-1)·d~(-1)),拆方1,2,3组(11,8.2,7.9 g·kg~(-1)·d~(-1))。给药4周后,酶联免疫吸附法(Elisa法)检测血清TNF-α,IL-8含量,免疫组织化学法检测肾组织中TNF-α,IL-8蛋白水平。结果:与正常组比较,模型组TNF-α和IL-8在血清和肾组织中含量明显升高(P0.05);与模型组比较,全方组、拆方1组、拆方2组、拆方3组血清和肾组织TNF-α,IL-8含量明显降低(P0.05),其中全方组肾组织TNF-α,IL-8蛋白表达和血清TNF-α,IL-8含量明显低于各拆方组(P0.05)。结论:益肾降浊化瘀方全方组及其拆方1组、拆方2组、拆方3组均能下调TNF-α,IL-8的表达,其中以益肾降浊化瘀方全方组作用最显著。     

苦参素对肾间质纤维化大鼠肾小管上皮细胞-间质转分化的影响

目的探讨苦参素对肾间质纤维化大鼠肾小管上皮细胞-间质转分化的影响及可能机制。方法大鼠行单侧输尿管结扎（UUO）建立肾小管间质纤维化模型。实验分为假手术、UUO及苦参素治疗组。治疗组在UUO的基础上每天以苦参素100mg/kg腹腔注射。各组于术后第7、14、21天分别处死5只大鼠,分别检测大鼠血清总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、尿素氮（BUN）、肌酐（SCr）及24h尿蛋白定量。用PAS及Masson染色法观察肾脏病理改变。用免疫组织化学法观察转化生长因子β1（TGF-β1）、Smad3、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）及Ⅰ型胶原（ColⅠ）的表达。用RT-PCR法测定肾组织TGF-β1及α-SMA mRNA水平。结果与UUO组比较,苦参素治疗组肾脏TGF-β1、Smad3、α-SMA及ColⅠ的表达明显减少,肾小管损害和肾间质纤维化的程度也明显减轻。治疗组TGF-β1 mRNA及α-SMA mRNA表达显著低于对应时间点的UUO组。结论苦参素可下调TGF-β1、ColⅠ的表达,抑制肾小管上皮细胞转分化及肌成纤维细胞的活化与增殖,其作用途径可能是通过下调Smad3的表达,从而干预Smad3介导的细胞内信号转导,最终减轻肾间质纤维化。