胸腺诱导对大鼠肝移植的免疫影响

背景:异体肝脏移植由主要组织相容性抗原可诱发免疫排斥反应,免疫抑制剂会对机体产生不良反应,目前通过移植前对供受体进行预处理等策略,可以诱导受体产生免疫耐受,在移植中具有广阔的应用前景。目的:用大鼠胸腺诱导的方法,对大鼠肝移植进行处理,从胸腺诱导方面,研究胸腺诱导与移植免疫排斥反应的关系。方法:供体为清洁级雄性SD大鼠40只,受体为清洁级雄性Wistar大鼠30只和清洁级雄性SD大鼠10只,分为同种基因移植组、同种异基因移植组、环孢素组、胸腺修饰诱导组,各10对。采用改良Kamada二袖套法并加以改进建立稳定的大鼠原位肝移植模型,造模后,环孢素组每天腹腔注射环孢素(50mg/kg),持续5d,胸腺修饰诱导组胸腺左右两叶各注射50μL主要组织相容性抗原,持续5d,其他组不给予任何干预措施,记录各组大鼠生存时间并分别于移植后3,7,14,21,28d进行病理学观察和混合淋巴细胞培养。结果与结论:经胸腺修饰诱导的肝移植大鼠生存时间则显著延长(60d),移植肝内组织损伤程度显著减轻,肝脏局部免疫排斥反应减少,淋巴细胞减少,肝移植效果与同种基因移植大鼠接近,且优于环孢素干预大鼠(P0.05)。提示胸腺诱导可减轻大鼠肝移植后产生的免疫排斥反应。     

供肝NK细胞对肝移植免疫反应中NF-κB 活性和IL-15表达的影响

 目的：观察大鼠移植肝组织内和外周血白细胞介素15（IL-15）的表达水平及脾组织内核因子κB(NF-κB)的表达活性变化,探讨供肝NK细胞减轻肝移植术后急性排斥反应的机制。方法：Lewis大鼠为肝移植供体,BN大鼠为受体,改良“二袖套”法建立大鼠肝移植模型。应用［60Co］射线照射清除供体免疫细胞和经门静脉回输供肝NK细胞等技术,实验设立3组。A组: 急性排斥组;B组: 单纯［60Co］照射排斥组;C组: ［60Co］照射+供肝NK细胞门静脉回输排斥组。移植术后第1、3、7天收集受鼠外周血清,ELISA法检测IL-15分泌水平,同时切取移植肝行病理学检查,Western blotting法检测移植肝组织IL-15蛋白的表达,凝胶电泳迁移实验（EMSA）检测受鼠脾组织NF-κB表达活性。另外每组各设亚组观察移植后大鼠自然生存时间。结果：B组术后大鼠自然存活时间较A、C组明显缩短,术后发生急性排斥反应程度较A、C组严重;术后第3、7天,3组受鼠外周血IL-15水平均较第1天时显著升高;移植术后第3、7天,B组大鼠血清IL-15 浓度均显著高于A、C组;术后第3、7天,移植肝组织中B组IL-15表达也显著高于A、C组,受鼠脾组织中B组NF-κB表达活性亦显著高于A、C组。结论：IL-15可能作为肝移植急性排斥反应的监测指标,对急性排斥反应的早期诊断和移植物的预后估计具有临床指导意义;供肝NK细胞可能通过下调NF-κB的表达活性来调节IL-15的水平,进而减轻肝移植术后急性排斥反应。     

胸腺接种肝特异性抗原减轻移植肝细胞凋亡的发生

目的：研究肝特异性抗原（LSA）胸腺接种对移植肝细胞凋亡的影响。 方法： 实验为同种肝移植：Ⅰ组为Wistar→Wistar同基因对照组；Ⅱ组为SD→Wistar急性排斥组；Ⅲ组为SD→Wistar术前1周供体肝特异性蛋白受体胸腺内注射处理组。观察手术后一般状态、生存时间、肝细胞凋亡及肝组织T细胞活化连接蛋白（LAT）的表达情况，确定移植后的受体的生存情况及机体的免疫状态。 结果： Ⅰ组大鼠术后一般状态好，均长期存活；Ⅱ组大鼠体重进行性减轻，术后9-13 d内全部死亡；Ⅲ组大鼠术后一般状态同Ⅰ组，明显好于Ⅱ组，存活率明显高于Ⅱ组；实验组各时段凋亡肝细胞数均与同时段对照组无显著差异，明显低于SD-Wistar急性排斥组；实验组与对照组移植肝中均未见LAT的表达。 结论： 移植前胸腺接种供体LSA对移植肝细胞具有明显的保护作用。     

输注同基因骨髓间充质干细胞联合脾组织移植诱导肝移植大鼠的免疫耐受

背景:有研究显示在免疫抑制剂的作用下,同种脾脏细胞移植可诱导免疫耐受,使移植物长期存活。另有研究还显示异种骨髓间充质干细胞移植可延长移植肝存活时间。目的:观察输注与受体同基因骨髓间充质干细胞联合脾组织移植对诱导大鼠肝移植后免疫耐受的作用。方法:将受体Lewis大鼠以数字表法随机分为4组:急性排斥组行DA-Lewis大鼠原位肝移植;环孢素A组行DA-Lewis大鼠原位肝移植后灌胃给予环孢素A;干细胞组行DA-Lewis大鼠原位肝移植,同期输注异体Lewis大鼠骨髓间充质干细胞;脾组织移植组在干细胞移植组的基础上同期移植DA大鼠脾组织。观察各组生存期,肝功能情况,血清细胞因子水平,嵌合体的形成情况及肝脏病理变化。结果与结论:与其他各组相比,脾组织移植组大鼠存活时间明显延长,术后血清丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、总胆红素、白细胞介素2、干扰素γ水平明显降低(P0.05),白细胞介素6、白细胞介素10明显升高(P0.05),30d后受体脾脏中供体阳性细胞明显升高(P0.05)。肝脏病理显示,环孢素A组和干细胞组移植肝仅呈急性轻度排斥反应,急性排斥组呈急性重度排斥反应,脾组织移植组未见明显排斥反应。说明大鼠肝脏、脾组织移植后输注同基因骨髓间充质干细胞可减轻移植肝的排斥作用,甚至诱导免疫耐受。     

大鼠肝移植急性排斥反应模型的建立

背景：研究表明Wistar和SD大鼠普遍为封闭杂交系而非近交系,有一定的遗传稳定性,同时也有一定的基因多态性,因此Wistar和SD大鼠之间的肝移植模型可能不是研究大鼠急性排斥反应的理想模型。 目的：建立Lewis-BN大鼠肝脏移植急性排斥反应模型。 方法：采用改良的“Kamada”二袖套法,分别进行同基因Lewis-Lewis间肝移植及Lewis-BN间肝移植。移植后3,5,7 d观察受体肝脏组织病理变化,测定谷丙转氨酶和总胆红素水平变化及大鼠存活时间。 结果与结论：同基因移植组大鼠无急性排斥表现,平均存活时间超过100 d,肝功能损害较轻。异基因移植组大鼠存活 (12.75±1.25) d,移植后第7 天肝脏病理检查有明显的排斥反应,肝功能损害较重,移植后各时相点谷丙转氨酶和总胆红素水平均明显高于同基因移植组(P < 0.05)。提示Lewis-BN大鼠肝移植组合为稳定的大鼠肝移植急性排斥模型,但近交系大鼠对手术耐受性差,建模难度大,熟练的显微外科技术和细心轻柔的操作是模型成功的关键。     

NF-κB参与低氧预适应对自体原位肝移植大鼠JNK通路的影响

背景：在肝脏缺血再灌注损伤中,NF-κB与JNK通路的串扰方式决定了细胞的死亡或存活。而将低氧预适应用于肝移植过程所导致的细胞凋亡现象,尚未见有报道。 目的：探讨低氧预适应后NF-κB的表达对移植肝JNK通路的影响及保护作用。 方法：采用经门静脉灌注法建立大鼠自体原位肝移植模型,SD大鼠随机分为正常对照组：不接受任何处理;自体移植组：行自体原位肝移植;低氧预适应组：移植前体积分数8%氮氧混合气体的低氧预处理90 min,然后行自体原位肝移植。分别于移植后 1,6,24 h处死大鼠取肝脏标本检测肝组织丙二醛、超氧化物歧化酶水平,免疫组化方法测定大鼠肝组织p-JNK蛋白,RT-PCR检测肝脏 NF-κB mRNA含量,透射电子显微镜下观察肝细胞的超微结构变化。 结果与结论：与对照组比较,两移植组肝组织丙二醛水平升高,超氧化物歧化酶水平降低(P < 0.05);与自体移植组比较,低氧预适应组丙二醛水平显著降低、超氧化物歧化酶水平显著升高(P < 0.05)。与正常对照组比较,两移植组各时相p-JNK蛋白的表达、NF-κB mRNA的转录水平显著升高 (P <0.05);与自体移植组比较,低氧预适应组NF-κB mRNA转录水平显著增高(P < 0.05),p-JNK蛋白的表达明显降低(P < 0.05)。透射电镜下自体移植组肝细胞出现典型的凋亡征象,而低氧预适应组肝细胞无明显凋亡形态。提示,肝移植大鼠低氧预适应后可能通过上调NF-κB的表达,减少活性氧释放,抑制JNK通路的持续激活,从而抑制肝细胞凋亡,减轻肝脏缺血再灌注。     

T细胞疫苗抑制了Flt3-L介导的小鼠肝移植急性排斥反应

目的:探讨供体抗原特异性T细胞疫苗诱导肝移植免疫耐受的作用及其机理,同时对肝移植"自动耐受"机制进行探讨。方法:以CBA小鼠作为受体,以B6小鼠作为供体,建立小鼠原位肝移植模型;制备T细胞疫苗:用B6小鼠的脾细胞免疫CBA小鼠,取CBA小鼠的脾淋巴细胞加以灭活,制备成T细胞疫苗(TCV)备用;实验分为3组:组1:单纯移植组,以CBA小鼠作为受体,以B6小鼠作为供体,做原位肝移植。组2:用Flt3-L治疗的B6小鼠作为供体,以CBA小鼠作为受体,做原位肝移植。组3:用Flt3-L治疗的B6小鼠作为供体,以TCV免疫过的CBA小鼠作为受体,进行原位肝移植。组间比较移植物存活时间(MST);测定肝移植小鼠血清中的IL-10、IL-4和IFN-γ水平;组内比较移植前后单向混合淋巴细胞反应(MLR);分离移植物浸润细胞(GICs)组间比较GICs凋亡率。结果:Flt3-L诱导了同种移植急性排斥反应,应用TCV于移植前和移植后可以显著抑制Flt3-L诱导的同种肝移植排斥反应。在没有Flt3-L刺激作用的情况下移植排斥反应非常轻微。肝移植小鼠血清中的IL-10、IL-4和IFN-γ水平检测发现,Flt3-L治疗组IFN-γ水平显著升高,IL-10、IL-4水平降低;TCV免疫组IL-10、IL-4水平显著升高,IFN-γ水平显著下降;单纯移植自动耐受组与TCV免疫组变化趋势一致。单向混合淋巴细胞反应(MLR)显示:在单纯移植组,淋巴细胞增殖效应不明显,CPM为3 318±1 190;在Flt3-L治疗组,效应细胞增殖显著增强,CPM为9 790±1 369,在TCV免疫组,TCV免疫加Flt3-L治疗,淋巴细胞增殖效应被显著抑制,CPM为4 017±880。分离肝脏移植物内浸润细胞凋亡,TCV免疫组引起TIL凋亡率为(54.20±3.12)%,有效抑制了TIL引起的免疫排斥反应,诱导了免疫耐受。而在Flt3-L治疗组,TIL凋亡率为(3.34±2.49)%。结论:小鼠同种肝移植存在"自动耐受"现象;这种"自动耐受"现象的免疫平衡可以被Flt3-L打破,从而诱发急性排斥反应。针对排斥效应T细胞的特异性T细胞疫苗可以显著抑制Flt3-L诱导的同种肝移植排斥反应。     

不同纲(罗非鱼/大鼠)肝细胞移植中的细胞免疫反应(英文)

背景:由于人肝细胞来源困难,许多学者尝试异种肝细胞移植的研究。文献报道较多的是猪肝细胞,受体多为大鼠、豚鼠等,这些均属于哺乳纲内不同目或科动物之间的移植。不同纲动物间的肝细胞移植报道较少。目的:将罗非鱼肝细胞植入大鼠脾内,探讨不同纲动物间肝细胞移植的细胞免疫排斥反应机制。方法:以胶原酶冷消化法分离罗非鱼肝细胞,以生理盐水重悬,细胞浓度调整为2×1010L-1。将36只SD大鼠按随机数字表法分为移植组和对照组。对照组脾内注射生理盐水,实验组脾内移植罗非鱼肝细胞。在移植后4,8,24h,3,5d,各组分别处死2只大鼠,以苏木精-伊红染色法观察移植物组织学变化,免疫组织化学SABC法检测移植物周围大鼠CD4,CD8阳性细胞。结果与结论:移植后数小时即发生排斥反应,8h后受体脾内很难见到正常肝细胞。移植后4h移植物周围可见CD4和CD8阳性细胞聚集。提示罗非鱼肝细胞移植到大鼠脾内数小时诱发了排斥反应,细胞免疫参与其中,自然杀伤细胞可能具有重要作用。     

大鼠近交系间原位肝移植急性排斥模型的建立与评价

背景：目前国内常用的封闭群品系大鼠(SD与Wistar大鼠)所建立肝移植急性排斥模型并不理想,易产生肝移植耐受。 目的：通过二袖套法建立稳定的DA-Lewis大鼠原位肝移植急性排斥模型。 方法：实验分为两组：同基因组：Lewis-Lewis 24例;异基因组：DA-Lewis 24例。观察移植后一般情况及移植后存活时间,两组受体分别于移植后3,5,7,10 d随机取3只处死取标本,观察肝脏组织病理变化,测定天冬氨酸转氨酶、总胆红素、细胞因子水平变化。 结果与结论：同基因组大鼠无急性排斥反应表现,中位生存时间超过100 d,肝脏组织发生轻度形态学改变。异基因组大鼠移植后黄疸明显,中位生存时间为11 d,移植后第7天肝脏组织病理表现典型急性排斥反应(Banff国际标准)。同期相比异基因组天冬氨酸转氨酶、总胆红素、细胞因子水平均高于同基因组(P < 0.001)。提示,DA-Lewis是稳定的大鼠肝移植急性排斥模型,是研究肝移植排斥反应及免疫耐受的理想动物模型。     

供体骨髓输注减轻同种肝移植排斥反应

目的:研究非清髓性骨髓移植在同种肝移植免疫反应中的作用及其意义。 方法:动物实验为同种大鼠肝移植：Ⅰ组为Wistar→Wistar同基因对照组；Ⅱ组为SD→Wistar急性排斥组；Ⅲ组为SD→Wistar环孢素A（cyclosporine A,CsA）肌肉注射处理组；Ⅳ组为SD→Wistar术前1周大剂量供体骨髓细胞输注处理组。用术后一般状态、生存时间、病理学排斥分级、肝标本中IL-2、IFN-γ的表达以及胸腺内嵌合体的检测等手段，确定不同处理组移植后的排斥反应情况及机体的免疫状态。 结果:Ⅰ组大鼠术后无排斥反应发生；Ⅱ组大鼠术后9-13 d内全部死亡，中位存活时间（10.7±0.5）d，排斥反应明显；Ⅲ组大鼠仅见轻度排斥；Ⅳ组自然存活亚组6只大鼠4只长期存活 (>100 d)，排斥分级明显低于Ⅱ组（P<0.05）,与Ⅱ组相比，Ⅳ组IL-2、IFN-γ蛋白的表达均明显下调。在骨髓输注15 d后，用PCR法在雌性Wistar大鼠受体胸腺内可检测到雄性SD大鼠供体特异性的Y染色体（Y-chromosome-specific sequence，Sry）基因片段。 结论:供体骨髓输注可形成供受体细胞的嵌合状态，可降低同种异体肝移植的排斥反应，延长受体生存时间。     

预输注RelB shRNA慢病毒修饰树突细胞诱导大鼠肝移植免疫耐受

背景：肝移植后的排斥反应是威胁患者和移植物长期存活的主要原因。诱导受者产生特异性免疫耐受是解决排斥反应的理想措施。 目的：探讨RNAi RelB树突状细胞预输注诱导大鼠肝移植特异性免疫耐受的可能性。 方法：将近交系雄性清洁级DA(RT1a)大鼠和近交系雄性SPF级Lewis(RT11)大鼠分别作为供、受体,行原位肝移植手术。术前随机配对分为4组：①对照组,受体鼠移植前不做预输注。②治疗组：受体鼠移植前7 d静脉输注供体大鼠RNAi RelB树突状细胞(5×106)。③未成熟树突状细胞组：受体鼠移植前7 d静脉输注供体大鼠未成熟树突状细胞(5×106)。④成熟树突状细胞组：受体鼠移植前7 d静脉输注供体大鼠成熟树突状细胞(5×106)。 结果与结论：与对照组、未成熟树突状细胞组以及成熟树突状细胞组相比,治疗组移植肝的平均生存时间显著延长。移植后第7天,治疗组天冬氨酸转氨酶,总胆红素水平低于对照组、成熟树突状细胞组、未成熟树突状细胞组(P < 0.01),移植后第14天治疗组、未成熟树突状细胞组天冬氨酸转氨酶,总胆红素均有轻微下降,两组比较差异仍有显著性意义(P < 0.01)。移植后第7天,与治疗组比较,对照组、成熟树突状细胞组、未成熟树突状细胞组γ-干扰素、白细胞介素2水平升高(P < 0.01),而白细胞介素4、白细胞介素10下降(P < 0.01);移植后第14天治疗组、未成熟树突状细胞组γ-干扰素、白细胞介素2水平均有下降,白细胞介素4、白细胞介素10水平均有升高,两组比较差异仍有显著性意义(P < 0.01)。对照组、成熟树突状细胞组、未成熟树突状细胞组移植后第7天排斥活动指数为8.0-9.0。未成熟树突状细胞组第14天肝细胞、内皮细胞坏死及汇管区炎性细胞浸润进一步增多。治疗组移植后第7天排斥活动指数为6.0-8.0,第14天时排斥活动指数为4.0-5.0。结果提示RNAi RelB树突状细胞预输注可以减轻移植肝排斥程度,延长移植肝生存时间,这是通过间接途径实现的,其机制可能与T细胞的调节和无能有关。     

他克莫司和西罗莫司对行肝癌肝移植患者Foxp3+调节性T细胞产生及肝癌复发的影响

背景：通过促进调节性T细胞的产生及增强其功能的发挥已成为维持移植物免疫耐受的有效手段。 目的：探讨他克莫司和西罗莫司对行肝移植的肝癌患者Foxp3⁺调节性T细胞产生及肝癌复发的影响。 方法：纳入符合米兰标准的肝癌肝移植患者40例,随机分为西罗莫司组和他克莫司组,每组20例,移植后第2~12个月间每月抽取受试者外周血检测Foxp3⁺调节性T细胞,并行彩超和外周血检测甲胎蛋白,必要时肝穿刺活检观察排斥反应及肿瘤的复发情况。 结果与结论：流式细胞仪检测结果显示,西罗莫司组外周血Foxp3⁺调节性T细胞阳性率明显高于他克莫司组(P < 0.05),移植肝穿刺活检证实西罗莫司组排斥反应与他克莫司组差异无显著性意义(P > 0.05),而移植肝彩超、外周血甲胎蛋白检测及移植肝穿刺活检或手术亦证实在肝癌复发率方面西罗莫司组明显低于他克莫司组(P < 0.05)。说明西罗莫司在肝癌肝移植中对肿瘤复发的抑制作用方面优于他克莫司,且排斥反应较他克莫司并未增加,甚至有更好的免疫耐受效果。     

恒河猴肝移植急性排斥反应中核因子κB p65的表达

背景：核因子κB作为一种重要的核内转录因子,是多种信号转导途径的汇聚点,参与机体免疫细胞的增殖、分化及细胞凋亡等多种反应物质基因的表达调控,在体液和细胞免疫中发挥重要作用。 目的：探讨恒河猴移植肝组织内核因子κB P65蛋白表达与急性排斥反应的关系。 方法：将恒河猴随机分为2组：急性排斥反应组肝移植后不给予抗排斥处理,对照组肝移植过程中及移植后均给予抗排斥处理。分别在移植后6,12,24和72 h 4个时间点收集血标本,全自动生化分析仪测定丙氨酸氨基转移酶、总胆红素,取移植肝脏组织行苏木精-伊红染色观察组织形态结构和排斥反应,根据Banff评分系统判断排斥反应程度,采用Western blot法检测肝脏组织中核因子κB p65的表达。 结果与结论：肝移植急性排斥反应发生时肝功能变化滞后于肝组织病理学检查。当急性排斥反应发生时,移植肝组织中核因子κB p65表达上调,急性排斥反应程度也随之加剧。并且在急性排斥反应早期,肝功能、病理学仅有轻微改变时,核因子κB p65表达显著升高。因此移植肝组织中核因子κB p65表达水平的检测对移植后急性排斥反应的早期诊断有重要意义,同时核因子κB可能成为控制移植急性排斥反应的新靶点。     

DA至Lewis大鼠肝移植急性排斥反应模型的建立：技术改良分析

背景：国际上研究肝移植免疫耐受的基础动物模型是大鼠肝移植急性排斥反应模型,国际上公认的肝移植急性排斥反应模型鼠种配对方式为DA至Lewis大鼠、DA至BN大鼠及BN至Lewis大鼠,但由于鼠种缺乏和操作技术有待成熟的原因,国内较少引用以上鼠种配对方式进行该模型的建立。 目的：课题组在大量SD大鼠肝移植模型建立训练的基础上,采用DA大鼠为供体,Lewis大鼠为受体,摸索DA至Lewis大鼠肝移植急排模型建立技巧和经验。 方法：通过改良二袖套法,以雄性DA大鼠为供体,雄性Lewis大鼠为受体,建立原位肝移植动物模型60只,受体大鼠术前1 d和术后1周内饲喂治疗剂量的他克莫司,1周后半量递减并停药,记录移植手术时间,观察受体大鼠的术后生存状况、手术成功率及生存期,分别于术后7,14,21,28 d处死受体大鼠,获取肝组织标本,苏木精-伊红染色,观察肝脏大体和镜下的病理学变化,进行急性排斥反应评分。 结果与结论：供肝冷缺血时间30~60 min,供体手术时间(18.5±4.0) min,供肝修整时间(7±3) min,受体手术时间(35.0±  7.3) min,无肝期为(13.0±3.0) min,手术成功率为98%,1周存活率为91.6%。术后2周随着他克莫司撤药,受体大鼠迅速发生急性排斥反应,于术后14~28 d死亡,平均生存时间为(20.85±0.71) d,中位生存时间为21 d。实验建立DA至Lewis大鼠肝移植急性排斥反应动物模型需要以大量SD大鼠肝移植训练为基础进行,通过对二袖套法技术的改良和围手术期短期应用他克莫司有助于该模型的稳定建立。     

肝癌并门静脉血栓肝移植：难控制出血的一期血管吻合和二期胆肠吻合

背景：原位肝移植过程中常出现难控性出血,止血困难,手术失败率高,但对其有效的处理手段目前尚未报道。 目的：探讨一期血管吻合、纱布压迫止血术式处理在肝癌并门静脉血栓肝移植中发生难控制出血的有效性,以及行二期胆肠吻合分期完成肝移植的可行性。 方法：对1例肝癌并门静脉血栓肝移植过程中出现难控制出血患者,采用一期血管吻合、纱布压迫止血,二期胆肠吻合术式进行止血处理,并观察该患者手术止血有效性以及肝移植术后恢复情况。 结果与结论：该患者行一期血管吻合,纱布填塞压迫止血后2 d出血停止,肝功能,凝血功能明显改善;二期胆肠吻合后未出现明显急性排异反应,3 d时肝功能、凝血功能明显改善;门静脉彩超示门静脉主干及分支管腔通畅灌注良好;移植后1周左右出现少尿、肾功能损害、大量腹水等肝肾综合征的表现,给予特利加压素等治疗后逐渐恢复;移植后2周出现因应激性溃疡导致上消化道出血,经内科止血治疗后治愈,于移植后34 d痊愈出院。结果表明,肝癌并门静脉血栓肝移植难控制出血,采用一期血管吻合、纱布压迫止血进行止血是有效的,并行二期胆肠吻合分期完成肝移植是完全可行的。     

Mechanism of Immune Hyporesponsiveness Induced by Recipient-derived Immature Dendritic Cells in Rat Liver Transplantation

Objective: The use of donor-derived immature dendritic cells (imDC) has become a promising approach to induce immune tolerance or immune hyporesponsiveness. However, donor-derived imDC needs to be harvested for a few days and transfused into the recipient in 5-10 days before transplantation, which is practically impossible in a clinical setting where donor organs are mainly harvested from cadavers. Moreover, donor-derived imDC might be cleared by allogeneic reaction offsetting induced immune tolerance or immune hyporesponsiveness. In our study, we further explored the underlying mechanism of immune hyporesponsiveness induced by donor-antigen-unloaded recipient-derived imDC by transfusing these imDC into rats in 1 day before liver transplantation. This paper is to study the mechanism of immune hyporesponsiveness induced by donor-antigen-unloaded recipient-derived imDC and its protection of liver grafts in rats. Methods: 40 SD rats (donor) and 40 male Wistar rats (recipient) were randomly divided into 4 groups: control, cyclosporine A(CsA), mature DC (mDC), and imDC; with 10 SD rats and 10 Wistar rats for each group. Animal models of acute graft rejection were established with these rats. Corresponding treatments were given before or after transplantation. In the control group, Wistar rats received no treatment other than liver transplantation. In the CsA group, Wistar rats underwent liver transplantation plus CsA treatment (10 mg/kg·d) in the starting day 2 after transplantation. For the mDC group, recipient-derived mDC(1×106/rat) were infused intravenously via the dorsal vein of the penis to recipient rats. For the imDC group, imDC (1×106/rat) were injected into recipient rats via the dorsal vein of the penis. In each group, 5 recipients were executed at 10 days after transplantation; the remaining five recipients were kept for the observation of survival time. Blood samples were collected for the measurement of ALT and TBIL; IL-2, IFN-γ, IL-4 and IL-10 and levels were measured with double-antibody sandwich ELISA. Liver tissue was harvested for HE staining and the observation of histological features. Acute rejection was evaluated with Banff classification. Expression levels of Fas-L/Fas in the grafts were detected by immunohistochemical staining; and western blot was used to detect the expression level of Scurfin. Results: The median survival times (MST) of the liver allografts in the CsA and imDC group were significantly longer than those in the control or mDC group (P<0.05). The serum levels of ALT and TBIL in the control and mDC groups were significantly higher than those of the CsA or imDC group(P<0.05). Compared with the CsA and imDC group, the levels of IL-2 and IFN-γ were higher but the levels of IL-4 and IL-10 were lower than those of the control and mDC groups(P<0.01). Slight or no rejection reaction was found in the CsA and imDC groups (P<0.05). The expression level of Scurfin protein in CD4+ CD25+ T cells of the imDC group was significantly higher than that of three other groups(P<0.05). Conclusion: Donor-antigen-unloaded recipient-derived imDC is an effective treatment in inducing immune hyporesponsiveness by blocking indirect recognition in rat liver transplantation model. Survival span was significantly prolonged by its protective effect. The mechanism of immune hyporesponsiveness induced by imDC transfusion may involve the preprocesses of T cell apoptosis induction, immune tolerance or hyporesponsiveness in T cells, induction of the shift in THl/TH2 balance, selection activation of Th2 subset, or induction of regulatory T cell.