姜黄素对乙醇诱导的人L-02肝细胞氧化损伤的保护作用研究

目的:探讨姜黄素对乙醇诱导的人L-02肝细胞氧化损伤的保护作用。方法:体外检测不同浓度梯度的姜黄素对人L-02肝细胞活力的影响;建立体外乙醇诱导的氧化损伤细胞模型,并以不同浓度姜黄素进行干预24h,检测肝细胞MDA水平、SOD和GSH-Px的活力。结果:与正常对照组相比,乙醇模型组MDA水平显著上升,SOD和GSH-Px活力明显下降(P<0.05),经姜黄素处理,MDA水平下降,SOD和GSH-Px活力显著上升(P<0.05)。结论:姜黄素可以减轻脂质过氧化程度,降低MDA含量,并提高肝细胞抗氧化的能力,使SOD与GSH-Px活性升高,发挥了对肝细胞的保护作用。     

红景天苷对疲劳小鼠氧化损伤的保护作用

目的：探讨红景天苷对疲劳小鼠氧化损伤保护作用的机制。方法：32只昆明种雄性小鼠按体质量随机分为正常对照组、红景天苷组、运动组及红景天苷＋运动组。红景天苷组及红景天苷牟运动组小鼠予红景天苷180mg／（kg·d）灌胃给药,正常对照组及运动组予相同体积[0．02mL／（g·d）]蒸馏水灌胃,连续灌胃15d。末次给药后30min,运动组及红景天苷＋运动组小鼠无负重游泳120min。游泳后立即取材,全自动生化仪检测血浆乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）、肌酸激酶（creatine kinase,CK）及肌酸激酶同工酶MB（creatine kinase—myocardial band isoenzyme,CK—MB）活性;采用试剂盒检测肝组织匀浆中过氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH—Px）活性和丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量;电子显微镜观察心肌和骨骼肌超微结构变化。结果：与不运动比较,长时间运动可明显提高小鼠血浆LDH、CK、CK—MB活性（P〈0．01,P〈0．05）,而红景天苷可降低小鼠血浆CK及CK—MB活性（P〈0．05,P〈0．01）;红景天苷与长时间运动有交互作用,红景天苷可拮抗长时间运动导致的血浆LDH、CK及CK—MB活性升高（P〈0．05）。与不运动比较,长时间运动可显著降低小鼠血浆SOD及GSH—Px活性（P〈0．01）,升高小鼠血浆MDA含量（P〈0．01）;红景天苷可明显升高小鼠血浆SOD及GSH—Px活性（P〈0．01,P〈0．05）,显著降低小鼠血浆MDA含量（P〈0．01）;红景天苷可拮抗长时间运动导致的小鼠血浆SOD活性降低（P〈0．05）。电子显微镜结果表明长时间耐力运动后骨骼肌和心肌出现明显的损伤,运动组小鼠骨骼肌及心肌超微结构损伤较红景天苷＋运动组明显。结论：红景天苷对运动所导致的氧化损伤具有一定的保护作用。     

红景天苷对CoCl2诱导PC12细胞低氧损伤的保护作用

目的研究红景天苷（Sal）对Co Cl2诱导PC12细胞低氧损伤的影响。方法用200μM Co Cl2诱导PC12细胞致其损伤,用不同浓度的红景天苷（0.1、1、10μM）作用于PC12细胞,TUNEL染色法观察细胞凋亡情况;RT-q PCR法测定Arc m RNA的表达;Western blot法测定Arc蛋白的表达。结果不同浓度红景天苷能明显抑制Co Cl2诱导的PC12细胞凋亡,并能显著提高PC12细胞中Arc m RNA和蛋白表达水平。结论红景天苷对Co Cl2诱导的PC12细胞低氧损伤具有一定的保护作用,其机制可能与红景天苷抵抗Co Cl2诱导PC12细胞的凋亡,上调PC12细胞Arc m RNA和蛋白表达水平有关。     

红景天苷对大鼠脑出血后血脑屏障损伤的保护作用研究

目的:研究大鼠脑出血后血脑屏障(BBB)通透性与核因子-κB(NF-κB)的关系及红景天苷的干预作用.方法:采用自体血注入尾状核法制成大鼠脑出血模型,免疫组化法观察NF-κB的表达,伊文思蓝法测BBB的通透性,干湿重法测脑含水量表示脑水肿.结果:与对照组相比,模型组及给药组BBB通透性均在出血后6小时开始升高,3天最高,给药组明显小于模型组(P＜0.01).两组的NF-κB也于6小时开始升高,3天达到高峰,给药组明显小于模型组(P＜0.05).BBB通透性与NF-κB表达呈显著正相关(R =0.638,P＜0.01),与脑水肿变化趋势一致.结论:脑出血后产生的NF-κB可能通过炎症反应的启动,增加BBB通透性,参与脑水肿形成和发展,红景天苷可改善此过程.     

红景天苷类似物对低糖低血清诱导PC12细胞损伤的保护作用

目的:评价红景天苷类似物对低糖低血清培养基诱导PC12细胞损伤的保护作用。方法 :体外培养PC12细胞,采用低糖低血清培养基制备损伤模型。给予60μmol/L、300μmol/L、1 000μmol/L不同浓度类似物预保护24 h。经低糖低血清损伤24 h后,观察其对细胞形态和活力的影响。结果:部分红景天苷类似物能拮抗低糖低血清培养基损伤PC12细胞活力下降。结论:部分红景天苷类似物对低糖低血清诱导PC12细胞损伤具有保护作用。     

红景天苷对糖尿病肾病的保护作用机制研究进展

<正>糖尿病肾病是糖尿病中较常见的慢性微血管并发症,本病患者肾小球系膜区细胞外基质过度增生积聚,致使基底膜增厚,肾小球硬化,肾小管间质发生纤维化,最终可导致终末期肾衰竭(ESRD),临床上需行透析或肾脏移植治疗[1].红景天(Rhodiola rosea L.)是生长在高海拔和寒冷地区的多年生草本植物,红景天苷是红景天的主要单体和有效成分,具有提高人体免疫力、抗疲劳、抗衰老及保护心血管等多种药理特性[2].研究结果显示,红景天苷对糖尿病肾病有     

红景天苷对诱导的成骨细胞在低氧环境中的保护作用

目的：探讨红景天苷对诱导的成骨细胞在低氧环境中的保护作用及其机制。方法：组织块法分离培养小鼠成纤维细胞,转染重编程为多能诱导干细胞,进行Nanog、Oct-4、Rexl、Sox-2的QT-PCR检测。诱导性多潜能干细胞（IPS细胞）诱导分化为成骨细胞,进行茜素红染色鉴定。将诱导后的成骨细胞分为红景天苷预处理组、正常组和低氧组,用Annexin V-FITC/PI染色检测细胞凋亡率,Western blot检测HIF-1α和VEGF蛋白表达量。结果：多能诱导干细胞的内源性基因Nanog、Oct-4、Rexl、Sox-2的表达量均明显高于小鼠成纤维细胞（均P＜0.05）。茜素红染色显示诱导后的成骨细胞染色阳性。红景天苷预处理组细胞凋亡率明显低于低氧组,差异有统计学意义（P＜0.05）。红景天苷预处理组的HIF-1α和VEGF表达量高于低氧组（0.93±0.05 vs. 0.81±0.02,0.95±0.03 vs. 0.79±0.04;均P＜0.05）。结论：红景天苷对诱导后成骨细胞在低氧环境中有保护作用,其机制可能是通过提高细胞HIF-1α和VEGF的表达来抑制成骨细胞的凋亡。     

红景天苷对急性缺氧性神经细胞损伤保护作用及机制探讨

目的:探讨红景天苷对急性缺氧性神经细胞损伤的保护作用及机制。方法:新生小鼠处死后取大脑皮层神经元进行原代细胞培养,神经元细胞经红景天苷处理后测定胞内ATP水平、己糖激酶等活性,提取mRNA通过RT-PCR检测细胞内PI3K、己糖激酶、葡萄糖转运体-1mRNA表达水平。同时以1%低氧处理原代神经元细胞建立急性缺氧模型,红景天苷处理后,通过MTT法观察红景天苷对缺氧神经元细胞的保护作用,PI3K抑制剂LY294002处理缺氧神经元细胞后探讨红景天苷的分子保护机制。结果:红景天苷组处理细胞的PI3K、己糖激酶(HK)、葡萄糖转运体-1(GLUT-1)等表达水平显著升高,HK活性增强,胞内ATP水平显著提高。PI3K抑制后红景天苷的上述作用明显减弱。缺氧处理促进神经细胞死亡,红景天苷减少缺氧性神经细胞死亡,PI3K抑制后红景天苷的上述作用明显减弱。结论:红景天苷处理可诱导神经细胞中PI3K的表达,增加葡萄糖代谢,提高胞内ATP水平,抑制缺氧性神经细胞损伤。     

红景天苷对急进高原大鼠肺组织的保护作用

目的：研究红景天苷对急进高原大鼠肺组织的保护作用及机制。方法：Wistar雄性大鼠36只,随机分为空白对照组、模型对照组、红景天胶囊组以及红景天苷小(14 mg/kg)、中(28 mg/kg)、大(56 mg/kg)剂量组,每组6只。除空白对照组外,其他各组预防性灌胃给药5 d后急进海拔4010 m的高原实地建立低压性缺氧模型,检测大鼠血气指标,酶联免疫吸附试验测定血清炎症因子水平,试剂盒测定肺组织氧化应激指标,苏木精-伊红染色观察肺组织病理学改变,蛋白质印迹法检测肺组织中闭合蛋白的表达量。结果：与空白对照组比较,模型对照组动脉血氧饱和度(SaO₂)、动脉血氧分压(PaO₂)、血液酸碱度、标准碳酸氢盐(SBC)和实际碳酸氢盐水平显著下降,血红蛋白水平显著上升(均P<0.05);肥大细胞蛋白酶(MCP)1、白介素(IL)-6和IL-1β含量显著增加,γ干扰素含量显著减少(均P<0.01);肺组织中谷胱甘肽和总超氧化物歧化酶含量显著下降,丙二醛含量显著增加(均P<0.01)。红景天胶囊和红景天苷各剂量组SaO₂     

红景天苷对NaCN及缺糖诱导PC12细胞凋亡的保护作用

目的:研究红景天苷对PC12细胞凋亡的影响,并探讨其抗凋亡的机制。方法:以NaCN及缺糖诱导的PC12细胞凋亡为模型,采用MTT比色法,琼脂糖凝胶电泳分析及流式细胞技术,考察红景天苷对细胞凋亡的保护作用;采用比色法测定Caspase活性、Western-blot技术检测胞浆中细胞色素C水平,考察红景天苷抗凋亡的机制。结果:红景天苷可以有效地改善NaCN及缺糖诱导的PC12细胞凋亡,抑制Caspase活性,降低胞浆中细胞色素C的水平。结论:红景天苷可能通过线粒体途径抑制NaCN及缺糖诱导的PC12细胞凋亡。     

Protective Role of Salidroside against Aginq in A Mouse Model Induced by D-galactose

Objective To investigate the protective effects of putative AGEs （advanced glycation endproducts） inhibitor salidroside against aging in an accelerated mouse aging model induced by D-galactose. Methods A group of 5-month-old C57BL/6J mice were treated daily with D-galactose, D-galactose combined with salidroside, salidroside alone, and control buffer for 8 weeks. At the end of the treatment, serum AGEs levels, neurological activities, expression of glial fibrillary acidic protein （GFAP） and neurotrophin-3 （NT-3） in the cerebral cortex, as well as lymphocyte proliferation and IL-2 production were determined. Results D-galactose induced mouse aging model was developed as described before. As expected, salidroside blocked D-galactose induced increase of serum AGEs levels. It also reversed D-galactose induced aging effects in neural and immune system, as evidenced by improving motor activity, increasing memory latency time, and enhancing lymphocyte mitogenesis and interleukin-2 （IL-2） production. Furthermore, elevated expression of GFAP and NT-3 in the aged model mice was also reduced upon salidroside treatment. Conclusion Salidroside inhibits AGEs formation in vivo, which at least partially contributes to its anti-aging effect in D-galactose induced aging model.     

Protective Role of Salidroside against Aging in A Mouse Model Induced by D-galactose

Objective To investigate the protective effects of putative AGEs (advanced glycation endproducts) inhibitor salidroside against aging in an accelerated mouse aging model induced by D-galactose. Methods A group of 5-month-old C57BL/6J mice were treated daily with D-galactose, D-galactose combined with salidroside, salidroside alone, and control buffer for 8 weeks. At the end of the treatment, serum AGEs levels, neurological activities, expression of glial fibrillary acidic protein (GFAP) and neurotrophin-3 (...     

α-硫辛酸对高糖培养施万细胞线粒体凋亡通路的影响

目的 探讨α-硫辛酸（alpha lipoic acid,ALA）对高糖培养施万细胞氧化应激损伤及线粒体凋亡通路的影响。方法 原代培养并纯化后的大鼠施万细胞为研究对象,分为正常组（5.6mmol/L葡萄糖培养基）、高糖组（50mmol/L葡萄糖培养基）、渗透压对照组（5.6mmol/L葡萄糖培养基+44.4mmol/L甘露醇）,以及高糖内分别加入不同浓度ALA （50、100、200μmol/L）组。流式细胞术检测施万细胞活性氧（ROS）及线粒体膜电位水平,Tunnel法检测施万细胞凋亡率,Western blot法检测bcl-2、bax、cyto C、cleaved-caspase-3及cleaved-caspase-9的表达。结果 与正常组比较,高糖组施万细胞内ROS水平明显增高（P<0.01）,线粒体膜电位下降,bcl-2蛋白表达降低（P <0.01）,bax蛋白的表达增加（P <0.01）,cyto C从线粒体到胞质的释放增加,caspase-9、caspase-3的活化水平增高,细胞凋亡率明显增高（P<0.01）。ALA降低高糖所致的施万细胞内ROS水平的增高（P<0.01）,提高了线粒体膜电位（P<0.01）,上调bcl-2蛋白的表达（P<0.01）,下调bax蛋白的表达（P <0.01）,减少了cyto C从线粒体到胞质的释放（P<0.01,P< 0.05）,降低了caspase-9及caspase-3的活化（P<0.01）,从而抑制了施万细胞凋亡。结论 ALA可以抑制高糖所致的施万细胞氧化应激损伤及线粒体凋亡通路的激活。     

5种常用中药注射剂对人正常肝细胞L-02的影响

目的:观察5种中药注射剂(榄香烯、鸦胆子、华蟾素、康莱特、肝力)体外对人正常肝细胞L-02增殖的影响.方法:将人正常肝细胞L-02进行体外培养,采用MTT法测定不同浓度、不同时间5种中药注射剂的体外抑制作用.结果:榄香稀、鸦胆子对L-02细胞具有较强的抑制作用,康莱特具有一定的抑制作用,而肝力抑制作用不明显,华蟾素则具有明显的时间依赖性.结论:榄香烯和鸦胆子在体外对L-02细胞具有较强的抑制作用,康莱特抑制作用较弱,肝力则无明显抑制作用,华蟾素各时间点作用差异大.     

硫化氢对氧化损伤心肌细胞凋亡的影响

目的:观察硫化氢(H2S)对体外培养乳鼠心肌细胞氧化损伤所致凋亡的影响。方法:以0.1 mmol/LH2O2处理细胞建立心肌细胞氧化损伤的模型,检测不同浓度的H2S对氧化应激下细胞存活率乳酸脱氢酶(LDH)活性及丙二醛(MDA)含量的影响,Annexin V-FITC/PI双染色分析不同剂量的H2S对氧化应激所致心肌细胞凋亡的影响。结果:过氧化氢对心肌细胞有明显的损伤作用,H2S可使培养基中的LDH和MDA水平显著下降,不同剂量的H2S预处理均可显著降低H2O2诱导的凋亡。结论:H2S能有效对抗H2O2引起的氧化损伤,且对细胞凋亡有抑制作用,其抗凋亡效应在一定范围内呈剂量依赖关系。     

应用微载体Cytodex 3高密度培养L-02人肝细胞系

目的　探讨用微载体进行 L - 0 2人肝细胞系高密度培养的方法 ,以期为生物人工肝提供有应用价值的生物材料。　方法　在限制贴壁的条件下 ,采用 Cytodex3为材料进行 L- 0 2人肝细胞的微载体培养 ,诱导肝细胞聚集体的形成 ,定期进行细胞计数及培养上清白蛋白、尿素、谷草转氨酶 (AST)、乳酸脱氢酶 (L DH )等生化指标的检测 ,并在光镜和透射电镜下观察生长情况。　结果　培养至第 6天时 ,所有的微载体均包满细胞 ,并形成微载体诱导的肝细胞聚集体 ,细胞数量达最高峰为 (17.1± 0 .76 )× 10 7/瓶 ,同时白蛋白和尿素的合成亦最高 ,浓度分别为5 3.81± 1.6 4m g/ L 和 5 .35± 0 .13m mol/ L。　结论　 Cytodex3培养的 L- 0 2人肝细胞可形成高密度的肝细胞聚集体 ,具有一定的生物合成和代谢功能。     

7-二氟甲基金雀异黄素对H_2O_2诱导PC12细胞损伤的保护作用

目的:探讨7-二氟甲基金雀异黄素对PC12细胞氧化应激损伤的保护作用。方法:采用过氧化氢(H2O2)诱导PC12细胞氧化应激损伤的模型,MTT法检测细胞增殖活性,碘化丙啶(PI)染色流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡,多功能生化分析仪测定培养液上清中的乳酸脱氢酶(LDH)活性。结果:7-二氟甲基金雀异黄素能有效拮抗40.0μmol/L的H2O2孵育24h对PC12细胞增殖活性的抑制作用和对PC12细胞凋亡的诱导作用,并能减少40.0μmol/L的H2O2诱导的PC12细胞的LDH释放。结论:7-二氟甲基金雀异黄素对过氧化氢诱导PC12细胞的氧化应激损伤具有保护作用。     

细胞受到氧化应激后损伤的检测方法

正常生理状态下,机体活性氧的产生与消除处于一个动态平衡中。而在某些病理生理状态下,细胞内的自由基产物超出其自身的抗氧化能力时,便会产生氧化应激。活性氧基团引起的氧化损伤在许多慢性疾病中起着重要作用,如糖尿病、动脉粥样硬化等。近年来,一些动物、细胞实验及临床试验对细胞氧化损伤的方法展开了研究。对目前国内外常用的检测细胞氧化损伤的方法予以综述,以期为检测细胞氧化受损提供更好的参考。     

金雀异黄酮对糖尿病大鼠心肌损伤的保护作用

目的 观察金雀异黄酮（genistein, Gen）对糖尿病大鼠心肌损伤的保护作用,并探讨其机制。 方法 雄性SD大鼠随机分为正常（N）组、糖尿病（D）组、Gen 5 mg/kg治疗（L）组和Gen 25 mg/kg治疗（H）组,每组8只。采用链脲佐菌素55 mg/kg腹腔注射诱导1型糖尿病大鼠模型。造模成功4周后,L组和H组大鼠开始分别灌胃给予Gen溶液5 mg/kg和25 mg/kg。干预4周后,测定各组大鼠血流动力学指标和空腹血糖（FBG）;通过HE染色和透射电镜下分别观察大鼠心肌病理形态结构和超微结构改变;测定心肌组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）含量和Caspase-3活性;RT-PCR检测心肌组织Bcl-2和BaxmRNA表达;Western blot检测心肌硫氧还蛋白（Trx）、Trx相互作用蛋白（TXNIP）和凋亡信号调节激酶1（ASK1）的蛋白表达。 结果 与N组比较,D组FBG、TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA含量和Caspase-3活性增高（P＜0.01）,血流动力学指标和GSH含量下降（P＜0.01）;心肌病理形态结构和超微结构明显损伤,心肌Bcl-2 mRNA和Trx蛋白表达下降（P＜0.01）,BaxmRNA、TXNIP和ASK1蛋白表达增高（P＜0.01）。与D组比较,L和H组中,FBG差异无统计学意义,TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA含量和Caspase-3活性下降（P＜0.05,P＜0.01）,血流动力学指标和GSH含量增高（P＜0.05,P＜0.01）;心肌病理形态结构和超微结构明显改善;心肌Bcl-2 mRNA和Trx蛋白表达增加（P＜0.05,P＜0.01）,Bax mRNA、TXNIP和ASK1蛋白表达下降（P＜0.05,P＜0.01）。 结论 金雀异黄酮对糖尿病大鼠心肌损伤具有保护作用,其机制可能与减轻心肌炎症反应,调节Trx系统表达,抑制氧化应激和细胞凋亡相关。