氧化低密度脂蛋白与内皮素在促进血管平滑肌细胞增生中的内在联系

本实验用培养的家兔血管平滑肌细胞探讨了在促进细胞增生过程中,氧化低密度脂蛋白(oxidizedlowdensitylipoprotein,OLDL)和内皮素之间的联系,发现二者都可刺激血管平滑肌细胞增生,内皮素A受体拮抗剂BQ123可显著抑印制OLDL的促细胞增生作用,￣3H-TdR的掺入量较单纯OLDL组减少13.3%;细胞培养液内皮素放射免疫测定表明,应用BQ123能使内皮素释放量较单纯OLDL组降低28.9%。免疫细胞化学检测结果亦与上述完全符合,提示在动脉粥样硬化发生中,OLDL促血管平滑肌细胞增生的作用可能部分是通过内皮素来实现的。     

人类白细胞相关抗原HLA DQB1基因与IDDM的关联

利用ＰＣＲ／ＳＳＯ方法对ＩＤＤＭ病人，ＬＡＤＡ病人，ＮＩＤＤＭ病人以及健康对照者进行ＨＬＡ ＤＱＢ１基因分型。结果发现ＤＱＢ１＊０２０１及ＤＱＢ１＊０３０２在ＬＡＤＡ组显著增高，分别为５３．４％，６６．７％比正常组的１９．５％和３４．２％。与正常组相比，ＤＱＢ１＊０３０２在ＩＤＤＭ组显著增高，为９１．１％比３４．２％。     

氧化低密度和极低密度脂蛋白对单核细胞血小板源性生长因子B链表达的影响

在单核细胞的培养基中分别加入２５ｍｇ·Ｌ￣（－１）低密度脂蛋白（ｌｏｗｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ，ＬＤＬ）、氧化ＬＤＬ（ｏｘｉｄｉｚｅｄＬＤＬ，ＯＬＤＬ）、极低密度脂蛋白（ｖｅｒｙｌｏｗｄｅｎｓｉｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ，ＶＬＤＬ）和氧化极低密度脂蛋白（ｏｘｉｄｉｚｅｄＶＬＤＬ，ＯＶＬＤＬ），培养２４ｈ后再用无血浆脂蛋白培养基收集条件培养基，并观察此条件培养基对￣３Ｈ－ＴｄＲ投入血管壁平滑肌细胞ＤＮＡ的影响。用抗血小板源性生长因子Ｂ链抗体（抗ＰＤＧＦ－Ｂ抗体）作疫组织化学染色。结果表明，单核细胞能表达ＰＤＧＦＢ，ＯＬＤＬ和ＯＶＬＤＬ能明显地促进单核细胞ＰＤＧＦ－Ｂ的表达，其条件培养基亦能促进￣３Ｈ－ＴｄＲ掺入平滑肌细胞ＤＮＡ内。上述结果提示，ＯＬＤＬ和ＯＶＬＤＬ通过加强单核细胞分泌ＰＤＧＦ－Ｂ并促进平滑肌细胞增殖而在动脉粥样硬化的发病过程中起作用。     

内源性一氧化碳对内皮素-1诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的探讨内源性一氧化碳（ＣＯ）对内皮素１（ＥＴ１）诱导的血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖的影响。方法体外培养Ｗｉｓｔａｒ鼠主动脉ＶＳＭＣ，用ＥＴ１诱导其增殖，用氯血红素诱导血红素氧合酶１（ＨＯ１），促进ＣＯ生成，测定培养上清液中碳氧血红蛋白（ＣＯＨｂ）含量和ＶＳＭＣｓ３Ｈ胸腺嘧啶核苷（３ＨＴｄＲ）参入量。结果加入梯度浓度氯血红素１０μｍｏｌ／Ｌ、２０μｍｏｌ／Ｌ、４０μｍｏｌ／Ｌ，培养上清液中ＣＯＨｂ量分别增高８．３％、１４．６％和１６．７％（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１），对由ＥＴ１增高的ＶＳＭＣｓ３ＨＴｄＲ参入量抑制率分别为２２．９％，４３．９％和５１．７％（Ｐ＜０．０１），与加入的氯血红素及上清液中ＣＯＨｂ含量呈浓度依赖关系。结论ＶＳＭＣｓ产生的ＣＯ对ＥＴ１刺激的平滑肌细胞的增殖有抑制作用。提示血红素ＨＯＣＯ系统在血管重塑中有一定作用。     

老年人胫骨超声检测的临床意义

目的了解老年人胫骨骨强度的变化。方法用骨定量超声仪（ＱＵＳ）测量１５５例老年人和３８５例青年人胫骨超声速度（ＳＯＳ），女性同时用双能Ｘ线骨密度仪（ＤＥＸＡ）测左前臂中、远端１／３交界处骨矿密度（ＢＭＤ）。结果两组（６０～６９岁组和≥７０岁组）老年人ＳＯＳ，女性分别为３７６８±１２１和３７４８±１３２ｍｓ－１，男性分别为３９０６±１２３和３９２５±６６ｍｓ－１。老年人ＳＯＳ显著低于青年人（Ｐ＜０．００１），女性分别低５．２％±３．０％和５．７％±３．３％，男性分别低１．８％±３．１％和１．３％±１．７％，男女差异有显著性（Ｐ＜０．００１）。两组老年人骨质疏松症（ＯＰ）检出率女性分别为４６．５％和６１．１％，男性分别为１１．４％和９．１％，女性显著高于男性（Ｐ＜０．００１）。ＱＵＳ与ＤＥＸＡ的相关系数（ｒ）为０．６５７（Ｐ＜０．００１），ＯＰ检出率分别为４９．４％和５５．１％，诊断符合率为６０．０％。结论老年人胫骨ＳＯＳ明显下降，老年女性ＳＯＳ明显低于老年男性。     

内皮素受体拮抗剂预防低氧性肺动脉高压的实验研究

内皮细胞合成的内皮素(ＥＴ)具有极强的促肺血管平滑肌细胞收缩和增生的作用。慢性低氧可引起血浆及肺组织匀浆中ＥＴ1水平升高,ＥＴ通过与ＥＴ1选择性受体(ＥＴＡ)或非选择性受体(ＥＴＢ)结合,参与慢性低氧性肺动脉高压的发病过程。为进一步探讨ＥＴ在低氧性肺动脉高压发病中的作用,本研究采用ＥＴＡ受体拮抗剂ＢＱ123进行预防处理,观察其对低氧性肺动脉高压的预防效应。一、材料和方法1动物模型的复制:雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠30只,体重200～220ｇ。分为低氧组、ＢＱ123组和对照组,每组10只。低氧组:将大鼠置于自制常压低氧舱内,向舱内充入氮…     

氧化修饰低密度脂蛋白及抗氧化剂在糖尿病血管病变中的作用

为探讨氧化修饰低密度脂蛋白（ＯＸＬＤＬ）及抗氧化剂在糖尿病血管病变中的作用，采用酶联免疫吸附双抗体夹心法（ＥＬＡＳＡ法），测定了６０例非胰岛素依赖型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）病人及３０例正常对照者血浆ＯＸＬＤＬ水平。结果显示：（１）ＮＩＤＤＭ组与正常对照组比较，血浆ＯＸＬＤＬ水平显著增高（Ｐ＜０．０１）。ＮＩＤＤＭ有血管病变组与无血管病变组比较，血浆ＯＸＬＤＬ水平显著增高（Ｐ＜０．０５）。（２）２０例ＮＩＤＤＭ病人用维生素Ｃ及维生素Ｅ治疗后，血浆ＯＸＬＤＬ水平显著下降（Ｐ＜０．０５）。（３）血浆ＯＸＬＤＬ水平与ＬＤＬ－Ｃ、ＨＤＬ、ＴＧ、ＴＣ、ＡｐｏＡ１及ＡｐｏＢ均无显著相关性。提示ＯＸＬＤＬ可能与糖尿病血管病变的发生和发展有关。抗氧化治疗可能对预防血管病变的发生有一定的作用。     

大肠癌组织APC／MCC和DCC基因杂合缺失的研究

为评估ＡＰＣ／ＭＣＣ和ＤＣＣ基因在大肠癌发生和发展中的作用，采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，并配合限制性片段长度多态现象（ＲＦＬＰ）分析，对４１例大肠癌患者的组织ＡＰＣ／ＭＣＣ（位于染色体５ｑ２１）和ＤＣＣ基因（位于染色体１８ｑ２１．３）杂合缺失（ＬＯＨ）进行研究。ＡＰＣ基因ＬＯＨ率为２８．０％（７／２５），ＭＣＣ基因ＬＯＨ率为３６．４％（８／２２），两者综合分析ＬＯＨ率为３８．９％（１４／３８）。ＤＣＣ基因ＬＯＨ率为５５．３％（２１／３８）。ＤＣＣ基因在有淋巴结转移组的ＬＯＨ率（８０．０％）显著高于无淋巴结转移组（３９．１％）（Ｐ＜０．０５），在ＤｕｋｅｓＣ、Ｄ期组的ＬＯＨ率（７１．４％）显著高于Ａ、Ｂ期组（３５．３％）。以上结果提示，ＡＰＣ／ＭＣＣ和ＤＣＣ基因的ＬＯＨ是大肠癌常见的基因改变，ＤＣＣ基因ＬＯＨ的测定有可能成为大肠癌病人预后估计的指标。     

活化PBL作用肝癌细胞的表型分析与TCR Vβ基因亚家族的优势取用

目的采用抗ＣＤ２８，ＣＤ８０，ＣＤ２及ＣＤ５８分别刺激健康人ＰＢＬ后作用肝癌细胞，对作用前后ＰＢＬ的表型变化及ＴＣＲＶβ基因亚家族的表达水平进行探讨．方法用ＦＡＣＳ分析作用肝癌细胞前后ＰＢＬ表型变化，并用ＲＴＰＣＲＳｏｕｔｈｅｒｎ印迹分析其ＴＣＲＶβ１２０的表达水平及特征．结果健康人ＰＢＬ作用肝癌细胞后ＣＤ３和ＣＤ８分子表达比作用前明显增高，而ＣＤ４分子无显著变化．健康人ＰＢＬ分别加ＩＬ２，ＰＨＡ，抗ＣＤ３和ＣＤ３＋ＣＤ２８，ＣＤ２８＋ＣＤ８０，ＣＤ２＋ＣＤ５８作用肝癌细胞（ＢＥＬ７４０２）前表达水平平均约５％，作用ＢＥＬ７４０２后表达水平约１３％～２５％，其特征为Ｖβ７增高．结论在癌抗原的参与下，ｍＡｂ共刺激的Ｔ细胞活化，ＴＣＲ接受ＡＰＣ呈递的相应抗原的刺激，具有该ＴＣＲ的淋巴细胞迅速增殖而成为针对抗原的Ｔ细胞克隆，发挥其识别和杀伤癌细胞的作用     

载脂蛋白AI和高密度脂蛋白对内皮细胞保护作用的实验观察

目的观察高密度脂蛋白（ＨＤＬ）和载脂蛋白ＡＩ（ａｐｏＡＩ）在保护血管内皮细胞拮抗低密度脂蛋白（ＬＤＬ）损伤方面的作用。方法细胞形态观察、计数细胞成活率、测定乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）释放百分比和６－酮－前列环素Ｆ_（１α）（６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ_（１α））。结果预加入ＨＤＬ或ａｐｏＡＩ（１００μｇ／ｍｌ），细胞再受到较大剂量（１５００μｇ／ｍｌ）的ＬＤＬ损伤时，不发生显著形态变化，细胞成活率由２５．０％（ＬＤＬ组）提高到９１．８％（ＨＤＬ＋ＬＤＬ组）和８９．７％（ａｐｏＡＩ＋ＬＤＬ组）；细胞膜的完整性增强，ＬＤＨ释放百分比由７２．０％±５．５％（ＬＤＬ组）降至２６．８％±３．４％（ＨＤＬ＋ＬＤＬ组）和２９．４％±４．５％（ａｐｏＡＩ＋ＬＤＬ组）；促进细胞自身分泌前列环素，使６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ_（１α）的含量由７．８±１．４μｇ／ｍｌ（ＬＤＬ组）增至１６．５±４．３μｇ／ｍｌ（ＨＤＬ＋ＬＤＬ组）和１４．２＋１．９μｇ／ｍｌ（ａｐｏＡＩ＋ＬＤＬ组）。结论在拮抗ＬＤＬ损伤时，ａｐｏＡＩ和ＨＤＬ在维持细胞形态、保持细胞膜完整性以及增加细胞自身分泌等方面作用近似。     

内皮素-1受体拮抗剂对肺气肿大鼠肺组织的保护作用及机制

目的 探讨内皮素-1受体拮抗剂对肺气肿大鼠肺组织的保护作用及机制.方法 将24只SD大鼠随机分为健康对照组、肺气肿模型组、BQ123干预组、Bosentan干预组,每组6只.测4组大鼠平均内衬间隔(MLI)和肺泡破坏指数(DI).用缺口末端标记法(TUNEL)测肺泡间隔细胞凋亡;用免疫组化法、Western blot测caspase-3表达;用明胶酶谱法测基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9活性;用ELISA测TNFα、IL-1β浓度.结果 (1)肺气肿模型组大鼠出现典型肺气肿变化,MLI[(108.7±6.8)μm]和DI[(62.2±7.0)%]较健康对照组显著增高[(69.8±6.6)μm;(13.9±2.7)%;P<0.01];BQ123干预组[MLI(89.0±7.4)μm,DI(41.5±4.5)%]、Bosentan干预组[MLI(81.9±6.1)μm,DI(44.0±8.5)%]均较肺气肿模型组显著降低,但2组间差异无统计学意义.(2)4组大鼠肺内均可见凋亡细胞,肺气肿模型组凋亡指数(AI)较健康对照组明显增高,BQ123干预组、Bnsentan干预组AJ较肺气肿模型组明显减低,但仍高于健康对照组(P<0.01).(3)肺气肿模型组大鼠肺组织caspnse-3表达明显增高,BQ123干预组、Bosentan干预组caspase-3表达较肺气肿模型组明显降低.(4)肺气肿模型组大鼠肺内MMP-2、MMP-9活性较健康对照组明显增高,BQ123干预组、Bosentan干预组MMP-2、MMP-9活性降低,但差异无统计学意义.(5)肺气肿模型组大鼠肺组织匀浆上清中TNFα、IL-1β水平较健康对照组明显增高,BQ123干预组、Bosentan干预组TNFα、IL-1β水平较肺气肿模型组明显减低.结论 内皮素受体拮抗剂可通过抑制肺气肿大鼠凋亡基因表达,降低MMPs活性和减少炎性因子释放而起到部分保护作用.     

Combined endothelin receptor blockade evokes enhanced vasodilatation in patients with atherosclerosis

Endothelin (ET)-1 causes vasoconstriction via ET(A) and ET(B) receptors located on vascular smooth muscle cells and vasodilatation via ET(B) receptors on endothelial cells. Studies in vitro indicate an upregulation of ET(B) receptors in atherosclerosis. The present study investigated the vascular effects evoked by endogenous ET-1 in atherosclerotic patients. Forearm blood flow (FBF) was measured with venous occlusion plethysmography in 10 patients with atherosclerosis and in 10 healthy control subjects during intra-arterial infusion of selective ET receptor antagonists. The ET(B) receptor antagonist BQ788 evoked a significant increase in FBF (31+/-13%) in the patients, whereas a 20+/-9% reduction was observed in the control subjects. The ET(A) receptor antagonist BQ123 combined with BQ788 evoked a marked increase in FBF (102+/-25%) in the patients compared with no effect in the control subjects (-3+/-9%, P<0.001 versus patients). The ET(A) receptor antagonist BQ123 increased FBF to a similar degree in patients (39+/-11%) as in control subjects (41+/-11%). The increase in FBF evoked by selective ET(A) receptor blockade was significantly (P<0.05) less than that evoked by combined ET(A)/ET(B) receptor blockade in the atherosclerotic patients. These observations suggest an enhanced ET-1-mediated vascular tone in atherosclerotic patients, which is at least partly due to increased ET(B)-mediated vasoconstriction.     

过氧化氢酶过度表达对血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的 探讨腺病毒戢体介导的过氧化氢酶基因转染对体外培养的人血管平滑肌细胞凋亡的影响。方法 用含过氧化氢酶基因的重组腺病毒转染人血管平滑肌细胞，采用Western blot方法检测血管平滑肌细胞过氧化氢酶的表达。应用流式细胞术、TUNEL法等方法检测血管平滑肌细胞的凋亡。结果 含过氧化氢酶基因的重组腺病毒转染后血管平滑肌细胞过氧化氢酶表达明显增多；流式细胞术显示含过氧化氢酶基因的重组腺病毒组与对照组比较凋亡率明显增加（P〈0．01）。经TUNEL分析显示，含过氧化氢酶基因的重组腺病毒组凋亡细胞明显多于对照组。两者之间有显著性差异（P〈0．001）。结论 腺病毒载体介导的过氧化氢酶基因转染导致过氧化氢酶过度表达。促进人血管平滑肌细胞的凋亡，这可能是防治经皮腔内冠状动脉血管成形术后再狭窄的一种新方法。     

内皮素-1及其受体拮抗剂对血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的　探讨内皮素 - 1(ET- 1)及其特异性内皮素 A受体 (ETA- R)拮抗剂 (BQ12 3)对脐动脉血管平滑肌细胞(HUSMC)凋亡的影响。方法　组织块培养 HU SMC,传代后分为对照组、ET- 1组、BQ12 3+ET- 1组。流式细胞术测定细胞核 DNA降解规律、凋亡细胞数、及细胞周期中各时相细胞的变化。结果　 ET- 1组可见明显 Ap峰 ,凋亡细胞百分比 (13.86 %± 4 .85 % )较对照组 (1.5 8%± 0 .2 3% )显著增加 (P<0 .0 5 )。ET- 1组 HUSMC的 G0 / G1 期细胞百分数 (31.5 6 %± 2 .73% ) ,较对照组 (71.15 %± 1.34% )明显降低 (P <0 .0 1)。 S期细胞百分数 (37.6 5 %±3.0 1% )和 G2 / M期细胞百分数 (30 .78%± 0 .30 % ) ,分别较对照组 (19.10 %± 1.99% )和 (12 .2 1%± 1.86 % )明显升高 (P<0 .0 1)。 BQ12 3+ET- 1组各期细胞百分数与相应对照组比较 ,统计学均无差异 (P>0 .0 5 )。结论　 ET- 1促 HU SMC凋亡和增殖的程度不同 ,产生增殖与凋亡的失平衡。BQ12 3可完全抑制 ET- 1的上述作用 ,具有临床应用前景     

银杏叶对血管平滑肌细胞增殖活性的影响

目的研究银杏叶对血管平滑肌细胞增殖活性的影响。方法对大鼠的胸主动脉平滑肌细胞采用组织块培养法,用四氧基偶氮硝基唑蓝（MTT）法测定细胞活性。结果与正常对照组比较,高糖（30mmol/L）在24h、48h、72h均有较强的促进大鼠VSMC增殖作用（P〈0.01）;与高糖组比较,不同剂量的EGB对过度增长的VSMC有抑制作用（P〈0.05）。结论EGB制剂可抑制高糖引起的VSMC过度增殖。     

Maturational changes of endothelial vasoactive factors and pulmonary vascular tone at birth.

The aim of this study was to determine which endothelial factors were involved in the decrease of pulmonary vascular resistance at birth, and how they changed with maturation. Response of intrapulmonary artery rings precontracted with prostaglandin F2alpha were studied from piglets aged <2 h, 2-3 day, 10 day and adult pigs for pharmacological responses to acetylcholine (ACh) and cromakalim (CMK) in the presence and the absence of the nitric oxide synthase (NOS) inhibitor, N(omega)-nitro-L-arginine (L-NA), the adenosine triphosphate sensitive potassium (K(ATP)) channel blocker, glibenclamide and the endothelin (ET)-A receptor antagonist, BQ123. In situ hybridization and immunochemistry studies were performed in lung tissues of the same animals in order to determine the expression of NOS and ET. There was a small contractile effect of ACh in the newborn. Relaxation to ACh, which was blocked by L-NA and reduced by glibenclamide, only appeared from the age of 3 days. The significantly greater relaxation to CMK in rings without endothelium (p<0.05) was abolished by BQ123 in the newborn, and then disappeared by 2 days of age. Glibenclamide had a greater inhibitory effect on relaxation induced by CMK at 10 days than in the newborn and 2 days old piglets. NOS expression was low in pulmonary arteries of the newborn and increased by 2 days of age whereas the converse was seen with ET expression. It is concluded that: 1) relaxant response to acetylcholine was absent at birth and appeared at 2 days; 2) the reduced relaxant response to cromakalin in rings with endothelium at birth could be blocked by BQ123; and 3) the expression of endothelin decreased whereas the expression of nitric oxide synthase increased from birth to 2 days of age.     

Endothelin is a potent mitogen for rat vascular smooth muscle cells

The effect of endothelin (ET), a novel endothelium-derived vasoconstrictive peptide, on DNA synthesis was studied in cultured rat vascular smooth muscle cells (VSMC). ET stimulated incorporation of [3H]thymidine into DNA of the quiescent VSMC in a dose-dependent manner; the approximate half-maximal and maximal stimulation for DNA synthesis was induced with 2 x 10(-10) M and 10(-9) M, respectively. The stimulatory effect by ET on DNA synthesis was completely inhibited by the calcium channel blocker nifedipine. ET combined with epidermal growth factor and transforming growth factor-alpha, but not with platelet-derived growth factor, had synergistic effects. These data indicate that ET is a potent mitogen as well as a constrictor for VSMC, suggesting its potential role in the development of vascular disease.     

Role of endothelin in stress-induced hypertension

In this study we investigated the role of endogenous endothelin in the cardiovascular response to acute stress, ie mild footshocks in conscious rats. Footshock-stress significantly increased mean arterial pressure and heart rate (P < 0.05). Peripheral or intracerebroventricular (IVT) administration of BQ 788, a selective antagonist of ET(B) receptor, did not alter pressor response to footshocks. Intraperitoneal injections of BQ 123 (1 mg/kg), a selective antagonist of the ET(A)-receptor, had a tendency to decrease, while BQ 123 (203 ng/5 microl) IVT administration significantly reduced the pressor response to footshocks (-12 mm Hg, P < 0.001). Neither ET(A) nor ET(B) antagonists, when injected centrally or peripherally, altered basal blood pressure or heart rate. Our results may indicate a role of brain endothelin in the sympathetic mediated cardiovascular response to stress, via stimulation of ET(A) receptor.