脑室内注射BDNF抗体对大鼠海马NOS表达的影响

探讨脑室内注射脑源性神经营养因子 (BDNF)抗体阻断内源性BDNF对大鼠海马一氧化氮合酶 (NOS)阳性神经元的影响。脑室内注射BDNF抗体一周后 ,采用Morris水迷宫进行行为检测 ;并用NADPH 黄递酶组化染色方法观察海马NOS阳性神经元数目的变化。与对照组相比 ,实验组大鼠空间学习和记忆能力明显下降 (P <0 0 1) ;实验组大鼠海马CA1区NOS阳性神经元数目 (38 37± 5 2 3)明显少于对照组 (4 9 5 3± 5 74 ) (P <0 0 1) ;实验组DG区NOS阳性神经元数目 (4 8 77± 5 5 1)明显少于对照组 (6 0 4 0± 7 39) (P <0 0 1)。脑室内注射BDNF抗体可导致大鼠空间学习记忆能力下降 ,海马NOS阳性神经元数目减少 ,提示BDNF对学习和记忆的影响可能与海马NOS阳性神经元数目的变化有关     

抑郁症大鼠杏仁核微管相关蛋白表达及神经元凋亡

目的 观察抑郁症大鼠杏仁核磷酸化微管相关蛋白-2（pMAP-2）表达和神经元凋亡的变化,探讨抑郁症的发病机制。方法 随机将20只雄性Wistar大鼠分为对照组和模型组,采用慢性不可预见性温和应激（CUMS）方法建立抑郁大鼠模型,采用糖水偏好实验、悬尾实验、Morris水迷宫实验进行行为学检测,免疫印迹方法检测pMAP-2变化,透射电镜观察神经细胞凋亡。结果 模型组体重增长率、糖水偏好百分比低于对照组（ P <0.05）,悬尾不动时间和逃避潜伏期长于对照组（ P <0.05）;模型组pMAP-2蛋白表达高于对照组（ P ＜0.05）;模型组观察到明显的神经细胞凋亡。结论 抑郁症大鼠杏仁核神经细胞凋亡增加,可能与MAP-2磷酸化增高有关。     

抑郁大鼠海马微管相关蛋白pMAP-2和p-Tau表达的研究

目的:观察微管蛋白p MAP-2和p-Tau在抑郁大鼠海马的表达变化情况,探讨海马微管蛋白与抑郁症的关系和意义。方法:通过利用慢性不可预见性温和应激(chronic unpredicted mild stress,CUMS)建立大鼠抑郁症模型,对照组和模型组分别采用糖水偏好实验、旷场实验以及Morris水迷宫对其行为进行学检测,采用尼氏染色观察海马神经元的形态学变化,对照组和模型组造模后1、7、14、28 d分批处死大鼠,用Western Blot方法检测海马组织中p-MAP-2和p-Tau的蛋白表达水平,免疫荧光双标观察海马组织中p-MAP-2和p-Tau定位分布。结果:糖水偏好实验:模型组糖水消耗量和糖水偏好百分比分别低于对照组(P0.01);旷场实验:模型组行走总路程、中央活动时间、直立次数和修饰行为分别低于对照组(P0.01);Morris水迷宫模型组平均逃避潜伏期高于对照组(P0.01)。CUMS后1 d大鼠海马p-MAP-2和p-Tau蛋白的表达低于对照组,7 d后开始升高,14 d明显高于对照组,28 d仍略高于对照组。p-MAP-2和p-Tau免疫荧光双标结果显示:部分神经元的胞浆内p-MAP-2和pTau同时表达,表明p-MAP-2和p-Tau有部分共定位。结论:p-MAP-2和p-Tau在抑郁模型大鼠海马出现先降低后增高的现象,因此我们推测在应激抑郁症发病过程中,p-MAP-2和p-Tau蛋白表达的变化可能影响微管的稳定性,破坏细胞骨架稳态,从而影响海马神经元的结构改变。     

脑室内注射重组BDNF腺病毒对大鼠海马神经发生的影响

目的 观察脑室内注射BDNF对海马神经发生的影响.方法 脑室内注射重组BDNF腺病毒4周后,Morris 水迷宫进行行为学检测,双标组化染色方法观察海马新生神经元数目的 变化.结果 与对照组相比,实验组大鼠空间学习和记忆能力明显增强(P<0.05);实验组大鼠海马DG区Brdu/DCX阳性神经元数目明显多于对照组(P<...     

抑郁症患者血清BDNF水平与相关因素分析

目的:探讨抑郁症患者血清脑源性神经营养因子(BDNF)水平与病程、抑郁症状严重程度、性别、年龄之间的相关性。方法:采用汉密尔顿抑郁量表(HAMD)对30例抑郁症患者(患者组)及30名健康对照者(对照组)进行评定,并采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定患者和对照者的血清BDNF水平。结果:患者组血清BDNF水平[(17.26±6.39)ng/ml]低于对照组[(24.13±6.82)ng/ml](P<0.01);患者组血清BDNF水平分别与其HAMD积分及病程长短呈负相关(r=-0.398,P<0.05;r=-0.413,P<0.05)。结论:抑郁症患者血清BDNF水平降低并与病程长短及抑郁症状的严重程度相关,提示BDNF可能参与抑郁症的发病过程。     

BDNF对慢性应激性大鼠海马神经元损伤的保护作用

目的研究脑源性神经营养因子(BDNF)对大鼠海马神经元的保护作用。方法40只成年Wistar大鼠随机分为对照组、应激组、BDNF低剂量组和高剂量组,每组10只。用电击足底结合噪声建立慢性应激大鼠模型,Morris水迷宫观察动物的空间学习和记忆能力,Nissl染色观察和计数海马神经元数量,Fara-2荧光法测海马突触体内游离钙浓度。结果在双海马注射BDNF后,对于因慢性应激引起的空间学习和记忆能力下降,海马神经元数量减少,海马突触体内游离钙浓度增高有明显保护作用。结论BDNF对应激海马损伤有保护作用,其机制可能是通过调节海马细胞内的钙浓度,防止海马神经细胞丢失有关。     

应激性抑郁症大鼠杏仁核微管相关蛋白表达的实验研究

目的:探讨抑郁症大鼠杏仁核磷酸化微管相关蛋白-2(pMAP-2)的表达。方法:随机将雄性Wistar大鼠分为对照组和模型组,采用慢性不可预见性温和应激(CUMS)方法建立抑郁大鼠模型,采用糖水偏好实验、悬尾实验、Morri水迷宫实验进行行为学检测,免疫印迹方法检测pMAP-2变化。结果:对照组和模型组大鼠7 d、14d和21d的体重增长率分别为7.62±0.83和2.51±0.38、16.37±1.82和1.45±0.85、22.93±2.78、9.34±1.32,相对糖水消耗量分别为9.42±1.81和3.81±0.84,糖水偏好百分比为92.49±8.19和76.61±4.95,差异有统计学意义(P<0.01);悬尾不动时间分别为(1.75±0.31)s和(2.95±0.38)s,差异有统计学意义(P<0.01);平均逃避潜伏期分别为(8.63±1.07)s和(24.76±2.37)s,差异具有统计学意义(P<0.01);对照组和模型组pMAP-2相对表达水平分别为0.74±0.12和1.54±0.18,模型组高于对照组(P<0.05)。结论:应激抑郁大鼠杏仁核组织中MAP-2磷酸化增高。     

MK-801对皮质酮诱导 抑郁样行为大鼠海马mBDNF和proBDNF表达的影响

目的 N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂通过脑源性神经营养因子(BDNF)发挥抗抑郁作用.然而,NMDA受体拮抗剂调控BDNF表达的机制尚不清楚.方法 口服皮质酮(CORT)诱导大鼠抑郁样行为.采用高架十字迷宫实验、蔗糖偏好实验、旷场实验和强迫游泳实验观察动物的抑郁样行为,采用蛋白免疫印迹方法检测动物背侧和腹...     

短期运动训练对自发性高血压大鼠海马BDNF通路的影响

目的 探讨短期运动训练对自发性高血压大鼠海马脑源性神经营养因子(BDNF)通路的影响.方法 分别将自发性高血压(SHR)大鼠和同源正常血压(WKY)大鼠分为非运动组和运动组,每组15只.运动组大鼠每天进行持续30min的运动,连续21d.非运动组大鼠在相同时间段被关在跑步机附近的笼子里.采用酶联免疫吸附和Western...     

线粒体缺陷对原代培养新生大鼠海马神经元微管相关蛋白表达的影响

目的：观察线粒体呼吸链复合体IV（即细胞色素C氧化酶）抑制剂叠氮钠（NaN₃）对神经元细胞骨架系统的影响,探讨线粒体缺陷在阿尔茨海默病发病中的作用。方法：将叠氮钠与原代培养的新生大鼠海马神经元共同孵育,MTT法测定细胞存活率,激光共聚焦显微镜系统观察细胞微管结构及微管相关蛋白表达的变化。结果：叠氮钠8-128 mmol/L与培养的神经元共孵育6-24 h,细胞存活率下降,呈时间及剂量依赖性;NaN₃ 16、64 mmol/L作用6 h,使细胞微管结构损伤,微管相关蛋白表达下降,尤以突起内最为显著。结论：叠氮钠与培养的神经元共孵育导致神经元损伤,其机制与线粒体缺陷致细胞骨架系统异常有关。     

Modulation of BDNF and TrkB expression in rat hippocampus in response to acute neurotoxicity by diethyldithiocarbamate

In this study, we examined the expression profile of brain-derived neurotrophic factor (BDNF) and its receptor TrkB in adult rat hippocampus following acute administration of diethyldithiocarbamate (DDTC), a neurotoxic compound which was previously shown to induce microglia activation and cell death. Semiquantitative RT-PCR analysis detected significant variations of BDNF mRNA levels in whole hippocampus homogenates, with a peak at 24h after DDTC injection. Increased BDNF protein expression was demonstrated by immunohistochemistry in various hippocampal subfields. The most relevant increase was observed in the hilus of the dentate gyrus where BDNF levels at 120h were found to be almost four times those of basal levels. Full-length TrkB (TrkB.FL) encoding mRNA was also shown to undergo an earlier increase in the hippocampus of DDTC-treated rats. TrkB immunostaining with an antibody binding both full-length and truncated (TrkB.T) isoforms was found to increase at 120h in the hippocampal CA2 and CA3 regions. These results demonstrate that DDTC modulates the expression of BDNF and its receptor in the adult rat hippocampus and suggest a possible involvement of this neurotrophin in the protective response to DDTC-induced neuronal damage.     

Distinct neuronal localization of microtubule-associated protein 4 in the mammalian brain

Although recent studies have suggested the role of microtubule-associated protein (MAP) 4 in some neuron-specific events, there are no reports that directly observed its neuronal localization. Here we show the detailed expression of MAP4 in the mammalian brain. Immunoblotting revealed the presence of MAP4 in all neuronal tissues. The site-specific localization of MAP4 was observed in sagittal brain sections: MAP4 was rich in brain-specific cells, cerebellum Purkinje cells and hippocampus pyramidal cells. When primary cultures of cortical neurons were immunostained, MAP4 was detected in the cell bodies and processes with patchy staining pattern. These results suggested that MAP4 play some roles in the central nervous system, such as the dynamic cytoskeletal reorganization and regulation of the microtubule-dependent long-range transport.     

侧脑室注射链脲佐菌素对大鼠海马神经元突触的影响

为观察链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)双侧侧脑室注射对大鼠海马神经元突触的影响,本研究将Wistar大鼠随机分为对照组和模型组,模型组大鼠分别于第1、3d双侧侧脑室重复注射STZ3mg/kg,对照组以人工脑脊液代替STZ。21d后,取大鼠海马,免疫组织化学染色及Western blotting方法观察突触素、活性调节细胞骨架相关蛋白(activity-regulated cytoskeletal-associatedprotein,Arc)的表达;电镜观察海马CA1区神经元突触超微结构的改变。结果显示:与对照组相比,模型组大鼠海马内突触素蛋白表达显著减少,而Arc蛋白表达显著增多;模型组海马CA1区神经毡内突触结构异常,突触小泡聚集增多。以上结果提示:脑室注射STZ可影响大鼠海马突触相关蛋白的表达,引起突触超微结构异常,干扰了神经元突触信号的传导。     

右美托咪定对抑郁症大鼠行为及海马BDNF和mTOR蛋白表达的影响

目的:观察右美托咪定(DEX)对抑郁症大鼠行为及海马脑源性神经营养因子(BDNF)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)表达的影响并探讨其机制。方法:实验设5组,即假手术(sham)组、抑郁症模型(model)组及DEX(2.5、5和10μg/kg)组,每组12只大鼠。抑郁症动物模型采用卵巢摘除加慢性不可预知性温和应激法制备。DEX各剂量组大鼠连续腹腔注射给药21 d。强迫游泳及旷场实验观察大鼠行为变化。Morris水迷宫实验评价大鼠空间学习和记忆能力。海马神经元病理变化采用尼氏染色法检测。大鼠海马白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA的表达水平采用RT-qPCR法检测。Western blot检测海马IL-1β、IL-6、TNF-α和BDNF蛋白表达水平及蛋白激酶A(PKA)、cAMP反应元件结合蛋白(CREB)、原肌球蛋白相关激酶B(TrkB)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)和mTOR蛋白的磷酸化水平。结果:与model组相比,DEX各剂量组大鼠强迫游泳不动时间明显降低,自发活动明显增加,逃避潜伏期明显降低,穿越平台次数明显...     

Presence of microtubule-associated protein 2 in chromaffin cells

We have examined bovine adrenal chromaffin cells in culture for the presence of the microtubule-associated protein 2. Chromaffin cells could be identified in culture on the basis of their staining with antibodies directed against secretory granule proteins. Using immunoperoxidase staining microtubule-associated protein 2 immunoreactivity was demonstrated to be present in chromaffin cells but not fibroblasts in culture. Microtubule-associated protein 2 immunoreactivity was present in the cell body, processes and varicosities of the chromaffin cells. Microtubule-associated protein 2 polypeptides were shown to be present in an adrenal medullary homogenate but not chromaffin granule membranes by immunoblotting. The results indicate that the neuronal cytoskeletal polypeptide microtubule-associated protein 2 is present in adrenal chromaffin cells. The presence of microtubule-associated protein 2 in both neurons and chromaffin cells may be related to their common embryonic origin.     

慢性轻度不可预见性应激对大鼠海马内甘丙肽表达的影响

目的:观察慢性轻度不可预见性应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)对大鼠海马甘丙肽(ga-lanin,Gal)蛋白及mRNA表达的影响,探讨Gal在大鼠实验性抑郁症发病过程中的作用机制。方法:将20只健康雄性SD大鼠,随机分为正常组和模型组,每组10只。孤养结合CUMS 21 d建造抑郁症模型,应用旷场试验和糖水偏好试验检测大鼠行为学变化,使用免疫荧光组织化学方法和逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)法测定Gal及Gal mRNA的表达。结果:造模后模型组大鼠运动总路程、中央路程、周边路程及糖水摄入量均较正常组偏低(P<0.05);模型组与正常组相比,海马内Gal及Gal mRNA的表达同样降低(P<0.05)。结论:慢性轻度不可预见性应激可使大鼠海马内Gal及Gal mRNA的表达量下降,推测Gal在抑郁发病过程中可能起到神经保护作用。     

急、慢性应激对大鼠海马BDNF表达的时序性影响

 摘要：目的 观察急性应激和重复低强度强迫游泳应激后大鼠海马BDNF及BNDF mRNA在不同时间点的动态表达;观察慢性应激条件下动物行为改变。方法 采用反转录－聚合酶链反应（RT-PCR）方法,观察急性和慢性应激对大鼠海马BDNF mRNA的动态表达的影响;采用Western bloting方法检测海马BDNF 蛋白表达量的变化。结果 急性应激导致动物海马BDNF mRNA及其产物表达增加,3小时后表达逐渐降低,与对照组比较差异具有显著性;慢性应激后BDNF蛋白表达呈降低趋势,并在多时点显著低于急性应激组 (p<0.05)。结论 急性应激显著增强大鼠海马BDNF表达;慢性应激组大鼠BNDF mRNA表达存在一定适应现象,且多时点表达量显著低于急性应激组。     

多巴胺对出血性脑卒中大鼠胶质纤维酸性蛋白和脑源性神经营养因子表达的影响及保护机制

目的：探讨多巴胺（DA）对出血性脑卒中大鼠的胶质纤维酸性蛋白（GFAP）和脑源性神经营养因子（BDNF） 表达的影响及保护机制。方法：建立出血性脑卒中大鼠模型,将大鼠随机分为假手术组、脑出血模型组（ICH 组）和DA 组（ 脑出血模型给予DA 组）。分别比较3 组大鼠的神经功能障碍评分、神经元形态、脑水肿、细胞凋 亡和脑组织形态变化;免疫组织化学染色法检测脑组织中GFAP 和BDNF 蛋白的表达。结果：与假手术组相比较, ICH 组神经功能障碍评分显著降低;与ICH 组相比,DA 组神经功能障碍评分显著升高。与假手术组比较,ICH 组尼氏小体数量显著减少;与ICH 组相比,DA 组尼氏小体数量明显增加;ICH 组脑组织含水量和细胞凋亡数量 显著高于假手术组;与ICH 组相比,DA 组脑组织含水量和细胞凋亡数量均显著降低。ICH 组脑组织出现了不同 程度的水肿,其中一部分神经细胞出现了明显肿胀,间质之间明显增宽,神经元结构受到了严重破坏,严重的 神经元出现坏死,且有大量的炎性细胞浸润;DA 组大鼠的脑组织形态得到明显的改善。与假手术组相比,ICH 组脑组织中GFAP 蛋白阳性表达显著增加,BDNF 蛋白阳性表达显著降低;与ICH 组大鼠相比,DA 组脑组织中 GFAP 阳性表达明显减少,BDNF 蛋白阳性表达明显增多。结论：DA 能抑制脑组织中GFAP 表达,促进BDNF 的 表达,改善脑出血的神经功能障碍,进而对出血性脑卒中受损脑组织起到保护作用。     

脊髓压迫性损伤大鼠海马和脊髓内BDNF的表达变化

目的探讨脑源性神经营养因子(BDNF)在脊髓压迫性损伤后的表达变化及作用。方法用自行设计的方法制作脊髓压迫模型,免疫荧光检测BDNF在星形胶质细胞、神经元和上下行轴突的表达;WB检测BDNF在大鼠海马及脊髓的表达。结果随着时间延长,受损部位的BDNF+-GFAP荧光强度逐渐增强;BDNF+-Tuj1荧光强度逐渐减弱;受损部位相邻上下段的BDNF+-NF200比受损部位的明显增强。海马和脊髓受损中心相邻的上、下段的BDNF蛋白表达在损伤后1d达到峰值,然后逐渐下降(P0.05);而脊髓受损中心的BDNF蛋白表达逐渐下降(P0.05)。结论脊髓损伤后,BDNF的表达下调,随伤后时间呈一定规律变化,是引起受损部位神经元表达下降的原因之一。