基于LPS/TLR4通路研究疏肝理脾汤治疗NASH大鼠的作用机制

目的:探讨疏肝理脾汤对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠脂多糖-Toll受样体-4(LPS-TLR4)信号通路的影响。方法:造模成功的NASH 84只大鼠随机分为6组,其中两组为无中药干预对照组,分为蛋氨酸胆碱缺乏(MCD)饮食(M_M)组和正常饮食(M_N)组;两组继续MCD饮食加中药(疏肝理脾汤)灌服,分以中药低剂量(D_低)组、高剂量(D_高)组;两组为正常饮食加中药(疏肝理脾汤)灌服,分以中药低剂量(Z_低)组、高剂量(Z_高)组,持续4周,于实验9周末处死所有动物,并行大鼠肝脏组织病理、外周血相关生化指标、细胞相关炎症因子、血浆LPS水平、肝组织TLR4水平等相关检测与分析比较。结果:与空白组比较,实验组SAF积分,血清ALT、AST、TC、TG、TNF-α、IL-6、IL-1含量;血浆LPS、TLR4mRNA及蛋白水平表达均明显升高;实验组内比较,与两组模型组(M_M组、M_N组)比较,各治疗组(Z_高组_、Z_低组、D_低组、D_高组)SAF积分;血清ALT、AST、TC、TG、TNF-α、IL-6、IL-1含量;血浆LPS、TLR4mRNA及蛋白水平表达均显著降低(P0.05)。各治疗组内两两比较,Z_高组在改善SAF积分、降低血清ALT、AST、TC、TG、TNF-α、IL-6、IL-1含量、降低血浆LPS/TLR4mRNA及蛋白水平表达方面优于其他治疗组(P0.05)。结论:"疏肝理脾汤"高剂量联合正常饮食对改善NASH大鼠脂肪沉积,降低炎症状态有一定作用,干预机制可能与影响LPS/TLR4信号通路,从而达到抑制相关炎症细胞因子分泌,减轻肝细胞炎性反应及脂肪变性有关。     

理气化痰祛瘀法对非酒精性脂肪性肝炎大鼠脂肪细胞因子表达的影响

[目的]观察理气化痰祛瘀中药对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝炎（NASH）大鼠肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）、瘦素（1eptin）及其肝组织mRNA水平的影响，探讨其防治NASH的作用机制。[方法]以高脂饮食喂养Wistar大鼠12周，建立大鼠NASH模型，同时以不同剂量的理气化痰祛瘀法中药干预12周，测定大鼠血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）及游离脂肪酸（FFA）水平，观察肝组织的病理改变，原位杂交技术检测肝组织TNF-α、IL-6、leptinmRNA表达，放免法测定血清TNF-α、IL-6、leptin水平。[结果]NASH大鼠血清ALT、AST、FFA、TNF-α、IL-6、leptin水平较正常大鼠显著升高，肝组织TNF-α、IL-6和leptinmRNA表达显著增强，理气化痰祛瘀法中药能显著改善NASH大鼠肝组织炎症活动程度，显著降低ALT、AST、FFA、TNF-a、IL-6、leptin水平和肝组织TNF-α、IL-6、leptinmRNA表达。[结论]TNF-α、IL-6、leptin参与高脂饮食诱导的大鼠NASH的发生，理气化痰祛瘀中药能调节TNF-α、IL-6、leptin的分泌，防止NASH的进一步发展。     

化痰祛湿活血方对脂肪变L02细胞促炎抑炎因子的影响

目的:探讨化痰祛湿活血方对脂肪变L02细胞相关炎性因子的影响。方法:培养L02细胞,采用油酸复制脂肪变肝细胞模型,随机分为空白组、模型组、脂联素(ADPN)组和化痰祛湿活血方含药血清组(中药组)。化学发光法测定细胞上清液中ALT、AST、TG含量;运用ELISA法检测细胞上清液中炎症因子TNF-α、IL-1、IL-6、IL-10水平,Real time PCR法检测细胞中TNF-α、IL-1、IL-6、IL-10 mRNA表达。结果:与模型组比较,24 h后ADPN组和中药组L02细胞中ALT、AST、TG含量均明显下降(P0.05),TNF-α、IL-1、IL-6水平明显下降,IL-10水平明显上升(P0.05)。TNF-α、IL-1、IL-6 mRNA表达明显下降(P0.05),IL-10 mRNA表达明显升高(P0.05)。结论:化痰祛湿活血方可通过下调TNF-α、IL-1α、IL-6表达及上调IL-10表达抑制脂肪变L02细胞炎症反应。     

B细胞转录激活因子在非酒精性脂肪性肝炎中的表达及意义

目的通过构建蛋氨酸-胆碱缺乏(MCD)饮食诱导非酒精性脂肪性肝炎(NASH)小鼠模型,研究B细胞转录激活因子(BATF)在肝脏中表达水平,并探讨其与NASH进展的关系。方法 C57BL/6小鼠共14只,随机分为对照组7只,MCD组7只。对照组正常饮食,MCD组给予MCD饮食8周建立NASH模型,通过实时荧光定量PCR、免疫组化、流式细胞术检测肝脏巨噬细胞中BATF表达情况,探讨BATF表达水平与临床指标的关系。结果与对照组相比,MCD组肝脏BATF和促炎因子TNF-α和IL-1βmRNA表达水平明显上调,且MCD组的BATF集中表达于间质炎细胞的细胞核。MCD组小鼠F4/80+标记库普弗细胞比例显著高于对照组,其中以CD11c+标记M1型库普弗细胞为主。BATF表达水平与肝脏生化ALT、AST以及肝脏组织学NAS评分、脂肪变、小叶炎症、气球样变均呈显著正相关。结论 BATF参与NASH进展,在预测NASH进展中可能具有潜在价值。     

基于IKK/IKB/NF-κB信号通路探讨理中汤加味联合穴位埋线干预非酒精性脂肪性肝炎大鼠的作用机制

目的:基于IKK/IKB/NF-κB信号通路探讨理中汤加味联合穴位埋线干预非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠的作用机制。方法:制备NASH大鼠模型,分为模型组、中药+埋线组、埋线组、中药组、西药组,另设空白组。干预4周后,肝组织行光镜观察;生化法检测肝功能、血脂、HOMA-IR,ELISA法检测TNF-α、IL-6、IL-1β含量;Western blot法检测肝脏IKK-α、NF-κB p65、IL-1β、IL-6、TNF-α表达。结果:模型组大鼠肝组织重度脂肪变,肝细胞有较大脂肪细胞广泛浸润,呈“气球状”改变,可见肝小叶内大量炎性细胞浸润,各干预组大鼠肝脏脂肪变性及炎性细胞浸润程度改善,其中以中药+埋线组改善最明显。与模型组比较,各干预组大鼠肝指数、ALT、AST、TG、TC、LDL-C、HOMA-IR、IL-6、IL-1β、TNF-α含量均下降,尤以中药+埋线组降低最明显(P<0.05)。Western Blot检测结果显示,与模型组比较,各干预组大鼠IKK-α、NF-κB p65、IL-1β、IL-6、TNF-α蛋白表达降低,其中中药+埋线组表达最少(P<0.05)。结论:理中汤加味联合穴位埋线可改善NASH大鼠肝功能、血脂水平,调节胰岛素抵抗,促进脂质代谢,改善脂肪变性,其作用机制可能与抑制IKK/IKB/NF-κB信号通路的激活,减少下游炎症细胞因子的释放有关。     

罗格列酮对非酒精性脂肪性肝炎小鼠肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ mRNA及其蛋白表达的影响

目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(pemxisome pmliforator-activated receptor gamma,PPARγ)激动剂罗格列酮对非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)小鼠肝组织PPARγ mRNA及其蛋白表达的影响及其在NASH进展中的作用.方法 健康雄性C57BL/6J小鼠15只,随机分为对照组、模型组和罗格列酮干预组.酶法检测小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和甘油三酯(TG)水平;光镜下观察肝组织脂肪变程度、炎症活动度和纤维化程度;采用RT-PCR和Western印迹法检测PPARγ和TNF-a mRNA及其蛋白的表达.结果 对照组小鼠肝脏未出现明显的脂肪变、炎症和纤维化,而模型组肝脂肪变及炎症明显,罗格列酮干预组肝脂肪变及炎症均明显减轻.罗格列酮干预组、模型组和对照组肝组织PPARγ mRNA及其蛋白表达依次为0.83±0.01、0.75±0.01、0.72±0.01和0.77±0.00、0.69±0.02、/0.49±0.01(P＜0.01).模型组、罗格列酮干预组、对照组TNF-a mRNA及蛋白表达依次为1.11±0.01、0.99±0.02、0.91±0.00和0.99±0.01、0.60±0.01、0.47±0.01(P＜0.01).结论 在高脂、胆碱一蛋氨酸缺乏饮食诱导的小鼠NASH模型中,肝组织TNF-α活性与NASH的进展有关;PPARγ特异性激动剂罗格列酮可通过上调PPARγ水平而抑制TNF-α表达,进一步阻止NASH的进展,为NASH的靶向性治疗药物的选择提供了新思路.     

威灵仙多糖对实验性NASH大鼠血清IL-17、TNF-α水平和肝脏病理改变的干预作用

目的:研究威灵仙多糖对实验性非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,N A S H)大鼠血清白介素17(i n t e r l e u k i n 17,IL-17)水平、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)水平和脏脏病理改变的干预作用,并探讨血清IL17水平与TNF-α水平的相关性.方法:采用高脂饲料饲养SD大鼠建立实验性N A S H大鼠模型,通过检测实验性N A S H大鼠模型组、威灵仙多糖组、易善复组及空白组空腹IL-17、TNF-α的含量及观察评估肝脏脂肪变分度、肝脏炎症分级后,统计分析各组血清IL17水平、血清TNF-α水平的差异和肝脏病理改变,并探讨血清IL17水平和TNF-α水平的相关性.结果:威灵仙多糖组NASH大鼠与模型组相比,肝脏脂肪变、肝脏炎症程度均减轻(均P0.05),血清I L-17、T N F-α水平均明显降低(均P0.01);威灵仙多糖组NASH大鼠与易善复组相比,肝脏脂肪变、肝脏炎症、血清TNF-α、IL-17水平均相当(均P0.05).结论:威灵仙多糖可有效治疗NASH大鼠,疗效与易善复相当,其主要机制之一可能是降低NASH大鼠血清IL-17及TNF-α水平、并改善NASH大鼠肝脏病理改变.     

不同强度有氧运动对非酒精性脂肪肝炎大鼠肝线粒体增殖相关转录因子表达的影响

目的研究不同强度运动对非酒精性脂肪肝炎(NASH)大鼠肝线粒体增殖相关调节因子的影响。方法 SD大鼠随机分为普通安静组(ND组)和高脂组,高脂组分为安静对照组(C组)和运动组,分别以普通或高脂饲料喂养16 w,后6 w运动各组进行跑台运动。结束时测血谷丙转氨酶(ALT)和血脂,肝匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA),肝烟酰胺腺嘌呤二核苷酸辅酶依赖的组蛋白去乙酰代酶(SIRT1)、过氧化物增殖物激活受体γ辅因子(PGC-1)α、核呼吸因子(NRF)-1、mt DNA转录因子(TFAM)mRNA和SIRT1、AMPK、p AMPK蛋白表达,肝HE染色切片。结果C组发生NASH;运动各组NAS和氧化应激不同程度缓解;中等、较大强度运动能显著升高SIRT1、p AMPK蛋白表达和SIRT1、PGC-1α、NRF-1、TFAM mRNA水平。结论中等和较大强度运动激活SIRT1/AMPK/PGC-1α信号通路,促进线粒体增殖,降低氧化应激水平,抑制炎症的发生。     

杞蓟制剂对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织TNF-α蛋白表达的影响

目的：观察杞蓟制剂对大鼠非酒精性脂肪性肝炎（nonalcoholic steatohepatitis，NASH）肝组织肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor，TNF-α）蛋白表达的影响，探讨其作用机制。方法：采用高脂饮食复制大鼠NASH模型。实验分正常对照组、模型组、杞蓟制剂组、复方蛋氨酸胆碱片对照组。观察动物一般情况。计算肝指数、肝组织细胞脂肪变性、炎症活动程度，测定血清丙氨酸转氨醇（ALT）、天门冬氨酸转氨酶（AST）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TCH）等指标。结果：与模型组相比，杞蓟制剂预防给药明显改善NASH大鼠肝指数、肝组织脂肪变程度、炎症活动程度及血清ALT、AST、TG、TCH等指标（P〈0．01或P〈0．05），同时明显降低肝组织TNF-α蛋白表达（P〈0．05），优于复方蛋氨酸胆碱片对照组（P〈0．05）。结论：杞蓟制剂抑制TNF-α蛋白在肝组织表迭是其防治NASH的重要机制。     

老年甲亢性肝损害患者炎症因子的变化及意义

目的探讨老年甲亢性肝损害患者炎症因子的变化及意义。方法选取40例老年甲亢性肝损害患者(老年组),40例中青年甲亢性肝损害患者(中青年组),40例健康体检老年人组(正常组)作为研究对象。采用化学发光法测定血浆中降钙素原(PCT)水平,放射免疫法测定IL-2、IL-6,ELISA法测定血清TNF-α,电化学发光法测定血清FT3、FT4,全自动生化分析仪测定血清ALT、AST、ALP、γ-GT和TBIL。结果老年组及中青年组IL-2、IL-6、TNF-α、FT3、FT4、ALT、AST、ALP、γ-GT、TBIL水平均高于正常组(P0.05或P0.01),PCT水平较正常组比较偏高但差异无统计学意义(P0.05);老年组IL-2、TNF-α、FT3、FT4水平和中青年组比较无显著差异(P0.05),但老年组IL-6、ALT、AST、ALP水平高于中青年组(P0.05);血清IL-6与TNF-α、ALT、AST、ALP呈正相关(r=0.45,0.32,0.39,0.28,P0.05)。结论老年甲亢易伴发更严重的肝功能损害,IL-6、TNF-α水平升高可能是老年甲亢性肝损害发生的重要机制。     

下调miR-122对非酒精性脂肪性肝炎小鼠的炎症发生及肝细胞凋亡的影响

目的探讨下调miR-122对非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis, NASH)小鼠的炎症发生及肝细胞凋亡的影响。方法 qRT-PCR检测各组小鼠肝组织中miR-122的表达情况;HE染色观察各组小鼠肝组织病理损伤情况;油红O染色观察各组小鼠肝组织脂肪堆积情况;ELISA检测各组小鼠血清中甘油三脂(TG)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)的表达情况;TUNEL荧光染色观察各组小鼠肝细胞凋亡情况;Western blotting检测各组小鼠肝组织中Bax、Bcl-2蛋白表达水平。结果 miR-122 mRNA的表达水平在MCD组和MCD+miR-NC组小鼠肝组织中表达水平上调(P均0.01),在MCD+miR-122 inhibitor组小鼠肝组织中表达水平下调(P0.001);MCD组和MCD+miR-NC组小鼠的肝脏出现中度至重度肝细胞空泡化和大量脂质滴(P均0.001),MCD+miR-122 inhibitor组小鼠的肝脏组织表现出轻度至中度的肝细胞空泡和脂质滴也减少(P0.05);MCD组和MCD+miR-NC组小鼠血清中TG、ALT、AST、TNF-α、IL-1β和IL-6表达水平上调(P均0.01),MCD+miR-122 inhibitor组小鼠血清中TG、ALT、AST、TNF-α、IL-1β和IL-6表达水平下调(P均0.05);MCD组和MCD+miR-NC组肝细胞凋亡指数升高(P均0.001),MCD+miR-122 inhibitor组肝细胞凋亡指数下降(P0.05);MCD组和MCD+miR-NC组小鼠肝组织中Bax蛋白表达水平上调(P0.01),Bcl-2蛋白表达下调(P均0.001),MCD+miR-122 inhibitor组小鼠肝组织中Bax蛋白表达水平下调(P0.05),Bcl-2蛋白表达上调(P0.05)。结论下调miR-122可抑制炎症的发生、抑制肝细胞凋亡,对NASH有一定的治疗作用。     

积雪草酸通过SIRT3/β-catenin/PPARγ信号通路影响急性心肌梗死模型大鼠血管新生及心室重构

目的基于急性心肌梗死(AMI)发生发展过程中沉默信息调节因子3(SIRT3)/β-连环蛋白(β-catenin)/过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)信号通路的变化,探讨积雪草酸(AA)对AMI模型大鼠血管新生及心室重构的影响及作用机制。方法将72只SD大鼠按照体重均衡的原则随机分组,其中12只为空白对照组,剩余的大鼠制备AMI模型。造模成功后将大鼠采用随机数字表法分为5组:模型组、阳性对照组、AA高剂量组、AA中剂量组和AA低剂量组,每组12只。空白对照组和模型组给予生理盐水,阳性对照组给予阿司匹林肠溶片,药物干预组给予不同剂量的AA。28天后采用多普勒超声仪检测各组大鼠的血管新生和心室重构情况。采用逆转录-聚合酶链反应检测大鼠心肌SIRT3、β-catenin和PPARγmRNA表达。采用酶联免疫吸附法检测各组大鼠白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、核因子κB(NF-κB)等炎症因子水平。结果与空白对照组相比,模型组大鼠的心脏功能变差,微血管密度(MVD)增加,心肌SIRT3、β-catenin、PPARγmRNA表达和血清IL-6、TNF-α、NF-κB水平均升高(P0.05);与模型组相比,各给药组大鼠的心脏功能明显改善,MVD增加,心肌SIRT3、β-catenin、PPARγmRNA表达均增加,血清IL-6、TNF-α、NF-κB水平降低(P0.05);与阳性对照组相比,AA高、中、低剂量组大鼠的心脏功能改善,MVD增加,心肌SIRT3、β-catenin、PPARγmRNA表达均升高,血清IL-6、TNF-α、NF-κB水平降低(P0.05)。结论积雪草酸抑制大鼠梗死心肌SIRT3/β-catenin/PPARγ信号通路,对AMI大鼠心肌组织具有一定的保护作用。     

疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝细胞TLR4/p38MAPK信号通路的影响

目的探讨疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝细胞TLR4/p38MAPK信号通路的干预作用,从炎症角度揭示疏肝健脾方药抗大鼠NASH的作用机制。方法选用SPF级SD大鼠120只,随机分为8组。采用高脂饲料喂养建立大鼠NASH模型,26 w后对肝组织进行HE染色,油红O染色,全自动生化分析肝功血脂改变,ELISA检测血清白介素(IL)-1、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α含量;采用离体循环灌注Ⅳ型胶原酶法分离肝细胞,流式细胞术(FCM)对肝细胞纯度进行活性和纯度鉴定。荧光定量PCR检测肝细胞TLR4、p38MAPK mRNA表达量;Western印迹法检测肝细胞蛋白TLR4、p38MAPK及磷酸化蛋白p38MAPK表达水平。结果 26 w高脂饮食成功建立了NASH大鼠模型,HE染色和油红O染色证实大鼠模型存在典型的NASH病理改变。与正常组比较,模型组血清IL-1、IL-6、TNF-α含量显著升高(P0.01);各用药组与模型组比较,合方高、低剂量组IL-1、IL-6、TNF-α含量显著降低(P0.05,P0.01),健脾高剂量组IL-1、IL-6含量降低有统计学差异(P0.05)。与正常组比较,模型组大鼠肝细胞TLR4、p38MAPK mRNA表达及磷酸化蛋白p38MAPK表达量显著增加(P0.01);各用药组与模型组比较,合方高、低剂量组,健脾高剂量组TLR4、p38MAPK mRNA蛋白及磷酸化蛋白p38MAPK表达量显著降低(P0.05,P0.01)。结论疏肝健脾方药能够降低NASH大鼠血清炎症因子水平,改善NASH大鼠肝脏的病理变化,TLR4/p38MAPK可能是疏肝健脾方药发挥抗NASH作用的药物靶点。     

水飞蓟宾胶囊治疗非酒精性脂肪性肝炎40例近期疗效观察

目的探讨水飞蓟宾胶囊治疗非酒精性脂肪性肝炎（NASH）的疗效及机制。方法将80例NASH患者随机分为观察组与对照组各40例。在基础治疗的基础上,观察组予水飞蓟宾胶囊105 mg,3次/d,对照组予维生素E胶丸100 mg,3次/d,疗程均为90 d。观察治疗过程中不良反应情况,放射免疫分析（RIA）法测定治疗前后IL-18、IL-8、TNF-α、AST、ALT、TG、TC水平,结果两组治疗过程中均未发生明显不良反应,治疗后血清IL-18、IL-8、TNF-α、AST、ALT、TG、TC指标均有不同程度改善,且观察组优于对照组,结论水飞蓟宾胶囊治疗NASH近期疗效确切,且较为安全。     

氧化苦参碱对非酒精性脂肪性肝炎大鼠的保护作用及机制研究

目的探讨氧化苦参碱(OMT)对非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)大鼠的保护作用及机制探讨。方法将30只SD大鼠随机分为3组:空白对照组、模型组、OMT治疗组(80 mg/kg);模型组、OMT治疗组均给予高脂饮食(基础饲料+100 g/kg猪油+20 g/kg胆固醇);OMT治疗组大鼠第8周给予氧化苦参碱溶液80 mg/kg灌胃;第16周后,比较各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase、ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase、AST)、血脂总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三脂(triglyceride、TG)、高密度脂蛋白(high density lipoprotein、HDL)和低密度脂蛋白(low density lipoprotein、LDL)变化;用RT-PCR技术检测肝组织白介素-6(interleukin-6、IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α、TNF-α)和转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)mRNA表达情况,并行HE染色、V-G染色、苏丹Ⅲ染色;分别从肝功能、血脂、炎症因子、肝脏病理学等方面评估OMT的治疗作用。结果高脂饲料16周后能成功诱导大鼠NASH模型;与模型组比较:OMT治疗组大鼠血清ALT、AST(P0.01);血清Tch、TG、HDL、LDL无明显降低(P0.05);肝组织中IL-6、TNF-α、TGF-β1 mRNA表达较模型组明显降低(P0.01)。HE染色、苏丹Ⅲ染色、V-G染色显示肝组织炎症反应程度、脂肪变性程度、纤维化程度明显减轻。结论 OMT对大鼠NASH进程有显著保护作用,这可能与其降低转氨酶水平,抑制IL-6、TNF-α、TGF-1 mRNA的表达相关。     

二草清肝汤治疗免疫性肝损伤大鼠的作用机制

60只健康雄性SD大鼠随机分为5组,正常组、模型组、环磷酰胺(CTX)组(12.6 mg/kg)、二草清肝汤小剂量组(3 ml/kg)和二草清肝汤大剂量组(6 ml/kg).检测各组血清ALT、AST和TNF-α、IL-12的变化,流式细胞仪检测肝细胞凋亡,免疫组化法检测肝细胞bax、bcl-2蛋白的表达.发现二草清肝汤大剂量组、小剂量组、CTX组ALT、AST、TNF-α、IL-12、凋亡率、bcl-2、bax阳性表达和bax/bcl-2较模型组降低.认为二草清肝汤对大鼠免疫性肝损伤具有保护作用,降低血清TNF-α、IL-12水平和抑制肝细胞凋亡可能是其作用机制之一.     

大麻二酚调控ConA诱导小鼠急性免疫性肝炎巨噬细胞的极化方向

目的 探讨大麻二酚(cannabidiol, CBD)对刀豆蛋白A(concanavalin A,ConA)诱导小鼠急性免疫性肝炎中肝脏巨噬细胞的影响。方法 30只C57BL/6雄性小鼠随机分为正常对照组、ConA模型组、CBD实验组(低剂量5 mg/kg、中剂量15 mg/kg、高剂量30 mg/kg)。实验结束后称取小鼠肝重,取外周血测定ALT和AST水平,ELISA法测定肝内细胞因子TNF-α、IL-6、TGF-β和IL-10含量,流式细胞术测定肝脏中巨噬细胞的分型和比例。结果 ConA模型组小鼠肝重较正常对照组减轻,血清ALT和AST水平升高(P<0.01),肝内细胞因子TNF-α和IL-6水平升高,TGF-β和IL-10水平降低(P<0.05),同时M1型巨噬细胞比例升高,M2型巨噬细胞比例下降(P<0.05)。与ConA模型组相比,CBD实验组小鼠肝重有不同程度的增加,血清ALT和AST水平下降,以中、高剂量组下降更显著(P<0.01和P<0.05),同时小鼠肝内TNF-α和IL-6水平下降,TGF-β和IL-10水平升高,中、高剂量组TNF-...     

姜黄素与吡格列酮对大鼠非酒精性脂肪性肝炎作用的对照研究

目的 比较姜黄素和吡格列酮对高脂饮食诱导的大鼠非酒精性脂肪性肝炎（NASH）的作用并探讨其机制.方法 48只SD大鼠随机分为正常组、模型组、姜黄素组和吡格列酮组（每组各12只）.正常组全程饲以普通饲料,另外三组均给予高脂饮食.6周末,每组各处死2只大鼠.验证非酒精性脂肪肝病造模成功后,姜黄素组和吡格列酮组每日分别给予姜黄素50 mg/kg和吡格列酮10 mg/kg灌胃,正常组、模型组给予相应体积的0.5%的羧甲基纤维素钠灌胃.6周治疗结束后,留取血样和肝组织.统计体/肝质量,计算肝指数和胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）;进行肝功能检测及病理组织学检查;并检测血清FFA、TNF-α和IL-6水平及肝组织FFA、TNF-α、IL-6、MDA、GSH含量和SOD的活性.结果 与模型组相比,姜黄素组和吡格列酮组大鼠NAS评分及血清ALT、AST水平均降低（P均〈0.05）.模型组较正常组大鼠血清HOMA-IR、FFA、TNF-α、IL-6水平及肝组织TNF-α、IL-6、MDA含量均明显升高（P均〈0.01）,而姜黄素组、吡格列酮组与模型组大鼠相比,上述指标均降低（P均〈0.05）,且以姜黄素组大鼠体质量、血清AST、NAS积分及肝组织FFA、MDA下降最为显著（P均〈0.01）.结论 姜黄素与吡格列酮均可通过调脂、改善IR、抗炎及抗氧化作用防治NASH,但前者的作用更强,且不增加大鼠的体质量.     

口服抗生素对NASH大鼠肝组织TLR4信号通路的影响

目的观察口服抗生素对非酒精性脂肪性肝炎大鼠代谢性内毒素血症激活肝脏4型Toll样受体(TLR4)信号通路的影响。方法将30只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组和干预组,后者给予高脂饮食喂养,正常组予普通饲料喂养。干预组大鼠自第9周起给予环丙沙星灌胃。造模12周末,比较各组门静脉血内毒素、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、甘油三酯和空腹血糖水平;计算非酒精性脂肪性肝病评分;采用Real time PCR及Westernblot法检测大鼠肝脏TLR4、胰岛素受体底物-1(IRS-1)mRNA及蛋白表达水平;采用ELISA法检测血清和肝匀浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)水平。结果模型组动物门静脉内毒素为0.361±0.018EU/ml,而正常组为0.324±0.013EU/m(l P<0.05);肝脏TLR4 mRNA水平为正常组的7.7倍,IRS-1 mRNA水平下降69%,血清及肝脏TNF-α分别为105.7±30.1pg/ml和608.7±78.8pg/ml,IL-6分别为60.9±12.5pg/ml和756.4±90.8pg/ml,均显著高于正常组(P<0.05);与模型组比,干预组门静脉血内毒素为0.341±0.016EU/m(lP<0.05),NAS积分为4.40±0.26(P<0.05),肝脏TLR4 mRNA和蛋白表达水平分别下降44%和14%,肝脏IRS1 mRNA和蛋白表达水平分别增加2.3倍和1.6倍,TNF-α和IL-6水平分别为531.1±64.6pg/ml和575.1±84.5pg/m(lP<0.05)。结论 NASH大鼠肝脏TLR4信号通路被激活,口服抗生素可减少肠源性内毒素血症,减轻肝脏炎症。     

妊娠期肝内胆汁淤积症患者细胞炎症因子与肝功能的关系及其对妊娠结局的影响

目的探讨妊娠期肝内胆汁淤积症(intrahepatic cholestasis of pregnancy,ICP)患者细胞炎症相关因子与肝功能的关系及其对妊娠结局的影响方法采用回顾性临床研究,选取2014-01/2016-10确诊为孕晚期ICP患者72例为研究对象,其中,符合轻度ICP者40例(轻度组),符合重度ICP者32例(重度组),另选取同期90例正常妊娠无并发症孕晚期孕妇为对照组,留取禁食后血清总胆汁酸(total bile acids,TBA)、谷草转氨酶(aspartate transaminase,AST)、谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)、白介素(interleukin,IL)-6、IL-10、IL-12和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factorα,TNF-α)标本后送检.采用ELISA法测定两组血清IL-6、IL-10、IL-12和TNF-α水平,应用全自动生化分析仪测定肝功能指标.结果ICP组患者血清IL-6、IL-10、IL-12、TNF-α、TBA、ALT、AST水平显著高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);ICP重度组患者血清IL-6、IL-10、IL-12、TNF-α、TBA、ALT、AST水平高于轻度组,差异有统计学意义(P0.05),经Pearson相关因素分析显示,IL-6、IL-10、IL-12、TNF-α与TBA、ALT、AST水平均呈正相关(P0.05).结论妊娠期肝内胆汁淤积症患者炎症细胞因子水平影响患者的肝功能,肝功能指标及细胞炎症因子对预测不良妊娠结局具有积极的作用.