老龄大鼠脑组织不同部位HIF-1α的表达规律探讨

目的 观察低氧诱导因子-1a(HIF-1a)在老龄大鼠脑组织不同部位的表达规律,探讨FIF-1a在神经系统衰老过程中的作用.方法 应用尼氏染色和免疫组化技术对比观察3月龄和30月龄大鼠脑组织不同部位神经细胞内尼氏体及HIF-1a的表达情况.结果 30月龄大鼠脑组织各部位神经细胞体积大,排列稀疏,胞浆内尼氏体稀疏.与3月龄组比较,30月龄组大鼠脑组织内各部位阳性表达细胞数目明显增多(P<0.01),且各部位阳性细胞个数有显著变化(P<0.01),其中海马CA3区阳性细胞数最多,而运动皮质区及第1小脑小叶阳性细胞数相对较少.结论 老龄大鼠脑组织各部位神经细胞蛋白质合成功能减弱,而HIE-1a表达增强,其中又以海马区表达最强,推测HIF-1a可能在衰老过程中尤其是记忆减退方面发挥重要作用.     

老龄大鼠脑组织内不同部位葡萄糖转运蛋白3的表达

目的:观察老龄大鼠的脑组织内不同部位的葡萄糖转运蛋白3(GLUT 3)的表达情况,探讨GLUT 3在神经系统衰老过程中的作用.方法:用免疫组织化学染色方法,测定3月龄、18月龄及30月龄大鼠(各10只)脑组织内不同部位GLUT 3的表达强弱.结果:各月龄组大鼠脑组织内不同部位阳性细胞数均有显著差异(P<0.01),其中海马区,尤其是海马CA1 区阳性细胞数最多,而运动皮质区及第1小脑小叶阳性细胞数相对较少.结论:在老龄大鼠脑组织中GLUT 3的表达减弱,提示GLUT 3在神经系统衰老过程中发挥一定作用.     

大鼠衰老过程中海马血管内皮生长因子及微血管密度的表达特点

目的:探讨大鼠衰老过程中海马血管内皮生长因子(VEGF)及微血管密度(MVD)的表达特点.方法:对3、18、24、30月龄(各10只)大鼠脑组织石蜡切片进行免疫组织化学染色,定量分析海马VEGF的表达规律和微血管变化.结果:①VEGF在各组大鼠海马组织中均有表达,主要表达于锥体细胞胞浆内,随增龄VEGF阳性细胞个数逐渐减少(P＜0.05);②MVD在各组大鼠均可见,随月龄增加MVD逐渐减少(P＜0.05).结论:VEGF及MVD随增龄在海马组织中表达减少,且两者的改变相一致,提示增加衰老大鼠脑组织内VEGF含量和改善脑组织血液循环,对预防和治疗老年脑血管病,血管性痴呆有重要意义.     

重组人促红细胞生成素对衰老大鼠脑组织不同部位BDNF表达的影响

目的 探讨重组人促红细胞生成素(rhEPO)对衰老大鼠脑组织内不同部位脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响.方法 40只2月龄雄性SD大鼠,随机分为4组:阴性对照组(N),D-半乳糖组(D),EPO干预组(E),阳性对照组(P),每组10只.应用免疫组化染色对比观察外源性rhEPO干预后D-半乳糖衰老大鼠脑组织不同部位BDNF表达的变化.结果 不同组大鼠比较发现相同部位BDNF表达存在显著差异:D组大鼠海马CA1、CA3、DG及额叶皮质区BDNF阳性细胞计数较N组相同部位明显减少(P<0.05),而应用rhEPO干预后的E组和P组大鼠海马CA1、CA3、DG及大脑皮质运动区BDNF阳性细胞计数较D组及N组相同部位显著增加(P<0.05);但E组和P组比较无差异.同组大鼠不同部位BDNF阳性细胞比较发现:同组大鼠不同部位BDNF阳性细胞个数存在显著不同(P<0.05),其中额叶皮质区阳性细胞数最多,其次是海马CA3区,海马DG区,海马CA1区.结论 rhEPO对增强大鼠神经细胞BDNF的表达具有普遍性,提示rhEPO可能能够通过增强内源性BDNF对神经系统衰老发挥保护作用.     

大鼠海马微血管构筑的衰老变化

目的:观察并定量分析大鼠海马微血管构筑的衰老变化.方法:采用单宁酸-氯化铁媒染微血管的方法分别观察青龄大鼠和老龄大鼠海马的微血管构筑,并采用MiVnt图像分析系统对海马的微血管密度(MVD)及微血管面积密度(MVA)进行定量分析.结果:老龄大鼠海马的微血管分布杂乱、扭曲缠结;老龄大鼠海马的MVD值和MVA值均明显低于青龄大鼠(P<0.01).结论:老龄大鼠海马的微血管明显减少,这是老年血管性痴呆发生机制的主要形态学依据.     

大鼠海马HIF-1α和EPO在衰老过程中的表达

目的:探讨大鼠海马组织中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)和促红细胞生长素(EPO)在衰老过程中的表达规律及二者在神经系统衰老过程中的作用.方法:应用尼氏染色和免疫组织化学技术观察不同月龄组(3,18,24,30月)大鼠海马CA1区神经细胞尼氏体及HIF-1α和EPO的表达情况.结果:随大鼠月龄的增大,海马CA1区神经细胞体积变大,排列稀疏,胞浆内尼氏体减少.随月龄增加海马CA1区HIF-1α阳性细胞数增加,差异有统计学意义(P＜0.05);大鼠海马CA1区EPO表达随月龄增加呈抛物线变化,由3月龄到18月龄,阳性细胞个数的增加有统计学意义(P＜0.05),由18月龄到30月龄,阳性细胞个数减少有统计学意义(P＜0.05).结论: HIF-1α与EPO在大鼠海马的表达在中年期之前,呈平行递增变化,在中年期之后,二者呈分离变化,提示HIF-1α活性下降和蛋白质合成功能的减退是衰老过程中EPO表达减少的主要原因,通过加强内源性HIF-1α的活性和补充外源性EPO有可能减缓神经系统的衰老.     

大鼠海马HIF-1&agr;和EPO在衰老过程中的表达

目的:探讨大鼠海马组织中低氧诱导因子-1&agr;（HIF-1&agr;)和促红细胞生长素（EPO)在衰老过程中的表达规律及二者在神经系统衰老过程中的作用。方法:应用尼氏染色和免疫组织化学技术观察不同月龄组（3,18,24,30月)大鼠海马CA1区神经细胞尼氏体及HIF-1&agr;和EPO的表达情况。结果:随大鼠月龄的增大,海马CA1区神经细胞体积变大,排列稀疏,胞浆内尼氏体减少。随月龄增加海马CA1区HIF-1&agr;阳性细胞数增加,差异有统计学意义（P<0.05);大鼠海马CA1区EPO表达随月龄增加呈抛物线变化,由3月龄到18月龄,阳性细胞个数的增加有统计学意义（P<0.05),由18月龄到30月龄,阳性细胞个数减少有统计学意义（P<0.05)。结论: HIF-1&agr;与EPO在大鼠海马的表达在中年期之前,呈平行递增变化,在中年期之后,二者呈分离变化,提示HIF-1&agr;活性下降和蛋白质合成功能的减退是衰老过程中EPO表达减少的主要原因,通过加强内源性HIF-1&agr;的活性和补充外源性EPO有可能减缓神经系统的衰老。     

穹隆-海马伞切断对大鼠脑内TrkA表达的影响

①目的　探讨穹隆 海马伞切断对大鼠脑内不同部位神经生长因子受体TrkA表达的影响及临床意义。②方法　成年健康雌性Wistar大鼠 10只 ,随机分为穹隆 海马伞切断模型组和假手术组。两组大鼠均常规取海马CA1区、皮质区、杏仁复合体区、基底前脑Meynert核等部位脑组织与假手术组比较TrkA阳性细胞表达情况。③结果　假手术组大脑各观察区有基础水平的TrkA表达。模型组大脑海马CA1区、大脑皮质区、杏仁复合体区以及Meynert核区TrkA阳性细胞数明显减少 (t=3.94 4～ 8.4 4 2 ,P <0 .0 5 )。 ④结论　穹隆 海马伞切断可致大鼠脑内多部位TrkA表达减少 ,其可能是导致认知和情绪损伤的原因之一。     

老龄大鼠海马CA3区神经元锥体细胞超微结构变化

目的　观察老龄大鼠海马CA3区神经元锥体细胞的超微结构变化。方法　将Wistar大鼠分为老龄组和成年组 ,应用透射电镜观察海马CA3区锥体细胞超微结构。结果　老龄组CA3区锥体细胞出现核膜内陷、核仁体积减少 ,线粒体肿胀、变性等形态学改变。结论　大鼠在衰老过程中 ,海马CA3区锥体细胞超微结构出现退行性改变     

穹隆-海马伞切断及去势大鼠脑内β淀粉样肽1-40表达的变化

①目的　观察穹隆 海马伞切断及去势大鼠脑内不同部位 β淀粉样肽 1 4 0 (Aβ1 40 )表达的变化 ,了解与阿尔茨海默病 (AD)相关的发病机制。②方法　将大鼠分为穹隆 海马伞切断及去势模型组 (模型组 )和假手术组 ,假手术组除不切断海马伞和去除卵巢外 ,其余步骤同模型组。常规处死大鼠取脑组织行Aβ1 40 免疫细胞化学染色 ,观察海马CA1区、皮质区、杏仁复合体区、基底前脑Meynert核等部位Aβ1 40 阳性细胞表达变化。③结果　假手术组大脑各观察区有少量的Aβ1 40 表达。与假手术组比较 ,模型组大脑海马CA1区、大脑皮质区、杏仁复合体区Aβ1 40 阳性细胞数明显增多 (t=3.96 9～ 6 .6 77,P <0 .0 1)。④结论　穹隆 海马伞切断加去势可致大鼠脑内多部位Aβ1 40 表达增多 ,此可能与老年性痴呆病理改变有关。     

Effects of brucine on vascular endothelial growth factor expression and microvessel density in a nude mouse model of bone metastasis due to breast cancer

Objective:To study the effects of brucine on vascular endothelial growth factor（VEGF）expression and microvessel density（MVD）in a nude mouse model of bone metastasis due to breast cancer,and to assess the possible antitumor mechanism of brucine.Methods:A syringe needle was used to directly inject 0.2 mL monoplast suspension（with 2×10⁶ human breast cancer cells contained）into the bony femoral cortex of the right hind leg for modeling.Twenty-five nude mice were randomized into five groups and administered with an intraperitoneal injection of saline or drug for 8 consecutive days:model group（0.2 mL normal saline）,low-dose brucine group(1.73 mg·kg^-1),medium-dose brucine group(3.45 mg·kg^-1),high-dose brucine group(6.90mg·kg^-1,and thalidomide group(200 mg·kg^-1).Diet and activity were recorded,and the tumors were harvested 5 weeks later.The percentage of VEGF-positive cells was determined with hematoxylin and eosin staining and immunohistochemical staining,and MVD expression was determined by optical microscopy.Results: The VEGF expressions in brucine-or thalidomide-treated mice were significantly reduced as compared with mice in the model group（P<0.01）.There were no significant difference between the high-dose brucine group and the thalidomide group（P>0.05）.Significant difference was between the high-and low-dose brucine group （P<0.05）.Further,VEGF expression was significantly increased in the low-and medium-close brucine groups compared with the thalidomide group（P<0.05）.The MVD values in the three brucine and thalidomide groups were significantly lower than that in the model group（P<0.01）.The MVD values in the medium-and high-dose brucine groups were not significantly different from those in the thalidomide group（P>0.05）,while the MVD value showed a significant increase in the low-dose group compared with the thalidomide group（P<0.05）.Conclusion:Brucine could inhibit the growth of breast cancer to bone metastases,possibly by inhibiting tumor angiogenesis.     

PTEN和VEGF的表达与宫颈鳞癌血管生成关系的研究

目的:研究宫颈鳞癌组织中抑癌基因(PTEN)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达与宫颈癌血管生成的关系。方法:应用免疫组织化学S-P法检测45例宫颈鳞癌组织和20例慢性宫颈炎组织(对照组)中PTEN和VEGF的表达,同时分析不同PTEN和VEGF表达状态下,宫颈癌组织微血管密度(MVD)的变化。结果:宫颈癌组和对照组PTEN阳性率分别为51.1%(23/45)和95.0%(19/20),2组比较差异有统计学意义(P<0.01);宫颈癌组和对照组VEGF阳性率分别为60.0%(27/45)和30.0%(6/20),2组比较差异有统计学意义(P<0.05);PTEN和VEGF的表达呈负相关(rs=-0.595,P<0.01)。同时根据PTEN和VEGF的表达状况将宫颈癌分为4组,组1为PTEN阴性VEGF阳性(n=20),组2为PTEN阴性VEGF阴性(n=2),组3为PTEN阳性VEGF阳性(n=7),组4为PTEN阳性VEGF阴性(n=16)。4组平均MVD分别为31.13、18.17、20.90、21.94,组1显著高于其他3组(P<0.05)。结论:宫颈癌PTEN基因失活可能通过增加VEGF的表达来促进血管生成,导致肿瘤恶性进展。     

黄芪注射液对脑缺血再灌注损伤大鼠脑内血管新生及HIF-1α/VEGF信号转导通路的影响

目的:探究黄芪注射液对脑缺血再灌注损伤大鼠脑内血管新生及缺氧诱导生长因子-1α(hypoxia inducible factor-1α, HIF-1α)/血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)信号转导通路的影响.方法:72只大鼠随机分为对照组、模型组和黄芪注射液组,每组24只,线栓法复制脑缺血再灌注损伤大鼠模型,评价术前、术后、给药7 d后的神经功能评分,免疫组化法检测脑缺血再灌注损伤皮质微血管密度,RT-PCR 法检测脑缺血再灌注损伤皮质 HIF-1α mRNA 和 VEGF mRNA,Western Blotting法检测脑缺血再灌注损伤皮质HIF-1α和VEGF的蛋白表达.结果:给药7d后黄芪注射液组神经功能评分明显低于模型组(P<0.01),微血管密度、HIF-1α mRNA和VEGF mRNA表达水平、HIF-1α和VEGF蛋白表达水平均高于模型组(P<0.01).结论:黄芪注射液促进脑缺血再灌注损伤大鼠脑内血管新生,其作用机制可能为激活HIF-1α/VEGF信号转导通路.     

中药复方962对老龄大鼠皮质胆碱乙酰转移酶和乙酰胆碱酯酶活性的影响

为研究中药复方 962胶囊对老龄大鼠皮质胆碱乙酰转移酶 (ChAT)和乙酰胆碱酯酶 (AchE)活性的影响 ,将2 2月龄和 2 4月龄Wistar大鼠分为青年对照组、老年模型组、阳性对照脑复康组 ( 0 .56g/kg)、962中剂量组 ( 0 .9g/kg)和 962大剂量组 ( 1 .8g/kg) 5组 ,分别灌胃给药 1～ 2个月后处死大鼠。用Fonnun法和羟胺比色法分别测定 5组大鼠皮质的ChAT和AchE的活性。结果 :中药复方 962大剂量 ( 1 .8g/kg)对老龄大鼠皮质ChAT活性有提高作用 (P <0 .0 5) ,但对AchE无显著影响。提示 :中药复方 962可能通过影响老龄大鼠中枢胆碱能神经系统而改善其衰老的变化     

乙醇对心肌梗死大鼠冠脉血管新生的影响

 目的  探讨乙醇对大鼠急性心肌梗死后冠脉侧支循环形成的影响及其机制。方法  取雄性SD大鼠随机分成4组:假手术组,空白对照组,小剂量乙醇组(50%乙醇,0.5 g·kg-1·d-1)及大剂量乙醇组(50%乙醇,5 g·kg-1·d-1)。制作心肌梗死模型,每组各8只,于术后第3天处死,留取梗死边缘区存活心肌,采用免疫组织化学SP法检测梗死边缘区心肌内微血管密度(microvascular density,MVD),ELISA法测定血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及内皮抑素水平。通过方差分析研究各组间MVD及VEGF、内皮抑素表达水平有无差异。结果  与假手术组相比,空白对照组MVD明显增加(P<0.05),VEGF、内皮抑素水平明显升高(P<0.05);小剂量乙醇组MVD较空白对照组明显增加(P<0.01),VEGF明显升高(P<0.05),内皮抑素浓度明显降低(P<0.05);而大剂量乙醇组MVD则明显减少(P<0.01),VEGF水平与空白对照组相比差异无统计学意义,而内皮抑素明显升高(P<0.05)。结论  乙醇能够改变心肌梗死后缺血心肌内VEGF和内皮抑素的表达,少量乙醇摄入可以通过增加VEGF的表达促进缺血心肌内的血管新生过程,而大量乙醇摄入则提高内皮抑素的表达而抑制缺血心肌的血管新生过程。     

PTEN与VEGF在子宫内膜腺癌血管生成中作用的研究

目的 研究子宫内膜腺癌组织中第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物基因(PTEN)和血管内皮生长因子VEGF的表达与子宫内膜腺癌血管生成的关系.方法 采用免疫组织化学SP法检测42例子宫内膜腺癌和20例正常子宫内膜(对照组)中PTEN和VEGF的表达,同时分析其不同表达状态下,子宫内膜腺癌组织中微血管密度(MVD)的变化.结果 子宫内膜腺癌组和对照组PTEN蛋白表达阳性率分别为45.23%(19/42)和100%(20/20),两组比较差异有统计学意义(P＜0.01).子宫内膜腺癌组和对照组VEGF阳性率分别为69.05%(29/42)和10.00%(2/20),两组比较差异有统计学意义(P＜0.01).PTEN与VEGF的表达呈负相关(r=-0.611,P＜0.05).将子宫内膜腺癌分为4组,A组为PTEN阴性、VEGF阴性(n=8),B组为PTEN阴性、VEGF阳性(n=14),C组为PTEN阳性、VEGF阴性(n=10),D组为PTEN阳性、VEGF阳性(n=10).4组平均MVD分别为30.71%、42.89%、25.46%和27.28%.B组显著高于其他3组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 PTEN基因的失表达与子宫内膜腺癌的发生、发展密切相关.PTEN基因失活可能通过增加VEGF的表达来促进血管生成,导致子宫内膜腺癌恶性进展.     

D-半乳糖衰老模型大鼠学习记忆能力和特定脑区抗氧化酶活性的变化

目的 探讨D-半乳糖衰老模型大鼠学习记忆能力和特定脑区抗氧化酶活性的变化,以揭示学习记忆能力与特定脑区抗氧化酶活性的关系.方法 Wistar大鼠皮下注射D-半乳糖建立衰老模型,在MG-2型三等分辐射式迷宫中进行学习记忆能力的检测后,将大鼠立即断头处死,分别测定大脑皮层、小脑、纹状体、海马、下丘脑五个脑区SOD、CAT、GSH-Px活性.结果 D-半乳糖衰老模型大鼠迷宫正确反应率为(58.9±5.4)%,比对照组的(66.8±8.9)%明显降低(P＜0.05).24h后达标次数显著高于对照组[衰老组(29.5±12.8)次,对照组(16.6±6.2)次,P＜0.01],24h正确反应率明显降低于对照组[衰老组(67.3±10.3)%,对照组(79.1±6.9)%,P＜0.01].与对照组比较:皮层、海马、纹状体SOD活性(衰老组:66.12±5.89、80.46±6.57、87.82±6.87;对照组:57.63±4.21、67.46±6.80、68.37±6.52)显著降低(P＜0.05和P＜0.01);CAT活性在皮层、海马、纹状体、下丘脑四个脑区(衰老组:6.45±0.55、5.86±0.35、6.93±0.63、8.89±0.38;对照组:5.32±0.56、4.76±0.38、4.37±0.43、6.11±0.37)均显著降低(P＜0.05和P＜0.01);各脑区GSH-Px活性差异无显著性(P＞0.05).结论 D-半乳糖衰老模型大鼠学习记忆能力降低.衰老过程中海马、皮层、纹状体、下丘脑的抗氧化酶活性变化与学习记忆密切相关.     

永久性局灶性中动脉阻断脑缺血(pMCAO)模型大鼠脑内突触相关蛋白表达的免疫组织化学观察

目的观察永久性局灶性中动脉阻断脑缺血(pMCAO)模型大鼠脑缺血发作后2 d、7 d脑内突触相关蛋白表达的变化。方法制作大鼠永久性局灶性中动脉阻断脑缺血(pMCAO)模型。缺血动物术后随机分为缺血2 d组、缺血7 d组,另设假手术组。在术后2 d、7 d 2个时间点采用HE染色观察动物神经病理学改变,同时采用免疫组织化学法观察动物的缺血侧脑组织突触素-I(synapsin-I)、突触后致密蛋白95(PSD-95)、α-突触核蛋白(α-synuclein)表达情况。结果与假手术组相比,缺血后,模型动物神经元大量变性坏死,数目减少,排列散乱。缺血后2 d,synapsin-I在CA1区、CA3区、皮层表达显著减少(P<0.05或P<0.01),PSD-95在CA1区、皮层表达显著减少(P<0.05或P<0.01),α-synuclein在CA1区神经元产生显著积聚(P<0.01);缺血后7 d,synapsin-I在CA1区、皮层表达仍显著降低(P<0.01),PSD-95在CA1区、皮层表达显著减少(P<0.05或P<0.01),α-synuclein在CA1、CA3、皮层表达显著增加(P<0.05或P<0.01)。结论 pMCAO模型大鼠在脑缺血发生后,神经突触有关蛋白的表达显著改变,并随缺血后不同时间点表达情况不同,这可能与神经元突触重塑有关。突触相关蛋白的表达与缺血损伤程度密切相关。