儿童慢性乙型肝炎肝组织HBsAg、HBcAg的表达与抗病毒疗效的关系

目的探索性研究慢性乙型肝炎(CHB)儿童肝组织HBsAg和HBcAg不同表达与抗病毒疗效的关系。方法收集2014年1月—2017年12月在解放军总医院第五医学中心青少年肝病科住院并明确诊断为CHB的276例6月~16岁儿童患者的病例资料,比较肝组织HBsAg和HBcAg免疫组化染色阳性和阴性组(HBsAg阳性组249例,HBsAg阴性组27例;HBcAg阳性组163例,HBcAg阴性组113例)患者的临床特点,以及肝组织HBsAg和HBcAg不同表达模式下抗病毒疗效的差异。计量资料组间比较采用Mann-Whitney U检验;计数资料组间比较采用χ2检验或Fisher精确检验。以肝组织HBsAg和HBcAg染色阳性和阴性为应变量,以可能影响其表达强度有意义的相关因素为自变量,进行logistic回归分析。结果276例患者年龄0.5~16岁,男性占60.51%(167例)。HBeAg阴性14例(5.07%)。肝脏炎症程度分级(G):2级52.54%,2~3级6.88%,3级7.61%。肝纤维化分期(S):3期7.25%,3~4期1.45%,4期3.62%。肝组织HBsAg阳性组儿童年龄及血清HBsAg定量高于阴性组(Z值分别为1.854、2.447,P值均<0.05)。肝组织HBcAg阳性组HBeAg阳性率高于阴性组(χ^2=2.650),ALT(Z=2.473)、AST(Z=1.813)、肝组织纤维化分期S≥3期的比例(χ^2=2.086)均低于阴性组(P值均<0.05)。logistic回归分析显示,影响肝组织HBsAg染色阳性的因素为血清HBsAg定量(P<0.05),影响肝组织HBcAg染色阳性的因素为HBeAg阴性或阳性(P<0.05)。276患者中186例完成IFNα或单用拉米夫定抗病毒治疗停药后6个月的随访,155例(83.33%)获得HBeAg血清学转换,其中76例(40.86%)HBsAg阴转。肝组织的HBsAg阳性表达强度越高,血清HBsAg阴转率越低。肝组织的HBcAg阳性表达强度越高,HBeAg血清学转换率越低。肝组织HBsAg及HBcAg均阴性表达模式的儿童HBsAg阴转率最高(100%),HBsAg阳性及HBcAg阴性的儿童HBsAg阴转率(32.31%)最低。结论肝组织HBsAg及HBcAg阴性的CHB儿童抗病毒治疗HBsAg阴转率最高。     

慢性乙型肝炎患者肝脂肪变与肝脏HBsAg和HBcAg的关系

目的 探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者肝细胞脂肪变与肝脏HBsAg和HBcAg表达的关系.方法 选取2005年1月至2008年6月间天津市传染病医院经肝活组织检查确诊的CHB合并肝脂肪变患者147例,另选取与其血清HBV DNA接近的无肝脂肪变的CHB患者149例,比较2组肝脏HBsAg、HBcAg免疫组织化学染色及肝脏损伤的差异.统计分析采用t检验和x2检验.结果 与无肝脂肪变组相比,肝脂肪变组平均年龄和体质指数较高(t值分别=-3.31和-6.57,P值均＜0.01),肝组织中重度炎性反应、明显纤维化及HBsAg强阳性染色的比例则较低(分别为30.6％比15.4％、26.5％比12.8％、23.1％比6.7％,x2值分别=9.63、8.92、15.76,P值均＜0.01),HBcAg强阳性染色比例亦呈下降趋势.与肝脂肪变程度F1至F2级者比较,F3至F4级者肝脏HBsAg、HBcAg强阳性染色比例呈下降趋势.结论 肝脂肪变影响CHB患者肝组织内HBsAg、HBcAg的表达,随肝脂肪变的出现及加重,HBsAg、HBcAg表达及肝组织损伤程度均呈下降趋势.     

乙型肝炎相关性肝细胞癌HBV复制及其癌组织中HBsAg/HBcAg表达的研究

目的以慢性乙型肝炎(chronic hepatitisB,CHB)患者为对照,观察乙型肝炎相关性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者血清中HBVDNA水平的变化,以及HCC组织中HBsAg/HBcAg的表达情况,探讨HBV导致HCC的可能机制。方法 HCC组89例,CHB组120例。采用实时定量PCR法检测血清HBVDNA水平;分别留取肝脏穿刺组织标本(HCC组织均带有癌旁肝硬化组织),用免疫组化法检测组织中HBsAg/HBcAg的表达情况。结果 HCC组血清HBVDNA水平明显低于CHB组(P<0.05);在CHB组织、癌旁肝硬化组织和HCC组织中HBsAg表达阳性率分别为90%、51%和10%,HBcAg阳性率分别为78%、19%和3%,与CHB组织、癌旁肝硬化组织相比,HCC组织中2种抗原表达均明显较低(P均<0.05)。结论在HBV慢性感染不同疾病阶段,血清HBVDNA水平和HBsAg/HBcAg在肝组织内的表达具有显著差异;与CHB组相比,HCC组HBVDNA水平较低,HBsAg/HBcAg表达显著缺失,这可能与HCC患者HBVDNA复制水平降低有关,但也不排除其他因素导致HBsAg/HBcAg表达抑制。     

HBsAg、HBcAg在慢性乙型肝炎肝细胞内的表达及临床意义

目的 探讨HBsAg、HBcAg在慢性乙型肝炎(CHB)患者肝细胞内的表达,及其与血浆HBVDNA定量、肝组织病理和临床间的关系。 方法 采用PCR检测351例CHB患者血浆HBV DNA定量,肝穿刺活检,采用免疫组织化学技术观察肝细胞内HBsAg、HBcAg的表达。 结果 在CHB患者肝细胞内HBsAg和HBcAg阳性表达率分别为92.3％和76.9％。HBcAg浆膜型(75.6％)和胞核型(24.4％)分别见于肝组织炎症较活跃和较静止期CHB。HBsAg表达强度与血浆HBV DNA定量呈较低正向关联(rp=0.24,P=0.0129)、与肝组织炎症和纤维化呈较低负向关联(rp=-0.22,P=0.0279和rp=-0.23,P=0.0186)。HBcAg的表达强度随着血浆HBV DNA定量的增加而增加,呈较强正向关联(rp=0.52,P<0.0001),随着肝组织炎症和纤维化程度的加重而减弱,呈较强的负向关联(rp=-0.33,P<0.0001和rp=-0.34,P<0.0001)。 结论 在CHB肝组织免疫损伤的免疫应答中,HBcAg是靶抗原,HBsAg不一定是靶抗原。HBsAg是筛查HBV感染的较敏感指标,HBcAg是评价HBV复制程度的较可靠指标。     

HBeAg阴性慢性乙型肝炎病毒感染者肝组织病理改变的相关因素分析

目的 分析HBeAg阴性慢性HBV感染者肝组织病理改变的相关因素.方法 对288例不同年龄、性别、ALT水平、肝组织HBsAg和HBcAg免疫组织化学结果的HBeAg阴性HBV感染者的HBV DNA载量、肝组织病理变化进行相关分析,采用Bivariate Pearson法.结果 男性组肝组织炎症分级和纤维化分期分别为1.721.23和1.71±1.24,女性组分别为1.25±1.39和1.21±1.40,两组差异有统计学意义(t=2.398,t=2.551;均P＜0.05)}男性HBV DNA载量高于女性,但差异无统计学意义.40岁以上HBeAg阴性HBV感染者HBV DNA载量、肝组织炎症分级和纤维化分期显著高于40岁以下者(t=2.060,t=2.536,t=2.808;均P＜0.05).ALT正常的HBeAg阴性乙型肝炎患者中,75例(52.03%)血清HBVDNA≤1×103拷贝/mL,肝组织炎症活动度≥G2的56例,占38.89%,血清ALT水平与肝组织炎症活动度相关(r=0.244,P=0.004).ALT异常的慢性HBV感染者中,42例(31.57%)血清HBV DNA≤1×103拷贝/mL,肝组织炎症活动度≥G2的89例,占66.92%.血清ALT水平与肝组织炎症程度无相关(r=0.007,P=0.939).肝组织免疫组织化学HBsAg及HBcAg双阳性组肝组织炎症/纤维化、HBV DNA滴度显著高于HBsAg、HBcAg双阴性组和HBsAg阳性、HBcAg阴性组,差异有统计学意义.血清HBV DNA与肝组织炎症程度相关(r=0.349,P＜0.05).结论 性别、年龄、血清HBV DNA水平及HBsAg、HBcAg免疫组织化学结果可作为判断HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者肝组织炎症损伤程度的相关指标,男性、年龄越大、血清HBV DNA水平越高、肝组织免疫组织化学HBsAg及HBcAg双阳性,肝组织炎性反应损伤越严重.HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者即使ALT正常、血清HBV DNA≤1×100拷贝/mL,仍约1/3患者的肝组织存在明显的炎性反应损伤,需定期追踪,最好行肝组织活检,以早期发现适宜治疗者而避免延误病情.     

前S1抗原在诊断HBeAg阴性慢性乙型肝炎病毒复制中的作用

目的了解前S1抗原(PreS1Ag)与HBeAg阴性慢性乙型肝炎病毒复制的关系及诊断HBeAg阴性慢性乙型肝炎的价值。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法对150例HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者血清进行PreS1Ag测定并与血清HBV DNA做对比分析。免疫组化法检测了HBsAg、HBcAg和PreS1Ag在肝组织的表达。结果血清PreS1Ag和HBV DNA检出率为62.7%和66.0%,x2检验,P=0.398,检出率高度符合,无统计学差异。肝组织HBsAg、HBcAg和PreS1Ag的表达阳性率分别为78.0%、58.7%与61.3%。HBsAg表达阳性率最高。PreS1Ag与HBcAg的表达几乎平行,x2检验,P=0.476,无显著性差异。结论PreS1Ag能够反映HBeAg阴性的慢性乙型肝炎患者的是否有病毒复制。     

HBeAg阳性和阴性的慢性乙型肝炎患者组织病理学及免疫组化学研究

目的探讨HBeAg阴性和阳性慢性乙型肝炎（CHB）患者组织病理学及免疫组化学的特点。方法对156例HBeAg阴性和阳性CHB患者肝组织炎症分级（G）及纤维化分期（S）的结果进行对比分析,并分别探讨两组CHB患者HBVDNA与ALT、G及S的关系,检测CHB患者肝组织HBsAg和HBcAg阳性表达率。结果HBeAg阴性CHB患者HBVDNA含量明显低于HBeAg阳性者,肝组织炎症程度高于后者,HBVDNA水平与ALT、G和S呈正相关,HBeAg阳性CHB血清HBVDNA与ALT、G无相关性。CHB患者肝组织HBcAg阳性率随炎症程度升高而升高。结论与HBeAg阳性CHB相比,HBeAg阴性者HBVDNA水平低,炎症程度高,HBVDNA水平与ALT、G、S正相关。CHB患者肝组织HBcAg阳性率随炎症程度增高而升高。     

饮酒对慢性乙型病毒性肝炎患者肝脏炎症和纤维化的病理影响

目的:从病理角度研究饮酒对慢性乙型病毒性肝炎(CHB)患者肝脏炎症和纤维化的影响.方法:回顾性分析84例有肝活检的患者,分为单纯饮酒组、单纯CHB组、CHB合并饮酒组.以半定量的方法分析并评价肝穿活检病理的炎症活动度、纤维化程度及脂肪变性程度.结果:在饮酒的CHB患者的病理下炎症活动度、纤维化程度及脂肪变性程度(8.73±6.93,7.67±5.34,43.58±21.80)均显著高于单纯CHB组(5.20±3.41,5.40±3.94,6.83±12.81,P均<0.05).多元线性逐步回归分析显示,每日饮酒量分别与病理下炎症活动度及脂肪变性程度的加重相关(R2=0.673,P=0.000;R2=0.559,P=0.000),每日饮酒量和累积饮酒量与病理下纤维化程度的加重相关(R2=0.650,P=0.000).结论:饮酒、尤其每日饮酒量与肝细胞损害程度有关,可明显加重CHB的病情.     

慢性乙型肝炎患者血清HBV复制标志物与肝组织HBsAg和HBcAg抗原表达的相关性研究

目的探讨血清HBV复制标志物与肝组织HBsAg和HBcAg抗原表达的相关性。方法用免疫组化法检测肝组织HBsAg、HBcAg,与血清HBeAg和/或HBV DNA进行相关性比较。结果血清HBeAg阳性与阴性组中肝组织HBsAg阳性率无显著性差异,而血清HBeAg阳性者肝组织HBcAg阳性率显著高于HBeAg阴性者;血清HBV DNA阳性与阴性组中肝组织HBsAg阳性率无显著性差异,但血清HBV DNA阳性者肝组织HBcAg阳性率显著高于HBV DNA阴性者。结论血清HBeAg和HBV DNA水平与肝组织HBcAg阳性率呈正相关。     

乙型肝炎病毒总DNA、共价闭合环状DNA和HBsAg在各种慢性乙型肝炎病毒感染者中的定量检测

目的 定量检测慢性乙型肝炎(CHB)、乙型肝炎肝硬化(LC)、肝细胞癌(HCC)患者HBV总DNA(tDNA)、HBV共价闭合环状DNA (cccDNA)和HBsAg,并探讨其特点.方法 荧光定量PCR检测21例CHB、23例LC和25例HCC患者外周血和肝组织标本HBV tDNA、HBVcccDNA,化学发光法定量检测外周血HBsAg.正态数据采用ANOVA分析和t检验,相关性分析采用Pearson检验,非正态数据采用秩和检验.结果 在CHB、LC和HCC患者中,外周血HBVtDNA分别为(5.38±2.08)、(4.96±1.65)和(4.18±0.91)lg拷贝/mL,肝组织HBV tDNA分别为(7.18±1.91)、(6.51±1.87)和(5.87±1.47)lg拷贝/μg,肝组织HBV cccDNA分别为(3.53±2.03)、(2.63±2.13)和(0.58±1.40)lg拷贝/μg,外周血H BsAg分别为(3.30±0.65)、(3.12±0.52)和(2.60±1.03)lg IU/mL,CHB与HCC患者比较,差异均有统计学意义(t=2.446,P=0.013;t=2.562,P=0.014;t=5.799,P＜0.01;t=2.709,P=0.003),LC与HCC患者肝组织HBVcccDNA及HBsAg定量比较,差异有统计学意义(t=-3.894,P＜0.01;t=-2.237,P=0.023).外周血均未检出HBV cccDNA.HBsAg定量与外周血HBV tDNA(r=-0.290,P=0.016)、肝组织HBV tDNA(r=0.372,P=0.002)及肝组织HBV cccDNA(r=0.378,P=0.001)均有关.结论 HBV tDNA、HBV cccDNA、HBsAg在CHB、LC、HCC患者呈逐渐降低趋势,HBsAg定量与外周血HBV tDNA、肝组织HBV tDNA及肝组织HBV cccDNA有关.     

隐匿性HBV感染者血清HBV M和肝组织病理学特点分析

目的：观察隐匿性HBV感染（OBI）者血清HBV M和肝组织病理学特点。方法在临床表现为OBI的慢性乙型肝炎（CHB）患者36例、肝硬化（LC）患者29例和原发性肝癌（PLC）患者22例,常规检测血清HBV M和HBV DNA,对CHB患者行肝活检,采用免疫组化法检测HBsAg和HBcAg。结果在CHB、LC和PLC患者,血清HBV DNA分别为（4.26±1.82）lgcopies/ml （P＆lt;0.05）、（3.13±1.43）lgcopies/ml和（2.78±1.26）lgcopies/ml;在36例CHB患者,肝组织HBsAg阳性8例（22.2%）,HBcAg阳性15例（41.7%）,HBsAg/HBcAg同时阳性9例（25.0%）;在三组患者中,血清HBV M以抗-HBc阳性最多见,分别为15例（41.7%）、12例（41.4%）和12例（54.5%）;在36例CHB患者,肝组织呈 G1、G2、G3和G4构成比分别为16.7%（6/36）、30.5%（11/36）、33.3%（12/36）和19.4%（7/36）,S1、S2、S3和S4构成比分别为11.1%（4/36）、22.2%（8/36）、50%（18/36）和16.7%（6/36）;在本组87例患者中有HBV感染家族史者57例（65.5%）。结论 OBI可引起慢性肝病病变进展,甚至导致肝硬化和肝癌的发生。血清抗-HBc阳性和HBV感染家族史是OBI发生的高危指标。单纯检测血清HBV DNA易造成OBI漏诊,及时行肝组织学检查可提高OBI诊断率。     

938例慢性乙型肝炎及无症状HBV携带者的肝组织病理、免疫组化与临床分析

我们对938例慢性乙型肝炎及无症状HBV携带者(ASC)的肝组织进行了病理、组化和临床对照分析。其中慢乙肝329例,无症状HBV携带者609例。临床与病理对照以无症状HBV携带者组符合率最低(29.23%),差异率为70%,经地衣红、维多利亚蓝、PAP肝细内HBsAg、HBcAg染色定位,发现ASC组和非特异性炎症组阳性率最高,肝细胞内病毒阳性率和病情成负相关。HBsAg在肝细胞内的表型以胞浆型为主,HBcAg的表型以核型为主。     

急性乙型肝炎患者特异性核心抗原细胞毒性T淋巴细胞频率的变化及其意义

目的 动态观察急性乙型肝炎(AHB)患者外周血HBcAg18-27表位特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)、血清ALT、HBV DNA、HBsAg和淋巴细胞亚群的变化,探讨HBV特异性CTL频率的消长在病毒清除以及肝脏损伤中的作用.方法 分别选取AHB、慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血,根据人类白细胞抗原(HLA)-A0201结果分为两组:HLA-A0201阳性患者作为HBV特异性CTL检测组、HLA-A0201阴性患者作为特异性抗原表位对照组.用HLA-A0201限制性表位HBcAg18-27五聚体复合物通过流式细胞技术,动态定量检测外周血中HBV特异性CTL频率和T、B淋巴细胞与自然杀伤细胞(NK)和NKT淋巴细胞;以速率法检测血清ALT水平;荧光定量PCR检测HBV DNA水平; Abbott微粒子化学发光技术检测HBV血清学标志物.计量资料采用均数±标准差((x)±s)表示或中位数(P25-P75)描述,组间比较采用方差分析或非参数检验(KruskalWallis检验和Mann-Whitney U检验);两种计量指标的关系采用Pearson相关分析.结果 AHB患者入院第1、2、3周外周血HBcAg表位特异性CTL频率分别为2.11%(0.20%～3.64%)、3.56%(1.05%～5.91%)、2.03%(0.33%～3.58%),高于入院第4、5、6周的0.99%(0.12%～2.16%)、0.29%(0.05%～0.76%)、0.39%(0.05%～0.46%),也显著高于CHB的0.11%(0.06%～0.29%),z值分别为-3.258,-4.041,-3.259,P值均＜0.01.AHB患者HBcAg表位特异性CTL峰值延迟于血清HBV DNA、HBsAg和ALT等指标的峰值;在AHB患者中,HBcAg表位特异性CTL高频率患者的血清HBsAg消失时间早于CTL频率较低的患者[(1.75±1.04)周与(4.33±3.51)周,t=-2.018,P＜0.05].CD3+CD8+T淋巴细胞频率的峰值出现在入院后第2周,并与HBcAg表位特异性CTL峰值相重叠,两者动态变化规律呈相关性(r=0.420,P＜0.01).AHB患者早期外周血NK、NKT淋巴细胞数量显著低于正常对照组和CHB患者,但随着病情好转而逐渐恢复,AHB患者外周血NK细胞数量变化与HBcAg特异性CTL动态变化呈负相关(r=-0.435,P＜0.01).结论 急性HBV感染者高频率的HBcAg表位特异性CTL与HBsAg的更早消失有密切关系,动态监测外周血中HBcAg特异性CTL频率变化,可以作为预测HBV感染后临床转归的参考指标;AHB患者外周血CD8+T淋巴细胞数量的变化,可以间接反应AHB患者体内HBcAg特异性CTL频率的改变.

Abstract：

Objective This report aims to investigate the dynamical changes of HBcAg18-27 epitope specific cytotoxic T lymphocytes(CTL), alanine aminotransferase (ALT), HBV DNA and HBsAg in peripheral blood of acute hepatitis B patients, and to explore the roles of HBcAg18-27-specific CTLs in virus clearance and liver injury. Methods Acute hepatitis B (AHB) and chronic hepatitis B (CHB) patients were divided into two groups according to results of HLA-A0201. Patients with positive HLA-A0201 were classified into HBcAg-specific CTL group and those with negative HLA-A0201 were referred as control group.The specific CTLs were stained with HLA-A0201 limited HBcAg18-27 epitope MHC-Pentamer and the frequencies of CTLs, T, B, NK and NKT cells were detected by flow cytometry (FCM). The serum ALT, HBV DNA and HBsAg were examined using speed analysis, quantitative PCR and abbott chemiluminescent technology. Results The frequencies of HBcAg18-27-specific CTLs in AHB patients were higher in the early three weeks as compared to the late three weeks. The apex time of HBV-specific CTL frequencies lagged behind those of HBV DNA, HBsAg and ALT. The loss of HBsAg in patients with high frequencies of HBVspecific CTL was earlier than that in patients with low frequencies (t = 2.018, P ＜ 0.05). In the second week the peak frequencies of CD3+CD8+ cells overlapped with that of HBcAg18-27-specific CTLs and with a positive correlation between (r = 0.420, P ＜ 0.05). During the early stages of AHB, the frequencies of NK and NKT cells were found significantly lower than that of control group and CHB group and the levels were back to normal after recovery. Moreover, a negative correlation existed between the frequencies of NK cells and the dynamic changes of HBcAg18-27-specific CTLs (r = -0.435, P ＜ 0.01) in AHB group. The frequencies of HBcAg18-27-specific CTLs were significantly higher as compared to CHB group in the first three weeks (z = -3.258, -4.04, and -3.259, P ＜ 0.01). Conclusion The early loss of HBsAg was closely related to the high frequencies of HBcAg18-27 specific CTLs in AHB patients. HBcAg-specific CTL frequencies in peripheral blood could be used to predict clinical outcome after HBV infection. The frequencie of CD8+ T cells can reflect the changes of frequencies of HBcAg-specific CTL. during acute HBV infection.     

慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA、HBeAg与肝组织HBcAg及炎症分级的关系

目的 探讨慢性乙型肝炎（CHB）患者血清HBV DNA、HBeAg与肝组织HBcAg及炎症分级的关系.方法 回顾性分析250例CHB肝穿刺患者,按血清HBV DNA水平,分为A组（＜3 log10 IU/ml）45例,B组（3～6 log10 IU/ml）138例,C组（＞6 log10 IU/ml）67例.按HBeAg阴阳性不同分为阳性组142例,阴性组108例.分别与肝组织中HBcAg水平、肝组织炎症分级进行比较,分析彼此的相关性,率的比较用卡方检验及确切概率法,相关性分析采用直线相关分析.结果 血清HBV DNA不同水平与肝组织HBcAg免疫组化比较差异有统计学意义（χ2=11.1,P=0.05）,两者之间呈正相关（r=0.75,P=0.001）;与肝组织炎症分级（G）比较差异无统计学意义（χ2=13.3,P=0.075）,两者之间也无相关性（r=0.04,P=0.325）.HBeAg阳性和阴性分组与肝组织中HBcAg水平比较差异有统计学意义（χ2=6.64,P=0.01）,两者之间呈正相关（r=0.56,P=0.001）;与肝组织炎症分级（G）比较差异无统计学意义（χ2=8.43,P=0 065）,两者之间也无相关性（r=0.06,P=0.415）.结论 CHB患者肝组织HBcAg表达更能反映出肝内HBV复制状态,患者血清中测不出病毒标志物时,可以考虑肝穿刺以观察肝组织中HBcAg表达来判断HBV复制状态具有重要意义.     

慢性乙型肝炎不同类型抗病毒治疗适应证临床病理特征的比较

目的比较分析慢性乙型肝炎(CHB)不同类型抗病毒治疗适应证的临床病理特征及其意义。方法纳入2014年1月至2019年12月861例接受肝活检术、乙型肝炎病毒(HBV)DNA阳性(>30 IU/ml)且符合抗病毒治疗适应证的CHB患者的临床资料, 比较分析其肝脏病理学改变及其与临床特征的相关性。据资料不同采用t检验、方差分析、非参数检验、χ2检验、Ridit分析、logistic回归分析进行统计学分析。结果大部分(72.24%)患者存在明显的病理损伤, 肝功能正常组的肝纤维化程度高于异常组(P<0.001)。17.54%患者存在肝脂肪变。绝大部分(97.33%)患者肝组织乙型肝炎表面抗原染色阳性, 而乙型肝炎核心抗原(HBcAg)染色阳性仅为50.87%。影响肝脏病理严重程度的正相关因素为碱性磷酸酶水平, 负相关因素为肝组织HBcAg染色阳性、白蛋白及血小板水平;HBcAg不同染色程度间肝脏炎症活动度和纤维化程度的差异均有统计学意义(χ2值分别为44.142、102.386, P<0.001), 以阴性组最严重。结论 CHB患者不同类型抗病毒治疗适应证之间的临床病理特征...     

HBeAg定量测定在慢性乙型肝炎诊断和治疗中的价值

目的　探讨采用微粒子荧光免疫分析法 (MEIA )检测的慢性乙型肝炎 (CHB)血清HBeAg定量在CHB诊断和治疗中的价值。方法　分别采用MEIA法、酶联免疫吸附分析法(ELISA)、荧光定量聚合酶链反应法 (PCR)检测 2 4 9例CHB和 32例非CHB血清HBeAg定量、乙型肝炎病毒 (HBV)标志物 (HBVM)和HBVDNA定量。同时作肝组织活检 ,链霉菌抗生素蛋白 过氧化物酶连接法 (S P)检测肝细胞中HBcAg表达。研究血清HBeAg定量与HBeAg定性、HBVDNA定量、肝细胞内HBcAg定量以及与病理诊断间的关系。 结果　 1.检测血清HBeAgMEIA法灵敏度 (80 .2 8% )高于ELISA法 (6 9.0 1% ) ,差异有显著性 (χ2 =9.312 ,P =0 .0 0 2 ) ;2 .血清HBeAg定量与HBVDNA定量对数值间呈正相关 (r =0 .4 11,P =0 .0 0 0 ) ;3.血清HBeAg定量与肝细胞内HBcAg的半定量呈正相关 (r =0 .6 4 6 ,P =0 .0 0 0 ) ;4 .血清HBeAg定量与肝脏病理分级之间呈负相关 (r =- 0 .172 ,P =0 .0 0 6 )。结论　MEIA法检测的血清HBeAg定量是目前临床上评价HBV复制和肝脏损害程度的较敏感、较稳定、较可靠的指标 ,在CHB的诊断和治疗中有一定价值。     

慢性乙型肝炎患者肝细胞内乙型肝炎核心抗原阳性的临床意义

目的探讨CHB患者肝组织HBcAg阳性的意义。方法对200例CHB患者应用荧光聚合酶链反应（FQ-PCR）法精确定量检测血清HBV DNA含量。患者均检测血清中HBeAg含量,同时进行肝活组织检查,应用免疫组织化学技术检测HBcAg情况,并进行相关性分析。结果按测定血清HBV DNA水平,分为A组（＜3 log10拷贝/ml）20例,B组（≥3 log10拷贝/ml-＜5 log10拷贝/ml）13例,C组（≥5 log10拷贝/ml～＜6 log10拷贝/ml）24例,D组（≥6 log10拷贝/ml～＜8 log10拷贝/ml）116例,E组（≥8 log10拷贝/ml）27例。肝组织HBcAg阳性者175例,占87．5％,A组HBcAg阳性率55．0％（11/20）,B组53．8％（7/13）,C组75．0％（18/24）,D组96．6％（112/116）,E组100．0％（27/27）,HBcAg阳性率与血清HBV DNA水平之间呈显著正相关（r=0．80,P＜0．01）。血清HBV DNA水平高低与HBeAg阳性率之间呈显著正相关（r=0．47,P＜0．01）。其中20例HBV DNA阴性者中（A组）,HBeAg阳性者5例（25％）,HBcAg阳性者11例（55％）；15例HBV DNA阴性且HBeAg阴性者中有7例HBcAg阳性,占46．7％。结论CHB患者肝组织HBcAg阳性能更可靠地反映肝细胞内HBV复制状态。检测肝组织内HBcAg对CHB患者疗效评价和对治疗反应性的预测更具有临床意义。     

慢性乙型肝炎患者肝组织乙型肝炎病毒cccDNA和血清病毒学标志物相关性的研究

目的探讨CHB患者血清病毒学标志物及肝组织、血清HBV DNA与肝组织HBVcccDNA的关系。方法应用实时荧光定量法进行20例CHB患者肝组织HBVcccDNA、肝组织及血清HBV DNA定量的测定,时间分辨荧光免疫分析法进行HBsAg、HBeAg、HBcAb等血清学标志物的测定,分析肝组织HBVcccDNA与肝组织HBV DNA、血清HBV DNA、HBsAg及HBeAg定量水平之间的关系。相关性分析采用Spearman相关性检验。结果所有患者肝组织中均能检测到HBVcccDNA,含量在7.63×10~4拷贝数/mg~9.46×10~8拷贝数/mg(对数值:7.55±1.08)之间;肝组织HBVcccDNA与肝组织HBV DNA呈显著正相关关系(r=0.859,P0.01),与血清HBV DNA呈显著正相关关系(r=0.640,P0.01);肝组织HBVcccDNA与HBeAg呈显著正相关(r=0.676,P0.01),与血清HBsAg无相关性(r=0.195,P0.05),与HBcAb呈显著负相关(r=-0.624,P0.01)。结论 CHB患者肝组织内HBVcccDNA呈稳定的中等水平复制;血清HBsAg定量尚不能作为反映肝组织中HBVcccDNA水平的指标,结合肝组织HBV DNA、血清HBV DNA等定量检测可以更全面反映HBV复制水平及患者病情评估。     

血清AFP和GP73在慢性乙型肝炎患者中的表达

目的检测不同程度的慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者的血清甲胎蛋白(AFP)和高尔基体蛋白73(GP73),研究CHB病情对AFP和GP73表达的影响。方法收集146例住院CHB患者血清,其中CHB轻度、中度、重度、肝硬化患者各30例,慢加亚急性肝衰竭患者26例,同时选取30名健康对照者,分别检测血清AFP、GP73。结果 AFP在CHB轻度组与对照组比较,差异无统计学意义(P=0.361);而在CHB其他各组中均较对照组升高,在CHB重度组最高(P0.05)。GP73在各组患者血清中表达均较对照组升高(P0.05);GP73在肝衰竭组中表达最高,依次为CHB重度组、肝硬化组、CHB中度组、轻度组,肝硬化组与CHB重度组差异无统计学意义(P=0.752),在CHB轻度组、CHB中度组中表达差异无统计学意义(P=0.584)。以20 ng/ml为cut-off值,AFP在所有CHB分组中均有阳性表现,CHB重度组(70.0%)及肝衰竭组(53.8%)阳性率最高,其他依次为肝硬化组(26.7%)、CHB中度组(23.3%)、CHB轻度组(3.3%)和对照组(0);以150μg/L为cut-off值,GP73在CHB轻度组与CHB中度组中阳性率分别为30.0%、36.7%,在CHB重度组、肝衰竭组及肝硬化组中稍高,分别为80.0%、61.5%、70.0%。结论 AFP和GP73在不同程度CHB患者血清中均可见升高,但受影响程度不一致,它们在用于肝癌诊断标志物时应排除不同程度肝脏炎症的影响。     

HBeAg阳性和阴性慢性乙型肝炎患者肝组织学与血清学关系的比较

目的 研究慢性乙型肝炎(CHB)患者(1×ULN≤ALT≤2×ULN)肝组织学与血清学的关系.方法 对全国多中心516例CHB患者(1×ULN≤ALT≤2×ULN)行血清学及肝穿刺病理检查,依据血清HBeAg表达水平将患者分为HBeAg阳性组和HBeAg阴性组,分析两组肝组织病理学与血清学指标的相关性.结果 HBeAg阳性患者肝组织炎症分级和肝纤维化分期与血清HBsAg和HBeAg表达水平呈负相关(P＜0.01),与血清透明质酸(HA)和α2-巨球蛋白水平呈正相关(P＜0.01),与血清HBVDNA水平无明显相关性;HBeAg阴性患者肝组织炎症分级和肝纤维化分期与血清HBV DNA水平呈正相关(P＜0.01),与HBsAg、HA和α2-巨球蛋白等无明显相关性.结论 血清HBV DNA可做为HBeAg阴性CHB患者肝脏病变程度的有效预测指标,HBsAg、HBeAg、HA和α2-巨球蛋白均可做为HBeAg阳性CHB患者肝组织损伤的预测指标.