内脂素对大鼠肝星状细胞表达碱性成纤维细胞生长因子的影响

目的 观察内脂素对大鼠肝星状细胞(HSCs)表达碱性成纤维细胞生长因子(FGF-2)的影响,探讨内脂素在肝纤维化中的作用.方法 对培养激活的大鼠HSCs分别给予不同浓度(0、50、100和200 ng/mL)的内脂素进行刺激,在不同时限(6 h、12 h、24 h及36 h)收集细胞总RNA.用实时荧光定量(SYBR Green Ⅰ)RT-PCR检测FGF-2 mRNA的表达.结果 50 ng/mL内脂素孵育HSCs 24 h可上调FGF-2 mRNA的表达(1.71±0.34 vs.1,P＜0.05),随着刺激浓度的增加FGF-2 mRNA的表达进一步上调(P＜0.05).100 ng/mL内脂素孵育HSCs 12h可促进FGF-2 mRNA的表达(1.68±0.31 vs.1,P＜0.05),随着刺激时间的延长,FGF-2 mRNA的表达逐渐增加(P＜0.05).结论 内脂素能诱导大鼠HSCs表达FGF-2,提示内脂索可能通过诱导FGF-2的表达参与肝纤维化的发病过程.     

高糖环境对肝星状细胞TLR4表达及脂多糖诱导的炎症因子表达的影响

目的研究高糖环境对肝星状细胞Toll样受体4(TLR4)表达及脂多糖（LPS）诱导的炎症因子表达的影响。方法体外培养
大鼠肝星状细胞株HSC-T6,采用高糖刺激,Western blot及RT-PCR检测细胞TLR4蛋白及mRNA表达;低糖或高糖培养基预处
理肝星状细胞24 h 后采用LPS（100 ng/ml）刺激,2 h 后Western blot 检测NF-κB核转位,24 h 后RT-PCR 检测MCP-1 和IL-6
mRNA表达,ELISA检测细胞上清两种炎症因子的浓度。结果高糖环境可上调肝星状细胞TLR4 蛋白及mRNA表达（均为P<
0.01）,且呈明显的时效-量效关系。高糖可促进肝星状细胞NF-κB核转位（P<0.01）,并促进MCP-1和IL-6表达及分泌（均为P<
0.01）。高糖预处理可增强LPS诱导的肝星状细胞NF-κB核转位（P<0.01）、MCP-1和IL-6表达及分泌（均为P<0.01）。结论高
糖可上调肝星状细胞TLR4的表达,并可促进脂多糖激活NF-κB而增加炎症因子表达及分泌。
     

线粒体内膜转位酶13调控肝星状细胞活化和增殖的实验研究

目的：研究线粒体内膜转位酶13(TIMM13)的表达对小鼠肝星状细胞活化和增殖的影响，探讨TIMM13在肝纤维化的的进展中的作用。方法：用5 ng/mL、10 ng/mL、20 ng/mL转化生长因子-β1(TGF-β1)作用小鼠肝星状细胞系JS-1细胞24 h，诱导JS-1细胞活化，实验分为对照组（0 ng/mL组）、5 ng/mL组、10 ng/mL组、20 ng/mL组；采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白质印迹（western blotting）法检测各组TIMM13、肝纤维化指标α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和Ⅰ型胶原蛋白（COL1A1）的mRNA与蛋白表达水平；在JS-1细胞中分别敲低和过表达TIMM13，将实验分为空载组（对照组）和沉默组/过表达组，用RTqPCR和western blotting法检测TIMM13、α-SMA和COL1A1的mRNA与蛋白表达水平，用细胞计数试剂盒（CCK-8）检测沉默/过表达TIMM13的第0、第24、第48和第72小时细胞的增殖情况。结果：与对照组比较，5 ng/mL组、10 ng/mL组、20 ng/mL组中TIMM13...     

大蒜素对大鼠肝星状细胞基质金属蛋白酶抑制剂-1表达的影响

目的 观察大蒜素对大鼠肝星状细胞（HSC-T6）增殖及细胞外基质降解酶-金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）的影响,探讨大蒜素抗肝纤维化的作用及其机制.方法 体外培养大鼠肝星状细胞株HSC-T6.MTT法检测大蒜素作用下对大鼠肝星状细胞增殖的影响、Real-time RT-PCR检测肝星状细胞的TIMP-1mRNA水平、Western blot检测肝星状细胞的TIMP-1蛋白的表达水平.结果 HSC-T6大蒜素处理组与空白对照组比较,增殖抑制率明显提高,差异有统计学意义（P ＜0.01）;TIMP-1的mRNA及蛋白表达水平均明显下降,并且大蒜素浓度增高时,TIMP-1的mRNA及蛋白表达水平则逐渐下降,大蒜素高浓度（24μg/mL）组对TIMP-1的抑制作用明显高于空白对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 大蒜素对HSC-T6增殖和TIMP-1的表达均有抑制作用,为临床开发抗肝纤维化的新药物提供了理论基础.     

血管紧张素Ⅱ对大鼠HSCs分泌ECM影响机制的研究

目的 探讨血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)刺激大鼠肝脏星状细胞(HSCs)分泌细胞外基质(ECM)的可能机制.方法 采用胶原酶原位循环灌流法分离大鼠肝星状细胞(HSCs).①用不同浓度Ang Ⅱ(10-9～10-5moL/L)处理HSCs,酶联免疫吸附法检测各组HSCs层黏蛋白(LN)、透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PcⅢ)和Ⅳ型胶原(CⅣ)水平.以未经AngⅡ处理的HSCs作为对照组.②选择使ECM分泌显著增加的AngⅡ处理组HSCs,抽提RNA后采用RT-PCR技术测定转化生长因子-β1(TGF-β1)和结缔组织生长因子(CTGF)mRNA表达,并与新鲜分离的大鼠HSCs和对照组HSCs进行比较.结果 与对照组比较,AngⅡ各浓度处理组HSCs的LN和HA分泌水平均明显增加(P<0.01),且呈剂量依赖关系;AngⅡ10-7～10-3mol/L处理组HSCs的PCⅢ和CⅣ分泌水平也显著增加(P<0.01).RT-PCR检测结果显示,与新鲜分离大鼠和对照组HSCs比较,有较高ECM分泌水平的10-6moL/L AngⅡ处理组HSCs的TGF-β1和CTGF mRNA表达水平明显升高.结论 Ang Ⅱ能刺激大鼠HSCs分泌ECM,其通过促进TGF-β1表达经CTGF介导而参与肝脏纤维化的发生.     

血管紧张素Ⅱ对大鼠HSCs分泌ECM影响机制的研究

目的探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激大鼠肝脏星状细胞(HSCs)分泌细胞外基质(ECM)的可能机制。方法采用胶原酶原位循环灌流法分离大鼠肝星状细胞(HSCs)。①用不同浓度AngⅡ(10-9~10-5mol/L)处理HSCs,酶联免疫吸附法检测各组HSCs层黏蛋白(LN)、透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PcⅢ)和Ⅳ型胶原(CⅣ)水平。以未经AngⅡ处理的HSCs作为对照组。②选择使ECM分泌显著增加的AngⅡ处理组HSCs,抽提RNA后采用RT-PCR技术测定转化生长因子-β1(TGF-β1)和结缔组织生长因子(CTGF)mRNA表达,并与新鲜分离的大鼠HSCs和对照组HSCs进行比较。结果与对照组比较,AngⅡ各浓度处理组HSCs的LN和HA分泌水平均明显增加(P<0.01),且呈剂量依赖关系;AngⅡ10-7~10-5mol/L处理组HSCs的PCⅢ和CⅣ分泌水平也显著增加(P<0.01)。RT-PCR检测结果显示,与新鲜分离大鼠和对照组HSCs比较,有较高ECM分泌水平的10-6mol/L AngⅡ处理组HSCs的TGF-β1和CTGF mRNA表达水平明显升高。结论AngⅡ能刺激大鼠HSCs分泌ECM,其通过促进TGF-β1表达经CTGF介导而参与肝脏纤维化的发生。     

受体型蛋白酪氨酸磷酸酶在大鼠肝星状细胞表达及在肝纤维化发生中的意义

目的:受体型蛋白酪氨酸磷酸酶(PTPRJ)在多种组织包括肝内表达.目前认为其作为一种潜在抑癌基因对于细胞增殖及迁徙具有抑制作用.文章通过观察PTPRJ在大鼠肝星状细胞中的表达及功能,探讨PTPRJ在肝纤维化发生中的意义.方法:四氯化碳(CCl4)皮下注射诱导大鼠肝纤维化模型,用Western技术检测PTPRJ在肝纤维化组织中的表达变化,采用Percoll梯度离心法分离培养原代大鼠肝星状细胞,采用细胞免疫荧光法观察PTPRJ表达情况,RT-PCR法测定其mRNA在肝星状细胞体外活化过程中的表达变化. 结果:免疫荧光及RT-PCR显示肝星状细胞中PTPRJ表达呈阳性;在CCl4诱导的实验性大鼠肝纤维化模型中随着不同时间段纤维化程度加重,PTPRJ表达减少;原代大鼠肝星状细胞体外培养自活化过程中,RT-PCR测定的PTPRJ表达逐步减少. 结论:PTPRJ在原代肝星状细胞中表达为阳性,并在肝星状细胞活化及肝纤维化过程中表达减少,提示PTPRJ可能对于肝纤维化发生发展起负性调控作用.     

LPS-TLR4信号通路在慢性酒精摄入大鼠模型肝纤维化发生中的作用及其机制

目的: 通过检测慢性酒精摄入大鼠门静脉血中内毒素脂多糖(LPS)水平,探讨LPS-Toll样受体4(TLR4)通路在慢性酒精摄入大鼠模型肝纤维化发生中的作用及意义。方法: 24只雄性SD大鼠随机分为酒精组和对照组,分别喂养等热量的Lieber-Decarli酒精饲料和对照饲料,10周后采集大鼠门静脉血,留取肝组织标本。采用HE染色和Masson染色评估肝脏的组织学特点,分光光度法检测大鼠门静脉血浆内LPS水平,免疫组织化学法检测肝组织纤维母细胞特异蛋白1(FSP-1)和波形蛋白(vimentin)以识别肝星状细胞(HSCs),原位杂交方法检测肝组织中TLR4 mRNA表达水平。应用计算机图像分析系统检测FSP-1阳性HSCs和TLR4 mRNA阳性细胞的积分光密度值(IA)。采用RT-PCR法检测肝组织中白细胞介素1(IL-1)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和转化生长因子β1(TGF-β1) mRNA表达水平。结果: 与对照组比较,酒精摄入10周末酒精组大鼠肝脏出现中央静脉周围及肝血窦周边纤维化,肝脏TLR4 mRNA表达水平及FSP-1阳性激活HSC均有明显增加(P<0.01),大鼠门静脉血浆LPS水平明显升高(P<0.01)。与对照组比较,酒精组大鼠肝脏致炎症因子IL-1、IL-6、TNF-α及TGF-β1 mRNA表达水平明显升高(P<0.01)。 Bivariate相关分析,10周末酒精组大鼠肝脏TLR4 mRNA表达水平与门静脉血浆LPS水平呈正相关关系(r=0.856,P<0.05)。结论: 慢性酒精摄入可引起大鼠肝脏TLR4信号通路活化,通过释放致炎因子和纤维源性因子在肝纤维化发病过程发挥重要的作用。     

拉米夫定和水飞蓟素对酒精刺激的HBV转基因小鼠肝纤维化相关因子的影响

目的：观察在肝损伤早期,拉米夫定和水飞蓟素对酒精刺激的乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)转基 因小鼠肝组织保护作用,并通过检测肝纤维化相关因子探讨其机制。方法：将40只1.3拷贝HBV转基因BALB/C小鼠 随机分为4组。对照组以生理盐水灌胃;模型组以体积分数为50%的白酒5 mL/kg灌胃,1 次/d;拉米夫定组在模型组 处理基础上以拉米夫定溶液(100 mg/kg)灌胃,1 次/d;水飞蓟素组在模型组处理基础上以水飞蓟素溶液(200 mg/kg) 灌胃,1 次/d。10周后荧光定量PCR检测各组小鼠血清HBV-DNA载量,全自动生化仪检测血清ALT和AST水平。HE 染色,Masson染色镜检观察肝组织病理变化,荧光实时定量PCR检测肝组织TGF-β1,Smad3,Smad7,结缔组织生长 因子(connective tissue growth factor,CTGF) mRNA表达水平,免疫组织化学检测肝组织TGF-β1,CTGF,α-平滑肌肌 动蛋白(α-SMA)表达水平。结果：与对照组相比,模型组肝组织病理损伤加重,血清HBV病毒载量,ALT和AST水平 明显增高,肝组织内TGF-β1,Smad3,Smad7,CTGF mRNA及TGF-β1,CTGF,α-SMA蛋白表达增加(P<0.05)。与模 型组相比,拉米夫定组和水飞蓟素组肝组织病理损伤均减轻,肝组织内TGF-β1,Smad3,CTGF mRNA及TGF-β1, CTGF,α-SMA蛋白表达减少(P<0.05),Smad7 mRNA的表达进一步增加(P<0.05),水飞蓟素组血清ALT和AST水平降低 (P<0.05)。结论：拉米夫定和水飞蓟素可通过调节TGF-β1/Smads信号通路,减少CTGF表达,抑制肝星状细胞活化等 机制阻断酒精刺激的HBV转基因小鼠肝组织纤维化的发生和进展。     

载脂蛋白嵌合模拟肽通过NF-κB途径抑制ox-LDL诱导的巨噬细胞炎症反应

目的：探讨载脂蛋白嵌合模拟肽Ac-hE-18A-NH2对氧化型低密度脂蛋白(oxidized LDL,ox-LDL)刺激下巨噬细
胞肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达的影响及其作用机制。方法：Ox-LDL刺激RAW264.7巨噬细胞,
给予不同浓度的模拟肽Ac-hE-18A-NH2(1~100 μg/mL)干预,收集细胞,测定巨噬细胞TNF-α的分泌和mRNA表达水平。
Western印迹检测ATP结合盒转运蛋白A1(ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1)及P-IκB蛋白浓度。EMSA检测核因
子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)活性。结果：Ox-LDL刺激使RAW264.7巨噬细胞TNF-α 分泌和mRNA表达明显增强,细
胞内胆固醇蓄积,促进IκB磷酸化,并激活NF-κB。Ac-hE-18A-NH2浓度依赖性地降低TNF-α 分泌及mRNA表达,上调
ABCA1 mRNA和蛋白的表达,减少细胞内胆固醇含量,抑制NF-κB活化,并抑制IκB磷酸化。相同的实验条件下及作
用浓度,D-4F对于TNF-α 分泌的抑制作用不如Ac-hE-18A-NH2。结论：Ac-hE-18A-NH2能抑制ox-LDL诱导的RAW264.7
巨噬细胞TNF-α分泌和mRNA表达,IκB/NF-κB-TNF-α信号通路是其中作用途径之一。Ac-hE-18A-NH2的抗炎作用优于
apoA-I模拟肽D-4F。     

高血流性肺动脉高压大鼠肺组织中TGF-β1和CTGF的动态变化及意义

目的:观察转化生长因子-β1 (TGF-β1) 与结缔组织生长因子(CTGF) 在高血流性肺动脉高压大鼠肺组织的动态表达变化, 探讨TGF-β1 和CTGF 在高血流性肺动脉高压过程中的作用。方法:50 只成年雄性SD 大鼠随机分成假手术组( S 组) 、右肺切除1 周组(PE1 组)、2 周组(PE2 组)、4 周组(PE4 组) 和6 周组 (PE6 组), 每组10 只。测量各组大鼠平均肺动脉压( mPAP)、右室肥大指数( RVHI) 和血管形态学指标;免疫组织化学染色和Western 印迹检测肺组织TGF-β1 和CTGF 蛋白表达;RT-PCR 检测TGF-β1 和CTGF mRNA 的表达。结果:与S 组比较, 右肺切除各时间组大鼠mPAP 和RVHI 均显著升高 (P<0.05), PE1 和PE 2 组肌型动脉(MA) 和部分肌型动脉(PMA) 占肺中小血管总数的百分比[(MA+PMA)%]、MA 的相对中膜厚度(RMT) 和相对中膜面积(RMA) 与S 组比较无明显差异, PE4和PE6 组(MA+PMA)%、RMT 及RMA 明显增高(P<0.05);免疫组织化学染色显示, 右肺切除各时间组大鼠TGF-β1和CTGF 较S 组分布广泛, 表达增强。Western 印迹结果表明, 与S 组比较, 右肺切除各时间组TGF-β1 蛋白均显著上升(P<0.01), 峰值出现在PE2 组;CTGF 蛋白在PE1 组和PE2 组较S 组升高, 但差异无统计学意义, PE4 组和PE6组较S 组明显增高(P<0.05)。与S 组比较, 右肺切除各时间组TGF-β1mRNA 表达均显著升高(P<0.01), PE2 组达峰值, PE4 组和PE6 组维持在高水平。PE1 组CTGF mRNA 增高不明显, PE2 组、PE4 组和PE6 组明显上升(P<0.01)。相关分析表明, CTGF 蛋白和mRNA 表达与RMT 和RMA 呈正相关( P<0.05);TGF-β1 蛋白和mRNA 表达与RMT 和RMA无相关性;TGF-β1 mRNA 表达与CTGF mRNA 表达之间无明显相关性。结论:TGF-β1 和CTGF 参与了大鼠高血流性肺动脉高压的病理生理过程。     

VEGF和miR-205及靶蛋白Ezrin和Lamin A/C在卵巢癌中的表达及意义

目的：分析血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF),miR-205,Ezrin,Lamin A/C在卵巢
癌组织中的表达及意义。方法：采用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测卵巢癌患者和
正常女性血清中VEGF的含量;免疫组织化学检测上皮性卵巢癌组织、卵巢良性肿瘤组织和正常卵巢组织中血管内
皮细胞生长因子受体-1(vascular endothelial cell growth factor receptor-1,VEGFR-1),VEGFR-2,Ezrin,Lamin A/C蛋白的
表达情况和CD31所标记的微血管密度(microvessel density,MVD);采用荧光定量PCR方法检测卵巢上皮性癌组织、
卵巢良性肿瘤组织和正常卵巢组织中miR-205,Ezrin和Lamin A/C的相对表达量。 结果：VEGF在上皮性卵巢癌患者
血清中的表达水平为(116.10±11.94),高于正常女性(40.04 ± 4.97,P<0.05);VEGFR-1和VEGFR-2在卵巢上皮性癌组织
中的阳性表达率分别为75.9%和91.4%,高于卵巢良性肿瘤组织和正常卵巢组织中的阳性表达率(P<0.05),VEGFR-1和
VEGFR-2在卵巢良性肿瘤组织和正常卵巢组织中的表达差异无统计学意义(P>0.05);MVD在上皮性卵巢癌组织中的计
数为(7.56±0.51),高于正常卵巢组织(1.22±0.56,P<0.05),MVD在卵巢良性肿瘤组织和正常卵巢组织中的表达差异无
统计学意义(P>0.05);miR-205 在上皮性卵巢癌组织中的相对表达量为(0.106±0.035),高于正常卵巢组织中的相对表达
量(0.0007±0.0005,P<0.05),miR-205 在卵巢良性肿瘤组织中的相对表达量为(0.0002±0.0003),高于正常卵巢癌组织中
的相对表达量,但差异无统计学意义(P>0.05);免疫组织化学结果显示：Ezrin和Lamin A/C在上皮性卵巢癌组织中的
阳性表达率分别为51.7%和60.3%,低于卵巢良性肿瘤组织和正常卵巢组织中的阳性表达率(P<0.05),Ezrin和Lamin A/C
在卵巢良性肿瘤组织和正常卵巢组织中的表达差异无统计学意义(P>0.05);RT-PCR结果显示：Ezrin和Lamin A/C在上
皮性卵巢癌组织中的相对表达量低于正常卵巢组织中的相对表达量(P<0.05);Ezrin和Lamin A/C在卵巢良性组织中的
相对表达量高于在上皮性卵巢癌组织,但差异无统计学意义(P>0.05)。 结论：VEGF在上皮性卵巢癌患者血清中表达
上调;miR-205在上皮性卵巢癌组织中表达上调;差异蛋白Ezrin和Lamin A/C在上皮性卵巢癌组织中表达下调,提示
VEGF和miR-205及靶蛋白Ezrin和Lamin A/C与卵巢癌的侵袭、转移相关。     

ADAMTS-2及TGF-β1在肝硬化组织中的表达

目的:检测含Ⅰ型凝血酶敏感蛋白模体的解整合素样金属蛋白酶(a disintegrin and metalloprotease withthrombospondin motif, ADAMTS)-2 及转化生长因子(transforming growth factor, TGF)-β1 在肝硬化组织中的表达, 探讨ADAMTS-2 与TGF-β1 在肝硬化发生和发展中的作用。方法:收集武汉总医院2010 年3 月至6 月肝硬化门静脉高压症患者的肝组织16 例及外伤性肝破裂正常肝组织8 例作为正常对照组。采用免疫组织化学及Western 印迹法检测ADAMTS-2 及TGF-β1 在肝硬化组织及正常组织中的表达。结果:免疫组织化学结果显示肝硬化组织中ADAMTS-2和TGF-β1 表达较正常肝组织明显增高(P<0.05)。Western 印迹分析亦显示ADAMTS-2 及TGF-β1 在肝硬化组织中表达强度明显高于正常组织(P<0.05), 而且两者的表达呈正相关(r=0.862, P<0.01)。结论:ADAMTS-2 和TGF-β1 可能存在协同致肝纤维化作用。     

维生素C增强衰老个体来源的骨髓间充质干细胞的增殖能力

目的观察维生素C（Vc）能否通过升高端粒酶活性促进衰老个体来源骨髓间充质干细胞（BMMSCs）的增殖能力。方法
以骨特异性早衰小鼠（SAMP6）为实验组,不发生早衰的R品系小鼠（SAMR1）为对照组,采用显微CT扫描技术验证SAMP6小
鼠的骨衰老表型。分离培养两组小鼠的BMMSCs,其中SAMP6小鼠来源的BMMSCs分别应用不同浓度的Vc进行处理。采用
MTT法检测BMMSCs的增殖能力,绘制生长曲线,使用端粒酶试剂盒检测端粒酶活性,并用PCR和Western blot方法检测端粒
酶逆转录酶（TERT）的表达水平。结果SAMP6小鼠具有骨衰老表型,SAMP6小鼠来源的BMMSCs的增殖能力和端粒酶活性
均低于SAMR1 小鼠来源的BMMSCs,差异均有统计学意义（P<0.05）。加入Vc 后,在一定浓度范围内SAMP6 小鼠来源的
BMMSCs增殖能力随Vc浓度的升高而显著改善（P<0.05）,同时其端粒酶活性和TERT表达水平有所提高（P<0.05）,与增殖能
力具有相关性。其中,Vc发挥促进作用的最适浓度为100 μg/mL,在1000 μg/mL时有抑制作用。结论维生素C能够增强衰老
个体来源BMMSCs的增殖能力,且这种作用可能是通过升高端粒酶活性实现的。
     

鼻咽癌患者外周血端粒酶hTERT mRNA的定量检测及其临床意义

目的定量检测鼻咽癌患者外周血中端粒酶逆转录酶催化亚单位（hTERT）mRNA的表达,并探讨其在鼻咽癌中的诊断及
治疗意义。方法采用实时荧光定量PCR技术（QPCR）检测33例鼻咽癌患者治疗（放疗或化疗）前后血浆中hTERT mRNA的表
达,并分析其与临床病理因素的关联,以24例健康志愿者作为对照。结果结果显示,健康志愿者血浆中hTERT mRNA相对表
达量为0.95±0.37,鼻咽癌患者血浆中hTERT mRNA含量达到10.75±4.29（P<0.05）。鼻咽癌患者血浆中hTERT mRNA的表达
与年龄、性别无统计学差异（P>0.05）,而与临床分期、T分期及N分期有显著性差异（P<0.05）。早期患者（Ⅰ、Ⅱ期）,放疗后其表
达量3.43±1.42 较治疗前5.60±2.33 明显下降;晚期患者（Ⅲ、Ⅳ期）诱导化疗及放疗后其表达量较治疗前12.68±3.08 分别降为
10.68±2.48、3.13±1.69（P<0.05）。结论鼻咽癌患者血浆中hTERT mRNA的表达明显升高,放化疗能够有效抑制该基因的表达,
而且该基因的含量与肿瘤的临床分期、大小及淋巴结浸润范围等临床病理因素密切相关,从而提示检测鼻咽癌患者外周血中
hTERT mRNA的含量,有可能为鼻咽癌患者早期诊断及疗效判断提供重要信息。
     

慢性乙型肝炎患者PBMCs中ROG、GATA3和T-bet mRNA水平及其意义

目的探讨慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞（PBMC）中转录因子ROG、GATA3和T-bet mRNA水平变化及意义。方
法收集135例慢性乙型肝炎患者（轻度45例、中度42例、重度48例）和15例健康志愿者（正常对照组）的外周血,分离单个核细
胞,提取总RNA,用实时定量PCR的方法检测ROG、GATA3和T-bet mRNA水平。应用SPSS16.0软件进行统计分析。结果慢
性乙型肝炎轻度、中度组和重度组患者外周血PBMCs中T-bet mRNA表达水平均明显高于健康对照组人群,组内比较差异均具
有统计学意义（P<0.05）。慢性乙型肝炎重度组患者外周血PBMCs中ROG mRNA表达水平明显高于健康对照组人群、轻度组
和中度组患者,差异均有统计学意义（P<0.05）。而轻度组、中度组患者和健康对照组比较差异均无统计学意义（P>0.05）。慢性
乙型肝炎中度组和重度组患者外周血PBMCs中GATA3 mRNA表达水平明显高于健康对照组人群和轻度组患者,差异均具有
统计学意义（P<0.05）;而轻度组和健康对照、中度组患者和重度组比较差异均无统计学意义（P>0.05）。慢性乙型肝炎轻度、中
度组和重度组患者T-bet/GATA3比值明显高于健康对照组人群,差异均具有统计学意义（P<0.05）;但3组之间比较差异无统计
学意义（P>0.05）。ROG表达水平与GATA3和T-bet/GATA3比值均无相关性（P>0.05）。结论ROG、GATA3和T-bet 在慢性乙
型肝炎患者外周血PBMCs中表达水平上调,并参与疾病的发生和疾病进展。ROG在纠正和维持Th1/Th2的新平衡状态过程中
起重要作用。
     

紧张型头痛患者导水管平面脑脊液流动相位对比法磁共振成像研究

目的：研究紧张型头痛患者导水管平面脑脊液流动特点。方法：紧张型头痛患者17例，正常对照者26例，
在导水管平面应用相位对比法脑脊液磁共振流动分析序列进行扫描，扫描数据应用脑脊液流动分析软件进行定性观
察和定量测量。结果：头痛组与对照组导水管平面脑脊液均呈与心脏博动相关的双向节律性流动。对照组脑脊液流
动曲线平滑“U”型25例、波浪型1例；头痛组脑脊液流动曲线平滑“U”型11例，波浪型6例 (P<0.05)。对照组与头
痛组导水管平面头侧方向脑脊液流量分别为(0.235±0.157)，(0.133±0.106) mL/s (P<0.05)，流速分别为(6.023±2.654)，
(3.479±2.364) cm/s (P<0.05)；足侧方向脑脊液流量分别为(-0.358±0.201)，(-0.190±0.141) mL/s (P<0.05)，流速分别为
(-8.263±3.020)，(-4.788±2.862) cm/s (P<0.05)。结论：头痛组导水管平面脑脊液流动曲线、头侧及足侧方向脑脊液平
均流量、流速与对照组比较均有明显差异，相位对比法磁共振成像显示慢性紧张型头痛患者脑脊液流动异常。     

成纤维细胞激活蛋白在大鼠烫伤创面修复过程中的动态表达

目的观测成纤维细胞激活蛋白（FAP）在大鼠不同深度烫伤创面修复过程中的动态表达特点。方法制作大鼠浅Ⅱ°和深
Ⅱ°两组烫伤模型（每组42只）,每组在伤后6、12 h,1、3、7、14、21 d 各处死6只大鼠,另设6只正常大鼠皮肤作为对照。免疫组织
化学和免疫印迹技术观测创面组织FAP的含量。结果FAP在创面成纤维细胞的细胞膜和细胞质表达,尤其是创面新生血管周
围。烫伤后6 h FAP表达明显增多。浅Ⅱ°创面6 h与12 h,1 d与3 d比较,FAP的表达差异无统计学意义（P>0.05）,余各时间点
与相邻时间点比较差异均有统计学意义（P<0.05）。深Ⅱ°创面12 h 与1 d,1 d 和3 d 比较,FAP的表达差异无统计学意义（P>
0.05）,余各时间点与相邻时间点比较差异均有统计学意义（P<0.05）。两组创面FAP表达的高峰均出现在烫伤后第7天,之后逐
渐下降,至伤后第21天FAP的表达量仍高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论FAP的动态表达特点提示它在创面修
复过程中起重要作用。
     

大鼠压力负荷增加心肌肥厚模型中核仁素的表达

目的：探讨腹主动脉缩窄致压力负荷增加大鼠心肌肥厚模型中核仁素的表达情况。方法：采用体质量
180~220 g SD大鼠40只,随机分为假手术组和腹主动脉缩窄模型组,利用腹主动脉缩窄法制备压力负荷增加心肌肥
厚模型,分别于术后2周、4周观察心脏质量指数、左心室质量指数;采用RT-PCR检测心肌组织中-MHC mRNA的
表达;采用Western印迹检测心肌、脑、肾组织中核仁素的表达情况。结果：腹主动脉缩窄模型组4周以后心脏质量
指数、左心室质量指数较假手术组显著增加(P<0.01);4周以后心肌组织中-MHC mRNA的表达较假手术组显著升高
(P<0.05);2周以后心肌组织中核仁素蛋白的表达较假手术组显著升高(P<0.05),而在脑、肾组织中无明显升高。结论：
核仁素蛋白在大鼠压力负荷增加心肌肥厚模型中的表达上调,表明核仁素可能参与了压力负荷增加心肌肥厚的发生
发展。