慢病毒介导的脯氨酰寡肽酶过表达对大鼠肝星状细胞功能的影响

目的探讨携带脯氨酰寡肽酶(prolyloligopeptidase,POP)基因的慢病毒转染大鼠肝星状细胞系-T6(hepatic stellate cellsT6,HSC-T6)对其生物学功能的影响,以揭示其在肝脏炎症与纤维化发生、发展中的作用。方法采用大鼠HSC-T6作为研究对象,设计合成携带大鼠POP基因的慢病毒,转染HSC-T6;通过ELISA方法检测各组HSC内Ac-SDKP水平;Real-time-PCR法检测各组HSC内相关基因表达量变化(POP、TGF-β1、α-SMA、MCP-1、Col I);Western blotting方法检测各组HSC中相关蛋白表达变化(POP、TGF-β1、α-SMA、Smad7、p-Smad2/3、PPAR-γ);CCK-8和流式细胞术检测转染POP对HSC增殖和凋亡的影响。结果慢病毒能高效感染HSC-T6并表达有活性的POP蛋白,与正常对照组及空病毒组相比,POP慢病毒感染的细胞内Ac-SDKP明显升高,Smad7、PPAR-γ蛋白表达显著升高,而α-SMA表达显著下降;POP慢病毒感染的细胞内MCP-1及α-SMA mRNA表达显著下调;此外,POP可促进HSC-T6增殖生长,而对HSC-T6凋亡无影响。结论 POP在HSC内可能发挥抗炎、抗纤维化作用,其机制可能通过促进Smad7及PPAR-γ的表达,抑制MCP-1及α-SMA的表达而发挥作用。     

罗格列酮与秋水仙碱对肝纤维化大鼠防护作用的比较

目的:探讨罗格列酮(RGZ)对实验性大鼠肝纤维化的防护作用.方法:采用四氯化碳(CCl4)腹腔注射诱导的大鼠肝纤维化模型,70只SPF级SD大鼠随机分为7组:正常对照组、模型组、罗格列酮组、罗格列酮预防组(小、中、大剂量组各10只)秋水仙碱组.应用HE染色、Masson染色、网状纤维染色观察大鼠肝纤维化的程度;生化法检测肝功能ALT、AST、Alb等;免疫组化染色法检测肝组织过氧化物酶体增生激活受体(PPAR-γ)、转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达.结果:罗格列酮预防组大鼠与模型组相比,肝组织结构明显改善,纤维化增生程度减低,肝功能改善,肝组织内丙二醛(MDA)、TGF-β1的表达均降低;RGZ综合效果优于秋水仙碱.结论:RGZ可通过激活PPAR-γ途径,减轻氧化应激后继的肝纤维化病变,降低TGF-β1的表达,对肝纤维化有良好的防护作用.     

大鼠肝纤维化形成过程中肝组织miR-21、miR-29b、TGF-β1、Smad3及Smad7水平的动态变化

[目的]探讨大鼠肝纤维化形成过程中肝组织miR-21、miR-29b、TGF-β1、Smad3及Smad7表达水平的动态变化,研究miR-21、miR-29b与TGF-β1/Smad3、Smad7信号通路之间的关系。[方法]80只SD大鼠,随机分为2组,每组40只。其中模型组予以皮下注射60%CCl4,0.3ml/100g体重,每周2次,复制肝纤维化动物模型。于造模0、3、6、9、12周分别随机抽取8只大鼠处死,取肝组织行相关指标检测。采用qRT-PCR检测肝组织中miR-21、miR-29b及TGF-β1mRNA的相对表达量;Western blot检测肝组织中Smad3、Smad7的蛋白水平;日本MPIAS-500多媒体真彩色图像分析系统作肝内胶原定量分析。[结果]与正常组比较,随肝纤维化的形成,模型组在3、6、9、12周肝细胞内的miR-21、TGF-β1mRNA和Smad3的表达量逐渐增加;miR-29b和Smad7的表达量逐渐减少。且miR-21与Smad7呈负相关(r=-0.69,P=0.046),miR-29b与Smad3呈负相关(r=-0.53,P=0.037)。[结论]随着肝纤维化的形成,肝组织中miR-21、TGF-β1mRNA和Smad3的表达上调,miR-29b和Smad7的表达下调。miR-21与miR-29b可能分别参与调节Smad3、Smad7的表达,经TGF-β1/Smad3、Smad7信号通路共同参与肝纤维化的发生。     

酒精性肝硬化患者CPTⅠα表达水平及其临床意义

目的观察酒精性肝硬化患者的肉碱转移酶Ⅰα(CPTⅠα)表达水平,并分析其临床意义。方法选取2017年3月-2018年3月在我院接受治疗的酒精性肝硬化患者为研究对象,同时选取同期在我院接受体检的健康成年人作为对照,观察两组研究对象CPTⅠα表达水平、肝功能指标和细胞因子水平的差异,分析酒精性肝硬化患者的CPTⅠα表达水平与肝功能指标和细胞因子水平的相关性。结果酒精性肝硬化患者的CPTⅠα表达水平和胃泌素-17(G-17)水平高于对照组(t=-33.031、-18.786,P0.001);酒精性肝硬化患者的谷丙转氨酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、直接胆红素(DBil)、总胆红素(TBil)和白蛋白(Alb)水平高于对照组(t=-31.460、-15.451、-21.106、-12.646、15.799,P0.001);酒精性肝硬化患者的IL-10、IL-6、IL-12水平均高于对照组(t=-28.845、-49.270、-29.824,P0.001);酒精性肝硬化患者的CPTⅠα表达水平与ALT、AST、DBil、TBil、Alb、IL-10、IL-6、IL-12水平正相关。结论酒精性肝硬化患者的CPTⅠα表达水平较高,且与肝功能和炎性因子水平密切相关,可作为临床监测酒精性肝硬化的重要指标。     

蓝莓对大鼠肝纤维化TGF-β1/Smads信号通路的影响

目的观察蓝莓对大鼠肝纤维化的预防作用及对肝纤维化大鼠肝组织转化生长因子（transforminggrowthfactor,TGF）-β1／Smads信号通路的影响。方法45只健康sD大鼠被随机分为正常对照组、模型组、蓝莓预防组、丹芍化纤胶囊预防组、蓝莓＋丹芍化纤胶囊预防组。每组9只。用四氯化碳（cch）制作大鼠肝纤维化模型,共8周。测定肝脏指数及血清ALT、AST并进行肝组织病理学检查,采用实时荧光定量RT—PCR检测TGF-β1、Smad4mRNA的表达,免疫组织化学法检测肝脏组织TGF-β1、Smad4及Smad7蛋白的表达。结果与正常对照组比较,模型组TGF-β1及Smad4的表达增高（P〈0．05）,而Smad7的表达降低（P〈0．05）。与模型组比较,各预防组血清ALT及AST均明显降低（P〈0．05）,TGF-β1及Smad4的表达均降低（P〈0．05）,而Smad7的表达均增高（P〈0．05）。结论蓝莓对GEL所致大鼠肝纤维化有一定的预防保护作用,其机制可能与蓝莓影响TGF-β1／Smads信号转导通路,从而下调TGF-β1及smad4的表达,同时上调Smad7的表达有关。     

HBV-ECPGN患者IgG、IgA、IgM、C3d的水平变化及其临床意义

目的探讨毛细血管内增生性肾小球肾炎伴乙型肝炎病毒抗原沉积(HBV-ECPGN)患者的IgG、IgA、IgM、C3d变化及其临床意义。方法选取2015年5月至2017年2月在我院接受治疗的HBV-ECPGN患者为研究对象,选取同期在我院接受治疗的单纯肾小球肾炎患者为对照组。观察两组患者血清IgG、IgA、IgM、C3d水平的差异,比较两组患者肾功能、肝功能指标、细胞因子水平的差异,分析HBV-ECPGN患者IgG、IgA、IgM、C3d与肾功能、肝功能指标、细胞因子水平的相关性。结果观察组患者的IgG、IgA、IgM和C3d水平均高于对照组(t=-52.499、-65.068、-12.995、-35.122,P0.001);观察组患者的尿素氮(BUN)、血肌酐(sCr)水平高于对照组(t=-8.680、-4.062,P0.001),肾小球滤过率(GFR)水平低于对照组(t=3.120,P=0.001);观察组患者的ALT、AST和TBil水平高于对照组(t=-14.848、-18.508、-12.209,P0.001);观察组患者的IL-10、IL-6和IL-12水平高于对照组(t=-16.357、-16.782、-24.748,P0.001);HBV-ECPGN患者IgG、IgA、IgM、C3d水平与BUN、sCr、ALT、AST、TBil、IL-10、IL-6和IL-12水平正相关,与GFR水平负相关。结论 HBV-ECPGN患者的IgG、IgA、IgM、C3d水平较高,且与肝肾功能和细胞因子水平密切相关。     

扶脾柔肝方对肝纤维化大鼠肝脏过氧化物酶体增殖物激活受体-γ与转化生长因子-β1表达的影响

目的研究扶脾柔肝方(FRF)对肝纤维化(HF)大鼠肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)-γ与转化生长因子(TGF)-β1表达的影响及机制。方法 80只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、秋水仙碱组、扶正化瘀组、FRF大、中、小剂量组,采用四氯化碳加上乙醇复制大鼠HF模型,造模10 w成功后,给予对应药物干预,每日1次,连续4 w,正常对照组、模型组给予生理盐水。检测血清肝纤维化指标,采用苏木素-伊红(HE)染色观察HF程度,免疫组化法观察肝组织PPAR-γ的表达,q RTPCR、Western印迹方法检测肝组织PPAR-γ、TGF-β1 m RNA和蛋白表达水平。结果模型组的HF分期较其余组明显升高(P 0. 01),模型组大鼠肝纤维化指标较其余各组均明显升高(P0. 01),模型组肝组织PPAR-γm RNA和蛋白表达明显下调(P0. 01),TGF-β1表达明显升高(P0. 01);与模型组比较,各药物干预组肝组织PPAR-γm RNA和蛋白表达上调,TGF-β1 m RNA和蛋白表达下调,其中FRF大剂量组差异有统计学意义(P0. 01)。结论 FRF上调HF肝组织PPAR-γm RNA和蛋白表达水平,下调TGF-β1表达,可能是其抗HF作用机制之一。     

桃红芪术软肝煎基于TGF-β/Smad信号通路逆转上皮-间质转化抗肝纤维化作用

目的:观察桃红芪术软肝煎从(transforming growth factor beta,TGF-β)/Smad信号通路逆转上皮-间充质细胞转化(e p i t h e l i a lmesenchymal transition,EMT)抗肝纤维化的作用.方法:取对数生长期的HepG2细胞进行试验,将细胞分为7组:空白组、TGF-β诱导EMT组、TGF-β+中药[低剂量组(p e a c h stilbene low dose group,THQL)、中剂量组(peach stilbene middle dose group,THQM)、高剂量组(peach stilbene high dose group,THQH)]、TGF-β+扶正祛瘀胶囊组(Fuzheng Huayu recipe,FZHY组)、TGF-β+秋水仙碱组(c o l c h i c i n e g r o u p,QSXJ组),采用免疫荧光和Western blot方法检测E-cadherin、Vimentin、Smad2、TGF-βR1表达情况,并检测细胞上清液中的谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate transaminase,AST)、甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)表达情况.结果:诱导组AFP诱导第3天浓度明显降低,差异具有统计学意义(P0.05);用药干预后,用药组ALT、AST水平均低于模型组,差异具有统计学意义(P0.05),THQL及TRQM的ALT水平均低于FZHY和QSXJ,差异具有统计学意义(P0.05),THQM及THQH的AST水平均低于FZHY和QSXJ,差异具有统计学意义(P0.05);桃红芪术软肝煎可以改善HepG2细胞被诱导发生EMT的形态,其中THQM组和THQH组形态改变较为明显;桃红芪术软肝煎可以上调E-cadherin表达,下调Smad2、TGF-βR1、Vimentin表达.结论:桃红芪术软肝煎可以通过作用于TGF-β/Smad信号通路逆转上皮-间质转化,从而起到抗肝纤维化的作用.     

还原型谷胱甘肽治疗老年急性有机磷中毒的效果及对肝功能的保护作用

目的探讨还原型谷胱甘肽(GSH)在急性有机磷农药中毒(AOPP)治疗效果及对肝功能的保护作用。方法老年AOPP患者74例随机分为两组,对照组给予阿托品配伍解磷定,观察组在此基础上加还原型GSH。结果观察组治疗总有效率(92.50%)明显高于对照组(67.65%)(χ~2=7.40,P=0.007);观察组治疗7 d后谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)和谷氨酰转肽酶(γ-GT)明显低于入院时(P0.05),观察组治疗7 d后ALT、AST和γ-GT明显低于对照组(P0.05);观察组血中白细胞(WBC)(t=4.005,P0.001)、肿瘤坏死因子(TNF)-α(t=6.542,P0.001)、白细胞介素(IL)-6(t=2.580,P=0.012)及IL-18(t=3.353,P=0.001)水平明显低于对照组(P0.05);观察组血清中IL-18与ALT(r=0.332,P=0.036)、γ-GT(r=0.395,P=0.012)及WBC(t=0.573,P=0.001)均呈现显著的正相关。结论还原型GSH对AOPP治疗效果较好,可以有效降低有机磷农药对肝脏的损伤和炎症反应。     

肝内信号肽酶复合物表达情况与慢性乙型肝炎临床特征的相关性

目的本研究探索信号肽酶复合物(SPC)在HBeAg(+)慢性乙型肝炎及HBeAg(-)慢性乙肝炎(CHB)患者肝脏中的表达是否存在区别,并结合两类患者肝组织病理改变(炎症、纤维化)、HBV DNA水平、血清HBeAg水平、肝功能损害水平等指标,期望为研究SPC与CHB发展、转归之间的关系提供一些实验室依据。方法选HBeAg(+)患者30例为A组,HBeAg(-)患者30例为B组。采集患者的性别、年龄数据;检查两组患者的肝功能(ALT、AST、TBIL)、血清HBV-DNA定量、血清HBeAg定量;对两组患者行肝穿刺病理活检,确定其炎症程度、纤维化程度;并对肝组织切片行SPC免疫组化染色,根据Shimizu标准作SPC染色积分统计,以了解SPC在肝内的表达。进行统计学分析对比两组患者上述数据的差异。结果 A组肝组织中SPC表达程度、炎症程度、HBV-DNA水平、血清e抗原滴度、ALT水平、AST水平均较B组高,差异有统计学意义(P0.05)。而纤维化程度、年龄则较B组低,差异有统计学意义(P0.05)。两组在性别和TBIL升高幅度上差异无统计学意义(P0.05)。使用Spearman分析,发现SPC积分与HBeAg滴度呈正相关(r=0.704,P0.01);与HBV-DNA呈正相关(r=0.571,P0.01);与ALT呈正相关(r=0.587,P0.01);与AST呈正相关(r=0.511,P0.01);与TBIL呈负相关(r=-0.289,P=0.25);与炎症程度呈正相关(r=0.421,P0.01);与纤维化程度呈负相关(r=0.655,P0.01)。结论 SPC在肝组织中的表达定量与血清HBeAg滴度呈正相关,并与ALT/AST升高幅度、肝组织病理改变、血清病毒载量、e抗原滴度等相关。     

姜黄素对乙型病毒性肝炎模型大鼠转化生长因子-β1、肿瘤坏死因子-α表达水平的影响

目的探讨姜黄素(Cur)对乙型病毒性肝炎(乙肝)大鼠转化生长因子(TGF)-β1、肿瘤坏死因子(TNF)-α表达水平的影响。方法采用健康SD大鼠尾静脉感染乙型肝炎病毒制备乙肝模型。将60只模型大鼠随机分模型组和Cur组,分别每日灌服生理盐水和20 mg/kg Cur,体积为5 ml。另取30只正常SD大鼠灌服生理盐水作对照组。分析各组造模8 w后的肝功能相关指标[丙氨酸转移酶(ALT)、天门冬氨酸转移酶(AST)、血清总胆红素(TBIL)和直接胆红素(DBIL)]及肝纤维化相关指标[透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)和Ⅲ型前胶原(PCⅢ)]水平,连续观察各组造模2、4、6、8 w的血清TGF-β1、TNF-α表达水平。结果与对照组相比,模型组的ALT、AST、TBIL和DBIL水平及HA、PCⅢ和LN水平均升高,且血清TGF-β1、TNF-α均升高,差异均有统计学意义(P0.05);Cur组的ALT、AST、TBIL、DBIL、HA、PCⅢ、LN、TGF-β1和TNF-α水平均低于模型组,但仍高于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论 Cur可改善乙肝大鼠的肝功能损伤及肝纤维化过程,可能与持续降低TGF-β1、TNF-α水平有关。     

肝豆扶木汤对TX小鼠肝纤维化TGF-β_1/Smad信号通路的影响

目的观察肝豆扶木汤(GDFMT)对TX小鼠肝纤维化转化生长因子-β1(TGF-β_1)/Smad信号通路的影响,探讨其抗肝纤维化的作用机制。方法将24只雄性TX小鼠随机分为模型组、青霉胺组、GDFMT组,另设正常对照组。采用竞争性放免分析法检测血清肝纤维化透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)、Ⅳ型胶原(C-Ⅳ)含量,免疫组化法观察肝组织TGF-β_1、Smad2和Smad7蛋白的表达。结果血清肝纤维化指标结果:与正常对照组比较,模型组血清肝纤维化HA、LN、PC-Ⅲ、C-Ⅳ含量均明显升高(P0.01);与模型组比较,青霉胺组和GDFMT组血清肝纤维化HA、LN、PC-Ⅲ、C-Ⅳ含量均降低(P0.05或P0.01);与青霉胺组比较,GDFMT组血清肝纤维化HA、LN、PC-Ⅲ、C-Ⅳ含量均降低(P0.05)。免疫组化法观察结果:与正常对照组比较,模型组TGF-β_1和Smad2蛋白表达明显升高,Smad7蛋白表达明显降低(P0.01);与模型组比较,青霉胺组和GDFMT组TGF-β_1和Smad2蛋白表达明显降低(P0.05),Smad7蛋白表达明显升高(P0.01);与青霉胺组比较,GDFMT组TGF-β_1和Smad2蛋白表达明显降低(P0.05),Smad7蛋白表达明显升高(P0.05)。结论 GDFMT可以能降低TX小鼠肝纤维化血清学指标,具有良好的抗肝纤维化的作用,其作用机制可能是抑制TGF-β_1和Smad2蛋白的表达,上调Smad7蛋白的表达。     

蒙药清肝九味散治疗酒精性肝纤维化的效果观察

目的观察蒙药清肝九味散对酒精性肝纤维化患者影像学指标的改善情况,探讨清肝九味散治疗肝纤维化的疗效。方法收集2015年10月-2017年1月期间内蒙古通辽市科尔沁区第一人民医院消化内科病房及门诊就诊的酒精性肝纤维化患者104例,随机分为试验组(n=52)和对照组(n=52)。实验组给予蒙药清肝九味散,对照组给予还原型谷胱甘肽片。收集患者治疗前、后的肝功能指标、肝脾超声检查结果及Fibro Scan检测的肝硬度值(LSM)。符合正态分布的计量资料组间比较采用独立样本t检验,组内比较采用配对样本t检验;非正态分布的计量资料组间比较采用Wilcoxon秩和检验。结果 2组患者临床症状及体征均有不同程度改善,试验组与对照组患者治疗前后ALT、AST、GGT、LSM水平比较差异均有统计学意义(试验组:Z值分别为-3.09、-7.19、-8.27,t=7.13,P值分别0.002、0.001、0.001、0.001;对照组:Z值分别为-3.28、-4.60、-5.06,t=8.54,P值分别为0.001、0.001、0.001、0.001);治疗后试验组与对照组AST、GGT水平比较差异均有统计学意义(Z值分别为-2.02、-2.15,P值分别为0.04、0.03);试验组与对照组患者治疗前后肝右叶斜径、门静脉内径、门静脉速度、脾厚度、脾静脉内径比较差异均有统计学意义(试验组:t值分别为6.48、11.02、2.20、3.30、5.30,P值分别为0.001、0.001、0.030、0.001、0.001;对照组:t值分别为3.51、6.31、2.68、3.06、4.71,P值分别为0.01、0.001、0.01、0.001、0.001);治疗后2组间肝右叶斜径、门静脉内径比较差异均有统计学(t值分别为3.96、3.53,P值分别为0.02、0.01)。结论蒙药清肝九味散治疗酒精性肝纤维化具有较好的疗效,能够有效改善酒精性肝纤维化患者LSM和腹部彩超等影像学相关指标。     

慢性乙型肝炎患者血清及肝组织中IL-18和TNF-α的表达及临床意义

目的:检测HBV感染慢性乙型肝炎患者血清与肝组织中的IL-18与TNF-α水平并分析其与ALT的相关性,探讨IL-18与TNF-α在该病的表达情况。方法:HBV感染患者60例,分成肝功能异常组(n=30),肝功能正常组(n=30);30例健康体检者作为对照组。使用酶联免疫吸附法(ELISA)测定受试者血清中IL-18、INF-α水平,使用全自动生化分析仪测定ALT水平,采用免疫组织化学法(sp)检测HBV感染患者肝组织中的IL-18、TNF-α表达情况,并探讨HBV感染慢性乙型肝炎患者血清与肝组织中IL-18、TNF-α与ALT的相关性。结果:IL-18、TNF-α在肝功能异常组与肝功能正常组的肝组织中均可见表达,且肝功能异常组IL-18、TNF-α的表达均高于对照组(P0.05)。肝功能异常组血清IL-18、TNF-α与ALT水平均高于对照组、肝功能正常组(尸0.05);肝功能正常组血清IL-18、TNF-α与ALT水平均高于对照组(尸0.05)。肝功能异常组血清中IL-18和TNF-α水平与ALT水平呈正相关(分别为r=0.607,P0.05;r=0.574,P0.05)。结论:细胞因子IL-18与TNF-α在慢性乙型肝炎患者肝功能异常时比肝功能正常时,无论是血清水平还是肝脏组织中的表达均要高。提示其参与了肝细胞炎性损伤的过程,可用于临床病情的评估和预后的判断。     

肝纤维化大鼠肝组织中瘦素和转化生长因子-β1/Smad信号通路的动态变化

目的 观察实验性大鼠肝纤维化形成过程中,肝组织瘦素、转化生长因子(TGF)-β1水平的动态变化,探讨瘦素在肝纤维化发生过程中可能的作用及机制.方法 以38只SD大鼠为实验对象,于实验开始时处死6只作为正常对照组,剩余32只皮下注射60%四氯化碳复制肝纤维化模型,分别于3、6、9、12周各处死8只.RT-PCR检测大鼠肝组织中瘦素、瘦素功能性受体(Ob-Rb)、TGF-β1及其受体(TGF-βR Ⅱ)的mRNA表达水平.Western印迹法榆测肝组织中Smad3、Smad7蛋白水平.免疫组化法检测肝组织中瘦素、Ob-Rb及TGF-β1的表达和定位.结果 正常肝组织中有少量瘦素、Ob-Rb、TGF-β1,TGF-βRⅡ的mRNA表达(分别为0.43±0.45、0,57±0.21、0.19±0.12、0.30±0.22),随着肝纤维化的逐渐形成,其表达量逐渐递增,至12周时分别为1.27±0.19、1.70±0.29、1.70±1.00、2.14±1.02,差异有统计学意义(P＜0.05).随着肝纤维化的形成,Smad3表达量逐渐递增,由0周时的0.44±0.24增至12周时的1.75±1.05,差异有统计学意义(P＜0.05);Smad7表达量逐渐减少,由0周时的1.35±0.12降至12周时的0.74±1.21,差异有统计学意义(P＜0.05).随着肝纤维化的形成,瘦素、Ob-Rb及TGF-β1表达水平增高(P＜0.01).结论 随着肝纤维化的形成,肝脏中瘦素、Ob-Rb基因及蛋白表达增加,有促肝纤维化作用.其机制可能与瘦素通过直接或间接上调TGF-61、TGF-βR Ⅱ及Smad3表达、下调Smad7表达有关.     

罗格列酮影响肝纤维化大鼠转化生长因子β1(TGF-β1)表达的机制

目的探讨罗格列酮对大鼠肝纤维化的保护作用和对转化生长因子β1（TGF-β1）mRNA表达影响的机制。方法检测肝组织病理学改变；生化法检测肝功能指标；免疫组织化学技术检测TGF-β1、PPARγ在肝内的表达及定位；采用RT-PCR检测肝组织TGF-β1、PPAR-γ mRNA的表达。结果与模型组大鼠比较，干预组肝组织结构变化明显改善，纤维化增生程度减低，肝功能改善，大鼠肝内TGF-β1表达有所降低，并且大剂量组干预效果最为显著。结论罗格列酮能有效减轻肝纤维化大鼠的肝脏损伤及纤维化程度，其机制可能与PPAR-γ直接或间接抑制肝内TGF-β1 mRNA的表达有关。     

五灵胶囊对肝纤维化大鼠肝组织TGF-β／Smad及Ras／ERK信号通路蛋白的影响

目的探讨五灵胶囊对肝纤维化大鼠肝组织TGF-βSmad及Ras／ERK信号通路蛋白的影响,阐述五灵胶囊治疗肝纤维化的作用机制。方法SD大鼠以高脂低蛋白饲料饲养,饮用10％乙醇,并腹腔注射4．1mol／LCCl4制备肝纤维化模型,给予五灵胶囊进行治疗1个月。Westernblot检测肝组织中α-SMA、Ras、ERK、p-ERK、Smad2／3、p-Smad2／3、Smad7、TJ3RI、T13R1I;RT-PCR法检测肝组织中COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、TGF-β1mRNA;酶法测定血清ALT、AST;ELISA测定血清COL-Ⅰ、COL-Ⅲ含量;肝组织masson和HE染色进行肝细胞变性程度与胶原纤维增生程度评分。结果五灵胶囊可显著降低血清AST、ALT水平,下调肝组织中Rasp21、α-SMA、p-ERK、T13RI蛋白与TGF-β1、COL-I、COL-Ⅲ mRNA表达（P〈0．01或0．05）,增加p-Smad2／3蛋白表达（P〈0．01）,使肝细胞变性程度与胶原纤维增生程度显著降低。结论五灵胶囊治疗肝纤维化的作用机制是显著降低肝纤维化大鼠组织肝细胞变性和胶原纤维增生的程度、抑制TGF-β／Smad及Ras／ERK信号通路TJ3RI、Rasp21、p-ERK蛋白表达及TGF-β1过量分泌。     

小鼠日本血吸虫性肝纤维化组织TGF-β1及Smads的表达

目的:探讨小鼠日本血吸虫病纤维化肝组织中转化生长因子(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、Smad2/3、Smad4和Smad7的表达和肝纤维化的发病机制.方法:清洁级6-8 wk龄ICR小鼠80只,雌雄各半,随机分为模型组和正常对照组,用血吸虫尾蚴腹部贴附法制成动物模型,正常组未予处理.感染后wk 4、6、8和12末分批处死2组小鼠且称肝脾质量,取部分肝做病理学观察,HE染色和猩红染色,制作组织芯片,免疫组化检测TGF-β1、Smad2/3、Smad4和Smad7在各细的表达状况.结果:与正常组相比,模型组小鼠肝脾质量和肝指数均高(肝,12 wk:2.99±0.28 g vs 1.83±0.13 g;脾,12 wk:0.87±0.15 g vs 0.14±0.02g;肝指数,12 wk:0.09±0.01 vs 0.04±0.00;均P＜0.01),TGF-β1和Smad2/3表达也均高于正常对照组(TGF-β1.12 wk:0.105±0.008 vs 0.024±0.002;Smad2/3.12 wk:0.094±0.009 vs 0.003±0.001,均P＜0.01),以上指数分别与肝纤维化程度呈正相关(r=0.635,0.482,0.646,0.347,0.662;均P<0.01);Smad4表达高于对照组且随着纤维化的发展表达量在逐渐下降(4wk:0.075±0.011 vs 0.023±0.006.6 wk:0.043±0.008 vs 0.010±0.002.8 wk:0.038±0.009 vs 0.003±0.002.12 wk:0.028±0.004 vs 0.013±0.006;均P＜0.01).Smad7仅8 wk表达增强.结论:TGF-β1和Smad2/3表达增强在肝纤维化的发生中起重要作用,Smad4可能主要在纤维化的早中期发挥效应.     

荔枝核总黄酮对大鼠肝纤维化Smad3、Smad4及TIMP-1信号表达的影响

目的:观察荔枝核总黄酮(total flavone from Litchi chinensis Sonn,TFL)对二甲基亚硝胺(dimethylnitrosamine,DMN)诱导的肝纤维化大鼠肝脏组Smads信号通路中关键信号传导分子Smad3、Smad4及基质金属蛋白酶抑制剂-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1TIMP-1)表达水平的变化,探讨TFL抗肝纤维化的作用机制.方法:90只S D大鼠随机平均分成正常对照组、模型组、秋水仙碱组不同浓度的TFL[200、100、50 mg/(kg·d)].用DMN腹腔注射诱导大鼠肝纤维化模型,造模同时灌胃给药.1次/d,共给6 wk,于实验第6周后处死大鼠,取血清测定谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate transaminase,AST)的含量.取留取肝脏同一部位行Masson染色观察大鼠病理改变及肝纤维化程度;免疫组织化学法检测Smad3、Smad4、TIMP-1表达量,实时荧光定量PCR检测(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)检测Smad3、Smad4、TIMP-1m RNA表达量.结果:与模型组比较,TFL能降低血清ALT、AST含量,Masson染色病理显示TFL能显著减轻大鼠肝纤维化程度;与空白对照组比较,模型组大鼠的肝纤维化程度明显增加,肝组织Smad3、Smad4及TIMP-1的表达明显增强(P0.05);与模型组比较,TFL各剂量组和秋水仙碱组肝组织Smad3、Smad4、TIMP-1的表达不同程度的降低(P0.05).结论:T F L可减轻实验性大鼠肝损伤及改善肝纤维化程度,其机制与降低S m a d3、Smad4及TIMP-1的表达有密切关系,可能与改善肝功能、抑制肝细胞变性坏死,从而抑制胶原蛋白的合成和沉积减少细胞外基质有关.     

老年甲亢性肝损害患者炎症因子的变化及意义

目的探讨老年甲亢性肝损害患者炎症因子的变化及意义。方法选取40例老年甲亢性肝损害患者(老年组),40例中青年甲亢性肝损害患者(中青年组),40例健康体检老年人组(正常组)作为研究对象。采用化学发光法测定血浆中降钙素原(PCT)水平,放射免疫法测定IL-2、IL-6,ELISA法测定血清TNF-α,电化学发光法测定血清FT3、FT4,全自动生化分析仪测定血清ALT、AST、ALP、γ-GT和TBIL。结果老年组及中青年组IL-2、IL-6、TNF-α、FT3、FT4、ALT、AST、ALP、γ-GT、TBIL水平均高于正常组(P0.05或P0.01),PCT水平较正常组比较偏高但差异无统计学意义(P0.05);老年组IL-2、TNF-α、FT3、FT4水平和中青年组比较无显著差异(P0.05),但老年组IL-6、ALT、AST、ALP水平高于中青年组(P0.05);血清IL-6与TNF-α、ALT、AST、ALP呈正相关(r=0.45,0.32,0.39,0.28,P0.05)。结论老年甲亢易伴发更严重的肝功能损害,IL-6、TNF-α水平升高可能是老年甲亢性肝损害发生的重要机制。