miR-122和miR-144-3p在肾细胞癌中的表达及临床意义

目的 探讨m iR-122和m iR-144-3p在肾细胞癌组织中的表达及其临床意义.方法 使用实时荧光定量PCR技术检测46例肾细胞癌患者癌组织与癌旁组织中miR-122和miR-144-3p的表达情况,比较二者在癌组织与癌旁组织中的差异.以肾细胞癌组织中miR-122、miR-144-3p的表达水平平均值作为分界,...     

miR-145在胃癌中的表达及其临床意义

目的探讨miR-145在胃癌中的表达及其临床意义。方法选取2011年2月至2012年6月江苏省中医院就诊的67例胃癌患者,采用荧光实时定量聚合酶链反应(PCR)技术检测胃癌患者miR-145的表达情况,取肿瘤边缘外5cm处的非癌胃黏膜作为对照,比较miR-145在正常组织及胃癌组织中的表达差异及与胃癌临床病理参数的相关性。结果 54例(80.60%)胃癌患者胃癌组织miR-145表达明显低于正常组织,miR-145的表达在不同性别、年龄及TNM分期患者间的差异无统计学意义(P>0.05),但在不同组织学分级及淋巴结转移情况患者间的差异有统计学意义(P<0.01)。结论 miR-145在胃癌中呈低表达,可能与胃癌的发生、发展密切相关,可成为胃癌诊断及预后判断的指标。     

miR-452在肾透明细胞癌中的异常表达研究

目的检测miR-452在肾透明细胞癌组织中的表达差异,探讨miR-452在肾癌发生过程中的作用。方法提取20例肾透明细胞癌及其相应癌旁组织的总RNAs,通过逆转录(RT)方法获得cDNA后,采用实时定量PCR(RT-qPCR)技术检测组织中miR-452的表达差异,并分析其与肾癌患者临床病理特征的关系。结果与相应的癌旁组织相比,miR-452在肾透明细胞癌组织中显著高表达,癌组织较癌旁组织升高约4.69倍,但其异常表达与肾癌患者临床病理特征并无显著相关性。结论 miR-452在肾透明细胞癌组织中明显高表达,其可能作为重要的致癌基因参与了肾癌的发生与发展过程,可能成为潜在的肾癌标志物,为肾癌的早期诊断及治疗提供新靶点。     

miR-543调控肾透明细胞癌细胞增殖和侵袭的机制分析

目的探讨与分析miR-543调控肾透明细胞癌(CCRCC)细胞增殖和侵袭的机制。方法 CCRCC细胞系ACHN随机分为三组:空白组、阴性对照(NC)组与miR-543组,NC组与miR-543组分别转染照NC与miR-543模拟剂,空白组不进行转染。MTT检测细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Transwell检测细胞转移与侵袭比率,Western blot检测蛋白表达水平。结果转染后24 h与48 h,与NC组与空白组相比,miR-543组的细胞增殖抑制率显著增加(P0. 05),细胞凋亡率显著增加(P 0. 05),细胞转移与侵袭相对数显著降低(P 0. 05),SDF-1、CXCR7蛋白相对表达量显著降低(P 0. 05),NC组与空白组比较差异无统计学意义(P 0. 05)。且miR-543对细胞增殖抑制率、细胞凋亡率、细胞转移与侵袭、SDF-1和CXCR7蛋白相对表达量的影响均不具有时间依赖性。结论 miR-543能抑制调控肾透明细胞癌细胞增殖和侵袭,促进细胞凋亡,且不具有时间依赖性,其作用机制可能与抑制SDF-1/CXCR7表达有关。     

肾透明细胞癌和肾嫌色细胞癌差异性表达CD256/CD257及其潜在意义

目的通过检测CD256/CD257在肾癌组织中的表达特点,分析CD256/CD257表达与肾癌临床病理分期、分级以及病理分型的关系。方法依据2002年AJCC肾癌TNM分期标准对90例肾癌组织进行病理分析。采用免疫组化技术(S-P法)和荧光定量PCR技术检测CD256、CD257在组织病理切片的表达情况。与临床病理特征结合进行统计分析。结果研究发现CD256、CD257在肾癌的表达与肾癌分期和分级没有显著相关性,但是CD256在肾透明细胞癌肿瘤组织中有高表达,在肾嫌色细胞癌肿瘤组织中无表达,而在两类肿瘤的癌旁组织中均为弱表达,表达于肿瘤细胞或肾小管上皮细胞的胞质/胞膜;CD257在肾透明细胞癌肿瘤组织中不表达,在肾嫌色细胞癌肿瘤细胞中等至高表达,而在两类肿瘤的癌旁组织中均为中等至高表达,表达于肿瘤细胞或肾小管上皮细胞的胞质/胞膜。CD256/CD257mRNA水平与蛋白水平一致。CD256、CD257在肾透明细胞癌和肾嫌色细胞癌呈现的差异性表达具有统计学意义(P<0.05)。结论 CD256、CD257在肾透明细胞癌和肾嫌色细胞癌的差异性表达可能与不同类型肾细胞癌的发生与分化有着紧密联系,值得深入研究。     

miR-122在肾癌中的异常表达及其临床意义

目的探讨肾癌中miR-122的表达特点及临床意义。方法基于前期平行测序的工作基础,对51例肾癌及相应癌旁组织、15例肾癌患者血清及15例健康对照者血清中miR-122的表达水平进行RT-qPCR检测,分析miR-122的表达高低与肾癌患者临床病理特征之间的相关性;并通过在肾癌细胞系(786-O和ACHN)中转染miR-122inhibitors,观察转染后细胞的增殖改变,初步探讨miR-122的生物学功能。结果相对于癌旁组织,肾癌组织中miR-122表达水平明显升高,上调率为82.35%;相比于健康对照者血清,肾癌患者血清中的miR-122表达亦明显升高,上调率为100%。肾癌组织中miR-122的表达水平与肾癌患者的临床病理特征无显著相关性(P0.05)。在肾癌细胞系(786-O和ACHN)中转染miR-122inhibitors后,肿瘤细胞的增殖受到抑制。结论 miR-122可能参与到肾癌的病理过程,研究肾癌中miR-122的表达特点及生物学功能可能对早期诊断及治疗肾癌具有潜在的临床价值。     

肾透明细胞癌患者血清miR-362的异常表达及意义

目的检测肾透明细胞癌患者血清miR-362水平,探讨其作为肾透明细胞癌分子诊断指标的可能性。方法采集107例肾透明细胞癌患者治疗前血清(其中TNMⅠ期76例、Ⅱ期16例、Ⅲ期2例、Ⅳ期8例及未知者5例),用实时荧光定量RTPCR法检测各组miR-362含量,并以107例年龄、性别匹配的健康人作为对照组。结果 miR-362在肾透明细胞癌患者血清中的相对含量为0.81(0.65,1.15),与健康对照组0.62(0.46,0.78)相比,表达水平明显升高(U=3 122,P0.01)。Ⅰ期、Ⅱ期和Ⅳ期患者血清miR-362的相对含量分别为0.76(0.66,0.95)、0.76(0.66,0.95)和0.69(0.37,1.03),均明显高于健康对照组,差异有统计学意义(U分别为2 197、474和98,P均0.01)。miR-362诊断肾透明细胞癌的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.727(95%CI:0.661~0.793)。当cut off值为0.696时,miR-362诊断肾透明细胞癌的敏感性和特异性分别为64.5%和63.6%。进一步对TNMⅠ期患者进行分析,结果其AUCROC为0.715(95%CI:0.641~0.790)。当cut off值为0.696时,miR-362诊断TNMⅠ期患者的敏感性和特异性分别为65.3%和63.6%。结论早期肾透明细胞癌患者血清中miR-362水平升高,具有一定的早期诊断潜能。     

miR-221-5p、miR-126在肾细胞癌中的相对表达水平及其对预后的预测价值

目的 探讨微小核糖核酸(miR)-221-5p、miR-126在肾细胞癌(RCC)中的相对表达水平,并分析二者对RCC预后的预测价值。方法 选取该院2016年7月至2018年7月收治的134例RCC患者作为研究对象,取患者癌旁组织(距离病灶约3 cm)进行对照,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测RCC组织、癌旁组织中miR-221-5p、miR-126相对表达水平,并分析二者与病理特征的关系。随访3年,绘制Kaplan-Meier生存曲线,采用log-rank χ²检验分析不同miR-221-5p、miR-126表达水平患者预后的差异性。绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析miR-221-5p、miR-126单独及联合检测评估RCC预后的价值,并计算曲线下面积(AUC)。结果 RCC组织中miR-221-5p相对表达水平高于癌旁组织,miR-126相对表达水平低于癌旁组织,差异均有统计学意义(P<0.05)。miR-221-5p高表达组和miR-126低表达组肿瘤最大径≥4 cm、Fuhrman分级为Ⅲ～Ⅳ级、有淋巴结转移、美国癌症联合会分期为Ⅲ/Ⅳ期占比...     

miR-145、miR-146a在慢性阻塞性肺疾病合并冠心病患者血清中的表达及临床意义

摘要：目的?探究慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并冠心病(CHD)患者血清miR-145、miR-146a的表达水平及临床意义。方法?收集2014年至2019年本院就诊的COPD稳定期患者96例，以COPD稳定期合并CHD患者38例作为COPD+CHD组，COPD稳定期未合并CHD患者58例作为COPD组，另选取同期在本院体检健康者45例作为健康人对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组血清miR-145、miR-146a的表达水平，并分析其与C反应蛋白(CRP)、纤维蛋白水平、肺功能、血气指标及Gensini评分关系。结果?健康人对照组、COPD组、COPD+CHD组血清miR-145(1.01±0.32 vs 0.73±0.25 vs 0.47±0.14)、miR-146a(0.99±0.28 vs 0.81±0.21 vs 0.45±0.13)的表达水平依次降低，差异有统计学意义(F分别为47.429、64.532，P均<0.05)。COPD+CHD组患者血清miR-145、miR-146a水平分别与CRP、纤维蛋白原水平及Gensini评分呈负相关(r分别为-0.398/-0.384、-0.403/-0.395、-0.407/-0.413，P均<0.05)，而与肺功能指标FEV1/FVC、血气指标PaO2水平呈正相关(r分别为0.421/0.405、0.357/0.362，P均<0.05)。此外，高CRP水平、低PaO2水平、低FEV1/FVC水平、高Gensini评分、低miR-145水平、低miR-146a水平是影响COPD并发CHD的独立危险因素(P均<0.05)。血清miR-145、miR-146a联合诊断COPD合并CHD的曲线下面积(AUCROC)为0.887(95%CI:0.821～9.520)，明显高于miR-145、miR-146a单独诊断。结论?血清miR-145及miR-146a表达下调与COPD患者肺功能降低、病情加重有关，是患者并发CHD的独立危险因素。     

Caspase-3和E-cadherin在肾透明细胞癌中的表达及其临床意义

目的 探讨Caspase-3和E-cadherin在肾透明细胞癌中的表达及其临床意义.方法 75例肾透明细胞癌标本、癌旁标本以及18例正常肾组织采用免疫组化检测Caspase-3和E-cadherin的表达情况.结果 Caspace-3在肾透明细胞癌的阳性表达明显低于正常肾组织和癌旁组织(P＜0.01),随着肾细胞癌病理分级的升高,Caspase-3的阳性表达率降低,临床分期的升高,Caspase-3的阳性表达率增高,但差异无统计学意义(P＞0.05).E-cadherin在肾透明细胞癌的阳性表达明显低于正常肾组织和癌旁组织(P＜0.05或P＜0.01),在癌旁组织表达低于正常肾组织(P＜0.05),其表达与病理分级和临床分期相关(P＜0.05).二者在有淋巴结转移组中的表达低于无转移组(P＜0.05).二者表达呈正相关(r=0.4352,P=0.0002).结论 Caspase-3及E-cadherin在肾透明细胞癌中的异常表达,可能在肾细胞癌的生长、分化中发挥重要作用,可以考虑作为判定肾癌生物学行为的辅助诊断指标.     

肾癌中miR-210的异常表达及意义

目的探讨miR-210在肾细胞癌发生过程中的作用。方法利用荧光定量PCR技术检测miR-210在52例不同阶段肾细胞癌及其癌旁组织中的表达量,并分析其与肾癌患者病理分期、年龄、性别的相关性。结果与相应癌旁组织相比,miR-210在肾癌组织中表达量显著上调(P=0.00),平均上调倍数为7倍。但miR-210上调倍数与肾细胞癌癌的病理分型、分期、年龄、性别均无显著相关。结论 miR-210在肾癌组织中表达明显上调,对肾癌的诊断和治疗具有潜在的意义。     

Vimentin在肾癌组织中的表达及临床意义

目的探讨波形蛋白（Vimentin）在肾癌组织中的表达与病理分期、分级及预后的相关性。方法采用免疫组织化学方法检测38例肾癌组织中Vimentin的表达。结果 Vimentin表达阳性率,在肾癌组织中为78.9%,在癌旁组织中为5%,两组比较,差异有统计学意义（P〈0.001）;Vimentin在肾癌组织中的表达,是预后不良的指标,随病理分期、分级的增高,有升高趋势,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 Vimentin在肾癌组织中的高表达有助于明确诊断,可作为肾癌分期、分级及预后判断的指标,对肾癌术后辅助治疗,可能有一定的参考价值。     

肾细胞癌患者血清miR-135b-5p表达变化的价值及功能

摘要:目的检测肾细胞癌(renalcellcarcinoma,RCC)患者血清微小核糖核酸(microRNA,miRNA)-135b-5p的表达水平变化，探究其临床应用价值及其参与RCC发生、发展的作用机制。方法采用 荧光定量逆转录PCR( qRT-PCR)检测2022年1月至 6月于东部战区总医院泌尿外科就诊且经病理学确诊的60例RCC患者及60例健康人对照血清miR-135b-5p的表达水平变化,评估其对于RCC患者的临床辅助筛查价值。体外培养RCC细胞系(ACHNCaki-1)和正常肾小管上皮细胞系(HK-2),qRT-PCR检测细胞及细胞分泌的细胞外囊泡( extracellular vesicles ,EVs)中miR-135b-5p 的表达水平;进一步应用生物信息学分析、EVs与细胞共培养、细胞功能等方法探究EVs miR-135b-5p 参与RCC的初步作用分子机制。结果RCC 患者血清miR-135b-5p水平[ 6.932(5.524, 9.964)]与健康人对照[5.534(4.373, 6.555)]比较显著升高(U= 1 042,P<0.01)。血清miR-135b-5p水平对于RCC筛查的ROC曲线下面积( AUCR0C)为0. 711( 95% CI:O. 619~ 0.802)。ACHN和Caki-1 细胞中miR-135b-5p水平较正常HK-2 细胞中的表达倍数显著明显升高(分别升高了7.821 倍和1.919倍。P值分别为0.000 3和0.000 1);同时,ACHN和Caki-1 EVs中miR-135b-5p 水平较HK-2 EVs中的表达倍数亦显著增高(分别升高了3.783 倍和2.627倍。P值分别为0.0001和0.0004)。生物信息学分析结合文献调研显示,miR-135b-5p可能通过调控潜在靶基因血管生成素样蛋白4( angiopoietin-like protein 4 ,ANGPTL4)的表达而参与血管生成。RCC EVs与人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)共培养结果显示,RCC细胞分泌的富含miR-135b-5p EVs在与HUVEC温育的不同时间点(4h 6h和8 h)均可明显促进内皮细胞成环,差异具有统计学意义(P值分别为0.011 2 ,0.005 7,0.001 7)。Western blot结果显示，mimics 组ANGPTL4蛋白的表达水平为( 0.616+0.003) ,较NC组( 1.00+0.05)显著降低,差异具有统计学意义(t=12.44,P=0.000 2)。进一步分析发现与NC组相比, HUVEC中miR-135b-5p过表达组在连续观察时间内(2h、4h、6h和8 h)的成环数明显增加(P值分别为0.000 1 ,0.0001,0.0032,0.0095)。结论RCC患者血清、细胞系及细胞分泌的EVsmiR-135b-5p表达水平均显著升高，血清miR-135b-5p水平测定对于RCC具有较高的临床辅助筛查价值,RCC细胞分泌EVsmiR-135b-5p可通过调控ANGPTL4的表达,参与血管生成。     

蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子在肾透明细胞癌中的表达及其意义

目的探讨蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子（CIP2A）在肾透明细胞癌中的表达情况及其与临床病理指标的关系。方法利用免疫组织化学方法检测35例肾透明细胞癌组织和对应癌旁组织（距离肿瘤≥0.5cm）中CIP2A的表达水平,并将癌组织CIP2A表达水平与临床病理指标进行比较。结果肾透明细胞癌组织CIP2A表达的阳性率为82.9%（29/35）,明显高于癌旁组织的阳性率22.9%（8/35）,差异有统计学意义（P〈0.001）;pT3/pT4期肾透明细胞癌CIP2A表达水平高于pT1/pT2期（P=0.007）,有远处转移者CIP2A表达水平高于无远处转移者（P=0.006）。CIP2A表达水平和年龄、性别及淋巴结转移无关。结论 CIP2A在肾透明细胞癌中呈高表达,并与肿瘤的局部侵袭和远处转移密切相关。     

TYMP基因在肾透明细胞癌中的表达及临床意义

目的:阐述胸苷磷酸化酶(thymidine phosphorylase,TYMP)基因在肾透明细胞癌(clear cell renal cellcarcinoma,CCRCC)中的表达及临床意义。方法:利用Oncomine及GEPIA数据库分析T YMP基因在正常肾组织及CCRCC组织中的表达差异;通过GEPIA数据库进行TYMP基因表达程度与病理分期的相关性分析;利用OncoLnc数据库对TYMP基因的表达水平与CCRCC患者生存率作Kaplan-Meier生存分析和log-rank检验;经MethHC数据库分析CCRCC组织和正常肾组织中T YMP启动子区DNA甲基化水平的差异;利用String-DB数据库分析与TYMP蛋白相互作用的蛋白;最后通过The Human Protein Atlas数据库分析TYMP蛋白在正常肾组织及CCRCC组织中的表达差异。结果:在mRNA及蛋白水平上,TYMP在CCRCC组织较正常肾组织中显著高表达,且TYMP mRNA表达水平越高,CCRCC病理分期越高;与TYMP基因低表达组相比,TYMP基因高表达的CCRCC患者总体生存率明显降低;CCRCC组织中TYMP启动子区DNA甲基化水平较正常组织甲基化水平显著降低;同时,与TYMP蛋白相关的蛋白有TK2,NT5M,CDA,UPRT,NT5C,UPP2,UMPS,TK1,UPP1和DPYD等,主要参与嘧啶核苷的合成、分解、代谢,转移戊糖基、蛋白质同源聚合等生物过程。结论:大样本数据挖掘能迅速获取CCRCC组织中TYMP基因表达的相关信息,为深入研究TYMP基因在CCRCC发生发展中的作用机制及预后奠定基础。     

肾透明细胞癌患者血清细胞外囊泡中miR-99b-3p水平检测的临床价值

目的 探讨肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)患者血清细胞外囊泡(extracellular vesicles,EVs)中miR-99b-3p的水平变化,评估其作为ccRCC非侵入性辅助诊断分子标志物的临床价值.方法 收集2016年12月至2018年10月东部战区总...     

miR-145抑制肺腺癌细胞A549中MMP2的表达

目的探讨miR-145对肺腺癌细胞系A549中MMP2表达的影响及其机制。方法脂质体2000介导miR-145模拟物转染肺腺癌细胞系A549,实时荧光定量PCR检测miR-145表达水平;western blot检测MMP2与β-catenin蛋白的表达水平。以wnt/β-catenin通路激活剂Li Cl与miR-145模拟物共同作用A549细胞,western blot检测MMP2和β-catenin蛋白的表达水平。结果实时荧光定量PCR结果表明,miR-145在模拟物组、对照组及空白组间的差异有统计学意义(F=296.30,P<0.05)。western blot结果显示,与对照组相比,miR-145转染后MMP2和胞核β-catenin蛋白的表达水平均明显下调(q分别为8.98,26.59,P均<0.05)。共处理实验结果表明,激活wnt/β-catenin通路能拮抗miR-145对MMP2表达的抑制作用(q=49.47,P<0.05)。结论 miR-145通过抑制wnt/β-catenin通路下调肺腺癌细胞A549中MMP2的表达。