基质金属蛋白酶组织抑制因子mRNA及蛋白在肝硬化组织中的定位

目的：了解基质金属蛋白酶组织抑制因子TIMP－1和TIMP－2蛋白及mRNA在肝硬化组织中的表达和分布状态。方法：以抗TIMP－1和TIMP－2单克隆抗体及TIMP－1和TIMP－2 cDNA探针为试剂,采用免疫组织化学法和原位杂交技术检测肝硬化组织中TIMP－1和TIMP－2蛋白和mRNA,结果：40例肝硬化患者肝组织中TIMP－1和TIMP－2蛋白以及mRNA表达的阳性率为100％,TIMP－1阳性的组织TIMP－2亦为阳性,且TIMP－1强度高于TIMP－2,而正常肝组织未见阳性表达,TIMP－1和TIMP－2蛋白及mRNA表达的阳性信号均位于肝细胞胞浆中,细胞核中无表达,结论：肝硬化患者的肝细胞中存在TIMP－1和TIMP－2蛋白及mRNA的表达,其表达强度与肝组织病理改变呈正相关,这可能是通过抑制基质金属蛋白酶（MMPs)的活性,使得细胞外基质（ECM）降解减少而引起肝硬化。     

基质金属蛋白酶2、9及基质金属蛋白酶组织抑制因子1在肺间质纤维化实验中的

细胞外基质 (ＥＣＭ)合成和降解失衡是引起ＥＣＭ积聚导致肺间质纤维化的重要病理生理因素。基质金属蛋白酶(ＭＭＰｓ)及其抑制物 (ＴＩＭＰｓ)是调节ＥＣＭ降解的重要体系。我们以博莱霉素诱导的肺间质纤维化大鼠为模型 ,观察肺间质纤维化发生过程中基质金属蛋白酶 2、9(ＭＭＰ 2、ＭＭＰ 9)及基质金属蛋白酶组织抑制因子 1(ＴＩＭＰ 1)基因表达的变化 ,探讨ＭＭＰ 2、9和ＴＩＭＰ 1在肺间质纤维化发病中的作用。材料与方法　 (1)动物模型制备 :雌性Ｗｉｓｔａｒ大鼠 6 0只(沈阳军区医学专科学校动物实验中心提供 ) ,体重 (2 15±2 0 )ｇ,…     

基质金属蛋白酶及其抑制因子

在细胞外基质(extracellular matrix,ECM)降解过程中起主导作用的是基质金属蛋白酶(matrix metalloprotelnaseMMPs)~[1],随着分子基因学的进步,现已知Ca~(2+)、Zn~(z+)依整MMP至少有14种,它们是具有相似基因结构的MMP家族,与组织的修复、纤维化、癌的浸润转移密切相关。表1,图1,显示的是各种类     

基质金属蛋白酶及其组织抑制因子在肝脏疾病中的表达

基质金属蛋白酶(MMPs)是一组锌离子依赖酶，而组织金属蛋白酶抑制因子(TIMPs)是一组具有抑制MMPs的活性多肽。MMPs与TIMPs在正常状态下处于动态平衡，凋节肝内细胞外基质(ECM)的生成和降解，维持肝内ECM质和量的稳定。病理状态下，各种原因引起的MMPs、TIMPs失衡与肝炎、肝纤维化、肝硬化等肝病的发生发展有密切关系.     

基质金属蛋白酶2、9及基质金属蛋白酶组织抑制因子1在肺间质纤维化实验中的表达

细胞外基质(ECM)合成和降解失衡是引起ECM积聚导致肺间质纤维化的重要病理生理因素。基质金属蛋白酶（MMPs）及其抑制物（TIMPs）是调节ECM降解的重要体系。我们以博莱霉素诱导的肺间质纤维化大鼠为模型,观察肺间质纤维化发生过程中基质金属蛋白酶2、9（MMP-2、 MMP-9）及基质金属蛋白酶组织抑制因子1（TIMP-1）基因表达的变化,探讨MMP-2、9和TIMP-1在肺间质纤维化发病中的作用。 材料与方法 (1) 动物模型制备：雌性Wistar大鼠60只(沈阳军区医学专科学校动物实验中心提供),体重(215±20)g,随机分为：模型组、对照组,每组各30只。模型组吸入乙醚麻醉后,颈前暴露气管,一次性气管内注入0.4%博莱霉素A5(天津华北制药厂)生理盐水注射液（5 mg/kg）,制成动物模型。然后分别于第1、3、7、14、28天处死6只大鼠,心脏取血。对照组同样方法注入等量生理盐水,同样天数各处死6只。(2)酶谱分析：根据刘煜等［1］介绍的方法,对标本进行MMPs酶谱分析。(3) Northern Blot：取5 μg大鼠肺组织总RNA,行RT-PCR,引物序列为：MMP-2：5′-AGTGGGACA AGAATCAGATCACAT-3′（上游）, 5′-TCGGTGGTACAGCTGT TGTAAGAG(下游);MMP-9：5′-AAGCAGACATTGTCAT CCAGTTTG-3（上游）,5′-GACAGAAACCCCACTTCTTGTCAG-3′(下游);TIMP-1：5′-CTCATCGCGGGCCGTTTAAG-3（上游）,5′-GAAGGCTTCGGGTCATCGAG-3′(下游),geneclean纯化回收PCR产物制备探针,随机引物法行α-32P-dCTP标记。20 μg RNA 样品经甲醛变性电泳、转入尼龙膜、65 ℃预杂交1～3 h、65 ℃杂交18 h,常规洗膜及放射自显影。     

基质金属蛋白酶组织抑制因子与肝纤维化

基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMPs)广泛分布于体内多种组织中,可以调节基质金属蛋白酶活性,对肝纤维化的形成和逆转具有重要作用。在TIMPs家族中,TIMP-1和TIMP-2与肝纤维化的关系最为密切。     

基质金属蛋白酶及其组织抑制因子与糖尿病足

创面修复是一个复杂而有序的生物学过程,许多重要过程均受细胞因子和蛋白酶的调节。研究表明糖尿病患者足部伤口中基质金属蛋白酶(MMPs)表达增加,其抑制因子基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMPs)表达减少,导致伤口难以愈合。MMPs与TIMPs的比例可能比它们的绝对浓度更重要,是预测伤口愈合的重要指标,与伤口愈合时间呈负相关。局部应用强力霉素、一些含蛋白酶抑制剂的敷料以及促有丝分裂的牛血清提取物等均可通过抑制MMPs促进创面愈合。     

氟化钠对大鼠长骨组织基质金属蛋白酶-13和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1 mRNA表达的影响

目的 观察亚慢性氟中毒大鼠长骨组织中基质金属蛋白酶-13(MMP-13)和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)mRNA的表达和变化,分析亚慢性氟中毒骨组织基质降解的分子机制.方法 将雄性Wistar大鼠按体质量随机分成两组,氟化钠组每日饮用含150mg/L氟离子(F-)的水溶液.对照组饮用自来水,共饲养24周,每4周处死一批动物,每组8只.透射电镜观察骨组织中破骨细胞的超微结构病变特点.RT-PCR法检测骨组织中MMP-13 mRNA和TIMP-1 mRNA的表达情况.结果 电镜观察可见破骨细胞溶酶体数量减少并伴有溶酶体酶的合成减少.第4、8、12、16、20、24周时,氟化钠组大鼠骨组织MMP-13相对表达量(1.87±0.67、1.87±0.75、1.90±0.73、1.93±0.86、1.88±0.61、1184±0.53)明显高于对照组(1.24±0.39、1.19±0.27、1.07±0.22、1.15±0.17、1.17±0.18、1.20±0.62),两组比较差异均有统计学意义(t值分别为2.29、2.41、3.07、2.52、3.15、2.22,P<0.05);氟化钠组大鼠骨组织TIMP條相对表达量(1.89±0.77、1.70±0.85、1.61±0.82、1.81±0.84、1.70±0.74、2.06±0.96)亦明显高于对照组(1.07±0.39、0.87±0.49、0.71±0.48、0.99±0.43、0.95±0.46、0.89±0.57),两组比较差异均有统计学意义(t值分别为2.69、2.19、2.68、2.46、2.43、2.96,P<0.05).结论 高剂量氟可以持续诱导MMP-13 mRNA和TIMP-1 mRNA的表达,参与氟中毒骨转换过程.     

肝纤维化基质金属蛋白酶-26/基质金属蛋白酶抑制因子-1 mRNA的表达

基质金属蛋白酶（MMPs）是一组能降解细胞外基质（ECM）的酶，该家族的一些酶是迄今为止已发现的惟一能分解纤维类胶原的酶类，MMP-26是MMPs家族的一个新成员，又称endometase或matrilysin-2，MMP-26可能参与一系列与组织重建有关的事件。基质金属蛋白酶组织抑制因子（TIMP）是一组能特异性抑制MMPs活性的低分子蛋白质，     

基质金属蛋白酶及其组织抑制因子和肝纤维化

肝纤维化是各种病因引起的慢性肝病的共同病理归宿。慢性肝损伤过程中,肝星状细胞(HSC)在炎症和各种细     

金属蛋白酶组织抑制因子在肝纤维化研究中的价值

金属蛋白酶组织抑制因子 (TIMPs)是近年发现的一组抑制基质金属蛋白酶 (MMPs)活性的糖蛋白。TIMPs家族由 4个成员组成 (TIMP 1、2、3、4) ,而肝脏中仅有TIMP 1和TIMP 2存在。研究表明[1] ,TIMPs与MMPs在正常状态下处于动态平衡 ,调节肝内细胞外基质 (ECM )的生成和降解 ,两者与ECM以及其他细胞因子相互调节、相互作用 ,构成了复杂的调控网络 ,从而为维持肝脏内ECM质和量的稳定发挥作用 ,而在病理状态下 ,各种原因和机制使肝脏内TIMPs/MMPs的失衡引起ECM质和量的变化 ,导致肝纤维化的发生和发展。一、TIMPs在肝纤维化…     

基质金属蛋白酶及基质金属蛋白酶组织抑制因子在支气管哮喘发病中作用及早期预防性吸入糖皮质激素的干预研究

目的 探讨基质金属蛋白酶(MMP)及基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)与支气管哮喘(简称哮喘)气道重塑的相关性以及预防性吸入激素对气道重塑的干预作用.方法 按随机数字表法将72只清洁级雄性Wistar大鼠分为对照组、哮喘组(卵原蛋白)、干预组(布地奈德+卵原蛋白),每组大鼠24只,分别于雾化激发后第7天、第28天和第35天处死每组大鼠中8只进行气道形态学观察,并采用病理图像分析系统测量大鼠的气道形态学参数.采用免疫组织化学测定肺组织MMP-9、TIMP-1的表达及ELISA方法 检测支气管肺泡灌洗液的上清中MMP-9及TIMP-1的含量.结果 ①与相应对照组相比,28d、35 d哮喘组内管壁厚度、平滑肌厚度、胶原沉积明显增厚(P＜0.05或＜0.01);经治疗后28 d、35 d组平滑肌厚度与相应哮喘组相比差异无统计学意义;而胶原沉积在治疗28 d、35 d组与相应哮喘组相比明显减少(P＜0.01);内管壁厚度治疗35 d组与相应哮喘组相比差异开始下降,但仍高于对照组(P值均＜0.05).②哮喘组支气管肺泡灌洗液中MMP-9及MMP-9/TIMP-1在初始阶段表达上调,在后期下降(P＜0.01);TIMP-1在初始阶段表达上调,在后期亦有下降的趋势,但差异无统计学意义;应用糖皮质激素干预后,在早期MMP-9、TIMP-1及两者比值明显低于哮喘组(P＜0.05),在晚期哮喘组与治疗组无明显差异.结论 哮喘发生、发展过程中,存在MMP-9/TIMP-1的表达失衡,糖皮质激素可能通过调节MMP-9/TIMP-1的平衡,阻抑胶原沉积而干预气道重塑的发生.     

皂荚提取物对肝癌大鼠基质金属蛋白酶抑制因子3/基质金属蛋白酶蛋白的影响

目的:观察皂荚提取物对肝癌大鼠TIMP3/MMPs蛋白的影响。方法:以皂荚提取物低、中、高剂量作用于肝癌模型大鼠,应用Western blot检测肝癌大鼠组织中TIMP3、MMP2及MMP9蛋白的表达水平。结果:皂荚提取物低、中、高剂量作用后的大鼠肝癌组织病理形态学得到明显改善,并且使组织中TIMP-3蛋白表达上调(均P0.01),抑制MMP2(低剂量组P0.05;中、高剂量组P0.01)及MMP9(低剂量组P0.05;中、高剂量组P0.01)蛋白的表达。结论:皂荚提取物具有显著的抗肝癌作用,且该效应与影响TIMP3/MMPs蛋白有关,高剂量皂荚提取物效果最为显著。     

血清基质金属蛋白酶及其组织抑制因子与肝纤维化

在正常肝脏纤维组织中存在着细胞外基质(ECM)的合成与降解的动态平衡。肝纤维化时纤维结缔组织的形成，是由于各种不同致病因子导致ECM合成与降解的失衡所致。基质金属蛋白酶(MMPs)是ECM降解的主要酶系，而其组织抑制因子(TIMPs)通过抑制MMPs，阻止ECM的降解，从而形成或促进肝纤维化。     

脑膜瘤与基质金属蛋白酶及其组织抑制因子的关系

脑膜瘤是常见的颅内肿瘤,虽然绝大多数脑膜瘤组织学表现良性,却常可见其侵犯硬膜、颅骨和脑组织.随着对脑膜瘤生物学行为的研究深入,基质金属蛋白酶(MMPs)和其组织抑制因子(TIMPs)在脑膜瘤中所起的作用也逐渐引起了人们的注意.本文就MMPs和TIMPs与脑膜瘤关系的研究现状作一综述.     

转化生长因子-1和基质金属蛋白酶抑制因子-1在肝硬化组织中的表达及其临床意义

目的了解转化生长因子-1（TGFβ1）和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP1）在肝硬化组织中的表达和分布状态。方法采用免疫组化法（S—P）。检测10例对照肝组织,57例肝硬化患者肝组织中TGFβ1、TIMP1的表达。结果57例肝硬化患者肝组织中TGFβ1、TIMP1蛋白表达的阳性率分别为90．38％、100％,而正常肝组织未见阳性表达,差异有统计学意义（P〈0．01）。TGFβ1、TIMP1表达的阳性信号均位于肝细胞胞浆中,细胞核中无表达。结论（1）肝硬化患者肝细胞中存在TGFβ1、TIMP1的表达,其表达强度与肝组织病理改变相关。提示TGFβ1与TIMP1的表达与肝纤维化活动状态密切相关,在肝纤维化的形成和发展中具有重要意义。（2）检测TGFβ1、TIMP1的表达可对肝硬化病变从分子水平进行评估,也可作为早期诊断及临床治疗和判断预后的分子病理学指标。     

丙型肝炎病毒核心蛋白上调基质金属蛋白酶组织抑制因子-1的表达

目的研究丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白对基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)-1基因表达的影响,以探讨HCV的致肝纤维化机制。方法聚合酶链反应(PCR)扩增TIMP-1的启动子DNA片段,克隆至真核报告载体pCAT3-basic中,构建pCAT3-TIMP-1p报告载体;将该质粒转染人肝癌细胞系HepG2细胞,以酶链免疫吸附试验(ELISA)检测氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性;将构建的pCAT3-TIMP-1p与HCV核心蛋白真核表达载体PcDNA3.1(-)-HCVcore共转染入人肝星状细胞系LX-2细胞,同时平行设立pCAT3-basic阴性对照组、pCAT3-control阳性对照组、pCAT3-TIMP-1p单独转染组,用ELISA法检测各组CAT的表达活性。结果成功获得TIMP-1基因启动子DNA片段,构建的pCAT3-TIMP-1p具有转录活性,与PcDNA3.1(-)-HCVcore共转染LX-2细胞后,ELISA法检测结果显示pCAT3-TIMP-1p吸光度值为0.833±0.040,同期单独转染LX-2细胞的pCAT3-TIMP-1p吸光度值为0.677±0.049,方差分析各组差异有统计学意义(F=132.401,P<0.05)。结论 HCV核心蛋白通过上调TIMP-1启动子的活性,促进TIMP-1基因的表达。     

胃肠安方对胃癌基质金属蛋白酶9及基质金属蛋白酶抑制因子1/2蛋白表达的影响

[目的]观察胃肠安方对人胃癌裸鼠原位移植瘤转移的抑制作用及其对基质金属蛋白酶9 (matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制因子(matrix metalloproteinases tissue inhibitor,TIMP)-1、TIMP-2蛋白表达的影响.[方法]建立裸小鼠胃原位癌模型,分为胃肠安方组及模型组,观察裸小鼠胃癌种植后肿瘤转移灶情况以及与肿瘤生长与转移密切相关的MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的影响.[结果]胃肠安方能够抑制胃癌生长与转移,与模型组比较,差异具有统计学意义(P＜0.05).胃肠安方组MMP-9蛋白阳性表达明显弱于模型组,TIMP-1及TIMP-2蛋白阳性表达明显强于模型组.[结论]胃肠安方具有抑制人胃癌裸鼠原位移植瘤转移作用,其抑制胃癌转移的部分作用机制与抑制MMP-9蛋白表达及上调TIMP-1、TIMP-2蛋白表达有关.     

血清金属基质蛋白酶及其抑制因子检测在肝病中的应用

1　血清金属基质蛋白酶及其抑制因子分类来源及作用底物血清金属基质蛋白酶类 (ＭＭＰｓ)是一类含有锌原子的、其活性依赖于钙离子的蛋白酶 ,可以降解ＥＣＭ中的主要生物大分子。按作用底物不同主要分为五大类 (1)间质胶原酶　 196 2年发现可分为成纤维细胞型 (又称 ,间质胶原酶类ＭＭＰ - 1)、中性粒细胞型 (ＭＭＰ - 8) ,ＭＭＰ - 1分子量 5 5ｋＤ ,来源于结缔组织细胞 (ＣＴ)肝内ＨＳＣ、ＨＣ、ＫＣ均有分泌。分解底物为胶原蛋白 (Ⅲ >Ⅰ >Ⅱ ) ;抗ＭＭＰ - 8抗体可识别ＭＭＰ - 1,而抗ＭＭＰ - 1抗体则不能识别ＭＭＰ - 8。胶原酶以前体…     

益心方对血管再狭窄小鼠基质金属蛋白酶与组织型基质金属蛋白酶抑制因子表达的影响

目的 探讨再狭窄血管中基质金属蛋白酶(MMPs)与组织型基质金属蛋白酶抑制因子(TIMPs)的表达及益心方对其的影响.方法 制备大鼠血管再狭窄模型,采用不同浓度的益心方药物浓度干预,观察颈总动脉形态学改变,免疫组化法检测颈总动脉MMPs与TIMPs的表达.结果 假手术组血管内膜和中膜处均可见少量散在分布的MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2的阳性染色表达颗粒,以MMP-2表达最为明显;与假手术组比较,球囊导管内皮剥脱术后,模型组血管中MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2表达均显著增加(P<0.05或P<0.01),主要在新生内膜中表达,胞浆和基质内出现大量特异性的阳性颗粒;与模型组比较,益心方治疗低、高剂量组能明显抑制血管壁MMP-2、MMP-9的表达(P<0.05或P<0.01),其特异性的阳性颗粒与模型组相比显著减少,对TIMP-1和TIMP-2的表达也有减少的趋势.结论 益心方抑制血管再狭窄,其机制与抑制血管平滑肌细胞MMPs与TIMPs表达有关.