香菇多糖对荷瘤小鼠肝组织的干扰素和超氧化物歧化酶mRNA表达

目的：研究香菇多糖（LNT）对荷瘤小鼠肝组织中干扰素（IFN）和超氧化物歧化酶（SOD）基因（mRNA）转录的影响。方法：生长正常的C57BL／6小鼠，左腋皮下接种S180细胞，接种48h后，分荷瘤组，荷瘤加低LNT组（浓度为5mg/kg)，荷瘤加高LNT组（浓度为30mg/kg)及对照组，每组4只，连续给药6d后，进行断颈处死，剖取瘤体称理记录和提取鼠肝组织总mRNA斑点杂交。结果：LNT对S180肉瘤的生长有较明显的抑制作用，而5mg/kg和30mg/kg两种剂量的LNT均能提高IFN和SDOmRNA的表达量，且前者作用稍强于后者（P＜0．05）。结论：LNT能提高荷瘤小鼠肝组织IFN和SOD的mRNA表达。     

microRNA194过表达抑制荷瘤小鼠肝癌细胞生长的实验研究

目的探讨micro RNA194过表达对肝癌细胞生长的抑制作用及其具体作用机制。方法通过细胞转染法构建过表达micro RNA194的肝癌细胞Hep3B,并将其接种于Balb/c裸鼠建立荷瘤小鼠。30只Balb/c裸鼠被随机分配为micro RNA194过表达组15只和对照组15只,采用荧光定量PCR法检测Hep3B细胞和荷瘤小鼠肝癌组织micro RNA194水平,采用荧光定量PCR法和Western blot法分别检测肿瘤组织胰岛素样生长因子1受体(IGF1R)水平及其蛋白表达情况。结果 Hep3B细胞和荷瘤小鼠肝癌组织micro RNA194 m RNA水平分别为(2.68±0.33)和(2.33±0.38),均显著高于对照组【分别为(1.00±0.12)和(1.00±0.16),P0.01】;在肝癌细胞接种第11 d、16 d和21 d时,micro RNA194过表达组小鼠肝肿瘤体积分别为(0.25±0.08)、(0.31±0.11)和(0.46±0.10)mm3,均显著小于对照组【分别为(0.56±0.13)、(0.73±0.20)和(0.95±0.22)mm3,P0.01】;在肝癌细胞接种第21 d时,micro RNA194过表达组小鼠肝肿瘤质量为(0.85±0.19)g,显著轻于对照组【(1.43±0.27)g,P0.01】;micro RNA194过表达组小鼠肝肿瘤IGF1R m RNA水平和其蛋白表达量分别为(0.78±0.12)和(0.81±0.17),均显著低于对照组【分别为(1.0±0.16)和(1.0±0.11),P0.01】。结论 micro RNA194过表达可以抑制肝癌细胞生长,有可能是通过抑制了下游靶基因IGF1R的表达而发挥作用的。     

吴茱萸碱对S180荷瘤小鼠抑瘤作用及血常规的影响

目的研究吴茱萸碱对小鼠肉瘤S180细胞肿瘤模型生长的抑制作用及对外周血常规的影响。方法小鼠左后肢皮下接种S180。接种后将小鼠按体重随机分为3组:模型组(0.5%羧甲基纤维素钠,剂量10 ml/kg)、阳性对照组(给予环磷酰胺,剂量50 mg/kg)、吴茱萸碱组(给予吴茱萸碱,剂量50 mg/kg)。每组小鼠10只。给药结束后,观察抑瘤率,检测血常规。结果吴茱萸碱对荷瘤小鼠的肿瘤生长具有较明显的抑制作用,50 mg/kg吴茱萸碱可使抑瘤率达到43.6%左右。吴茱萸碱(剂量50 mg/kg)能升高S180荷瘤小鼠外周血的白细胞(P<0.05),红细胞和血小板的影响不大。结论吴茱萸碱对小鼠在体肿瘤S180具有一定的抑制作用,吴茱萸碱作为抗肿瘤药有较大的开发潜力;吴茱萸碱能升高S180荷瘤小鼠外周血的白细胞数量,可能是其抗肿瘤的作用机制之一。     

低剂量博莱霉素A5对荷瘤小鼠实验性化疗效果的影响

目的　探讨不同时间给予低剂量博莱霉素 A5(BLMA5)诱导的适应性反应对常规化疗效果的影响及其机制。方法　本文以皮下接种S1 80肉瘤的昆明种小鼠为模型 ,荷瘤小鼠化疗前不同间隔时间 (2 h、6 h、1 2 h)预先给予低剂量 BLMA5(0 .0 8mg/ kg,D1 )处理 ,观察肿瘤生长的动态和测定肝组织自由基生物学活性。结果　荷瘤小鼠化疗前预先给予 D1 处理可使肿瘤生长减慢 ,以间隔时间为 6 h组抑瘤效果最好 (P<0 .0 5～0 .0 0 1 ) ,并且可提高肝脏 SOD活性 (P<0 .0 5) ,GSH- Px活性也有提高趋势 ,且降低了 MDA含量 (P<0 .0 1 )。结论　常规化疗前 6 h给予低剂量BL MA5可提高化疗效果 ,其机制可能与改善机体抗氧化能力及提高自由基产物的清除能力有关。     

二甲双胍联合奥沙利铂抗肿瘤作用

目的:探究二甲双胍联合奥沙利铂对结肠癌移植瘤小鼠的抗肿瘤作用。方法:32只BALB/C雄性小鼠左前肢腋下接种c26小鼠结肠腺癌细胞,随机分为恶病质组、二甲双胍组、奥沙利铂组以及联合组,另外8只小鼠作为正常组。奥沙利铂组小鼠每周1次腹腔注射奥沙利铂注射液0.01 mg/g,同时每日灭菌蒸馏水0.1 m L/g灌胃;二甲双胍组小鼠每日给予二甲双胍0.2 mg/g灌胃,同时每周1次腹腔注射生理盐水0.02 m L/g;联合组小鼠每日给予二甲双胍0.2 mg/g灌胃,同时每周1次腹腔注射奥沙利铂注射液0.01 mg/g;正常组和恶病质组小鼠每日灭菌蒸馏水0.1 m L/g灌胃,同时每周1次腹腔注射生理盐水0.02 m L/g。每日检测小鼠体重、肿瘤大小、自发性活动、精神毛发等。连续给药42 d后,颈椎脱臼法处死小鼠,解剖分离并称重右下肢腓肠肌组织,ELISA法检测腓肠肌组织炎症因子水平,HE染色观察腓肠肌形态。结果:荷瘤小鼠体重、腓肠肌质量、腓肠肌横切面积较正常组均明显降低(均P0.05),奥沙利铂组和联合组小鼠肿瘤重量及体积均明显减少,且联合组减少最为明显(均P0.05),各荷瘤小鼠腓肠肌组织中IL-6及TNF-α水平较正常组均明显升高,其中二甲双胍组及联合组较恶病质组则明显下降(均P0.05)。结论:二甲双胍联合奥沙利铂能够抑制肿瘤生长,且能延缓癌性恶液质的发生。     

蛇床子素对四氯化碳诱导小鼠脂质过氧化反应的影响

目的:研究蛇床子素(Ost)对四氯化碳(CCl_4)诱导小鼠脂质过氧反应的影响.方法:40只昆明种小鼠随机平均分为4组:正常对照组、模型组、Ost治疗1组(50 g/kg)、Ost治疗2组(100 g/kg).除对照组外,其余各组腹腔注射1 g/L CCl_4花生油溶液.16 h后分别测定血清SOD和T-AOC及肝组织MDA,NO和T-AOC.结果:与模型组相比,50 g/kg Ost显著升高肝组织NO含量(F=6.171,P=0.01);100 g/kg Ost显著降低CCl_4中毒小鼠肝组织中MDA含量(F=3.547,P=0.04),升高NO(F=3.698,P =0.009)和T-AOC(P=0.000)以及血清中提高SOD活性(F=4.797,P=0.04)和T-AOC(F= 3.103,P=0.02).结论:蛇床子素有抗脂质过氧化作用.     

性激素对老年小鼠脑中MDA、SOD活性的影响

本文采用丙二醛(MDA)—硫代巴比妥酸(TBA)显色法和核黄素一氯化硝基四氮唑蓝(NBT)法测定小鼠脑中MDA含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果表明:老年组鼠脑中MOA含量明显高于老年前期组,老年组鼠脑SOD活性显著低于老年前期组。说明脑中自由基形成随龄增多,SOD活性随龄下降。丙酸睾丸素(80μg/kg,160μg/kg)、己烯雌酚(16μg/kg,32μg/kg,64μg/kg)对老年组鼠脑MDA含量有不同程度的降低作用,对SOD活性有不同程度的增高作用。     

HO-1 mRNA在砷暴露肝损伤小鼠肝组织中的表达

目的:探讨血红素氧化酶-1 mRNA(HO-1mRNA)在砷暴露肝损伤小鼠肝组织中表达的意义.方法:40R♂小鼠被随机分成对照组和亚砷酸钠组(iAs3 组).10 mo后处死小鼠,肝功能检查血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、球蛋白(GLB);部分肝组织作HE染色观察病理变化;TRIzol-酚-氯仿一步法提取肝组织总RNA,紫外分光光度法测定总RNA及纯度,实时荧光定量PCR法测定肝组织中HO-1 mRNA的表达,以18S基因作为质控.结果:iA3 组小鼠血清ALT、AST、GLB值高于对照组(61.5±5.5 U/L V5 38.0±5.6 U/L,530.9±39.0 U/L vs 118.3±9.1 U/L.27.15±4.1g/L vs 20.9±0.6 edL,均P<0.05);肝组织病理检查有明显的炎症细胞浸润和肝细胞坏死,纤维组织增生;小鼠肝组织HO-1 mRNA基因表达在iAs3 组增高,与对照组比较有统计学意义(t=5.393,P<0.05).结论:小鼠亚砷酸钠长期暴露诱导的HO-1高表达,可能参与了肝损伤肝纤维化发生机制.     

外源性一氧化氮对旋毛虫感染小鼠抗氧化能力的影响

目的探讨外源性NO供体亚硝基铁氰化钠(SNP)对旋毛虫病小鼠肝脏、外周血中抗氧化酶活性及脂质氧化的影响。方法采用消化法分离旋毛虫肌幼虫,感染BALB/c小鼠,400条/只。42 d后,收集感染鼠及正常小鼠外周血、肝脏。设A组(感染鼠肝脏匀浆物+SNP)、B组(正常鼠肝脏匀浆物+SNP)、C组(感染鼠外周血+SNP)、D组(正常鼠外周血+SNP)。每组内设5个SNP反应终浓度,分别为0(空白对照)、2、5、10、30μmol/L,37℃反应30 min,测定各组超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及脂质氧化(MDA)含量。结果与正常鼠相比,旋毛虫感染鼠肝脏、外周血中SOD、CAT、GSH-Px活性上升,MDA含量增加,差异均有统计学意义(P均0.05);在A、B组中,10、30μmol/L SNP作用下SOD、CAT、GSH-Px活性较空白对照降低(P均0.05);与2~30μmol/L SNP反应后,MDA含量较空白对照明显升高(P均0.05)。在C、D组中,30μmol/LSNP作用下SOD、CAT、GSH-Px活性显著下降,MDA浓度升高,与空白对照比较差异均有统计学意义(P均0.01)。在2~30μmol/L浓度区间,SNP浓度与旋毛虫感染鼠肝脏、外周血中SOD、CAT、GSH-Px活性呈负相关(r肝SOD=-0.901,r肝CAT=-0.802,r肝GSH-Px=-0.847,r血SOD=-0.899,r血CAT=-0.685,r血GSH-Px=-0.635,P均0.05),与MDA含量呈正相关(r肝MDA=0.697,r血MDA=0.764,P均0.05)。结论旋毛虫感染可致小鼠肝脏、外周血中活性氧自由基产生增加,SOD、CAT、GSH-Px活性升高;外源性NO可降低旋毛虫感染小鼠SOD、CAT、GSH-Px活性,抑制小鼠的抗氧化能力。     

黄精多糖联合低剂量顺铂对小鼠H22肝癌移植瘤生长的抑制及其抗氧化损伤作用

目的观察黄精多糖(PSP)联合低剂量顺铂对小鼠H22肝癌移植瘤生长的影响及其抗氧化损伤作用,并探讨其机制。方法 72只小鼠右腋皮下注射H22肝癌细胞建立荷瘤模型,随机分为对照组、PSP小剂量组(10 g/kg)、PSP大剂量组(30 g/kg)、顺铂组(2.5 mg/kg)、PSP小剂量+顺铂组、PSP大剂量+顺铂组;末次给药24 h后处死小鼠,通过称重移植瘤的质量,计算抑瘤率;通过称重肝脏的质量,计算肝脏系数;测定肝组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)的含量;同时观察肝脏组织学结构变化。结果与对照组比较,顺铂组及PSP+顺铂组均显著降低移植瘤重(P0.05或P0.01),且随着PSP剂量增大及与顺铂合用抑瘤率逐渐提高;与对照组比较,顺铂干预后肝脏质量及肝组织匀浆中SOD水平明显降低(P0.01),而MDA含量明显升高(P0.01);与顺铂组比较,PSP联合顺铂干预后肝脏质量及肝组织匀浆中SOD水平逐渐升高(P0.05或P0.01),且MDA含量降低(P0.01)。结论黄精多糖与顺铂联合使用可明显抑制H22肝癌移植瘤的生长,并能减轻顺铂引发的肝脏氧化损伤。     

氟化物对成骨细胞OPGL mRNA和M-CSF mRNA表达的影响

目的探讨氟对成骨细胞的骨保护蛋白配体(OPGL)mRNA和巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)mRNA表达的影响.方法应用酶消化法分离小鼠乳鼠成骨细胞,取第3代成骨细胞,加入不同浓度的氟6 h,提取细胞总RNA,通过逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,观察成骨细胞分泌的OPGL和M-CSF表达的变化.结果在氟的作用下,成骨细胞的OPGL mRNA和M-CSF mRNA的表达呈上升趋势,但未达到统计学差异水平.结论氟有可能通过上调OPGL和M-CSF的表达,提高破骨细胞的骨吸收活性.     

骨肉瘤组织中XIAP mRNA、Caspase-9 mRNA的表达变化及意义

目的观察X染色体连锁凋亡抑制蛋白（XiAP）mRNA和Caspase-9 mRNA在骨肉瘤中的表达变化及其与骨肉瘤临床病理指标的联系。方法采用原位杂交技术检测51例骨肉瘤组织中XIAP mRNA和Caspase-9 mRNA,并以10例骨软骨瘤（骨良性病变）组织为对照（对照组）。结果在51例骨肉瘤中XIAPmRNA和Caspase-9 mRNA的表达水平与骨肉瘤的临床病理特征无明显关系,XIAP mRNA的阳性表达率显著高于对照组（P〈0．05）;Caspase-9 mRNA则显著低于对照组（P〈0．05）;XIAP mRNA与Caspase-9 mRNA的表达呈等级负相关（r=-0．467,P〈0．05）。结论XIAP、Caspase-9 mRNA可能与骨肉瘤的发生、发展有关。以XIAP和Caspase-9为靶点进行诱导骨肉瘤细胞凋亡的治疗,将可能成为临床提高保肢手术成功率及患者生活质量的新治疗思路。     

乳黄制剂对肝硬化模型大鼠肝组织脂多糖结合蛋白mRNA、CD14 mRNA及Toll样受体4 mRNA的影响

目的:研究乳黄制剂对肝硬化大鼠肝组织LBP(脂多糖结合蛋白)mRNA、CD14 mRNA、TLR4(Toll样受体-4)mRNA的影响.方法:SPF级雄性Wister大鼠88只随机分为6组:正常组、模型组、预防组、预防对照组、模型治疗组、模型治疗对照组.采用CCl4复合因素法制造肝硬化模型.用乳黄制剂进行预防和治疗,并与乳果糖对照药进行比较,分别检测大鼠肝组织LBP mRNA、CD14 mRNA、TLR4 mRNA的表达水平.结果:治疗组大鼠肝组织LBP mRNA、CD14 mRNA、TLR4 mRNA表达水平明显低于模型组(P＜0.05),预防组大鼠肝组织LBP mRNA、CD14 mRNA、TLR4 mRNA表达水平与正常组比较差异无显著性意义(P＞0.05).结论:乳黄制剂能有效抑制内毒素调节蛋白及其相关受体的表达,从而减少内毒素血症的发生.     

五株胰腺癌细胞株的PTCH和SMO mRNA表达

目的 研究胰腺癌细胞株SW1990、PaTu8988s、PANC-1、BxPC3、CFPAC中PTCH和SMOmRNA表达及相关关系。方法用 RT—PCR法测定5株胰腺癌细胞株和正常胰腺组织的PTCH和SMOmRNA表达。结果 正常胰腺组织无PTCH和SMOmRNA表达；胰腺癌细胞株SW1990、PaTu8988s、PANC-1、BxPC3有PTCHmRNA的表达；胰腺癌细胞株PaTu8988s、PANC-1、BxPC3有SMOmRNA表达，而SW1990无SMOmRNA表达；胰腺癌细胞株CFPAC无PTCH及SMOmRNA表达。结论 正常胰腺组织无PTCH和SMOmRNA表达；胰腺癌细胞株PTCH和SMOmRNA表达有差异，这可能与其生物学特性不同有关。     

五株胰腺癌细胞株的 PTCH 和 SMO mRNA 表达

目的 研究胰腺癌细胞株SW1990、PaTu8988s、PANC-1、BxPC3、CFPAC中PTCH和SMO mRNA表达及相关关系.方法 用RT-PCR法测定5株胰腺癌细胞株和正常胰腺组织的PTCH和 SMO mRNA表达.结果 正常胰腺组织无PTCH和SMO mRNA表达;胰腺癌细胞株SW1990、PaTu8988s、PANC-1、BxPC3有PTCH mRNA的表达;胰腺癌细胞株PaTu8988s、PANC-1、BxPC3有SMO mRNA表达,而SW1990无SMO mRNA表达;胰腺癌细胞株CFPAC无PTCH及SMO mRNA表达.结论 正常胰腺组织无PTCH和 SMO mRNA表达;胰腺癌细胞株PTCH和SMO mRNA表达有差异,这可能与其生物学特性不同有关.     

Hormone-induced increase in levels of functional mRNA and alpha-amylase mRNA in barley aleurones

Incubation of barley aleurone cells with gibberellic acid produces a progressive increase in the RNA content of the cells. The activity of poly(A)-containing RNA, measured in an in vitro wheat germ protein-synthesizing system, reaches a maximum ≈12 hr after hormone addition and declines thereafter. The structurally intact functional mRNA content in these cells, measured as poly(A)-RNA with 5′ “caps,” also shows a maximum at 12 hr and correlates with the translational capacity of poly(A)-RNA. Activation of mRNA by guanylylation or methylation after addition of gibberellic acid is ruled out. Available evidence indicates that gibberellic acid stimulates protein synthesis by increasing the synthesis of mRNA. Studies with cycloheximide suggest that the induction of synthesis of α-amylase mRNA by gibberellic acid requires protein synthesis after hormone addition.     

丹黄方对大鼠肝再生过程中PC3、c—fos、LRF—1影响的实验研究

目的：探讨丹黄方对大鼠肝切除肝再生模型中促肝细胞再生的作用机制。方法：采用肝部分切除肝再生模型，用丹黄方进行干预，通过RT-PCR、电泳凝胶等方法检测与肝再生密切相关因子PC3 mRNA、c-fos mRNA、LRF-1 mRNA的表达，观察丹黄方对肝细胞再生的影响。结果：丹黄方对肝再生模型大鼠肝组织PC3 mRNA、c-fos mRNA的表达有增强作用，与模型比较，差异有显著性意义；对肝组织LRF-1 mRNA表达的影响不显著。结论：丹黄方可能是通过增强肝组织PC3 mRNA、c-fosmRNA的表达而促进肝细胞的增殖。     

氯沙坦协同辛伐他汀对心力衰竭大鼠心室基质金属蛋白酶2、9及其组织抑制因子1、2基因表达的影响

目的 探讨心力衰竭(心衰)时心脏基质金属蛋白酶2(MMP-2)、9(MMP-9)及其组织抑制因子1(TIMP-1)、2(TIMP-2)基因表达及其与心肌纤维化的关系.方法 用降主动脉缩窄术建立心衰模型.SD大鼠随机分成6组.分别在氯沙坦5 mg/kg、辛伐他汀2 mg/kg以及两药合用(联合投药组)投药后1、3,5周动态测定左室舒张末期内径、左室收缩末期内径及左室后壁厚度、左室短轴缩短率.ELISA法检测B型利钠肽浓度.Masson染色观察心肌胶原情况.RT-PCR法检测心室MMP-2、MMP-9和TIMP-1、TIMP-2基因表达.结果 投药后5周各组胶原容积分数比较差异有统计学意义(P<0.01),投药各组较降主动脉缩窄(模型)组下降(P<0.05),尤其联合投药组下降更明显(P<0.01).MMP-2 mRNA和MMP-9 mBNA在投药各组与模型组差异无统计学意义(P>0.05);但TIMP-1 mRNA和TIMP-2 mRNA在投药各组明显低于模型组(P<0.01),联合投药组降低更明显(P<0.05).结论 心衰模型大鼠MMP-2 mRNA、MMP-9 mRNA和TIMP-1 mRNA、TIMP-2 mRNA表达升高可能是压力负荷大鼠心肌胶原含量增加的分子机制之一,氯沙坦、辛伐他汀以及联合投药均能下调TIMP-1 mRNA、TIMP-2 mRNA水平,缓解心肌重构,尤其联合投药组效果更明显.