血管紧张素Ⅱ受体1反义寡核苷酸转染心肌细胞

目的探讨血管紧张素Ⅱ1型受体反义寡核苷酸转染心肌细胞的可行性.方法应用显微荧光技术观察反义寡核苷酸在原代培养的心肌细胞内的转染效率,及其在细胞内的时相性分布; MTT法检测转染复合物对心肌细胞活力的影响.结果寡核苷酸单独转染时,30分钟开始进入心肌细胞;60分钟进入细胞核,转染效率达峰值为30%;120分钟部分被降解;4小时后大部分降解.脂质体的介导能显著提高反义寡核苷酸对心肌细胞的转染效率,60分钟达峰值为60%,并且能改变寡核苷酸在细胞内的分布,4小时后仍能使寡核苷酸稳定于细胞核内;MTT法证实转染复合物对心肌细胞的活力无显著性影响.结论反义寡核苷酸能成功的转染心肌细胞;脂质体的包裹能提高反义寡核苷酸转染效率、延长其作用时间,并改变寡核苷酸在细胞内的分布,使其长时间的稳定在细胞核内.本研究浓度的转染复合物对心肌细胞无明显的细胞毒性.     

乙酰肝素酶反义寡核苷酸对人胃癌细胞株SGC 7901表达bFGF的抑制作用

目的利用人胃癌细胞株SGC7901细胞,探讨乙酰肝素酶反义寡核苷酸对人胃癌细胞株SGC7901中表达碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的影响。方法采用脂质体介导乙酰肝素酶反义寡核苷酸转染人胃癌细胞株SGC7901细胞,采用免疫细胞化学法观察细胞内bFGF的变化。结果脂质体介导转染乙酰肝素酶反义寡核苷酸后,SGC 7901胃癌细胞内乙酰肝素酶mRNA表达下降,bF-GF阳性表达率由转染前的72．23％降至40．25％。转染后细胞bFGF表达明显减少。结论转染乙酰肝素酶反义寡核苷酸可以有效抑制胃癌细胞bFGF的表达。     

阳离子磷酸胆碱聚合物MPC_(30)-DEA_(70)载MiRNA-195反义寡核苷酸转染心肌细胞的研究

目的:探讨新型阳离子磷酸胆碱聚合物MPC30-DEA70(PC)载MiRNA-195反义寡核苷酸(AMOMiRNA-195)转染心肌细胞及其对心肌细胞肥厚的影响。方法:应用琼脂糖凝胶电泳表征具有不同比值的MPC30-DEA70与AMO-MiRNA-195的复合物,将不同比例的MPC30-DEA70/AMO-MiR-195基因复合物(PC复合物)转染至体外培养的乳鼠心肌细胞。应用倒置荧光显微镜(FMI)及激光共聚焦扫描显微镜(CLSM)观察MPC30-DEA70/AMO-MiR-195(FAM标记)在细胞内的分布及定位;流式细胞仪(FCM)检测转染效率及荧光强度;RT-PCR检测心肌细胞MiRNA-195的表达;RT-PCR法检测心肌肥厚标志物心房钠尿肽(ANP)、α-肌球蛋白重链(α-MHC)、β-肌球蛋白重链(β-MHC)编码基因Nppa、Myh6、Myh7基因的表达。结果:1不同比值的PC复合物在电泳中可见不同程度的电泳迟滞现象,随电性增强而显著;2FMI及CLSM观察到MPC30-DEA70/AMO-MiR-195(FAM标记)分布在细胞核周围,少量进入细胞核。3流式细胞术显示随N/P比值的增加,转染效率明显增大,荧光强度也随之增强;4RT-PCR法显示PC复合物可使MiRNA-195及心肌肥厚标志性基因Nppa、Myh7基因表达降低,且随着N/P比值的增大,MiRNA-195、Nppa及Myh7基因表达明显下降(P0.05),Myh6基因表达无明显变化。结论:MPC30-DEA70可作为AMO-MiRNA-195的载体转染至体外培养的乳鼠心肌细胞,并下调MiRNA-195及心肌肥厚标志性基因Nppa、Myh7基因表达。     

AT1R反义寡核苷酸对心肌细胞生长影响的实验研究

目的 :探讨 AT1 R反义寡核苷酸 （AT1 R- AS- ODNs）对正常大鼠心肌细胞生长的影响。方法 :脂质体介导AT1 R- AS- ODNs转染体外培养的 SD乳鼠心肌细胞 ,Western印迹及原位杂交检测细胞内 AT1 R蛋白及 m RNA表达 ;流式细胞仪检测细胞内 DNA合成 ;免疫沉淀法检测 c- Jun氨基末端活化蛋白激酶 （JNKs）活性 ;免疫细胞化学检测核转录因子 c- Jun蛋白表达水平。结果 :在脂质体介导下 ,AT1 R- AS- ODNs成功转染心肌细胞 ;转染 2 4 h后 ,AT1 R蛋白及 m RNA表达水平分别被下调 6 0 .7%、5 1.2 % （P<0 .0 5 ） ;但 AT1 R- AS- ODNs转染对细胞内 JNKs活性、c- Jun蛋白表达、DNA合成无显著影响。结论 :AT1 R- AS- ODNs能有效抑制正常大鼠心肌细胞 AT1 R表达 ,但不改变细胞内 AT1 R偶联的信号转导过程 ,也不影响细胞的正常生长。     

反义基因治疗对H9C2心肌细胞β_1受体表达的影响

目的 观察阳离子脂质体介导的β1受体反义基因对H9C2心肌细胞β1受体mRNA及受体蛋白表达的影响,寻求最佳转染比率。方法 H9C-2心肌细胞,用去甲肾上腺素（norepinephrine,NE）刺激24h后转染β1受体反义寡核苷酸（β1 antisense oligonucleotide,β1-AS-ODN）,脂质体与β1-AS-ODN的混合摩尔比为2.0、2.5和3.0,分别转染18h、24h和36h;在倒置荧光显微镜下观察心肌细胞的形态;用免疫印迹技术测定心肌细胞β1受体蛋白的时间表达曲线。实验分为4组：NE组、NE加β1受体反向寡核苷酸（β1 inverse oligonucleotides,β1-IN-ODN）组、NE加β1-AS-ODN组、心肌细胞组,用半定量逆转录多聚酶链反应检测心肌细胞β1受体mRNA的表达。结果 β1-AS-ODN分布在心肌细胞的胞浆及细胞核中,转染24h效率达70%,此后平缓降低;NE组的心肌细胞β1受体蛋白显著升高;与NE组相比,脂质体与β1-AS-ODN的混合摩尔比2.0、2.5,和3.0的心肌细胞β1受体蛋白显著降低（P〈0.05,P〈0.01,P〈0.05）;与心肌细胞组比较,NE组和β1-IN-ODN组的心肌细胞β1受体mRNA和受体蛋白显著升高（P〈0.01）;与NE组相比,NE加AS-ODN组的心肌细胞β1受体mRNA和受体蛋白显著降低（P〈0.01）。结论 阳离子脂质体与β1-AS-ODN比率为2.5转染24h效果最好,其机制可能是通过激活核糖核酸酶H降解靶mRNA,在转录和翻译水平抑制目的基因表达。     

microRNA-1和microRNA-133参与小鼠诱导多能干细胞向心肌的分化

目的 研究microRNA-1（miRNA-1）和microRNA-133（miRNA-133）对小鼠诱导多能干细胞（miPSCs）向心肌分化的影响。方法 RT-PCR分析miPSC分化过程中microRNA-1和microRNA-133的表达变化；microRNA-1和micro-133反义寡核苷酸转染miPSCs，增强miRNA-1和miRNA-133表达；并按照转染分子的不同，将细胞分为对照组（添加miRNA-U6）、miRNA-1组、miRNA-133组和miRNA-1+miRNA-133组。RT-PCR、q-PCR和免疫荧光化学染色检测miRNA转染并诱导miPSCs分化后，各组细胞内miRNA-1和miRNA-133的表达变化以及心肌细胞相关特异性基因和蛋白的变化。结果 miPSCs心肌分化过程中miRNA-1，miRNA-133的表达具有差异性，均在后期有显著增高（P<0.01）；在分化过程中单独过表达miRNA-1 和miRNA-133对心肌的分化并未有促进作用，但共表达miRNA-1 和miRNA-133后，却显著增加心肌细胞的搏动数量和心肌基因的表达，并且促进了心肌细胞成熟。结论 miRNA-1和miRNA-133通过协同作用促进miPSCs体外分化为心肌细胞，显著提高 miPSC 向心肌细胞定向分化效率。     

血小板源生长因子β受体反义寡核苷酸对血小板源生长因子诱导大鼠血管平滑肌细胞迁移的影响

为研究血小板源生长因子β受体反义寡核苷酸对血小板源生长因子诱导的大鼠血管平滑肌细胞迁移的影响和作用机制，利用激光共聚集显微镜观察平滑肌细胞对异硫氰酸荧光素标记的反义寡核苷酸的摄取和细胞内定位，改良Boden's小室法观察平滑肌细胞迁移。结果发现，加入反义寡核苷酸培养24h及48h后荧光分别位于细胞浆内和细胞核内，5umol/L以上浓度反义寡核苷酸作用36h后，被血小板源生长因子诱导迁移通过Boyden's小室碳纤维素膜的细胞数量小于空白对照组；正义，错义寡核苷酸和5umol/L以下浓度反义寡核苷酸迁移抑制不明显，提示血小板源生长因子β受体反义寡核苷酸在细胞核内呈时间和浓度依赖性抑制血小板源生长因子诱导的血管平滑肌细胞迁移。     

脂质体介导的VEGF-C反义寡核苷酸对肺腺癌细胞系 A549生长、凋亡的影响

目的 探讨脂质体介导的血管内皮生长因子C(VEGF-C) 反义寡核苷酸对肺腺癌细胞系 A549生长、凋亡的作用.方法 将 A549 细胞随机分为磷酸盐缓冲液对照组(PBS组)、正义寡核苷酸对照组(SODN组)和反义寡核苷酸转染组(AODN组),应用细胞计数方法计数每组细胞数,苏木精-伊红(HE)染色法观察细胞形态及分布,流式细胞仪分析A549细胞凋亡情况.应用Western印迹方法检测转染后各组A549细胞中VEGF-C蛋白表达.结果 VEGF-C反义寡核苷酸转染后,AODN组细胞生长受抑程度显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01),生长缓慢且核分裂像较对照组明显减少.流式细胞仪检测结果显示AODN组细胞凋亡率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01).Western印迹结果显示VEGF-C反义寡核苷酸可明显抑制VEGF-C基因表达.结论 脂质体介导的VEGF-C反义寡核苷酸能有效地干扰VEGF-C基因表达,并可抑制肺腺癌A549细胞生长并促进其凋亡.     

β1肾上腺素能受体反义寡核苷酸对自发性高血压大鼠心肌间质及左室功能的影响

目的观察在自发性高血压大鼠中以阳离子脂质体载体介导的β1肾上腺素能受体反义寡核苷酸逆转其心肌纤维化及改善其左室舒缩功能的作用.方法 20只雄性19周龄SHR随机分为阳性对照组(n6),反义(AS-ODN)治疗组(n7,尾静脉β1-AS-ODN 1.0 mg/kg 20天内共3次),反向(IN-ODN)治疗组(n7,尾静脉注射β1-IN-ODN 1.0 mg/kg 20天内共3次),另选同龄雄性Wistar Kyoto(WKY)大鼠为正常对照(n6).常规方法测定尾动脉收缩压、左室血流动力学指标及左心室重量指数(LVMI),显微荧光技术观察FITC标记的寡核苷酸在心肌细胞内的摄取及分布,Van Gieson染色法检测左室胶原容积分数(CVF),RT-PCR法检测左室心肌β1肾上腺素能受体(β1-AR)mRNA表达.结果 (1)转染后3 d,寡核苷酸被心肌细胞有效摄取,均匀分布于其胞浆内;(2)与WKY组大鼠相比较,28周龄SHR存在高血压,心肌肥大、纤维化及左室功能不全;(3)与SHR组比较,β1-AS-ODN治疗组大鼠左室心肌β1肾上腺素能受体(β1-AR)mRNA表达减少,血压及LVMI、CVF降低,左室舒缩功能得到改善.结论β1-AS-ODN通过在转录水平抑制SHRβ1-AR的表达,在持久而有效降压的同时,更能有效地逆转左室肥大、纤维化及改善左室功能.     

bcl-2反义寡核苷酸与VP16协同抑制小细胞肺癌细胞增殖的研究

目的 研究bcl-2反义寡核苷酸与足叶乙甙（VPl6）联用对小细胞肺癌细胞NCI—H69增殖的影响。方法 通过脂质体将不同寡核苷酸导入NCI—H69细胞中，分为反义寡核苷酸组、正义寡核苷酸组、无义寡核苷酸组和空白对照组4组。Western Blot法检测细胞bcl-2蛋白的表达。不同浓度的VP16作用于4组转染后的细胞，MTT法测定细胞存活分数。结果 4组细胞中。与空白对照组相比较，反义寡核苷酸组的bcl-2蛋白表达明显受到抑制。bcl-2反义寡核苷酸转染细胞与VP16作用后，反义寡核苷酸组细胞在各个浓度的存活分数均低于对照组，且有统计学意义（P〈0．01）。结论 bcl-2反义寡核苷酸与VP16能协同抑制小细胞肺癌细胞的增殖。     

β1肾上腺素能受体反义寡核苷酸对自发性高血压大鼠心肌间质及左室功能的影响

目的观察在自发性高血压大鼠中以阳离子脂质体载体介导的β1肾上腺素能受体反义寡核苷酸逆转其心肌纤维化及改善其左室舒缩功能的作用。方法20只雄性19周龄SHR随机分为阳性对照组(n=6),反义(AS-ODN)治疗组(n=7,尾静脉β1-AS-ODN1.0mg/kg20天内共3次),反向(IN-ODN)治疗组(n=7,尾静脉注射β1-IN-ODN1.0mg/kg20天内共3次),另选同龄雄性WistarKyoto(WKY)大鼠为正常对照(n=6)。常规方法测定尾动脉收缩压、左室血流动力学指标及左心室重量指数(LVMI),显微荧光技术观察FITC标记的寡核苷酸在心肌细胞内的摄取及分布,VanGieson染色法检测左室胶原容积分数(CVF),RT-PCR法检测左室心肌β1肾上腺素能受体(β1-AR)mRNA表达。结果(1)转染后3d,寡核苷酸被心肌细胞有效摄取,均匀分布于其胞浆内;(2)与WKY组大鼠相比较,28周龄SHR存在高血压,心肌肥大、纤维化及左室功能不全;(3)与SHR组比较,β1-AS-ODN治疗组大鼠左室心肌β1肾上腺素能受体(β1-AR)mRNA表达减少,血压及LVMI、CVF降低,左室舒缩功能得到改善。结论β1-AS-ODN通过在转录水平抑制SHRβ1-AR的表达,在持久而有效降压的同时,更能有效地逆转左室肥大、纤维化及改善左室功能。     

大豆磷脂脂质体对培养心肌细胞缺氧缺糖性损伤的影响

本文研究大豆磷脂脂质体对培养心肌细胞缺氧缺糖性损伤的影响。结果表明：在培养心肌细胞６小时缺氧缺糖的同时，补充大豆磷脂脂质体可抑制培养液中乳酸脱氢酶活性和心肌细胞内琥珀酸脱氢酶损伤反应的增加，减轻心肌Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋－三磷酸腺苷酶（ＡＴＰａｓｅ）活性的降低，提高心肌细胞总磷脂和总胆固醇含量。提示：大豆磷脂脂质体可减轻培养心肌细胞缺氧缺糖性损伤，可能与其作用于细胞膜脂质有关。     

热休克蛋白70通过Bcl-2抑制氧化应激所致C2C12细胞凋亡

目的 探讨C2C12肌原细胞内热休克蛋白70对Bcl-2表达的影响及Bcl-2对热休克蛋白70抗细胞凋亡作用的影响.方法 应用Western Blotting观察Bcl-2在转染热休克蛋白70真核表达质粒(pcDNA3.1-HSP70)或其反义寡核苷酸C2C12肌原细胞中的表达;采用基因瞬间转染技术使热休克蛋白70过表达的C2C12肌原细胞内Bcl-2表达抑制,应用流式细胞术检测H2O2处理所致细胞凋亡的发生情况.结果 转染热休克蛋白70真核表达质粒的C2C12肌原细胞中,热休克蛋白70和Bcl-2的表达明显高于空载体转染组(P<0.01);而转染热休克蛋白70反义寡核苷酸后,热休克蛋白70和Bcl-2的表达明显低于随机寡核苷酸转染组 (P<0.01);热休克蛋白70过表达的C2C12肌原细胞分别转染Bcl-2反义寡核苷酸及随机寡核苷酸,0.5 mmol/L H2O2处理24 h,Bcl-2反义寡核苷酸转染组的细胞凋亡率明显高于随机寡核苷酸转染细胞组.结论 热休克蛋白70能上调C2C12肌原细胞内Bcl-2的表达;热休克蛋白70的抗细胞凋亡功能可能与其上调Bcl-2表达相关.     

结缔组织生长因子反义寡核苷酸抑制血管紧张素Ⅱ诱导人近曲肾小管上皮细胞肥大米

目的：进一步探讨结缔组织生长因子（connective tissue grnwth factor，CTGF）反义寡核苷酸对血管紧张素Ⅱ（AngII）诱导的肾小管细胞肥大的影响。方法：采用体外培养的人肾近端小管上皮细胞株（HK2），分别采用考马斯亮蓝法、流式细胞分析技术及扫描电镜和透射电镜，观察CTGF反义寡核苷酸对AngII诱导的细胞内总蛋白含量、细胞周期分布改变及细胞直径和超微结构改变的影响。结果：AngⅡ干预HK2细胞48h后，细胞内总蛋白含量显著增加（P＜0．01）；这种作用可被CTGF反义寡核苷酸显著抑制，且呈时间和浓度依赖性。AngⅡ干预HK2细胞后，细胞大部分阻滞在G0-G1期（P＜0.01），而CTGF反义寡核苷酸可逆转这种周期阻滞现象（P＜0．05）。经AngⅡ干预的HK2细胞，细胞平均直径显著增加，细胞超微结构显示表面微绒毛减少、细胞内粗面内质网增多、线粒体减少、高尔基体增加，这些作用均可被CTGF反义寡核苷酸所抑制。结论：CTGF反义寡核苷酸对AngⅡ诱导HK2细胞肥大具有显著的抑制作用，提示CTGF可能介导了AngⅡ诱导的肾小管上皮细胞肥大。     

MUC2反义脱氧寡核苷酸对胃癌细胞体外黏附侵袭活性的影响

目的 探讨黏蛋白MUC2反义脱氧寡核苷酸（ASODN）对人胃癌细胞株SGC7901黏附侵袭活性的影响。方法 采用人工合成的MUC2 ASODN经阳离子脂质体包裹后转染入SGC7901细胞中，采用黏附试验、Boyden小室体外侵袭试验观察比较转染前后癌细胞黏附率，穿膜细胞相对百分率及组织蛋白酶D、钙黏蛋白表达的变化。结果 转染SGC7901细胞48h后，癌细胞黏附率在30、60、90、120min各时间段逐渐升高，但低于空白对照组（P均〈0．01）；转染后癌细胞穿膜细胞相对百分率明显下降；转染后SGC7901细胞的E-钙黏蛋白表达明显增高，组织蛋白酶D水平明显降低。结论 人工合成的MUC2 ASODN能有效抑制胃癌细胞株SGC7901黏附侵袭能力。     

三磷酸肌醇受体/钙调神经磷酸酶信号通路激活致心肌肥厚的研究

目的 研究激活心肌细胞三磷酸肌醇受体（IP3R）是否触发钙调神经磷酸酶（CaN)介导的心肌肥厚信号通路。方法 培养Wistar乳鼠心肌细胞检测心肌细胞蛋白和核酸合成，细胞内钙变化，CaN，活化T细胞核因子3（NFAT3）及锌指转录因子（GATA4），胚胎基因（α-actin,β-MHC）及即刻早期基因（c-fos,c-myc)表达。结果 给予IP3能时间和剂量依赖性也增加心肌细胞蛋白和核酸合成，能明显致心肌细胞内钙增加；IP3刺激心肌细胞IP3受体，能明显激活心肌细胞CaN/NFAT3/GATA4信号通路，促使心肌细胞的早期即刻基因和胚胎基因表达。结论 激活IP3R介导的CaN/NFAT3/GATA4信号通路能显地促使心肌细胞肥大，这条信号通路不同于已知的G蛋白偶联受体介导的心肌肥厚信号转导途径。     

血管紧张素转换酶抑制剂对缺氧心肌细胞的保护机制

目的：探讨血管紧张素转换酶抑制剂对缺氧心肌细胞的保护机制。方法：培养Ｗｉｓｔａｒ大鼠心肌细胞，７２小时后分为对照组、卡托普利组、依那普利拉组、缺氧组、缺氧加卡托普利组、缺氧加依那普利拉组。药物终浓度为１０－５ｍｏｌ／Ｌ。前３组采用有氧培养，后３组应用低糖无氧培养３０分钟。在ＭＰＶ３型显微分光光度计下测定心肌细胞内乳酸脱氢酶、琥珀酸脱氢酶相对含量，并取细胞上清液应用生化分析仪测定细胞内酶漏出情况。实验结果采用ｔ检验。结果：卡托普利和依那普利拉均可提高心肌细胞内乳酸脱氢酶含量（与对照组、缺氧组相比Ｐ＜０．０１）；减少缺氧心肌细胞内酶的漏出（与缺氧组相比Ｐ＜０．０１）。结论：血管紧张素转换酶抑制剂可明显改善缺氧心肌细胞糖代谢，加速糖酵解，减轻缺氧性损伤，对缺氧心肌细胞具有一定的保护作用。     

缺血预适应后离体鼠心生理功能及形态学改变的实验观察

本实验旨在了解离体鼠心缺血预适应后心肌收缩功能和形态学的改变。方法：通过测定LVDP、dp／dt。RPP等心功能指标，以及形态学评级来评价单纯全心缺血30分钟并再灌注60分钟（B组，n=10）与缺血预适应（C组，n=11）对心肌收缩功能和心肌细胞超微结构的影响。结果：复灌30分钟时缺血预适应组的LVDP、dp／dt、RPP恢复百分率高于对照组（P＜0.05。电镜下心肌细胞的损伤评级缺血预适应组低于对照组（P＜0．05）．结论：缺血预适应能加强离体鼠心全心缺血后心肌收缩功能的恢复，减轻心肌细胞的损伤。     

P19-αMHC-EGFP干细胞株的构建及其向心肌细胞诱导分化的初步研究

目的 构建稳定携带心肌特异报告基因pαMHC-EGFP的P19细胞株并诱导其向心肌细胞分化.方法 应用脂质体转染法转染质粒pαMHC-EGFP到P19干细胞,通过G418筛选和有限稀释法得到稳定携带pαMHC-EGFP的细胞克隆P19-αMHC-EGFP.诱导P19-αMHC-EGFP向心肌细胞分化,在诱导的不同阶段观测其超微结构的变化,在诱导分化进程中监测"跳动"的发绿色荧光的心肌细胞出现.同时与未转染pαMHC-EGFP的P19细胞进行心肌细胞分化率及心肌肌钙蛋白I(cTnI)表达量的对比.结果 电镜结果 提示在诱导的第10天,部分细胞出现心肌细胞样特征.P19-αMHC-EGFP在诱导分化的第7天出现发强绿色荧光并"跳动"的心肌细胞,同时与对照P19细胞在心肌细胞分化率及cTnI表达量上差异无统计学意义(P>0.05).结论 P19-αMHC-EGFP细胞株在分化为心肌细胞的同时具有强绿色荧光标记,其向心肌细胞分化的效率及cTnI的合成未受影响.这一特征有利于对分化成熟的心肌细胞进行识别和纯化,从而应用于心肌细胞替代治疗.     

人心钠素基因裸质粒与脂质体介导转染在培养鼠心肌细胞中表达的研究

目的：采用脂质体介导转染法和裸质粒直接转染法，将构建的人心钠素（hANF)真核表达质粒（pCR3.hANF)导入培养鼠心室肌细胞中，观察和比较hANF基因在心肌细胞中的表达效率，方法：实验为脂质体／pCR3．hANF转染组，裸pCR3．hANF转染组及pCR3对照组，通过RNA的提取，逆转录－聚合酶链式反应、Southern杂交及放射免疫测定，检测表达效率。结果：（1）转染后24h，脂质体／pCR3．hANF转染组hANFmRNA均有明显表达（P值分别后24h明显增高（P值均小于0．05）；（2）转染后48h，脂质体／pCR3．hANF转染组hANFmRNA均有明显表达（P值均＜0．01），且较转染后24h明显增高（P值均小于0．05）；（2）转染后48h，脂质体／pCR3．hANF转染组和pCR3．hANF转染组培养液中ANF的浓度明显高增（P值均小0．01）；转染组间比较，前者hANF的表达也明显高于后者（P＜0．01）。结论：脂质体介导的hANF基因转染和裸hANF质粒直接转染均能显著提高hANF基因的表达效率；直接转染法更具方便性和实用性，有利于将来的临床应用。