酶联免疫吸附试验中HIV抗体室内质控品的制备及应用

目的制备酶联免疫吸附试验(ELISA)检测中HIV抗体室内质控品。方法用HIV抗体阴性血清,按1∶1、1∶2、1∶4、1∶8稀释ELISA试剂盒中HIV阳性对照品,检测不同稀释度的HIV抗体,选择S/CO=2～4倍临界值作为弱阳性质控品的稀释倍数,大批量配制,分装,-20℃储存。将自制质控品与日常血清样品同时检测HIV抗体,每月统计检测S/CO均值、标准差和变异系数,监测其均一性和稳定性。结果经单因子方差分析自制的弱阳性质控品均一性无显著性差异,12个月中HIV抗体S/CO均值在2～3之间,变异系数20%,稳定性良好。结论自制的HIV抗体质控品均一性、稳定性良好,保存期达12个月,可作为ELISA检测中弱阳性质控品使用。     

供多年使用、多厂家试剂共用的HIV抗体干血棉球质控品应用研究

[目的]研究设计一种供多年使用,多厂家ELISA检测HIV抗体试剂盒共用的干血棉球质控品。[方法]用HIV抗体阴性血清稀释HIV抗体强阳性血清,制备成较高S/CO值的干血棉球质控品。根据不同厂家ELISA检测HIV抗体试剂盒敏感性的差异,标定出不同试剂盒检测干血棉球质控品S/CO值2～3时溶解液的各自用量。实验时,不同厂家试剂盒用不同用量的溶解液溶解干血棉球质控品,使之成为该厂家试剂盒S/CO值2～3的弱阳性质控血清,用于室内质量控制。[结果]干血棉球质控品置-20℃历时3年,经多个厂家的ELISA检测HIV抗体试剂盒对干血棉球质控品20次检测结果,其S/CO值的变异系数(cv)均﹤20%。[结论]使用干血棉球质控品大大减少了制备频次,简化了操作程序,为各级艾滋病检测实验室ELISA检测HIV抗体的室内质量控制提供了极大的方便。     

HIV抗体筛查实验室弱阳性血清的制备及其应用

目的：探索HIV抗体弱阳性对照血清简便、易行、准确的制备方法及HIV抗体室内质控图的应用。方法：用正常人阴性血清按不同稀释倍数梯度稀释HIV抗体阳性血清后，制备出弱阳性血清。结果：用双抗原夹心ELISA法进行HIV抗体检测后找出S／CO值在2—3倍之间的血清稀释倍数，连续检测20次，制出室内质控图。结论：制作弱阳性对照血清时，用不同稀释倍数逐渐降低阳性血清抗体滴度能准确简便地找出弱阳性对照血清孔数。     

HIV抗体筛查实验室弱阳性血清的制备及其应用

[目的]探索HIV抗体弱阳性对照血清简便、易行、准确的制备方法及HIV抗体室内质控图的应用。[方法]用另一种试剂的阴性对照血清梯度稀释该试剂的阳性对照血清,制备出弱阳性血清。[结果]用双抗原夹心ELISA法进行HIV抗体检测后找出S/CO值在2~3倍之间的血清稀释倍数,连续检测12次,制出室内质控图。[结论]制作弱阳性对照血清时,逐渐降低阳性血清抗体滴度能准确简便地找出若阳性对照血清孔数。     

艾滋病实验室HIV抗体血清室间盲样考核的制备及分析

目的 连云港市疾病预防控制中心艾滋病检测实验室是连云港地区唯一的艾滋病抗体确证实验室,同时也是本地区的筛查中心实验室,根据《全国艾滋病检测技术规范》和《江苏省艾滋病管理办法》要求,承担辖区内艾滋病筛查实验室(简称艾滋病网络实验室)的管理工作,每年例行1次HIV抗体血清盲样考核.全市艾滋病网络实验室共17家,每家1套盲样,每套10份血清样本,含阴性、强阳性和弱阳性3种,所需盲样量数量较大,若直接购买商用质控品,考虑到经济因素和购回后的稀释问题,决定自己制备.方法 HIV抗体阳性血清灭活处理后,用胎牛血清梯度稀释,分装、保存.结果 分装后的样本在均一性、稳定性、无菌性方面均能符合要求.结论 该方法制备的血清可用于室间质控品,同时适用于室内质控.     

乙型肝炎病毒表面抗原室内质控血清制备及评价

目的制备HBs Ag检测的室内质控血清及对其应用进行评价。方法将若干HBs Ag阳性血清混匀,以及若干健康体检者血清混匀,经3 000 r/分离心15 min去除蛋白质沉淀,56℃加热30 min灭活处理备用。用处理后的正常血清对上述阳性标本做系列稀释至S/CO值2~3,用0.2μm滤膜过滤稀释好的质控血清除菌,按0.01%加入硫柳汞充分混匀,以每支0.5 m L分装、标记,-70℃保存备用。结果 HBs Ag自制质控血清质控图均值(x)、标准差(s)、变异系数(CV)分别为:2.60、0.08、3.07。自制HBs Ag质控血清在室温2℃~8℃、-20℃、-70℃不同温度储存连续检测至S/C0值失控,结果室温下6 d在控;2℃~8℃两周内在控;-20℃、-70℃储存条件下12月内稳定、在控,且-20℃、-70℃储存条件下12月内差异无统计学意义(P>0.05)。两个厂家不同试剂批号检测结果分析,每月检测20次,持续检测12个月,统计每月S/CO的、s、CV%,检测结果比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论自制弱阳性质控血清可用于HBs Ag室内质控血清制备与评价,质控效果和稳定性均符合国家质控物要求。     

基于8E5细胞的HIV-1病毒载量能力验证质控品制备及评估

目的制备及评价基于8E5细胞的人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus 1,HIV-1)病毒载量能力验证质控品的均一性、稳定性和反复冻融性。方法将8E5细胞上清原液10倍梯度稀释得到浓度依次为10⁶、10⁵、10⁴、10³拷贝/ml的4组HIV-1病毒载量能力验证质控品,应用病毒载量分析仪进行检测,将病毒拷贝数其换算成lg值,计算均值(xˉ)、标准差(s)、变异系数(coefficient of variation,CV)、变化趋势,并对质控品的均一性、稳定性和反复冻融性进行评价。结果在4个浓度梯度的均一性评价中,各浓度组质控品的CV分别为1.2%、2.6%、1.8%和3.2%。稳定性评价实验中,在-20℃条件下,各组质控品在5个月评价期间内,检测结果不随时间延长而改变(P>0.05)。在4℃条件下,各组质控品在5周评价期间内,检测结果随时间延长而未改变(P>0.05)。在25℃条件下,各组质控品在15 d评价期间内,检测结果随时间延长而减少(P<...     

HIV抗体筛查实验室室内质量控制分析及影响因素

目的联合应用"即刻法"和Levey-Jennings(L-J)质控图对HIV抗体检测进行室内质控,保证检测结果的准确性。方法利用外部质控品S/CO值制作"即刻法"和L-J质控图,对质控结果进行分析。结果检测试剂,环境温湿度,仪器设备状态,实验室操作等问题,都可能影响检测质量。结论联合使用"即刻法"和L-J质控图,是一种适合基层疾控中心HIV抗体检测的质量控制手段。     

HIV抗体弱阳性质控血清的制备及应用评价

目的 掌握抗HIV弱阳性外部对照质控血清的制备方法,有效运用到试验过程中。方法 用HIV抗体阴性血清成倍比稀释强阳性血清,采用酶联免疫吸附检验(ELISA)来检测各稀释度OD值,并计算S/CO值来确定某一稀释度为配置稀释度(即临界值2-3倍)。结果 采用倍比稀释法,可获得所需外部质控所用血清浓度,并且连续检测20次,绘制出室内质控图。结论 制备适合自己试验室的弱阳性的外部质控血清方法简单,使用起来方便,也易于保存,适用于HIV初筛实验室日常检测的室内质量控制工作。     

ELISA检测HIV抗体弱阳性外部质控血浆的制备和应用

目的 制备HIV抗体检测的弱阳性外部质控血浆并进行应用,确保HIV初筛实验室的检测质量.方法 用不同个体HIV阴性血浆稀释不同个体的HIV阳性血浆得到弱阳性外部质控血浆,用荷兰生物梅里埃试剂检测20次后得到的S/CO值在Eexcle表格上绘制质控图.结果 自制的弱阳性外部质控血浆经1年使用后稳定性好,变异系数＜20％.结论 自制适合自己实验室的弱阳性外部质控血浆方法简单,经济实惠,使用方便,易于保存,适用于HIV初筛实验室日常检测的质量控制工作.     

ELISA检测HIV抗体室内质控血浆的使用与分析

目的为了提高HIV抗体的检测质量，控制诊断试剂的质量和人员操作过程中的误差。方法采用上海市疾病预防控制中心提供的人类免疫缺陷病毒HIV抗体室内质控血浆，在不同品牌（法国梅里埃和上海科华）、同一批号和不同批号的诊断试剂盒中，随标本同时检测HIV抗体室内质控品。结果试剂盒用同一品牌、同一批号的HIV抗体诊断试剂重复性好，CV值分别为7.77％和9.82％。结论在开展HIV抗体室内质控检测时，应采用同一品牌、同一批号的诊断试剂进行检测，以提高HIV抗体的检测质量。     

HIV初筛实验室室内质量控制浅析

目的在常规质控图的基础上,加强和完善“即刻法”室内质控。方法采用ELISA法进行HIV抗体检测,对20天内不同时间进行的20次实验中得到的20个数据,建立Levey-Jennings质控图（以下简称L-J质控图）的同时,从第三次实验结果开始进行即刻法质控,对比2个方法的质控结果。结果用即刻法质控的结果也在L-J图质控范围内。结论进一步加强、确认“即刻法”在HIV初筛实验室室内质量控制的作用。     

HIV抗体干血浆滤纸片质控品制备的研究

目的：研究制备一种新型的干血浆滤纸片质控品,用于艾滋病初筛实验室间质量评价活动。方法：取来自中国地区不同亚型的HIV抗体强阳性标本,分别制成5份标本。将这5份标本分别进行HIV抗体效价滴定。最后选取OD值高低不同的5份标本作为室间质量评价的标本。结果：用ELISA法检测HIV抗体,干血浆滤纸片样品与血浆样品检测结果无显著性差异（P〉0.05）。结论：干血浆滤纸片质控品可以用于基于ELISA方法检测的HIV抗体的初筛实验室的质量评价活动中,其在稳定性、样品保存、运输方面均优于血浆质控品。     

稀释白蛋白质控品制备尿微量白蛋白质控品的应用

目的 自行通过稀释白蛋白质控品制备尿微量白蛋白(U-MA)高、低2种浓度的室内质控品.方法 通过对白蛋白质控品进行连续稀释.配制成高低两种浓度溶液,用作尿微量白蛋白的室内质控品.对配制的质控品进行均一性,稳定性性能评价.结果 此种质控品的微白蛋白含量基本均一,具有可接受的稳定性(四个月内稳定).结论 此种质控品可以满足室内质控的要求.     

HIV外部质控血清的试制和使用

目的 为了提高HIV检测质量,鉴别和控制诊断试剂的质量和操作误差.方法 使用HIV抗体阴性的正常人血清梯度稀释HIV抗体强阳性血清,并经标定后作为外部质控血清.使用阿克苏试剂,全自动酶免分析仪和手工方法随标本同时检测.结果 实验证明,两种检测方法的精密性和稳定性良好,CV分别为3.4%和4.2%.结论 自制HIV外部质控血清,方法易行,经济实用,为室内质控提供了较好的质控品和参照方法.     

HIV质控血清稳定性的关键影响因素研究

目的研究温度、冻融、运输等因素对HIV抗体质控血清稳定性的影响。方法将配置的HIV质控血清分别进行如下处理:(1)置于-20℃、4℃、室温、37℃不同时间;(2)反复冻融;(3)模拟运输。之后用ELISA试剂盒检测样本的反应OD值,统计分析处理后与样本参考值的差异。结果质控血清在-20℃可以保存1年,在4℃不超过3周,在室温下不超过1周,在37℃不超过2d是稳定的。反复冻融对检测值绝对影响不大,但统计学差异显著。运输路途时间超过15 d,样品稳定性得不到保证。结论 HIV质控血清必须按照要求进行正确的保存、运输和使用。     

全血锌检测的质控物制备及应用评价

目的制备血锌检测全血质控物以加强室内质控,监控血锌检测结果。方法采集健康人静脉全血,肝素抗凝,0.5%曲拉通1:200稀释无菌分装,-20℃冷冻保存。检测前平衡至室温,和临床标本一同检测。结果分装的全血质控物均一,-x为7.65 mg/L,s为0.24,各管间CV为3.14%,管间差符合要求;连续监测半年,计算其-x在7.60~7.76 mg/L之间s、介于0.40~0.48,CV在5.14%~6.31%之间波动。结论自制全血锌质控物性状稳定,质量可靠,可满足临床检测质控需要。     

HIV抗体阳性血清梯度稀释系列用于实验室质控和试剂评价探讨

目的探讨HIV抗体阳性血清梯度稀释系列用于实验室质控和试剂评价。方法确认阴性血清梯度稀释HIV抗体确认阳性血清,系列的最高稀释度应含HIV抗体确认实验不确定结果,用第三代双抗原夹心法HIV抗体ELISA检测试剂进行检测,寻找稀释度与OD值间的关系,然后应用于实验室质控和试剂评价。结果在一定稀释度范围内-log[稀释度]与OD值呈线性关系。实验系列用于质控,各实验室均正确报出样品的阴阳性结果,但灵敏度(回归曲线斜率/残差标准差)不同,依此对实验室进行排序;同时,没能正确报出检测结果的试剂其确定系数和灵敏度较底。结论HIV抗体阳性血清梯度稀释系列可用于实验室质控和试剂评价。但灵敏度的合适范围还需继续探讨。     

弱阳性外部对照质控血清的制备方法

[目的]掌握弱阳性外部对照质控血清的制备方法。[方法]用抗-HIV抗体阴性的血清倍比稀释抗-HIV抗体阳性血清，采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各稀释度血清，计算S／OD值。依据所需外部对照质控血清的强弱来确定某一稀释度为配制稀释度，按配制稀释度的年需求量来配制弱阳性外部对照质控血清。[结果]采用倍比稀释法可获得均匀、无菌、稳定的弱阳性外部对照质控血清。(结论)倍比稀释法是制备弱阳性外部对照质控血清的1种方便、快捷、可靠的方法。     

用试剂盒中的阳性对照血清配制艾滋病初筛实验室室内质控品的试验

〔目的〕探索1种既能节约资金,又能保证质量的配制实验室室内质控品的方法,加强HIV初筛实验室的质量控制。〔方法〕用正常人血清稀释试剂盒中的阳性对照,配制成弱阳性的质量控制品。〔结果〕经过9个月的实验证明,质控结果相对稳定,变异系数为3.52%。〔结论〕用试剂盒剩余的阳性对照配制实验室的室内质控物,经济方便,切实可行。