ICU耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐药基因检测及同源性分析

目的探讨医院重症监护病房(ICU)分离的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)的耐药机制,并进行同源性分析。方法收集海南省人民医院重症监护ICU病房2019年6月-2019年12月各类标本分离的15株CRKP进行耐药率统计,聚合酶链反应(PCR)扩增碳青霉烯酶耐药基因,目的产物经基因测序和BLAST比对确定其基因型,脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株的同源性。结果 15株CRKP对亚胺培南、美罗培南和三代、四代头孢菌素和β-内酰胺酶抑制剂、头孢西丁完全耐药,除了米诺环素耐药率(13.3%)和阿米卡星耐药率(33.3%)较低外、庆大霉素、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶、氯霉素和喹诺酮类抗菌药物的耐药率均高于80%; PCR扩增结果显示,15株中有8株NDM-1耐药基因阳性,阳性率为53.3%; 8株NDM-1耐药基因阳性菌株PFGE指纹图可分为5种PFGE类型,命名为A亚型(1和2为同一克隆株,同源性为98.0%),B亚型(5和8同源性为95.0%),C亚型(4和6同源性为86.7%),亚型D和亚型E同源性85.0%。结论本院分离的CRKP主要产NDM-1型碳青霉烯酶,体外药敏结果显示高程度的耐药性,8株产NDM-1的肺炎克雷伯菌PFGE分为5个型别,3个型别分别有2株菌为同一克隆株,其他2株菌为单一出现。     

4种β-内酰胺酶基因在一组耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌中的流行分析

目的调查一组耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(Carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP)β-内酰胺酶基因的存在状况。方法收集分离自2016年某医院ICU的20株CRKP菌;采用K-B纸片扩散法进行17种药物敏感性判断,采用聚合酶链反应(PCR)法检测A、B、C、D四类36种β-内酰胺酶基因,PCR法连锁检测KPC型β-内酰胺酶编码基因与插入序列(KPC-ISKpn6)。结果 20株CRKP菌每株均检出blaTEM、blaSHV、blaKPC和blaNDM型β-内酰胺酶基因,阳性率分别为100.00%、100.00%、75.00%、100.00%;15株KPC阳性菌株KPC-ISKpn6连锁检测均为阳性。结论 blaTEM、blaSHV、blaKPC、blaNDM等4种基因的菌株在该组CRKP菌中流行;KPC型β-内酰胺酶编码基因由插入序列ISKpn6介导。     

MLST和PFGE在耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌医院感染监测中的应用

 目的 探讨某院重症监护病房(ICU)患者、医院环境中耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)菌株的同源性,为医院感染防控提供理论依据。方法 收集2017年9—12月某三甲医院ICU患者、环境中连续分离的CRKP菌株,进行耐药表型、碳青霉烯酶基因检测,采用多位点序列分型(MLST)和脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行分子同源性分析。结果 共收集10株CRKP菌株,其中9株分离自5例患者的临床感染标本,1株分离自气压治疗仪面板。10株菌均携带产KPC酶基因;MLST分型均为ST11型;共有5种PFGE带型,其中5株带型完全一致,为流行菌株,1株菌株与流行菌株带型仅相差1条条带,其余4株菌带型相近,但与流行株带型差异较大。气压治疗仪面板分离的1株CRKP菌株与患者来源的4株CRKP菌株耐药表型、PFGE型别及ST型别完全一致,考虑为仪器共用造成的医院感染。分离自同一重症胰腺炎患者腹腔引流液、血标本的CRKP菌株PFGE带型完全一致,推测CRKP可能通过腹腔感染入血。结论 PFGE和MLST对明确医院感染细菌传播路径,个体细菌感染路径以及遗传变异有重要意义,有助于从切断感染途径方面入手指导控制多重耐药菌的传播。     

徐州地区耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌流行病学及耐药机制分析

目的分析徐州地区耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)流行病学情况及耐药机制。方法收集2017年1月-2017年5月徐州某教学医院肺炎克雷伯菌93株,采用全自动微生物分析系统进行菌株鉴定和药敏试验,PCR技术检测1、2和3类整合酶基因及碳青霉烯酶耐药基因,脉冲场凝胶电泳(PFGE)对CRKP进行同源性分析。结果 93株肺炎克雷伯菌检出CRKP 41株,检出率44.1%;CRKP菌株除对阿米卡星、复方新诺明、四环素、替加环素耐药率较低,对其他类抗菌药物耐药率均90%;非CRKP菌株除对替卡西林耐药率100.0%,对其他类抗菌药物耐药率均90%;CRKP与非CRKP菌株整合子阳性率差异无统计学意义;41株CRKP菌株,整合子阳性率24.4%,均为1类整合子,blaKPC基因阳性率73.2%,blaNDM基因阳性率14.6%;52株非CRKP菌株,整合子阳性率21.2%,均为1类整合子,blaKPC基因阳性率1.9%;PFGE显示,41株CRKP菌株分4型,以A型为主,34株占82.9%。结论徐州地区CRKP检出率较高,CRKP菌株以产KPC、NDM型为主,对大多数抗菌药物耐药,应引起临床及院感高度重视。     

PICU多药耐药鲍氏不动杆菌同源性分析

目的分析儿童重症监护病房(PICU)多药耐药鲍氏不动杆菌(MDRAB)同源性,为临床防治和控制医院感染提供参考依据。方法随机抽取医院PICU 2011-2014年分离的MDRAB 25株,采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)方法分析其同源性,利用Bio Numerics软件进行单链聚类分析。结果 25株MDRAB可分为10个PFGE基因型,存在3种优势克隆株,分别为A基因型8株占32%、B基因型5株占20%、C基因型4株占16%,2011年以C基因型克隆株流行为主,2012年为B基因型,2013-2014年则为A基因型为主。结论应重视和加强耐药菌监测工作,严格执行医院感染控制的消毒隔离制度,控制耐药菌的传播,PFGE是研究临床菌株流行、菌株分型的有效手段。     

住院患者与环境分离的CRKP同源性及其传播特征

目的 探讨碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)感染患者及同病房患者与环境分离CRKP的同源性、耐药机制及传播特征。方法 收集中山市中医院2017-2022年全院CRKP菌株,从2020年1月开始对CRKP感染患者的同病房患者筛查直肠拭子,对CRKP感染患者周围环境采样,筛查CRKP;使用胶体金法检测碳青霉烯酶基因,运用脉冲场凝胶电泳技术(PFGE)进行同源性分析。结果 共收集CRKP菌株39株,其中患者菌株36株,筛查同病房患者直肠拭子61例,检出CRKP菌株2株,采集环境标本680份,1名CRKP患者的卫生间水槽下水口检出CRKP; 39株CRKP中产KPC酶9株(23.08%),产NDM酶21株(53.85%),9株未检出常见的5种碳青霉烯酶;PFGE分析发现39株CRKP分为18个克隆型,6年内医院内发生过3次CRKP克隆传播。结论 加强CRKP感染患者房间水槽的消毒,可阻止CRKP通过水槽引起传播;医院内各时段流行的CRKP基因型可能不同,明确其类型对指导治疗决策有重要意义。医院内流行是CRKP检出率上升的原因,同源性分析结果可为确定主动筛查的目标患者提供依据。     

ICU血流感染CRKP耐药基因和分子流行病学特征

目的 调查医院各重症监护室(ICU)中血流感染患者血液中分离的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)主要耐药机制和克隆株流行现状。方法 收集2017-2019年复旦大学附属中山医院ICU患者血培养中分离CRKP共32株。使用Vitek MS对菌株进行鉴定,并使用全自动药敏分析系统检测常见抗菌药物对其的最低抑菌浓度(MIC)。聚合酶链式反应(PCR)扩增并测序检测CRKP中碳青霉烯酶基因;脉冲场凝胶电泳(PFGE)和多位点序列分型(MLST)检测不同菌株间的同源性。结果 CRKP菌株对三、四代头孢菌素、加酶抑制剂类、氟喹诺酮类和氨基糖苷类耐药率均超过50%,仅对替加环素和黏菌素的耐药率为0%。32株CRKP中含bla_KPC-2基因31株(96.88%),含bla_NDM-1基因1株(3.13%),MLST将32株共分为3个不同ST型,其中ST11型29株占(90.6%),ST15型2株占(6.25%),ST2237型1株占(3.13%)。PFGE结果显示共有8个PFGE型别,其中以PFGE C型为主,16株(50.00%),D型5株(15.63%)...     

ICU患者感染CRKP与CSKP的耐药基因和毒力基因

目的 分析重症监护病房(ICU)患者感染耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)与碳青霉烯类敏感肺炎克雷伯菌(CSKP)的耐药基因及毒力基因。方法 选择2015年11月-2019年11月浙江大学附属第一医院ICU收治的感染肺炎克雷伯菌患者297例,根据其感染菌株是否耐碳青霉烯类分为CRKP组86例和CSKP组211例,采用全自动微生物分析仪进行菌株鉴定和药敏试验,采用多位点序列分型(MLST)分析CRKP与CSKP菌株基因分型和同源性,采用黏液丝试验检测毒力表型,采用聚合酶链式反应(PCR)检测荚膜血清型及毒力基因。结果297株肺炎克雷伯菌共检出CRKP菌株86株和CSKP菌株211株,CRKP菌株对常用抗菌药物的耐药率高于CSKP菌株(P<0.05);86株CRKP菌株共检测到6个ST型,以ST11型(59.30%)为主,211株CSKP菌株共检测到12个ST型,以ST405型(21.33%)为主;86株CRKP菌株检出K5型4株(4.66%),K1型3株(3.49%),211株CSKP菌株共检出74株(35.07%)高毒力荚膜血清型;CSKP组magA、ybt、kfu基因阳性率高...     

综合重症监护病房分离的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐药性和同源性分析

目的 对综合重症监护病房分离的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌（CRKP）耐药性和同源性进行分析,为临床抗菌治疗和监测提供参考。方法 收集2019年3月至2021年3月2家医院综合重症监护病房分离得到的260株CRKP菌（其中马鞍山某医院156株,苏州某医院104株）,并对CRKP菌株进行常规药敏试验、PCR扩增和测序检测耐药基因携带情况,利用脉冲场凝胶电泳（PFGE）技术和多位点序列分型技术（MLST）对CRKP菌株进行同源性分析。结果 260株CRKP菌株对17种临床常用抗菌药物高度耐药,多重耐药率100%。马鞍山某医院的CRKP菌株主要携带碳青霉烯酶及超广谱β内酰胺酶（ESBLs）基因共5种耐药基因,bla_KPC-2型、bla_NDM-1型、bla_SHV型、bla_TEM型和bla_CTX-M-1型的携带率分别为84.62%、3.21%、70.51%、71.79%和80.77%。苏州某医院的CRKP菌株共携带bla_KPC-2型、bla_NDM-1型、bla_SHV型、bla_TEM型和bla_CTX-M-9型共5种耐药基因,携带率分别为74.04%、23.08%、80.77%、76.92%和27.88%。PFGE分型结果显示2家医院CRKP菌株均以A型和C型为主,但亚型和数量有差异。MLST分型分出ST11、ST76、ST16、ST437、ST379、ST751、ST395和ST307共8种序列型,马鞍山某医院主要为ST11型,占83.97%,而苏州某医院以ST11型（65.38%）和ST76型（27.88%）为主。结论 2家医院综合重症监护病房的CRKP菌株存在一定差别,但均以携带KPC-2碳青霉烯酶基因的ST11型为主,针对性加强重症监护病房清洁和院感监测,有利于控制多重耐药菌的传播和流行。     

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐消毒剂基因检测及同源性分析

目的 探讨武汉地区临床分离的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)中耐消毒剂基因的携带状况及耐消毒剂基因携带菌株的同源性, 为有效预防和控制CRKP传播提供理论依据。 方法 收集2018—2019年武汉市3所三级医院临床住院患者分离的非重复性CRKP菌株, 采用最低抑菌浓度测定方法对药敏结果进行复核, 采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测耐消毒剂基因qacEΔ1、cepA, 采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)对同时携带qacEΔ1和cepA基因的CRKP菌株进行同源性分析。 结果 共收集62株CRKP, 77.42%来源于重症监护病房(ICU), 40.32%来自痰标本。所有CRKP均为多重耐药菌, 对厄他培南、阿莫西林/克拉维酸、头孢唑林、头孢他啶、头孢曲松5种抗生素的耐药率均为100%, 对临床其他常见抗菌药物也呈现高度耐药。耐消毒剂基因检出率为95.16%(59/62), 其中qacEΔ1、cepA基因检出率分别为64.52%(40/62)、91.94%(57/62), 38株(61.29%)同时检出qacEΔ1和cepA。PFGE结果显示, 38株CRKP可分为A~K共11个型别, 以E型为主, 占42.11%(16株)。 结论 武汉地区CRKP菌株耐药形势严峻, 广泛携带耐消毒剂基因, 存在不同医院、不同科室间的克隆传播, 应加强流行病学监控, 合理使用消毒剂。     

碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌碳青霉烯及头孢菌素类抗生素耐药机制

目的研究碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌(CRE)对碳青霉烯及头孢菌素类抗生素耐药机制,为临床治疗CRE感染及医院感染的控制提供分子流行病学依据。方法收集2014—2015年临床送检各类标本分离的细菌,使用Microscan Walkaway 40 plus进行细菌鉴定和药敏试验,对分离的CRE进行常见碳青霉烯酶的编码基因(bla_(NDM-1)及bla_(KPC-2))和超广谱β-内酰胺酶编码基因(bla_(TEM)、bla_(SHV)、bla_(CTX-M-1)-like、bla_(CTX-M-2)-like、bla_(CTX-M-8)-like及bla_(CTX-M-9)-like)的检测,同时检测细菌多重耐药相关的Ⅰ类整合子编码基因bla_(inT-1)。结果 2014—2015年共分离7株CRE,检出率为0.30%,1~6号菌株为肺炎克雷伯菌,7号菌株为弗劳地柠檬酸杆菌,7株菌株对β-内酰胺酶抑制剂复合制剂、头孢菌素类、头霉素类、碳青霉烯类抗生素均耐药,3株菌对阿米卡星及四环素敏感,2株菌对复方磺胺甲口恶唑敏感。3株菌检出bla_(NDM-1),2株检出bla_(KPC-2),5株检出bla_(TEM),7株均可检出bla_(SHV),1株检出bla_(CTX-M-1)-like,4株检出bla_(CTX-M-9)-like,5株检出bla_(inT-1),未检出基因bla_(CTX-M-2)-like及bla_(CTX-M-8)-like。结论 bla_(NDM-1)及bla_(KPC-2)是导致7株CRE对碳青霉烯类抗生素耐药的重要机制,bla_(TEM)、bla_(SHV)及bla_(CTX-M-9)-like是导致对头孢菌素类抗生素耐药的主要原因,bla_(inT-1)在CRE多重耐药及耐药基因传播中发挥着巨大的作用。     

临床分离沙门菌的耐药性及超广谱β-内酰胺酶类耐药基因

目的研究北京地区2012—2015年沙门菌临床分离株的血清型分布、耐药状况及超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)耐药基因特征。方法采用最小抑菌浓度法测定北京市肠道门诊分离的677株沙门菌株对16种抗菌药物的耐药情况,采用聚合酶链反应(PCR)方法对244株β-内酰胺酶类耐药菌株进行耐药基因检测。结果677株沙门菌分为68种血清型,其中肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌和山夫登堡沙门菌位居前3位。沙门菌对氨苄西林和阿莫西林/克拉维酸的耐药率分别为42.54%、40.77%,至少耐3种以上抗菌药物的菌株占57.16%。244株对氨苄西林和阿莫西林/克拉维酸耐药的沙门菌,携带至少一种ESBLs基因的菌株174株(71.31%),146株bla_(TEM-1)型,30株bla_(OXA-1)型,18株bla_(CTX-M)型(其中7株bla_(CTX-M-15),6株bla_(CTX-M-55)和5株bla_(CTX-M-14));20株同时携带2种耐药基因。结论该地区沙门菌携带ESBLs耐药基因水平较高,以bla_(TEM-1)为主,同时伴有bla_(OXA-1)和3种bla_(CTX-M)基因亚型,呈现基因多样性。     

ICU患者血流感染耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌同源性分析

目的了解某院重症监护病房(ICU)血流感染患者分离的耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(CRAB)同源性。方法收集该院ICU2012年1—12月血流感染患者血液、下呼吸道和静脉导管尖端分离的CRAB,进行药物敏感试验,以及运用脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株同源性。结果 50株CRAB分离自患者血液26株、下呼吸道20株、静脉导管4株;对哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、氨苄西林/舒巴坦、头孢曲松、头孢噻肟、头孢吡肟、亚胺培南、美罗培南、环丙沙星的耐药率均为100%。对分离自患者血液(26株)、呼吸道(6株)和静脉导管尖端(4株)的36株CRAB进行PFGE,结果表明主要为7个PFGE型(A~G),其中A克隆5株,B克隆2株,C克隆3株,D克隆4株,E克隆3株,F克隆8株,G克隆3株;其余8株菌为散发。该ICU分为Ⅰ、Ⅱ区,其中A、B、F克隆在两个病区间均存在。3例患者不同部位分离的CRAB为同一克隆,其中2例血液、下呼吸道、静脉导管尖端为同一克隆,另1例血液和下呼吸道为同一克隆。对其中6例患者下呼吸道分离的CRAB进行PFGE分型,3例同属D克隆。对12例血流感染患者静脉导管尖端进行培养,4例患者培养阳性,且为CRAB,分别与各自血液分离株为同一克隆。结论 ICU存在CRAB血流感染流行,患者间交叉传播是医院流行的主要方式。     

呼吸ICU耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌耐药基因的携带情况及同源性

目的了解我院呼吸ICU耐碳青酶烯类鲍曼不动杆菌(CRAB)携带的β-内酰胺酶的耐药基因及其流行特征。方法收集2015年10—12月呼吸ICU临床患者送检标本分离的CRAB。试验菌株进行5种耐药基因(KPC-2、IMP、VIM、NDM-1、OXA-23)PCR特异性扩增,扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳和测序分析,并且进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)同源性分析。结果 2015年10—12月呼吸ICU共分离CRAB22株,其中19株(86.36%)分离于痰。22株CRAB对复方磺胺甲口恶唑的耐药率为59.09%,对米诺环素的耐药率为9.09%,对多粘菌素B均敏感,对其他检测抗菌药物的耐药率均为80%以上。PCR扩增未检出KPC-2、IMP、NDM-1三种耐药基因,而VIM、OXA-23阳性率均为100%。PFGE同源性分析结果:22株菌分为13种不同带型,每种带型包含菌株数为1~5株不等,其中9种带型(69.23%)分别只包含1株菌,其他4种(30.77%)带型包含菌株数为2~5株不等。其中,A5、A7和A8为同一型,A9、A11、A14、A19和A22为同一型,A4、A10和A12为同一型,A16和A18为同一型。结论呼吸ICU分离CRAB携带的β-内酰胺酶耐药基因主要为VIM、OXA-23型基因。同源性分析证实,有小部分为同一克隆株,存在小范围的流行。     

医院感染鲍曼不动杆菌的耐药性和分子流行病学研究

目的：分析医院内鲍曼不动杆菌的耐药性和分子流行病学特征。方法对2014年3—4月浙江大学金华医院细菌室分离的39株鲍曼不动杆菌进行耐药性分析,同时应用脉冲场凝胶电泳（PFGE）进行分子分型并应用聚类分析软件分析其同源性。结果39株鲍曼不动杆菌中37株为临床菌株,主要分离自ICU患者的痰液样本。39株鲍曼不动杆菌中碳青霉烯类抗生素耐药鲍曼不动杆菌（CRAB）、多重耐药鲍曼不动杆菌（MDRAB）和泛耐药鲍曼不动杆菌（XDRAB）的检出率分别为74.4%、56.4%和25.6%,未检到全耐药鲍曼不动杆菌;未检到替加环素耐药菌株,检出中介菌株9株（中介率23.1%）。耐药率在70%以上的其他抗菌药物依次为环丙沙星（82.1%）、头孢曲松（79.5%）、庆大霉素（76.9%）、头孢吡肟（74.4%）、亚胺培南（74.4%）、哌拉西林/他唑巴坦（71.8%）。头孢哌酮/舒巴坦的耐药率为13.5%。PFGE电泳图谱聚类分析结果表明,39株鲍曼不动杆菌共分为17型,其中以外科ICU流行性最为广泛,主要包括A型、C型、J型、M型等鲍曼不动杆菌克隆株;其次为内科ICU和新生儿ICU,流行菌株以O型、P型为主。部分病区之间、吸引器开关与患者之间分离的鲍曼不动杆菌存在一致的同源性。结论浙江大学金华医院的CRAB、MDRAB、XDRAB菌株检出率较高,在部分ICU病区呈暴发流行,以A型、C型、J型菌株流行最广,吸引器开关可能为鲍曼不动杆菌院内交叉感染的重要媒介。     

耐替加环素鲍曼不动杆菌的同源性及临床分布

目的了解某院耐替加环素鲍曼不动杆菌的同源性及临床分布。方法选取该院2013—2014年各临床科室送检标本分离的多重耐药鲍曼不动杆菌（88株）,检测其对替加环素的敏感性;应用脉冲场凝胶电泳（PFGE）分析替加环素耐药菌株的同源性,以及感染患者的临床特征和科室分布。结果88例患者在检出多重耐药鲍曼不动杆菌前未曾使用过替加环素。88株多重耐药鲍曼不动杆菌中4株（4.55%）对替加环素耐药,分别为10、31、33和87号菌株。PFGE结果显示,31、33和87号菌株同一基因型,同源性高,分布于医院3个不同的独立病区;31号菌株在综合重症监护病房（ICU）检出,33号菌株在急诊ICU检出,虽在不同科室检出,但在检出前患者有转科情况,曾同时期住胃肠外科和急诊ICU;87号菌株在神经外科ICU检出,此患者从未转科,检出时间距31、33号菌株检出晚7～8个月。10号菌株于急诊ICU检出,该患者未曾转科。结论该院多重耐药鲍曼不动杆菌中替加环素耐药菌株检出率低,检出菌株大部分具有同源性,不同病区可能存在交叉感染。     

住院患者产CTX-M型ESBLs和KPC的大肠埃希菌感染分布与耐药基因分析

目的了解住院患者产CTX M型超广谱β 内酰胺酶（ESBLs）和碳青霉烯酶（KPC）大肠埃希菌感染的临床分布与耐药情况。方法收集某院2011-2012年临床送检标本分离的多重耐药大肠埃希菌,采用微量肉汤稀释法检测抗菌药物最低抑菌浓度（MIC）;聚合酶链反应（PCR）扩增ESBLs和KPC基因,确定CTX M和KPC基因型别及MLST分型。结果48株多重耐药大肠埃希菌中单产ESBLs 45株（93.75%）,携带blaCTX M基因者44株（91.67%）,其中blaCTX M 1组基因20株（41.67%）、blaCTX M 9组基因32株（66.67%）,同时携带两组基因者8株（16.67%）。经基因测序确定的基因亚型有CTX M 14（65.91%,29/44）、CTX M 55（31.82%,14/44）、CTX M 15（11.36%,5/44）、CTX M 3（2.27%,1/44）、CTX M 24（2.27%,1/44）和CTX M 65（2.27%,1/44）,其中CTX M 14+CTX M 55（11.36%,5/44）、CTX M 14+CTX M 15（4.55%,2/44）和CTX M 55+CTX M 65（2.27%,1/44）。产ESBLs+KPC菌株中2株（4.17%）经PCR扩增均携带blaKPC和 blaCTX M基因,经测序分析1株为CTX M 14+KPC 2,1株为CTX M 3+KPC 2。ST131 （53.66%）是主要的MLST型别,检测到ST648、ST405、ST167、ST1193等ST型。 结论该院大肠埃希菌产ESBLs基因型中CTX M 14、CTX M 55和CTX M 15亚型最常见,存在多种不同亚型;ST131是主要的MLST型别,检测到产KPC 2型碳青霉烯酶菌。     

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的耐药机制与分子流行病学特征

目的了解耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)的碳青霉烯酶基因携带情况及分子流行病学特点,为医院感染控制和临床治疗提供实验室依据。方法收集山东省泰安市中心医院2014年1—11月临床分离的CRKP 13株,采用Walk Away 96 PLUS型全自动细菌分析仪进行细菌鉴定和药敏试验;改良Hodge试验及EDTA协同试验进行碳青霉烯酶表型的确认;采用多聚酶链反应(PCR)方法扩增相关碳青霉烯类耐药基因(bla KPC、bla IMP、bla VIM、bla GIM及bla NDM-1)并测序;采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)和多位点序列分型(MLST)调查菌株的克隆相关性并进行流行病学比较。结果 13株CRKP主要来源于痰(7株,53.85%)及尿(4株,30.77%),对复方磺胺甲口恶唑、四环素的耐药率较低(均40%),对其他抗菌药物(除阿米卡星)的耐药率均70%,对碳青霉烯类药物的耐药率均为100%;13株细菌改良Hodge试验均为阳性,5株细菌EDTA协同试验阳性;经PCR测序确认,碳青霉烯酶基因中,bla KPC基因最常见(13/13),其次为bla NDM-1基因(5/13),未发现其基因bla IMP、bla VIM和bla GIM;PFGE聚类结果显示,13株肺炎克雷伯菌被分为5型,主要为C型(9/13),且均属于ST11,其他分别为ST37、ST626、ST628和ST668型。结论碳青霉烯酶基因bla KPC与bla NDM-1是引起该院肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素耐药的主要原因,ST11是主要的克隆类型,医院需尽快强化医院感染预防控制措施。     

165株黏质沙雷菌耐碳青霉烯类基因检测 与克隆型分析

摘要:目的　研究临床分离耐碳青霉烯类黏质沙雷菌株的耐药基因及其克隆型,探讨黏质沙雷菌耐药流行特点与预防治疗对策。方法　收集2013-2014年从本医院不同病区分离的耐碳青霉烯类黏质沙雷菌165株,以Vitek 2 compact 检测其药敏结果,以PCR检测其耐碳青霉烯酶类基因,ERIC-PCR分析菌株的克隆型。结果　耐碳青霉烯类黏质沙雷菌主要分离自重症监护室,其对氨曲南、头孢曲松、厄他培南与亚胺培南100%耐药;对左旋氧氟沙星、阿米卡星、复方新诺明、头孢吡肟、头孢他啶耐药率较低,分别为3.8%、4.4%、8.2%、19.0%和21.5%。PCR共检出常见碳青霉烯酶基因87株,其中36株携带blaSME基因,24株携带blaKPC基因,14株同时携带blaKPC和blaSME基因,13株携带blaNDM-1基因。165株可分为5类克隆型,Ⅰ类克隆型63株,Ⅱ类克隆型46株,Ⅲ类克隆型31株,Ⅳ类克隆型13株,Ⅴ类克隆型12株。结论　耐碳青霉烯黏质沙雷菌的耐药机制复杂,以产A类碳青霉烯酶为主。同种克隆型趋于集中,容易引发区域医院感染暴发流行。合理应用抗菌药物,降低抗生素选择压力有利于控制耐碳青霉烯类菌株的蔓延。