白假丝酵母菌感染分布及耐药性分析

回顾性分析某院2003-2005年各类临床标本分离的186株白假丝酵母菌分布特点及药敏结果。186株白假丝酵母菌主要分离自呼吸道标本，占60．75％；其次为中段尿18．28％，分泌物11．83％，血液4．30％，其他4．84％。白假丝酵母菌对两性霉素B、制霉菌素、5-氟胞嘧啶、氟康唑、咪康唑、酮康唑、益康唑、伊曲康唑的耐药率分别为4．84%、9．68%、41．94％、63．98％、61．83％、67．23％、46．77％、66．67％；3年来，白假丝酵母菌除对两性霉素B和制霉菌素的耐药率显著降低（P〈O．01），对益康唑的耐药率没有太大变化（P〉0．05）外，对5-氟胞嘧啶、氟康唑、酮康唑、咪康唑的耐药率显著增高（P〈0．01或P〈0．05）。     

白假丝酵母菌感染与药敏分析

为了解白假丝酵母菌分布特点及其耐药性，对分离自临床标本的假丝酵母菌采用显色平板，联合YBc及VITEK-32半自动细菌检测分析仪进行鉴定，并用CANDIFAST真菌药敏试验板做药敏试验。465株假丝酵母菌中白假丝酵母菌占71．83％（334株）；以中老年患者分离居多（64．67％），其次为侵入性治疗者（60．78％），使用肾上腺糖皮质激素者（16．77％）；对两性霉素B具有较高敏感性（91．0％），其次为制霉菌素（87．1％），5-氟胞嘧啶（84.7％）。     

白假丝酵母菌生物膜与其耐药性的相关性研究

[目的]观察白假丝酵母菌生物膜形成过程中耐药性产生变化情况.[方法]利用载玻片法形成白假丝酵母菌生物膜结构,倒置显微镜观察不同阶段的生物膜形态,用NCCLS微量稀释法检测浮游状态白假丝酵母菌耐药性,用XTT减低法获得生物膜耐药性的变化情况.[结果]白假丝酵母菌耐药性随着生物膜的成熟不断增强,比游离态菌 高100倍以上.[结论]成熟生物膜与耐药性增强有明显正相关性.     

白假丝酵母菌致食物中毒机理的研究

目的研究白假丝酵母菌致食物中毒的机理。方法首先提取白假丝酵母菌的毒性物质,明确其性质,再进行小白鼠灌胃试验和家兔灌胃试验。结果白假丝酵母菌毒素为热不稳定外毒素,能使小白鼠疲倦、厌食、竖毛、发绀、颤抖、呼吸加快、腹泻、脱水甚至死亡;能使家兔心跳、呼吸加快、呕吐、腹泻。结论白假丝酵母菌能产生热不稳定外毒素,引发食物中毒。     

白假丝酵母菌对唑类药物耐药机制的研究进展

近年来，白假丝酵母菌对唑类药物耐药问题备受人们关注。随着耐药菌株的不断出现，耐药机制的研究也取得了一定的进展。白假丝酵母菌对唑类药物耐药机制主要与Ergll基因、CDR1和CDR2基因、MDR1基因的过度表达及突变有关。本文就这方面研究新进展进行综述。     

IL-2在阴道白假丝酵母菌病小鼠模型中的作用

目的:通过对小鼠阴道白假丝酵母菌病感染过程中IL-2的变化,探讨其在阴道白假丝酵母菌病细胞免疫中的作用。方法:将试验小鼠分为3组,分别为一次感染组(A组)、二次感染组(B组)、对照组(C组),通过小鼠阴道种植白假丝酵母菌制做小鼠阴道白假丝酵母菌感染模型,分别于2、7、14天取小鼠阴道灌洗液及血液测IL-2的含量,并留取部分阴道灌洗液做真菌培养,观察两者之间的联系。结果:A组与B组血液及阴道灌洗液中IL-2含量在感染第7天达到高峰,感染第2天及第14天含量无显著变化,含量均高于对照组。B组同时期IL-2含量较A组显著增多。A组及B组同时期阴道灌洗液中IL-2含量较血液中显著增多。阴道灌洗液真菌培养显示A、B组CFU计数于第7天达到高峰,第14天与第2天无显著差异。B组同时期真菌培养CFU计数比A组显著增多。结论:IL-2在抗白假丝酵母菌的感染过程中发挥了作用,主要是通过阴道局部粘膜免疫发挥作用,且在再次感染过程中发挥较大作用。     

白假丝酵母菌基因分型方法的研究进展

正随着医疗技术的快速发展,各种医用材料和侵入性操作技术在临床广泛应用,广谱抗菌药物、糖皮质激素和免疫抑制剂在临床的大量使用,医院内真菌感染的比例越来越高,其中白假丝酵母菌在真菌感染中所占比例最高,是临床中常见的致病菌之一。白假丝酵母菌主要引起皮肤、黏膜的浅表部位感染,侵袭性呼吸系统感染和血流感染等,其中血流感染相对严重,如白假丝酵母菌血症。早在二十世纪八十年代,Pfaller等~([1])报道,侵袭性假丝酵母菌感染     

雌激素诱导白假丝酵母菌阴道炎小鼠模型中环氧化酶-2的表达

目的:探讨雌激素对白假丝酵母菌性阴道炎模型小鼠阴道组织中环氧化酶-2(COX-2)表达的影响及其在发病机制中的意义。方法:80只小鼠随机分为雌激素化未感染白假丝酵母菌组(E组)、未雌激素化感染白假丝酵母菌组(I组)、雌激素化感染白假丝酵母菌组(EI组)和空白对照组(C组)。制作白念珠菌性阴道炎小鼠模型,每组分别于接种后第2天、第4天、第7天和第14天取小鼠阴道组织,用免疫组化方法检测组织中COX-2的表达。结果:除C组外,各组小鼠阴道组织内第2天出现COX-2的阳性表达,持续升高至第7天达到高峰,第14天时开始下降;E组在第4、第7天COX-2免疫组化检测OD值分别为0.157±0.017和0.161±0.014,与相应C组(0.101±0.014和0.106±0.014)比较均具有显著性统计学差异(P均<0.05)。EI和I组第7天的OD值分别达到0.275±0.059和0.234±0.063,与对照组相比明显上调(P均<0.01),且EI组显著高于I组(P<0.05)。结论:在白假丝酵母菌性阴道炎小鼠模型中,雌激素能通过诱导阴道组织中COX-2的表达在其发病机制中起重要作用。     

实时荧光定量PCR快速检测妇科白假丝酵母菌

目的 建立一种快速、灵敏、特异的鉴定白假丝酵母菌实时荧光定量PCR方法.方法 利用实时荧光定量PCR反应体系对妇科白假丝酵母菌进行检测.鉴定结果与临床常规鉴定方法对照,评价其敏感度、特异度及重复性.结果 通过对50例样品的检测,结果显示实时荧光定量PCR法检测标本的鉴定结果与常规鉴定方法的结果对照,特异度为100％,敏感度为100％;最小能检测到10个拷贝数的重组质粒;批内重复实验和批间重复实验结果均与常规鉴定方法结果相符.结论 实时荧光定量PCR法鉴妇科白假丝酵母菌,特异度和敏感度高,重复性好,且快速、简便,该方法将有助于妇科白假丝酵母菌病的早期诊断和针对性治疗.     

假丝酵母菌属医院感染与耐药性分析

目的探讨假丝酵母菌属医院感染现状及耐药性,为临床医师合理用药提供科学依据。方法用显色培养基和API真菌鉴定条鉴定真菌,按照《全国临床检验操作规程》进行操作。结果 102株假丝酵母菌属主要分布于重症监护病房(ICU)、内科、外科及肿瘤病区,分别占50.0%、23.5%、15.7%及10.8%;102株假丝酵母菌属中,白色假丝酵母菌占59.8%、光滑假丝酵母菌占19.6%;假丝酵母菌属对4种抗菌药物耐药率最高的是氟康唑,伊曲康唑次之,两性霉素B和5-氟胞嘧啶耐药率较低,白色假丝酵母菌对4种药物的耐药率分别为50.8%、36.1%、8.2%和1.6%。结论假丝酵母菌属的耐药性已十分严重,应加强监测、预防与控制。     

白色念珠菌CDR基因表达与氟康唑体外药敏试验的关系研究

目的调查白色念珠菌临床株对氟康唑的耐药情况,研究白色念珠菌临床耐药基因的表达与氟康唑耐药之间的关系。方法采用M27-A2微量肉汤稀释法,对某院微生物实验室2010年分离保存的221株来自就诊患者的痰、中断尿、粪便和咽拭子的白色念珠菌进行氟康唑MIC值测定。以白色念珠菌18S RNA为内参照,采用RT-PCR技术观察比较耐药株和敏感株组在不同氟康唑浓度下CDR1和CDR2基因的转录水平。结果 221株白色念珠菌中,有57.47%（127株）对氟康唑敏感,10.86%（24株）剂量依赖敏感,31.67%（70株）耐药。不同药物浓度作用下,耐药株组CDR1和CDR2的表达量相对要高于敏感株组（P〈0.05）。结论白色念珠球菌对氟康唑耐药率较高,耐药株组CDR1和CDR2表达量高于敏感株组。     

G试验和GM试验联合痰真菌培养对ICU患者侵袭性真菌感染的早期诊断

目的探讨血清1,3-β-D葡聚糖检测(G试验)及半乳甘露聚糖抗原检测(GM试验)联合痰真菌培养在重症监护病房(ICU)患者侵袭性真菌感染(IFI)早期诊断中的价值。方法选取徐州医科大学附属医院2015年1月—2016年12月重症监护病房(ICU)有高危IFI因素的住院患者,根据IFI的诊断标准将患者分成3组:IFI组(包括确诊及临床诊断)、拟诊IFI组、非IFI组。分析三组患者血清G试验、GM试验和痰真菌培养的结果,评价三者联合检测对IFI的早期诊断价值。结果共调查ICU住院患者264例,其中IFI组56例,拟诊IFI组43例,非IFI组165例。56例诊断IFI患者中,血清G试验阳性46例,GM试验阳性39例,真菌培养阳性34例;三者联合检测的敏感性98.2%、特异性82.4%、阳性预测值65.5%、阴性预测值99.3%、阳性似然比5.58、阴性似然比0.02、Youden指数0.98。三者联合检测的敏感性、阴性预测值均高于G试验、GM试验和痰真菌培养的单独检测,差异均有统计学意义(均P0.05);但是,三者联合检测的特异性、阳性预测值与单独检测G试验、GM试验和痰真菌培养比较,差异均无统计学意义(均P0.05)。结论 G试验、GM试验和痰真菌培养三者联合检测能提高ICU患者IFI早期诊断的敏感性,从而指导临床医生早期治疗IFI。     

实时定量PCR快速检测外科发热患者血中白念珠菌载量的方法

目的 建立实时定量PCR(RQ-PCR)快速检测血中自念珠菌(Gandiad albicans)载量的方法,并对可能存在肠屏障损伤和肠道菌移位的外科发热患者标本进行检测.方法 基于白念珠菌基因组单拷贝基因NAG1设计引物和探针;构建并制备质粒做标准品;用QIAamp(R) DNA Blood Mini Kit试剂盒提取白念珠菌基因组DNA;建立20μl TaqMan探针RQ-PCR反应体系;对74份外科发热患者临床标本进行定量检测.结果 引物和探针特异性好;标准曲线R2 值0.9918～0.9985,扩增效率0.88～1.027,检测限为100 拷贝/μl上机检测液(即约1.1×103 cfu/ml全血),仪器检测灵敏度为97.46%,特异度为100%,平均准确性为(99.64±2.08)%,批内及批间重复性的平均变异系数分别为(14.76±2.64)%和(17.85±3.53)%;血标本中白念珠菌基因组平均提取效率为(88.60±5.73)%,提取效率平均变异系数为(11.70±5.36)%;标本于-20℃存放3、6个月后和0时间点定量结果比较,差异无显著性(P=0.267);74份外科发热患者血中白念珠菌的阳性率为2.7%,最高含量约为4.42×103 cfu/ml.结论 RQ-PCR可以快速、灵敏、特异地定量检测血标本中白念珠菌,重复性好,适用于临床日常检验.少数外科发热患者周围血中存在白念珠菌.     

环磷酰胺致小鼠免疫功能低下模型建立与评价

目的 建立环磷酰胺致免疫低下模型,应用流式细胞术检测小鼠自然杀伤细胞(NK)细胞分化抗原CD69⁺/自然杀伤细胞G2D受体(NKG2D⁺)和T淋巴细胞分化抗原CD69⁺/CD3⁺评价其免疫低下动物模型中的应用.方法 以环磷酰胺强化注射、少量多次注射、一次大剂量注射分别建立免疫低下模型,30 d后处死,取外周血和脾,分别检测小鼠外周血自然杀伤细胞(NK)亚群CD69⁺/NKG2D⁺和外周血T淋巴细胞CD69⁺/CD3⁺亚群,同时进行脾NK细胞活性测定,ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验,观察环磷酰胺对外周血T淋巴细胞、NK细胞免疫功能的影响.结果 环磷酰胺强化注射、少量多次注射均可使小鼠外周血和牌的活化的NK细胞和T淋巴细胞比例及T淋巴细胞转化增殖能力、脾NK细胞活性降低.结论 环磷酰胺强化注射可以长时降低小鼠细胞免疫功能的作用,适用于建立长期免疫低下模型;流式细胞术检测T淋巴细胞和NK细胞分化抗原在免疫调节功能评价中有较好应用价值.     

利用白消安致BALB/c小鼠生殖毒性建立NOA疾病模型

目的利用白消安对BALB/c雄性小鼠生殖毒性,建立不同损伤程度的NOA(non-obstructive azoospermia,NOA)动物模型。方法本研究取6~8周龄性成熟的BALB/c雄性小鼠共45只,随机分为3组:0 mg/kg组、30 mg/kg组、40 mg/kg组,每组15只。每2周观察并记录小鼠体重,睾丸和附睾湿重,睾丸体积,及生精细胞损伤程度。通过HE染色,判断生精细胞受损情况;通过免疫组化技术检测受损生精细胞停滞的减数分裂阶段,该法主要借助生精细胞减数分裂过程中的三个标记蛋白:STRA8(Stimulated by Retinoic Acid 8,STRA8)减数分裂启动标记蛋白,SCP3(Synaptonemal Complex Protein 3,SCP3)减数分裂中标记蛋白,TNP1(Transition Protein 1,TNP1)减数分裂后标记蛋白。结果注射白消安后小鼠存活良好,注射白消安2周时,生精细胞开始损伤,30 mg/kg组轻于40 mg/kg组;4周时,40 mg/kg组呈唯支持细胞样变化;6-10周时,生精功能开始恢复,30 mg/kg组恢复明显快于40 mg/kg组;40 mg/kg组STRA8、SCP3、TNP1表达在注射4周最低,第8周开始恢复到正常水平。结论白消安40 mg/kg组单次注射4周时,可建立为唯支持细胞型NOA生精障碍模型;单词注射4-8周期间,可建立损伤程度不同的NOA生精障碍模型,为睾丸组织体外培养提供稳定的研究组织。     

Plasma beads loaded with Candida albicans cytosolic proteins impart protection against the fungal infection in BALB/c mice

The development of a prophylactic vaccine against systemic candidiasis, employing Candida albicans cytosolic proteins (Cp) as antigen and fibrin cross-linked plasma beads as an antigen bearing dual delivery system is described. Groups of mice were administered either with free Cp, or Cp entrapped in plasma beads, Cp entrapped in liposomes or liposome encapsulated Cp further entrapped in plasma beads. Humoral immunity was studied by measuring the anti-Cp antibody titers in the sera of the immunized animals. Induction of cell-mediated immunity was assessed by delayed type hypersensitivity (DTH), NO production, up-regulation of co-stimulatory molecules viz. CD80, CD86 on APCs on one hand and T-cells proliferation as well as induction of IFN-γ and IL-4 on the other. The efficacy of various vaccine formulations in protecting mice against a lethal challenge with C. albicans, was assessed by determining animal survival rate and fungal burden in the systemic circulation and vital organs. Among various Cp-based vaccines investigated, the preparation containing liposomized Cp entrapped in plasma beads imparted superior protection in the immunized mice as compared to other antigens delivery systems.     

弓形虫感染致BALB/c小鼠生殖毒性作用

目的探讨不同剂量弓形虫感染对BALB/c小鼠的生殖毒性作用。方法将50只受精鼠随机分为5组,每组10只;孕8 d,阴性对照组给予磷酸盐缓冲液,低、中、高剂量组腹腔注射50、100、200个/只纯化RH株弓形虫速殖子,阳性对照组给予环磷酰胺20 mg/kg;孕18 d观察孕鼠主要脏器及胚胎情况。结果阳性对照组吸收胎率(19.6%)、死胎率(23.6%)、流产率(4.6%)、畸胎率(31.4%)与阴性对照组比较明显升高,差异均有统计学意义(P<0.01)。弓形虫100、200个/只剂量组吸收胎率、死胎率、流产率分别为15.7%、8.2%、5.8%和28.9%、12.5%、15.1%,高于阴性对照组(P<0.05);200个/只剂量组活胎畸形率与阴性对照组比较(27.3%,0%)明显升高(P<0.01)。结论 100、200个/只纯化RH株刚地弓形虫速殖子孕中期感染可致BALB/c小鼠生殖毒性。     

Therapeutic efficacy of a multi-epitope vaccine against Helicobacter pylori infection in BALB/c mice model

Epitope vaccine is a promising option for therapeutic vaccination against Helicobacter pylori (H. pylori) infection. In this study, we constructed a multi-epitope vaccine with five epitopes and mucosal adjuvant E. coli heat-labile enterotoxin B subunit (LTB) named HUepi-LTB and evaluated its therapeutic effect against H. pylori infection in BALB/c mice model. HUepi-LTB containing three Th epitopes from UreB and two B cell epitopes from UreB and HpaA was constructed and expressed in E. coli. Oral therapeutic immunization with HUepi-LTB significantly decreased H. pylori colonization compared with oral immunization with PBS, and the protection was correlated with antigen-specific CD4⁺ T cells and IgG and mucosal IgA antibody responses. This multi-epitope vaccine may be a promising vaccine candidate that may help to control H. pylori infection.     

BALB/c小鼠食物过敏动物模型的实验研究

目的　BALB/ c小鼠作为食物过敏动物模型的可行性一直存在争议 ,本研究探讨BALB /c小鼠作为食物过敏动物模型的可行性。方法　对相应试验组动物分别腹腔注射 0 . 2 5ml 2 0mg/ ml卵清蛋白 (OVA)、牛血清白蛋白 (BSA)、大豆胰蛋白酶抑制剂 (TI)和马铃薯酸性磷酸酶 (PAP )共两次 ,间隔为一周。检测血浆中的组胺水平和血清中特异IgE抗体含量 ,同时进行皮肤过敏反应实验 (PCA)。结果　OVA、BSA、TI及PAP组32倍稀释血清中均可检测到特异IgE抗体 ;血浆中组胺水平较对照组显著升高。常见致敏食物蛋白质OVA和TI、不常见致敏食物蛋白质BSA和无致敏史食物蛋白质PAP均可使BALB/ c小鼠产生过敏反应。结论　BALB c小鼠不适合作为食物过敏动物模型。     

DNA vaccine encoding the Toxoplasma gondii bradyzoite-specific surface antigens SAG2CDX protect BALB/c mice against type II parasite infection

The surface antigens SAG2C, SAG2D, and SAG2X, which expressed specifically on bradyzoite stage of Toxoplasma gondii, have been demonstrated to be important for persistence of cyst in the brain. In this study, DNA vaccines expressing SAG2C, SAG2D, and SAG2X of T. gondii were constructed and their protective efficacy were evaluated in BALB/c mice. Mice vaccinated with pVAX1-SAG2C (pSAG2C), pVAX1-2D (pSAG2D) or pVAX1-2X (pSAG2C) showed higher levels of serum IgG antibodies and lymphocyte proliferation response compared to PBS and pVAX1 treated mice (p < 0.05). The immune response was characterized by a strong Th1 response and increased cytokine production of IL-2 and IFN-γ. Vaccinated mice displayed significant protection against the challenge with the cyst of T. gondii genotype II strain of PRU (cyst-forming in mouse). A significant reduction in the brain cyst burden was detected in the mice immunized with pSAG2C (72%), pSAG2D (23%), pSAG2X (69%) alone and even more reduction rate, 77%, was achieved in the combination group compared to PBS treated mice. The results implied that immunization with DNA vaccines expressing SAG2C, SAG2D, and SAG2X, and, in particular, a combination of all three DNA plasmids, could effectively protect the mice against T. gondii chronic infection.