人冠状病毒HCoV-OC43的研究进展

冠状病毒(Coronaviruses)属于套式病毒目冠状病毒科冠状病毒属,圆形或近似圆形,直径为100～160 nm.有包膜,包膜上有突起,即棘突糖蛋白(spike glycoprotein,S蛋白)或血凝酯酶糖蛋白(hemagglutinin-esterase glycoprotein,HE蛋白),在电子显微镜(简称电镜)下冠状病毒呈日冕冠或皇冠状,故以此得名[1-2].冠状病毒的基因组为单股正链的RNA,大小为27 ～ 32 kb,是已知所有RNA病毒中基因组最大的[3].     

新型冠状病毒检测技术的研究进展

快速、高灵敏度、高准确度的病毒检测技术对于控制新型冠状病毒（SARS-CoV-2）的传播至关重要。该研究介绍了现有的各种SARS-CoV-2检测技术,以及其他先进技术在SARS-CoV-2诊断中的应用,并通过不同检测技术的比较试图寻找更快、更灵敏、更准确且操作更简单的检测技术,为SARS-CoV-2的快速诊断提供思路。     

一步法RT-PCR检测SARS冠状病毒技术研究

[目的]建立一步法RT—PCR方法，对非典型肺炎疑似病例进行SARS相关冠状病毒检测。[方法]参照WHO公布的PCR检测SARS相关冠状病毒的引物序列，我们合成了4对引物，利用RT—PCR技术建立一步法检测SARS相关冠状病毒的方法。[结果]利用该方法对武汉市非典型肺炎疑似病例进行SARS相关冠状病毒检测，其中样品W20用4对引物检测均在相应的位置出现了DNA条带，样品W1只有BNIin—s/as引物出现预期产物。同时我们将W20的BNIin—s/as引物扩增的109bp产物进行了序列测定，结果显示该片段序列与其他地区和国家的SARS冠状病毒的同源性极高，均在99．5％以上。[结论]一步法RT—PCR扩增产物是SARS冠状病毒基因片段，我们建立的一步法RT—PCR是一种可靠的检测方法。     

肉品卫生的实验室快速检测技术与判定

随着我国商品经济的发展和广大人民物质生活水平的提高,广大消费者对肉品卫生质量的要求也越来越高,肉品卫生已成为人们普遍关注的热点。上至党和国家领导人,下至普通平民百姓,从街头巷议到全国人大及政协会议,肉品卫生、‘餐桌污染”等话题是大家共同关注的焦点。保     

RT-LAMP法对Ⅱ型诺如病毒的检测

目的在本实验室建立适合于基层使用的Ⅱ型诺如病毒快速检测方法 RT-LAMP法,并将其应用于临床病毒性腹泻的检测,为了解诺如病毒导致的病毒性腹泻在南京市的流行状况提供方法和数据。方法用实验室保存的诺如病毒阳性标本进行方法学建立,并收集南京地区某医院2011年秋冬因腹泻就诊并临床诊断为病毒性腹泻的57例成年人患者的粪便进行Ⅱ型诺如病毒检测,包括荧光定量PCR法及基于环的等温扩增(LAMP)法,并对检测为阳性标本核酸进行测序分析。结果所建立的Ⅱ型诺如病毒RT-LAMP法和荧光定量检测法均可以检测到稀释到10 000倍的阳性标本,即两种方法具有相同的敏感度。对于诺如病毒I型、甲肝病毒及乙肝病毒没有扩增,即对诺如病毒Ⅱ型的扩增具有特异性。57例临床粪便标本,荧光定量PCR法与RT-LAMP法均检测到6例Ⅱ型诺如病毒阳性病例,两种方法符合率为100%,经测序分析,5例为诺如病毒GⅡ.4亚型,1例为诺如病毒GⅡ.6亚型。5例GⅡ.4亚型分别来源于4个不同的流行株,3个国家和地区,巴西、俄罗斯和北京。结论南京地区2011年诺如病毒腹泻病例以GⅡ.4亚型为主要感染亚型,也有GⅡ.6亚型。结果提示该病毒传播范围的广泛性和流行病学防控的艰巨性。荧光定量PCR与RT-LAMP法都可以快速进行病原检测,但RT-LAMP法因其方法简易、不需要特殊仪器、结果直接肉眼观察而更适合基层使用。     

环介导恒温扩增技术检测人冠状病毒的研究进展

冠状病毒(Coronavirus,CoV)是一类严重危害人类和畜禽健康的致病微生物,广泛存在于自然界中。目前已知能感染人的冠状病毒共7种,分别为人冠状病毒229E(HCoV-229E)、人冠状病毒OC43(HCoV-OC43)、SARS冠状病毒(Severe acute respiratory syndrome virus,SARS-CoV)、人冠状病毒NL63(HCoV-NL63)、人冠状病毒香港I(HCoV-HKU1)、中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)和新型冠状病毒(Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)。核酸扩增技术是生命科学领域非常有效的技术,环介导恒温扩增技术(loop mediated isothermal amplification,LAMP)是科研人员发展的十多种核酸恒温扩增技术之一。本文着重介绍LAMP技术在检测人冠状病毒的研究进展。     

一种基于颜色特征的快速自动目标检测方法

为快速检测目标,本文提出了一种基于颜色特征的方法。该方法使用人工神经网络进行颜色分类,在多分辨率下依据定位标识器最显著的特征进行初次搜索,得到一系列初始目标,然后在原图中对它们进行特征提取,再使用人工神经网络进行真伪目标判别。实验证明,该方法可以准确、实时地检测目标。     

H7N9人禽流感病毒RT-LAMP快速检测方法的建立

目的采用RT-LAMP技术建立一种针对H7N9人禽流感病毒的特异、灵敏、快速、可视、简便的检测方法。方法根据H7N9人禽流感病毒HA基因的保守序列,利用Primer Explorer V4软件,设计一套针对HA基因的7个区域的5条特异性引物,优化反应体系与扩增条件,并验证其特异度与灵敏度。结果该方法能检测出H7N9亚型流感病毒,而对H1亚型、H3亚型、H5亚型、H6亚型、H9亚型流感病毒、乙型流感病毒、人副流感病毒、呼吸道合胞病毒、人冠状病毒、人偏肺病毒、人腺病毒、人博卡病毒均无扩增反应,其最低检出限为0.01 pg。另外,扩增反应只需要45 min即可判读结果,并可通过反应液是否有沉淀或向反应液中加入荧光染料来对结果进行可视化诊断。结论本研究建立的RT-LAMP检测方法具有高特异度、高灵敏度、快速简便、可视化判读结果等优势,适合在基层进行H7N9人禽流感病毒的快速检测,并可以应用于大流感疫情的准确筛查。     

人冠状病毒HCoV-HKU1环介导等温扩增检测技术的研究

目的建立一种快速、灵敏、高效的人冠状病毒HKU1(HCoV-HKU1)LAMP扩增检测方法。方法应用生物信息学软件设计5套LAMP扩增引物,以合成的HCoV-HKU1质粒为模板,通过实时浊度法进行最佳引物组的筛选,并分析该方法的特异性和灵敏度。结果 HCoV-HKU1 LAMP扩增方法针对其他病原微生物及人类基因组无反应信号。该方法可以检测到1拷贝/μl的HCoV-HKU1质粒。结论 HCoV-HKU1 LAMP扩增方法特异性好、灵敏度高,在临床鉴别诊断和口岸冠状病毒的检测中具有很好的应用前景。     

基于微阵列化学发光技术的新型冠状病毒（SARS-CoV-2）抗体检测试剂盒研制及应用

目的 建立新型冠状病毒（SARS-CoV-2）抗体检测方法。方法 考核基于微阵列化学发光技术的新型冠状病毒（SARS-CoV-2）抗体检测试剂盒的检测性能,并对临床疑似病例血清样本进行采集,在实验室完成检测、确认。结果 对本试剂盒进行性能分析显示其具有高灵敏性、高特异性和良好的重复性。通过对563例疑似样本的检测,发现抗体检出量的变化对被检测对象的感染状态具有一定的指示作用。结论 作为对新冠病毒核酸检测的有力补充,基于微阵列化学发光技术的新型冠状病毒（SARS-CoV-2）抗体检测试剂盒能够同时定性检测血清样本中的新型冠状病毒（SARS-CoV-2）IgM和总抗体,可为入境人员检疫监测提供更全面的信息,有望对优化入境管理措施、减轻入境管理的工作负荷提供参考依据。     

基于模糊识别技术对血压判定的初步研究

血压判定方法是提高血压测量准确度的关键,本文主要阐述了根据示波法原理间接测量血压,提出了基于脉动波时间间隔特征的测量血压的方法;同时、利用模糊识别技术对高低血压进行研究,建立了相关的算法和规则,初步实现了对血压高低的判定。本文提出的模糊模式识别是判定高低血压非常有效的方法,具有很大实际应用价值。     

基于AI技术的新型冠状病毒肺炎CT影像特点分析

目的:通过AI技术分析新型冠状病毒肺炎(以下简称“新冠肺炎”)的CT影像特点。方法:回顾性分析武汉火神山医院经核酸检测确诊的957例新冠肺炎患者的CT影像资料。采用联影uCT76064排螺旋CT进行胸部扫描,扫描完成后将原始数据导入联影uAI新冠肺炎智能辅助分析系统进行AI计算。观察新冠肺炎患者的CT征象,包括病灶分布、影像特征等,并对左右肺的病灶体积进行比较。采用SPSS 19.0软件进行数据分析。结果:新冠肺炎患者的CT影像主要表现为双肺弥漫分布磨玻璃密度影;患者右肺病灶体积明显大于左肺,差异有统计学意义(P=0.000<0.05),右肺下叶病灶体积明显大于其余各肺叶,差异有统计学意义(P=0.000<0.05)。结论:采用AI技术分析新冠肺炎的CT影像,可以了解肺炎病灶分布特点,判断肺炎严重程度,具有重要的临床意义。     

15种新型冠状病毒核酸检测试剂的检测性能比较

目的 比较15种新型冠状病毒(COVID-2019)核酸检测试剂的阳性率,为新冠核酸检测实验室选择检测试剂提供参考。方法 挑选2021—2022年四川新型冠状病毒阳性样本50份,选取15种新型冠状病毒核酸检测试剂(编号A～O),严格按照试剂说明书进行核酸检测,运用SPSS 22.0软件对实验结果进行卡方检验。评价15种试剂检测新型冠状病毒核酸阳性率和阴性率的差异是否具有统计学意义,检验水准α=0.05。结果 15种试剂的阳性检出率分别为试剂A 18.00%、试剂B 30.00%、试剂C 60.00%、试剂D 62.00%、试剂E 56.00%、试剂F 46.00%、试剂G 62.00%、试剂H 56.00%、试剂I50.00%、试剂J 30.00%、试剂K 54.00%、试剂L 60.00%、试剂M 32.00%、试剂N 68.00%和试剂O 40.00%,其中试剂N检出率最高(68.00%),差异具有统计学意义(χ²=62.464,P<0.001);试剂检测限试剂阳性率比较差异无统计学意义(χ²=7.808,P=0.099);模板占体...     

咽拭子新型冠状病毒核酸检测的临床价值

 目的 了解某院新型冠状病毒肺炎（COVID-19）患者的临床资料及咽拭子检查结果,评价咽拭子新型冠状病毒（SARS-CoV-2）核酸检测的临床价值,为临床诊断COVID-19提供参考。方法 回顾性收集中南大学湘雅医院2020年1月23日—2月18日经SARS-CoV-2核酸检测确诊COVID-19患者病历资料,分析患者临床资料、病毒核酸检测的取样次数、取样方法、标本类型、检测手段等信息。结果 28例确诊患者平均年龄（43.78±14.46）岁,男女比例为2.5∶1,46.42%的患者有武汉/湖北旅居史,14.29%的患者与确诊COVID-19患者有密切接触史。患者临床表现以发热（78.57%）、咳嗽（53.57%）为主,实验室检查可见白细胞计数正常（71.43%）,淋巴细胞计数下降（53.57%）,肺部CT呈多发磨玻璃影（92.59%）及斑片影（70.37%）。28例确诊病例中,发病至确诊的中位时间为5.5 d。首次采集标本SARS-CoV-2检测阳性者18例（64.29%）,首次可疑阳性1例;首次阴性（包括可疑阳性）,第二次采集阳性者5例（17.86%）;前两次采集阴性,第三次采集阳性者2例（7.14%）;经四次检测阳性者1例（3.57%）;经五次检测后阳性者2例（7.14%）。鼻/口咽拭子采样26例（92.86%）,诱导排痰2例（7.14%）,经鼻咽拭子、咽拭子、痰标本RT-PCR确诊27例（96.43%）,痰标本NGS测序确诊1例（3.57%）。结论 COVID-19临床常表现有发热及干咳,但无特异性,仍需依赖SARS-CoV-2核酸检测才能确诊。咽拭子作为发热门诊首选的SARS-CoV-2核酸采集方式具有简便易行的优势,但检测结果呈阴性并不能排除SARS-CoV-2感染。     

水中大肠菌群检测方法的等效性判定

目的 比较大肠菌群酶底物滤膜法与传统膜过滤法、固定底物技术法用于水中大肠菌群检测时是否具有等效性.方法 采集60份水源水水样,用三种方法 同时进行检测,检测结果 用ISO 17994-2004<水质-微生物方法 之间的等效性建立标准>比较酶底物滤膜法与国标法用于水中大肠菌群检测结果 的一致性.结果 当水样数为100份时...     

新型冠状病毒核酸检测中的思维误区

目的探讨2019新型冠状病毒(2019-nCoV)核酸检测在目前新型冠状病毒肺炎(COVID-19)病例确诊中遇到的"假阴性"和"假阳性"问题。方法根据2019-nCoV核酸检测的基本原理和条件,从检测样本采集、运输、保存的方式,试剂盒的质量,以及临床实验室的管理等多方面,分析2019-nCoV核酸检测报告"假阴性"和"假阳性"的原因。结果研究结果论述了造成当前2019-nCoV核酸检测"假阴性"和"假阳性"的可能原因。优化样本采集的操作和方法,加强质控管理,开发应用新技术,加强对疑似病例和出院患者的诊断和管理,是避免2019-nCoV核酸检测报告出现"假阴性"的应对策略,并对保证核酸检测结果的及时性和准确性具有非常重大的意义,可供相关部门在制定防治策略和开展工作时参考。结论核酸检测阳性结果被视为2019-nCoV感染诊断的金标准,而阴性结果不能作为排除2019-nCoV感染的金标准,更不能作为排除COVID-19的金标准。     

新型冠状病毒检测系统性能验证分析

目的 验证新型冠状病毒核酸检测系统,分析是否满足口岸新型冠状病毒(SARS-CoV-2)快速检测要求。 方法 依据 《医学实验室质量和能力认可准则在分子诊断领域的应用说明》(CNAS-CL02-A009)要求,评估新型冠状病毒核酸检测系统(包括核酸提取试剂、核酸提取仪、PCR扩增试剂和 PCR 仪)检测性能,主要包括防污染情况、符合性、检出限、重复性和抗干扰能力等技术参数。 结果 在环境测试以及高浓度样本交叉污染的测试中, 阴性符合率和阳性符合率均为100%;灵敏度试验结果显示,该检测系统的灵敏度可以达到约 10² copies/ml,重复性 CV 值均在 4%以内; 抗干扰能力选择在咽拭子标本采集管中加入 5%的全血、5%的氯化钠、 布地奈德鼻喷雾剂(5%),结果符合率 100%。 结论 本次验证 SARS-CoV-2 的检测系统防污染措施、符合性、检出限、重复性和抗干扰能力等性能指标与试剂厂家声明一致,本检测系统可满足 SARS-CoV-2 实验室快速检测需求。     

基于多线程技术的实时检测

室扑、室颤是极其严重的心律失常。在临床心电监护中，如能及时自动检测到室扑、室颤等恶性心律失常，就为抢救病人赢得宝贵的时间。为此，我们研发了室扑、室颤实时检测系统，其软件系统既需完成前端管理等非实时任务，又需完成数据采集、显示、分析、识别和报警等实时任务。本文主要介绍多线程技术在实时检测程序设计中的应用。     

对国标矿物油检测结果判定的一点异议

食品油中非食用油 (矿物油 )的国家标准检测方法为皂化法[1] ,即利用食用植物油能被氢氧化钾皂化生成甘油和钾肥皂 ,两者均溶于水呈透明溶液 ,而矿物油不能被皂化也不溶于水 ,所以溶液浑浊或有油状物析出 ,以此判定是否含有矿物油。 2 0 0 1年 1月我站食卫科采集一批县、乡个体