褪黑素对大鼠阿霉素肾病的干预作用

褪黑素（ＭＴ）是一种主要由松果腺分泌的神经内分泌激素，近年来，它的抗氧化清除自由基能力和神经内分泌免疫调节功能倍受关注［１］。但有关ＭＴ对阿霉素肾病（ＡＩＮ）干预作用的报道较少。我们在ＡＩＮ 和松果腺摘除（ＰＸ ）模型基础上，观察ＭＴ对ＡＩＮ大鼠血尿生化指标的影响，试图为临床肾小球疾病治疗提供新的可能性。一、材料与方法１ 动物和试剂：雌性Ｗｉｓｔａｒ大鼠，体重１７０－２１０ ｇ，安徽医科大学动物实验中心提供．自由进食、饮水。ＭＴ为美国Ｓｉｇｍａ公司产品。阿霉素（ＡＤＲ），日本明治制药株式会社产品工实…     

MCP-1、ICAM-1在糖尿病肾病大鼠肾脏损害中作用及厄贝沙坦干预的影响

目的：探讨MCP-1、ICAM-1在糖尿病肾病大鼠肾脏损害中作用及厄贝沙坦对二者的影响.方法：采用高糖高脂饮食合并链脲佐菌素腹腔注射的方法建立糖尿病肾病大鼠模型.将大鼠随机分为正常对照NC 组、糖尿病肾病DN组、厄贝沙坦DI组,检测各组大鼠24 h尿量、24 h尿白蛋白定量（24 h UTP）、血糖（BG）、血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、肾重指数（KI）;行HE染色观察各组大鼠病理学形态,免疫组化观察MCP-1、ICAM-1蛋白的表达,RT-PCR观察MCP-1 mRNA、ICAM-1mRNA的表达.结果：与NC组比较,DN组大鼠肾脏病理改变加重,24 h尿量、24 h UTP、KI、BG、Scr、BUN、肾脏组织中MCP-1mRNA和ICAM-1mRNA及蛋白水平均显著增加,差异均有统计学意义（P＆lt;0.01）;与DN组比较,DI组大鼠BG、BUN、Scr有所改善,差异无统计学意义;肾脏病理改变减轻,其余指标明显降低,差异有统计学意义（P＆lt;0.05）.结论：MCP-1、ICAM-1在糖尿病肾病肾脏损害过程中可能起重要作用;厄贝沙坦能够减轻糖尿病肾病肾组织MCP-1、ICAM-1的表达,缓解了肾脏病理损伤.     

NF-κB在醛固酮所致大鼠肾损伤中的作用及相关机制

目的 探讨NF-κB在醛固酮-1%NaCl诱导的单侧肾切除肾损伤模型中的作用及可能机制。 方法 32只雄性SD大鼠单侧肾脏切除后随机分为4组：对照组（n=8）;1%NaCl组（1%NaCl饲料喂养,n=8）;醛固酮组（1%NaCl饲料喂养+0.75 μg/h醛固酮泵入,n=8）;吡咯烷二硫氨基甲酸（PDTC）组（1%NaCl饲料喂养+0.75 μg/h醛固酮泵入+PDTC 100 mg/kg灌胃,n=8）。共治疗4周。观察各组大鼠收缩压、蛋白尿、肾功能、肾组织形态学改变。.Western印迹和实时定量PCR法观察肾皮质胞间黏附分子1（ICAM-1）及结缔组织生长因子（CTGF）的蛋白表达及mRNA表达;EMSA法检测肾皮质NF-κB活性;免疫组化法观察NF-κB的表达情况。 结果 醛固酮组大鼠表现明显的高血压、蛋白尿、肾小球硬化,ICAM-1及CTGF蛋白和mRNA表达水平较1%NaCl组显著升高（均P < 0.05）,NF-κB活性明显增强,NF-κB在肾组织表达也明显增加。PDTC干预后在抑制NF-κB活性和表达的同时,ICAM-1及CTGF表达明显减少（均P < 0.05）,同时大鼠血压和肾小球硬化也得到了明显缓解。 结论 NF-κB抑制剂PDTC可通过减少ICAM-1及CTGF的表达缓解单侧肾切除-1%NaCl-醛固酮所致肾损伤。     

阿霉素肾病大鼠肾皮质nephrinmRNA的表达及来氟米特对其表达的影响

目的：观察阿霉素肾病大鼠肾皮质nephrin mRNA的表达及来氟米特对其表达的影响，探讨nephrin在蛋白尿发生发展中的作用以及来氟米特治疗肾脏病的可能机制。方法：建立阿霉素肾病模型，第4周进一步将模型组分为治疗组和非治疗组，治疗组给予来氟米特管饲。应用光镜、电镜观察不同时期（第2、4、6、8周）各组大鼠肾组织的病理改变；BCA法检测尿蛋白排泄量；半定量RT—PCR的方法检测肾皮质中nephrin mRNA的表达。结果：（1）模型组尿蛋白量逐渐增加，而治疗组第6周和第8周的尿蛋白量均低于同时期的非治疗组水平（P=0．02和P＜0．01）；（2）模型组nephrin mRNA表达量在2、4、6、8周分别为对照组的0．5、1．0、2．0、1．6倍，并与尿蛋白量呈正相关（r=0．699，P＜0．001）；（3）模型治疗组nephrin mRNA的表达第8周达非治疗组的1．3倍。结论：（1）随着阿霉素肾病大鼠尿蛋白排泄量的增加，肾皮质nephrin mRNA的表达发生了显著变化，并与蛋白尿的发生发展之间具有一定的相关性；（2）来氟米特可减少肾病大鼠尿蛋白量，同时增加肾皮质nephrin mRNA的表达。     

细胞间黏附分子1基因K469E多态性与2型糖尿病肾病的相关性研究

目的 探讨细胞间黏附分子1(ICAM-1) K469E基因多态性与2型糖尿病肾病(DN)的关系。方法 运用PCR-限制性多态性片断长度(RFLP)技术检测98名健康对照者和210例2型糖尿病患者(其中DN患者110例，DM患者100例)的基因型，比较各组的基因型和等位基因频率。结果 (1)DN组KK基因型和K等位基因频率显著高于DM组和正常对照组；(2)与EE型组相比，KK型组DN的发生率明显上升；(3)Logistic回归分析显示ICAM-1 K469E基因多态性是DN的危险因素。结论 ICAM-1 K469E多态性与2型糖尿病伴发肾病的发生有关，K等位基因可能是DN的易感基因。     

足细胞分子高表达致阿霉素肾病大鼠发生蛋白尿

目的 动态观察足细胞裂孔隔膜复合体分子nephrin、podocin、CD2AP及α-actinin-4在阿霉素肾病大鼠蛋白尿发生发展中的表达变化，探讨其在蛋白尿发生发展中的分子行为及其机制。方法 尾静脉注射阿霉素建立阿霉素肾病大鼠模型，3、7、14、28 d每组处死6只大鼠留取肾脏标本。应用间接免疫荧光染色、实时定量PCR、Western 印迹分别检测各个时间点nephrin、podocin、CD2AP、α-actinin-4的分布、mRNA和蛋白表达量的变化。结果 (1)14 d肾病组大鼠24 h尿蛋白显著高于对照组(P < 0.01)，增高持续到28 d。(2)透射电镜显示14 d肾病组足突不同程度变宽，28 d足突弥漫性融合。(3)与对照组相比，从第7天开始肾病组nephrin和podocin染色从沿肾小球毛细血管袢线样分布向不连续粗颗粒样的分布模式转变；CD2AP节段染色增强区逐渐扩大，有的区域呈斑片状和连续线状增强；α-actinin-4从沿肾小球毛细血管袢均匀的点线样分布向不均匀粗颗粒的分布转变，而且随时间进展这种转变逐渐加重。(4)与对照组相比，肾病组于7 d时nephrin mRNA表达显著增高(P < 0.01)；podocin mRNA表达14 d时显著增高(P < 0.05)，直至28 d(P < 0.05)；CD2AP mRNA表达28 d时显著增高(P < 0.05)。(5)与对照组相比，肾病组nephrin蛋白表达28 d时显著增高(P < 0.05)；podocin蛋白表达于7 d时显著增高(P < 0.05)，而28 d时又显著降低(P < 0.05)；CD2AP蛋白表达于14 d时显著增高(P < 0.05)，直至28 d (P < 0.05)。(6)α-actinin-4 mRNA与蛋白表达在实验过程中未出现明显变化。结论 nephrin、podocin和CD2AP的表达增加及分布异常是导致阿霉素肾病大鼠蛋白尿发生发展的分子机制，而分子表达的增加是足细胞抵抗损伤的一种代偿反应。     

氯沙坦对尿酸性肾病大鼠肾组织MCP-1和ICAM-1mRNA表达的影响

目的 探讨氯沙坦对尿酸性肾病大鼠血清尿酸、尿素氮、肌酐、尿蛋白以及单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）和细胞间黏附分子-1（ICAM-1）在肾脏中表达的影响.方法 分别给予右侧肾脏切除术后大鼠氧嗪酸钾或者联合别嘌呤醇或者联合氯沙坦灌胃8周,监测上述指标变化情况,并采用实时荧光定量PCR测定各组大鼠肾脏MCP-1和ICAM-1mRNA表达的情况.结果 别嘌呤醇和氯沙坦均有效降低血清尿酸水平（P〈0.01）,改善肾功能（P〈0.05）.肾切除联合氧嗪酸钾灌胃组大鼠肾脏组织MCP-1和ICAM-1明显高于单纯肾切除组（P〈0.01）,别嘌呤醇和氯沙坦均能减少氧嗪酸钾所致的上述基因表达的增加（P〈0.01）.结论 MCP-1和ICAM-1介导的炎症反应可能参与高尿酸血症加速肾脏病进展过程,氯沙坦可能通过抑制尿酸所致的炎症反应而延缓肾脏病的进展.     

阿霉素肾病大鼠肾皮质nephrin mRNA的表达及来氟米特对其表达的影响

目的:观察阿霉素肾病大鼠肾皮质nephrinmRNA的表达及来氟米特对其表达的影响,探讨nephrin在蛋白尿发生发展中的作用以及来氟米特治疗肾脏病的可能机制。方法:建立阿霉素肾病模型,第4周进一步将模型组分为治疗组和非治疗组,治疗组给予来氟米特管饲。应用光镜、电镜观察不同时期(第2、4、6、8周)各组大鼠肾组织的病理改变;BCA法检测尿蛋白排泄量;半定量RT-PCR的方法检测肾皮质中nephrinmRNA的表达。结果:(1)模型组尿蛋白量逐渐增加,而治疗组第6周和第8周的尿蛋白量均低于同时期的非治疗组水平(P=0.02和P<0.01);(2)模型组nephrinmRNA表达量在2、4、6、8周分别为对照组的0.5、1.0、2.0、1.6倍,并与尿蛋白量呈正相关(r=0.699,P<0.001);(3)模型治疗组nephrinmRNA的表达第8周达非治疗组的1.3倍。结论:(1)随着阿霉素肾病大鼠尿蛋白排泄量的增加,肾皮质nephrinmRNA的表达发生了显著变化,并与蛋白尿的发生发展之间具有一定的相关性;(2)来氟米特可减少肾病大鼠尿蛋白量,同时增加肾皮质nephrinmRNA的表达。     

细胞间黏附分子-1单克隆抗体对全脑缺血再灌注损伤大鼠的脑保护作用

目的 评价细胞间黏附分子-1单克隆抗体(1A29)对全脑缺血再灌注损伤大鼠的脑保护作用.方法 健康成年雄性SD大鼠40只,体重180～200 g,2～3月龄,采用四血管法制备全脑缺血再灌注模型.随机分为4组(n=10):Ⅰ组于缺血前即刻股静脉注射同型对照抗体1 mg/kg;Ⅱ组～Ⅳ组分别于缺血前即刻、再灌注即刻及再灌注4 h时股静脉注射1A29 1 mg/kg.于再灌注24 h时进行神经功能损伤评分、脑组织多形核白细胞及单核细胞计数,并计算脑梗死面积百分比及脑组织含水量.结果 与Ⅰ组比较,其余3组脑组织多形核白细胞计数、单核细胞计数、脑梗死面积百分比、含水量及神经功能损伤评分均明显降低(P<0.01),3组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 缺血前或再灌注4 h内静脉注射1A29均可减轻大鼠全脑缺血再灌注损伤.     

卡托普利不能抑制激素对大鼠阿霉素肾病肾小球硬化的恶化作用

目的 :探讨血管紧张素转换酶抑制剂 (ACEI)卡托普利能否抑制肾上腺糖皮质激素 (激素 )对大鼠阿霉素肾病肾脏病理损害的加重作用。方法 :40只SD雄性大鼠分成A(正常对照 )组、B(阿霉素 )组、C(阿霉素 +泼尼松 )组和D(阿霉素 +泼尼松 +卡托普利 )组。注射阿霉素后 4周开始经饮水给予入泼尼松及卡托普利 ,其浓度分别为 5 0mg/dl和 2 5mg/dl。在注射阿霉素之后的第 16周及 2 8周末每组分别用 5只大鼠取血及肾脏组织 ,分别作生化及病理检查。结果 :注射阿霉素 1周以后尿蛋白 (Upro)开始升高 ,4周以后达到 (16 8.45± 76 .2 8)mg/d。B组、C组及D组注射阿霉素后第 16周末及 2 8周末Upro、血清肌酐 (Scr)、甘油三酯 (Trg)及血清总胆固醇 (ChL)都显著高于A组 ,血清白蛋白 (Salb)则显著低于A组。B组、C组及D组组内第 2 8周与第 16周比较 ,Upro、Scr升高有显著性差异 ,Salb降低有显著差异。C组与B组比较 ,Upro、Scr、Trg及ChL显著升高。而D组上述生化指标的变化与C组比较都无显著性差异。B组肾脏病理积分显著高于A组 ,且第 2 8周末显著高于第 16周末 ;C组及D组第 16周末肾脏病理积分显著高于B组 ,但D组与C组比较无显著差异。结论 :卡托普利不能阻抑激素对大鼠阿霉素肾病病理损害的加重作用     

体外循环时心肌细胞上粘附分子的变化及抑肽酶对其表达的影响

目的：观察行心脏瓣膜置换术的病人在体外循环（CPB）前，后心肌细胞间粘附分-1(ICAM-1）及血管细胞间粘附分子－1（VCAM－1）的表达，并探讨抑肽酶对其表面的影响，方法：20例病人被随机均分为抑肽酶组和对照组，分别于手术开始及结束时取右心房心肌标本，采用免疫组化法检测心肌细胞及心肌血管内皮细胞上ICAM－1及VCAM－1的表达（IOD值）。结果：对照组心脏瓣膜我术病人CPB后心肌细胞上和心肌血管内皮细胞（EC）上ICAM－1及VCAM－1的表达较术前有明显增加（P＜0．05），而在抑肽酶组则无明显变化，组间比较，差异有具有显著意义，P＜0．05，结论：CPB时心肌细胞及心肌血管EC上ICAM－1及VCAM－1的表达增高，抑肽酶可通过抑制这些粘附分子的表达而减轻CPB所致的炎症反应。     

烧伤后粘附分子介导中性粒细胞粘附对肺血管通透性的影响

目的观察比较烧伤血清及烧伤后中性白细胞（ＰＭＮ）对肺血管通透性的影响,分析ＰＭＮ粘附及粘附分子ＣＤ１１ｂ／ＣＤ１８在该影响中的介导作用。方法应用离体肺灌流技术,通过肺重量增加（ＬＷＧ）、液体滤过系数（Ｋｆ）和通透性表面积乘积（ＰＳ）分别观察肺水肿程度、肺血管对小分子物质和大分子物质的通透性。结果烧伤血清能使ＬＷＧ、Ｋｆ和ＰＳ明显增加,以Ｋｆ增加最为明显;烧伤后ＰＭＮ也能使Ｋｆ和ＰＳ增加,以ＰＳ增加为明显;用单抗封闭烧伤后ＰＭＮ膜上ＣＤ１１ｂ／ＣＤ１８后,ＰＭＮ在肺血管内的滞留减少,Ｋｆ和ＰＳ值增加被抑制,并以ＰＳ改变为显著。结论（１）被激活的ＰＭＮ释放的介质类物质如氧自由基、蛋白酶等物质对肺微血管内皮细胞（ＰＭＥＣ）的损伤作用部分依赖于ＰＭＮ与内皮细胞的粘附。（２）烧伤后被激活的ＰＭＮ释放的介质类物质主要介导肺血管对小分子物质通透性的影响。烧伤后ＰＭＮ与肺微血管内皮细胞（ＰＭＥＣ）的粘附除了使介质类物质的作用放大外,还介导肺血管对大分子物质通透作用。（３）ＰＭＮ膜上ＣＤ１１ｂ／ＣＤ１８分子可能通过与ＰＭＥＣ细胞间粘附分子的结合,本身具有对内皮细胞的生物学调控作用     

雌激素预防大鼠同种肾移植慢性排斥反应的实验研究

目的 探讨雌激素对移植肾慢性排斥反应的影响。方法 以Fisher大鼠作供者,雌性Lewis大鼠作受者进行同种肾移植,为排除排卵周期及相应的内源性性激素变化的影响,肾移植均在非排卵期进行,后治疗组大鼠隔日给予25μg/kg雌二醇皮下注射。移植后16周作肾功能、移植肾组织学及免疫组化检测,测定肾组织中转化生长因子及β－机动蛋白mRNA的表达。结果 与对照组比较,移植后治疗组24d尿蛋白持续保持较低的水平（P＜0.01）,血清肌酐水平降低（P＜0.01）,肌酐清除率升高（P＜0.01）,移植肾组织管内膜增厚、肾小球硬化和间质纤维化程度减轻（P均＜0.01）,淋巴细胞和单核／巨噬细胞浸润减少（P＜0.01）,细胞间粘附分子（ICAM－1）、转化生长因子（TGF－β1）的mRNA表达减少（P均＜0.01）。结论 雌激素对移植肾功能有保护作用,其机理与影响上述细胞因子在移植肾的表达有关,提示雌激素可能为一类潜在的抗慢性排斥反应药物。     

粘附分子的表达与大肠癌转移相关性的分析

目的 检测粘附分子ＣＤ４４ｖ６、Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ的表达与人大肠癌转移的关系。方法 应用免疫组化方法,测定３２例病理证实的大肠癌标本中ＣＤ４４ｖ６和Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ。结果 ＣＤ４４ｖ６表达与肿瘤分型、Ｄｕｋｅｓ分期及ＴＮＭ分期无明显相关性,但与淋巴结转移和远处转移明显相关。Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ在大多数正常粘膜呈阳性表达,而在大肠癌标本中阳性率仅为４９．６％,在能转移的病例中阳性率为２０％。结     

烧伤大鼠早期切痂对内皮细胞间粘附分子-1及E-选择素 mRNA表达影响

目的　研究烧伤血清对体外培养的内皮细胞的细胞间粘附分子１（ＩＣＡＭ１）及Ｅ选择素（Ｅｓｅｌｅｃｔｉｎ）ｍＲＮＡ表达的影响,探讨实施休克期切痂上述指标的变化。　方法　Ｗｉｓｔａｒ 大鼠１７６ 只,３０％ Ⅲ度烫伤,收集不同时间点血清,采用逆转录ＰＣＲ 方法分别观察伤后不同时相点血清刺激内皮细胞ＩＣＡＭ１、Ｅｓｅｌｅｃｔｉｎ ｍＲＮＡ表达的规律。　结果　烫伤后血清可刺激内皮细胞ＩＣＡＭ１ 、ＥｓｅｌｅｃｔｉｎｍＲＮＡ表达上调,而且表达量与伤后时间呈正相关。伤后８ 及２４ 小时切痂动物血清不引起内皮细胞的上述变化,９６ 小时切痂（１－６０±０－１７）、（１－２０ ±０－０９） 效果不及休克期切痂组（０－９３ ±０－１４） 、（０－９３ ±０－２２）。　结论　及早切痂去除了坏死组织,避免了内皮细胞大量合成ＩＣＡＭ１、Ｅｓｅｌｅｃｔｉｎ 等粘附分子,减轻了由粘附分子介导的中性粒细胞对内皮细胞的进一步损害。     

烧伤后白细胞与内皮细胞粘附分子介导作用的研究

为研究白细胞粘附依赖于细胞粘附分子的介导作用,作者通过离体实验观察分析了烧伤血清对外周血中性粒细胞（ＰＭＮ）ＣＤ１１ｂ／ＣＤ１８表达的影响及ＣＤ１１ｂ／ＣＤ１８在烧伤后ＰＭＮ粘附中的介导作用。结果表明：（１）烧伤血清使ＰＭＮＣＤ１１ｂ／ＣＤ１８分子表达和ＰＭＮ与肺微血管内皮细胞（ＰＭＥＣ）的粘附率增高。（２）ＣＤ１１ｂ／ＣＤ１８单抗不仅能使正常ＰＭＮ与ＰＭＥＣ的粘附率下降５０％,也使烧伤血清激活的ＰＭＮ与ＰＭＥＣ粘附率下降至烧伤血清激活前水平。我们认为,严重烧伤能使外周血ＰＭＮＣＤ１１ｂ／ＣＤ１８表达明显增高,ＣＤ１１ｂ／ＣＤ１８不但介导基础状态下的ＰＭＮ粘附,更是介导烧伤后引起的大量ＰＭＮ与ＰＭＥＣ粘附的主要分子。     

阿霉素肾病大鼠肾组织中血管生成素样蛋白3基因表达

目的动态观察阿霉素肾病大鼠在发生蛋白尿的过程中肾组织血管生成素样蛋白3（ANGPTL3）mRNA表达水平的变化，探讨ANGPTL3在大鼠肾组织中表达与蛋白尿的关系。方法通过激光微分离技术分离阿霉素肾病大鼠肾小球和肾小管，采用实时荧光定量RT-PCR方法分析阿霉素注射后7、14、21和28d肾组织中ANGPTL3 mRNA表达水平的变化。结果（1）阿霉素注射后第14天开始出现大量蛋白尿（P〈0.01），血清白蛋白明显减少（P〈0．01），胆固醇（P〈0．01）和甘油三酯（P〈0．05）明显增高，以上各项指标均在第28天达高峰。（2）通过激光微分离系统成功地分离了大鼠肾组织中的肾小球和肾小管。（3）阿霉素注射后7及14d后，大鼠肾皮质中总ANGFTL3 mRNA表达水平与同一时间点正常对照组比较无明显变化；到第21天时为正常对照组的9．03倍（P〈0．01）；第28天时为正常对照组的3．95倍（P〈0．05），与第21天时相比已呈现下降趋势。（4）阿霉素注射后不同时间点肾小球中ANGPTL3 mRNA表达水平的变化趋势与肾组织总ANGPTL 3mRNA表达水平的变化一致，第7、14天时，肾小球中ANGPTL 3mRNA表达水平与同一时间点正常对照组比较无明显变化；到第21天时为同一时间点正常对照组的2．18倍（P〈0．05）；第28天时为正常对照组的1．90倍（P〈0．05）。（5）阿霉素注射后不同时间点肾小管中ANGPTL3 mRNA表达水平无明显改变，与同一时间点的正常对照组相比均无显著性差异。结论正常大鼠和阿霉索肾病大鼠的肾组织中均有ANGPTL3 mRNA表达。肾组织可以自身合成ANGPTL3；肾病的大鼠肾组织自身合成ANGPTL3增多，且这种改变是发生在肾小球。ANGPTL3可能通过影响肾小球的功能参与肾病蛋白尿的进展过程。     

Membranous nephropathy in childhood and its treatment

Membranous nephropathy is predominantly a disease of middle-aged and elderly individuals, and is thus rather an uncommon finding in proteinuric and nephrotic children. In children, it differs in several important respects from the disease as seen in adults: an apparent associated cause is more common, macroscopic haematuria is seen quite frequently, a relapsing course is more often noted, renal venous thrombosis is not found and evolution into renal failure is the exception. Nevertheless, a proportion of children with membranous nephropathydo evolve into renal failure, and their management is discussed with particular reference to recent papers on the treatment of membranous nephropathy in adults. An aggressive search for associated disease is worthwhile in children, and one should wait to see what the evolution or proteinuria and renal function may be. If a progressive course becomes evident, then a trial of treatment with corticosteroids is worthwhile, but if this is ineffective then a more aggressive approach involving the use of alkylating agents may be justified. It remains undetermined what the best regime in children and adolescents may be.