缺血后处理对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响

目的探讨缺血后处理对大鼠肾缺血再灌注（I／R）损伤的影响及其机制。方法18只雄性SD大鼠随机分为3组（n=6）：假手术组（S组）、缺血再灌注组（I／R组）和缺血后处理组（IPo组）。采用夹闭双侧肾蒂45min-再灌注6h制备肾脏缺血再灌注损伤模型。IPo组在夹闭双侧肾蒂45min后，再灌注10s，缺血10s，重复3次后，完全恢复肾血流。再灌注6h时开胸，取心脏血后处死大鼠，取肾组织。测定血清肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）和尿酸（UA）浓度，肾组织中丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性；光镜下观察肾组织病理学改变；采用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记（TUNEL）法检测肾组织中凋亡细胞，光镜下计数凋亡细胞，并计算肾小管上皮细胞凋亡指数（AI）。结果与S组比较，I／R组和IPo组Cr和BUN浓度升高（P〈0．05），UA浓度差异无统计学意义（P〉0．05），肾组织SOD活性降低，MDA含量升高，肾小管上皮细胞凋亡指数增加（P〈0．05），病理损伤明显。与I／R组比较，IPo组Cr和BUN浓度降低（P〈0．05），UA浓度差异无统计学意义（P〉0．05），SOD活性升高，MDA含量降低，肾小管上皮细胞凋亡指数减少（P〈0．05），病理损伤减轻。结论缺血后处理能减轻大鼠肾缺血再灌注损伤，其机制与增强肾脏抗氧化能力和抑制肾组织细胞凋亡有关。     

姜黄素预处理对大鼠缺血再灌注肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的：建立大鼠。肾脏缺血再灌注损伤（IRI）模型,观察姜黄素预处理对大鼠肾脏缺血再灌注肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法：36只SD雄性大鼠随机分为3组,分别为假手术（Sham）组、肾脏缺血再灌注模型（IR）组、姜黄素预处理（CUR）组,每组12只。CUR组在缺血前2h给予姜黄素100mg／kg剂量溶于0．1％二甲基亚砜1ml中,注入腹腔。24小时后沿原切口进入,切除左。肾。肾组织用4％多聚甲醛固定24h,常规石蜡包埋切片。采用TUNEL法检测各组缺血肾小管上皮细胞凋亡。结果：与Sham组相比,IR组肾小管上皮细胞凋亡明显增加。与IR组比较,CUR组肾小管上皮细胞凋亡减少（P＜0．05）。结论：姜黄素预处理可减轻肾脏IRI的肾小管上皮细胞凋亡。     

急性缺血再灌注损伤对肾脏的近期和远期作用

目的 探讨急性缺血再灌注（IR）损伤对大鼠肾脏的近期和远期作用及其机制。 方法 双侧肾蒂夹闭40 min后再灌注，制作大鼠IR模型。术后4 h、24 h、48 h、72 h、1周、5周和10周收集血样和肾脏标本，动态观察肾脏病理、肾功能和大鼠死亡情况。用透射电镜观察小管上皮细胞的超微结构；原位末端标记法（TUNEL）检测肾小管上皮细胞凋亡情况；Masson染色法观察小管间质纤维化程度；Western印迹法测定α?鄄平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达；免疫组织化学法观察肾脏α-SMA和转化生长因子β1 (TGF-β1)的分布和表达。 结果　 再灌注后IR组的Scr 和BUN水平逐渐升高，48 h达到最高峰。IR组病死率为32% (8/25)，假手术（Sham）组病死率为0 (0/22)。再灌注48 h IR组出现近端肾小管上皮细胞广泛性坏死和少量凋亡；IR组术后5周和10周有轻至中度的小管间质纤维化，术后1周肾脏α-SMA和TGF-β1蛋白表达显著升高，以后两者表达有所下降但仍高于Sham组。 结论 严重的缺血再灌注损伤不仅是早期肾小管大量坏死、肾功能急剧下降和病死率增高的原因，而且可以导致小管间质纤维化，影响肾脏的远期预后。TGF-β1过表达和肌成纤维细胞增多可能介导了纤维化病变。     

地塞米松预处理减轻肾缺血再灌注损伤

目的探讨地塞米松（dexamethasone,DEX）对小鼠肾缺血再灌注损伤的作用及其机制。方法建立小鼠肾缺血再灌注损伤模型。18只雄性C57BL／6小鼠随机分为3个组（n=6）,分别为假手术组（Sham）、肾缺血再灌注损伤模型组（IRI）和DEX预处理组。Sham和IRI组缺血前60min予生理盐水（腹腔注射）,DEX组缺血前60min给予DEX（4mg／kg）,IRI组和DEX组血管夹夹闭左侧肾蒂,置于32℃温箱后1h松开血管夹,去除右肾。Sham组操作同上,但不夹闭左侧肾蒂,再灌注24h后处死小鼠,收集血清和肾脏标本。PAS染色后观察肾脏病理形态学变化,PCR检测白细胞介素6（interleukin6,IL-6）、干扰素γ（interferonγ,IFN-γ）和肿瘤坏死因子（tumornecrosisfactorOt,TNF-a）Westernblotting检测pAkt和总的Akt。结果与Sham组相比,IRI组血清肌酐和血尿素氮明显升高。病理检查可见肾脏内肾小管上皮细胞明显肿胀坏死、蛋白管型形成明显,还可观察到炎症细胞浸润明显增加。PCR显示IL-6、IFN-γ和TNF-a mRNA水平明显上调,Westernblotting显示p-Akt蛋白表达量明显增加,但Akt蛋白表达量无明显差异。与IRI组相比,DEX治疗组血清肌酐、血尿素氮明显下降,肾小管上皮细胞肿胀坏死减轻、炎症细胞浸润减少,IL-6、IFN-γ和TNF-a表达降低,p-Akt表达减少,但Akt蛋白表达量无明显差异。结论DEX预处理可通过抑制Akt信号通路激活,从而抑制炎症反应,从而减轻肾缺血再灌注损伤。     

肢体缺血后处理和肾脏缺血后处理对大鼠肾脏缺血-再灌注损伤的影响

目的 探讨肢体缺血后处理和肾脏缺血后处理对大鼠肾脏缺血-再灌注(I-R)损伤的影响.方法 24只大鼠随机均分为假手术组(S组)、缺血-再灌注组(I-R组)、左下肢缺血后处理组(LIP组)及肾脏缺血后处理组(RIP组).S组仅对左肾动脉进行游离;I-R组:夹闭左肾动脉45 min后松开,左肾再灌注6 h;LIP组在左肾复灌前6 min时左股动脉夹闭5 min;RIP组在左肾缺血45min后灌注10 s,停灌10 s,反复6次;检测复灌6 h时血清肌酐(Cr)、血尿素氮(BUN);光镜下观察肾组织病理改变,TUNEL法检测肾组织中凋亡细胞并计算凋亡指数(AI);免疫组化法检测肾组织Fas、Caspase-3表达;电镜下观察肾单位超微结构改变.结果 与S组比较,其他三组大鼠BUN、Cr浓度升高(P<0.01)、肾组织病理改变明显、肾组织Fas、Caspase-3阳性指数和AI增加(P<0.01).与I-R组比较,LIP、RIP组大鼠BUN、Cr浓度降低(P<0.01),肾组织Fas、Caspase-3阳性指数和AI降低(P<0.01).RIP组AI明显低于LIP组(P<0.05).结论 在肾脏I-R损伤的病理过程中,肾小管上皮细胞凋亡可以由胞膜上的Fas被激活而最终导致靶细胞凋亡;两种后处理都可以抑制肾小管上皮细胞凋亡,减轻I-R损伤.     

甘氨酸对肾缺血-再灌注损伤的保护作用及对iNOS表达的影响

目的探讨甘氨酸对急性肾缺血-再灌注损伤的保护作用及作用机制。方法将24只Wistar大鼠随机分为假手术组（A组）、对照组（B组）、甘氨酸治疗组（C组），通过夹闭大鼠双侧肾蒂30min，再灌注30min制成肾缺血-再灌注损伤动物模型，检测尿量、血尿素氮（BUN）、血肌酐（Cr），肾组织光镜及电镜检查并使用免疫组化法检测iNOS表达。结果B组比A组尿量增加，血BUN、Cr升高，肾小管上皮细胞变性坏死明显，iNOS表达明显增强（P〈0．05）。C组比B组尿量明显增加，血BUN、Cr明显下降，肾小管上皮细胞变性坏死程度减轻，iNOS表达明显减少（P〈0．05）。结论甘氨酸对大鼠肾脏缺血-再灌注损伤有明显的保护作用，其机制可能与抑制大鼠缺血-再灌注后肾脏iNOS蛋白表达有关。     

丁羟茴香醚对衰老大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察老年大鼠肾脏缺血再灌注（I／R）模型中。肾小管上皮细胞的损伤变化，探讨活性氧（ROS）清除剂对I／R损伤的保护作用。方法27月龄大鼠随机分为假手术组、I／R模型组、丁羟茴香醚（BHA）组和nicardipine组。夹闭双侧。肾动脉30min再灌注18h制成I／R模型。观察肾功能、肾脏病理改变、肾小管上皮细胞凋亡情况。检测肾组织半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（caspase）3、细胞色素C表达。测定肾组织脂质过氧化物丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性。结果（1）肾脏I／R损伤时，老年大鼠肾功能明显减退，肾组织病理改变比较明显，大量肾小管上皮细胞凋亡，肾组织caspase-3、细胞色素C表达明显上调。肾组织中MDA增加、SOD活性下降（P均〈0．05）。（2）BHA或nicardipine均能明显改善肾功能。肾组织病理改变和凋亡相关指标（P〈0．05）；BHA或nicardipine均能减少组织中MDA含量，部分恢复肾组织中SOD含量。结论老年大鼠肾脏I／R损伤时肾小管上皮细胞凋亡增加，肾功能减退。ROS堆积后，线粒体损伤导致肾小管上皮细胞凋亡。清除ROS可以抑制‘肾小管上皮细胞凋亡，减轻I／R损伤。     

缺血预处理联合后处理对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响

目的 评价缺血预处理联合后处理对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响.方法 健康雄性SD大鼠30只,体重250～280 g,随机分为5组(n=6):假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)、缺血预处理组(IP组)、缺血后处理组(IPo组)和缺血预处理联合后处理组(IP+IPo组).S组仅开腹,游离双侧肾脏,分离双侧肾蒂但不夹闭.采用夹闭双侧肾蒂45 min、再灌注6 h的方法 制备肾缺血再灌注模型.IP组夹闭双侧肾蒂5 min,再灌注5 min,反复3次,余操作同I/R组;IPo组夹闭双侧肾蒂45 min后,再灌注10 8,缺血10 s,反复3次,再灌注6 h.于再灌注6 h时,经心脏抽血后迅速处死大鼠取肾,测定血清肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)的浓度;采用硫代巴比妥酸法测定肾组织丙二醛(MDA)含量,采用黄嘌呤氧化酶法测定肾组织超氧化物歧化酶(SOD)活性;光镜下观察肾组织病理学结果 ;TUNEL法检测肾组织凋亡细胞,计算凋亡指数(AJ).结果 与S组比较,其余各组血清Cr和BUN的浓度升高,肾组织SOD活性降低,MDA含量和AI升高(P<0.05);与I/R组比较,IP组、IPo组和IP+IPo组血清Cr和BUN的浓度降低,肾组织SOD活性升高,MDA含量和AJ降低(P<0.05),肾损伤减轻;与IP组和IPo组比较,IP+IPo组肾组织SOD活性升高,AI降低(P<0.05),肾损伤减轻.结论 缺血预处理联合后处理可减轻大鼠肾缺血再灌注损伤,较单独应用时效果好.     

骨髓间充质干细胞对缺血再灌注损伤肾小管上皮细胞增殖和凋亡的影响

目的：探讨外源性骨髓间充质干细胞（MSCs）移植对缺血再灌注损伤（I/R）后肾小管上皮细胞增殖和凋亡的影响。方法：将雄性SD大鼠MSCs用DAPI标记后注入受体雌性SD大鼠体内。30只受体大鼠随机分为3组：假手术对照组（C组）、MSCs＋I/R组（M组）、DMEM-F12＋I/R组（D组）,每组10只。7d后观察肾功能,肾脏病理改变,采用原位末端标记法检测细胞凋亡指数,免疫组化法检测增殖细胞核抗原（PCNA）的表达,并观察DAPI标记的MSCs在受体大鼠肾脏的分布情况。结果：I/R后第7天,M组在肾功能、肾脏病理改变上,均明显好于D组;肾组织内PCNA＋细胞数和凋亡指数均低于D组。I/R后7d内未发现MSCs定位于肾组织中。结论：外源性MSCs可以促进I/R损伤后肾小管上皮细胞的增殖和减少细胞凋亡,从而有利于肾小管损伤的早期恢复。     

通心络胶囊对肾缺血再灌注损伤大鼠肾小管上皮细胞凋亡的作用研究

目的探讨通心络胶囊（Tongxinluo capsule,TXLC）对肾缺血再灌注损伤（I／R）大鼠肾小管上皮细胞凋亡的作用及其可能机制。方法将30只雄性Wistar大鼠随机分为假手术对照组（S组）;缺血再灌注组（I／R组）和缺血再灌注联合通心络胶囊预处理组（I／R＋T组）。每组10只。采用无创动脉夹夹闭大鼠双侧肾蒂45min,再灌注24h的方法制成急性肾I／R模型,其中I／R＋T组术前喂药7d。光镜下观察细胞结构改变;测定血肌酐（SCr）,并观察肾功能变化;测定肾组织中超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量;采用脱氧核苷酸末转移酶介导的DNA原位末端标记技术（TUNEL）检测细胞凋亡的情况。结果与S组比较,I／R组肾组织SOD活性明显降低,MDA水平明显升高,SCr明显升高;与I／R组比较,I／R＋T组肾组织SOD活性明显升高,MDA水平明显降低,SCr明显降低。I／R＋T组肾组织病理损伤较I／R组明显减轻。结论TXLC对大鼠急性肾I／R具有保护作用,可能是通过其抗氧化作用减少肾小管上皮细胞凋亡而实现的。     

Is ischemic preconditioning of the kidney clinically relevant?

BACKGROUND: Renal ischemic preconditioning (IPC) is a phenomenon whereby a brief period of ischemia and reperfusion (I/R) provides tolerance to subsequent periods of ischemia. IPC has been demonstrated to protect rodent kidneys during I/R. The applicability to large mammals, including human beings, is unclear. The objective of this study was to determine if renal IPC has a beneficial effect in a large animal model of warm I/R and hypothermic preservation injury, which occurs with renal allografting. METHODS: Renal ischemia (45 minutes) and reperfusion was studied in untreated dogs and in dogs receiving IPC (10-minute/10-minute I/R). IPC was administered immediately before I/R (early IPC) or 24 hours before I/R (delayed IPC). In another group of dogs, pharmacologically induced IPC was attempted with local intra-arterial administration of dipyridamole (2.4 mg/kg/min) to increase local adenosine concentrations. Finally, IPC was induced in kidneys before harvest, cold stored for 24 hours in University of Wisconsin flush solution, and subsequently reperfused for 4 hours in allogeneic recipients. Renal functional parameters, including vascular resistance, glomerular filtration rate, urine production, oxygen consumption, and proximal tubular fluid reabsorption, were monitored during the reperfusion period and were compared with the control ischemic group. RESULTS: Renal function significantly declined during I/R, relative to the nonischemic contralateral kidney but was not different with any form of IPC, relative to the ischemic control group not treated with IPC. IPC pretreatment also did not affect the preservation injury observed in cold-stored kidneys reperfused after transplantation. CONCLUSIONS: It is concluded that IPC has no significantly measurable effects in warm or hypothermic renal I/R injury in large animals. The clinical usefulness of IPC in human renal ischemic conditions remains uncertain.     

The Early Protective Effect of Glutamine Pretreatment and Ischemia Preconditioning in Renal Ischemia–Reperfusion Injury of Rat

Background

Heat shock proteins (HSP) play an important role in protecting cells against stress.

Methods

Using a rat model, we tested the hypothesis that pretreatment with glutamine (Gln) and ischemia preconditioning (IPC) increase the expression of HSP resulting in attenuation of renal ischemia/reperfusion (I/R) injury. Sprague-Dawley rats were randomized into 4 groups [group I, Gln injection (+), IPC (+); group II, Gln injection (+), IPC (−); group III, saline injection (+), IPC (+); group IV, saline injection (+), IPC (−)]. Renal HSP70 expression was determined by Western blotting and kidney function was assessed by blood urea nitrogen and serum creatinine. Renal cross-sections were microscopically examined for tubular necrosis, exfoliation of tubular epithelial cells, cast formation, and monocyte infiltration.

Results

Gln pretreatment increased intrarenal HSP expression (P = .031). In group I, tubulointerstitial abnormalities were clearly slighter compared with the other groups (P < .001).

Conclusion

Our experiments suggest that (1) a single dose of Gln could induce HSP expression and (2) IPC could relieve renal I/R injury. In addition, IPC combined with Gln pretreatment had a synergic protective effect against renal I/R injury.     

Ischemic preconditioning attenuates capillary no-reflow and leukocyte adherence in postischemic pancreatitis

Background and aims Ischemic preconditioning (IPC) has been shown to protect several organs from ischemia–reperfusion injury. Postischemic microvascular dysfunction is considered to be the key mechanism of early graft pancreatitis after transplantation. The aim of the study was to determine whether brief ischemia and reperfusion before prolonged ischemia followed by reperfusion is protective in respect to microcirculatory derangement in postischemic pancreatitis.Methods In an in-situ model of ischemia–reperfusion was induced in the isolated pancreatic tail segment. Wistar rats were randomized to one group (n=7/group) with 2-h ischemia and reperfusion (I/R) and another group with 10-min ischemia and 10-min reperfusion (IPC) before the prolonged ischemia time. Microcirculation was observed for 2 h by intravital-fluorescence microscopy that analyzed functional capillary density and leukocyte adherence in postcapillary venules. Histological damage was quantified by a semiquantitative score (edema, vacuolization, PMN infiltration, necrosis).Results IPC resulted in a significant improvement of functional capillary density (248±20 vs 372±8 cm^–1, P<0.001), a significant reduction in leukocyte adherence in postcapillary venules (476±79 vs 179±15 cells/mm², P<0.001) and in significantly lower histological damage (score 9±0.8 vs 5±1.4, P<0.001), when compared with the ischemia–reperfusion group.Conclusion IPC reduces pancreatic inflammatory reaction by preservation of postischemic microcirculation. Therefore, it might become a useful procedure before organ procurement in pancreas transplantation.     

缺血预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤保护作用机制的研究

目的　探讨缺血预处理 (IPC)保护作用的发生机制。方法　建立大鼠部分肝脏热缺血再灌注模型。IPC采用肝脏缺血 10min ,再灌注 10min。结果　IPC后肝组织中腺苷和NO水平明显升高 ,与对照组相比差异显著 (P <0 0 1) ,但IPC前应用腺苷A2 受体拮抗剂后NO的升高被抑制 (P<0 0 1)。缺血再灌注 (I/R) 2h后血清中TNF α、AST、ALT、LDH及W/D水平和假手术组相比明显增加 ,而IL 10含量降低 (P <0 0 1) ;IPC、I/R前加入腺苷、IPC前应用腺苷A1受体拮抗剂显著地降低TNF α释放和AST、ALT、LDH及W /D水平 ,提高IL 10含量 ,与I/R组相比差异显著 (P <0 0 1) ;但IPC前应用腺苷A2 受体拮抗剂 (IPC +A2 antag)和NO合成酶抑制剂NAME并没有能像IPC组那样有效降低TNF α、AST、ALT、LDH及W /D的水平 ,提高IL 10的含量 (P <0 0 1) ;而IPC前给IPC+A2 antag组提供NO前体精氨酸又获得和IPC组同样的结果 (P >0 0 5 )。结论　IPC引起细胞外腺苷水平升高 ,腺苷A2 受体活化 ,介导了NO合成增加 ,最终通过抑制效应器TNF α的释放、增加IL 10的合成来实现对缺血组织的保护作用。     

缺血预适应对老年大鼠缺血-再灌注心肌的影响

目的探讨缺血预适应（ischemic preconditioning,IPC）对老年大鼠缺血-再灌注损伤（I/R）后心肌的影响。方法取Wistar大鼠56只,其中21~23月龄（老年鼠）和4~5月龄（青年鼠）各28只,建立离体心脏Langendorff灌注模型,按随机数字表法分为7组（每组8只）：青年对照组、青年I/R组、青年IPC组、老年对照组、老年I/R组、老年IPC组、老年强化IPC组。对照组采用全心灌流90 min,不做任何处理;I/R组采用心脏平衡灌流30min后,缺血30 min,再复灌30     

垂体中叶素对肾脏缺血再灌注大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响及其机制

目的 探讨垂体中叶素（IMD）对肾脏缺血再灌注（I/R）大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响及相关机制。 方法 健康雄性Wistar大鼠24只随机分为假手术组、I/R组、空质粒组、IMD质粒组。动物右肾切除后,采用超声微泡法,将空质粒或IMD质粒转染入左肾,1周后制作肾脏I/R模型。TUNEL法测定细胞凋亡;半定量RT-PCR检测Bax、Bcl-2、Fas的mRNA表达水平;比色法检测caspase-8、-9的活性;Western印迹法检测caspase-3蛋白的表达水平。 结果 与假手术组相比,I/R组细胞凋亡率增高,Bax、Fas mRNA表达增加,bcl-2 mRNA表达下降,caspase-8、-9活性增强,caspase-3蛋白表达增加（均P < 0.05）。与I/R组相比,IMD转染组细胞凋亡率明显降低,Bax、Fas的mRNA表达下降,bcl-2的mRNA表达增加,caspase-8、-9活性减弱,caspase-3蛋白表达减少（均P < 0.05）。转空质粒组与I/R组比较,各指标差异均无统计学意义。 结论 IMD能上调bcl-2表达,降低bax、Fas的表达,降低caspase-8、-9活性,从而抑制肾脏I/R损伤所诱导的凋亡。     

肾缺血预处理对肾小管上皮细胞内钙超载的影响

目的：通过观察肾缺血预处理（IPC）和缺血再灌注（I/R）过程中血清超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和细胞内游离钙离子浓度（[Ca^2＋]i）含量的变化,进一步探讨肾IPC的保护机制。方法：将雄性SD大鼠88只随机分为11组,摘除右肾,分离并夹闭左肾动脉制备肾I/R和缺血预处理后缺血再灌注（IPC-I/R）动物模型。Ⅰa～Ⅴa（I/R）组为缺血再灌注0、1、24、48、72h组,Ⅰb～Ⅴb（IPC-I/R）组为缺血预处理后缺血再灌注0、1、24、48、72h组,Sham组为假手术组。比色法测定血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、SOD、MDA含量,流式细胞仪检测肾小管上皮细胞内[Ca^2＋]i水平,TUNEL原位标记法观察细胞凋亡情况。结果：除0h组外,IPC-I/R与I/R各组比较肾功能损害、细胞凋亡均明显减轻,SOD升高,MDA降低,[Ca^2＋]i水平下降;两种模型中均以再灌注24h组损伤最严重,Scr、BUN、MDA和[Ca^2＋]i水平最高,SOD水平最低,细胞凋亡最多;再灌注24h前损伤呈加重趋势,24h后逐渐减轻;组间比较,[Ca^2＋]i与血清SOD水平呈负相关,与MDA呈正相关。结论：肾IPC可以减轻I/R过程中膜脂质过氧化损伤和细胞内钙超载,从而减轻肾脏形态及功能损伤;膜脂质过氧化和细胞内钙超载相互作用,共同发挥对肾I/R损伤的保护作用。     

Protective effect of ischemic preconditioning against intermittent warm-ischemia-induced liver injury

BACKGROUND: Although ischemic preconditioning (IPC) has been reported to protect the liver from injury when subjected to continuous hepatic ischemia, whether IPC protects rat livers against ischemia-reperfusion (I/R) injury after intermittent ischemia has not been elucidated. MATERIALS AND METHODS: Five groups of Wistar rats were subjected to intermittent hepatic ischemia (I) comprising 15-min ischemia and 5-min reperfusion three times with or without prior IPC (10-min ischemia and 10-min reperfusion), 45-min continuous ischemia (C) with or without IPC, and sham operation. Serum transaminase and lactic acid levels, hepatic tissue energy charges, and hepatic blood perfusion were measured after reperfusion. Plasma tumor necrosis factor-alpha (TNF-alpha) levels were determined after reperfusion for 120 min. Histological and apoptotic findings were evaluated after reperfusion for 180 min. RESULTS: IPC significantly reduced serum transaminase levels after continuous and intermittent ischemia (IPC + C, 1107 vs C, 2684 IU/l; IPC + I, 708 vs I, 1859 IU/l). After hepatic ischemia without IPC, apoptosis and necrosis with increased plasma TNF-alpha levels were observed. IPC protected livers from injury by interfering with the increase in plasma TNF-alpha (IPC + I, 27.6 vs I, 64.8 pg/ml; IPC + C, 21.6 vs C, 49.3 pg/ml). This resulted in the attenuation of hepatic necrosis after continuous ischemia and significantly reduced necrosis and apoptosis after intermittent ischemia. CONCLUSIONS: IPC exerts a greater protective effect against hepatic I/R injury after intermittent hepatic ischemia than after continuous hepatic ischemia.     

不同预处理对肝硬化兔缺血再灌注肝组织HSP70及ET-1表达的影响

目的:探讨两种预处理方式,即经典缺血预处理(IPC)与肢体缺血预处理(LIPC),对肝硬化兔肝缺血再灌注(I/R)损伤的保护作用及可能的作用机制。方法:皮下注射CCl4-橄榄油溶液制备兔肝硬化模型,随后将模型兔随机分为假手术组,肝I/R组(I/R组),IPC+肝I/R组(IPC组),LIPC+肝I/R组(LIPC组),每组7只。肝I/R模型制作方法:阻断入肝血流30 min,再灌注2 h;IPC诱导方法:在行肝I/R处理前阻断入肝血流10 min,开放10 min;LIPC诱导方法:在行肝I/R处理前24 h,采用止血带捆扎兔单侧后肢5 min,再开放5 min,重复3次。各组于再灌注2 h后切取肝组织,行组织形态学观察,用ELISA法测定内皮素1(ET-1)含量及Western blot法检测热休克蛋白(HSP70)的表达。结果:与假手术组比较,其余各组在肝硬化病变的基础上均出现不同程度的变性、水肿和炎性细胞浸润,但IPC组与LIPC组明显轻于I/R组,而LIPC组及IPC组间病变程度无明显差异;与假手术组比较,其余各组肝组织ET-1含量和HSP70的表达均明显增加(均P<0.05),但IPC组与LIPC组肝组织ET-1含量低于I/R组,HSP70的表达高于I/R组(均P<0.05),而上述2项指标在LIPC及IPC组间均无统计学差异(均P>0.05)。结论:LIPC和IPC均能对肝硬化肝I/R损伤有保护作用,且保护强度相似,其机制可能均与抑制ET-1的释放及增加HSP70的表达有关;LIPC具有无创性,可能具有更大的临床应用前景。     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ协同刺激因子1α在早期缺血预处理中的作用

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ协同刺激因子1α（PGC-1α）在早期缺血预处理中的作用和早期缺血预处理的机制。方法取Wistar大鼠30只,建立离体心脏Langendorff灌注模型,随机分成3组,每组10只。对照组（CON组）：全心灌流120min,不做任何处理;缺血-再灌注组（I/R组）：心脏平衡灌流30min后,缺血30min,再灌注60min;缺血预处理组（IPC组）：心脏平衡灌流10min,经2次缺血5min复灌5min后,缺血30min,再灌注60min。采用链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶（S-P法）检测PGC-1α的表达,测定平均积分光密度值（IODA）;采用电子显微镜对心肌线粒体进行Flameng评分。结果IPC组PGC-1α表达（IODA10.94±5.23）明显高于I/R组（IODA3.88±1.72）和CON组（IODA3.39±2.46;P=0.009,0.007）。I/R组线粒体水肿、破裂明显,而CON组、IPC组线粒体损伤较轻。Flameng评分分析显示,IPC组（0.44±0.13）和CON组（0.88±0.22）线粒体评分低于I/R组（1.78±0.14;P=0.003,0.014）。结论IPC能明显减轻线粒体损伤,其机制与PGC-1α激活和高度表达有关,PGC-1α可能是一种重要的内源性心肌保护物质。