血管内皮生长因子在骨形态发生蛋白-2诱导成骨细胞过程中的作用

目的探讨血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）在骨形态发生蛋白-2（BMP-2）诱导成骨过程中的作用。方法（1）取小鼠胚胎成骨细胞进行体外培养，RT—PCR法检测rhBMP-2（300ng／m1）诱导成骨细胞分化过程中VEGF受体（VEGF receptors，VEGF—R）的表达。（2）采用VEGF反义寡核苷酸（antisense oligodeoxynucleotides，ASODNs）和苏拉明分别阻断VEGF的合成及功能，观察对成骨细胞碱性磷酸酶（ALP）活性和钙结节形成的影响。（3）在rhBMP-2诱导成骨的同时，添加不同浓度的外源性VEGF，观察对成骨细胞体外矿化能力的影响。结果（1）VEGF—R（Flk-1和Flt-1）mRNA在成骨细胞呈稳定弱表达，rhBMP-2干预24h后VEGF—R的表达量无明显变化。（2）应用VEGF ASODNs和苏拉明可抑制rhBMP-2所诱导的ALP活性和钙结节形成，并存在剂量依赖效应。（3）单独应用VEGF并不能使成骨细胞分化为钙结节，外源性VEGF的加入亦不影响rhBMP-2刺激钙结节形成的能力。结论VEGF在成骨细胞可以自分泌的形式发挥作用，VEGF至少部分参与了rhBMP-2的诱导成骨活性。     

胰岛素样生长因子-Ⅱ、胰岛素样生长因子结合蛋白-1、抵抗素对妊娠期高血压诊断及严重程度判断价值

目的探讨胰岛素样生长因子-Ⅱ、胰岛素样生长因子结合蛋白-1、抵抗素对妊娠期高血压的诊断及严重程度判断的价值。方法将石家庄市第二医院自2016年7月至2018年6月收治的144例妊娠期高血压患者纳入B组,将同期收治的30例正常孕妇纳入A组。比较A、B两组研究对象羊水胰岛素样生长因子-Ⅱ、胰岛素样生长因子结合蛋白-1、抵抗素水平,以及不同程度妊娠期高血压患者羊水胰岛素样生长因子-Ⅱ、胰岛素样生长因子结合蛋白-1、抵抗素水平。结果 B组胰岛素样生长因子-Ⅱ(16.34±4.57)ng/ml,低于A组的(21.68±1.43)ng/ml;B组胰岛素样生长因子结合蛋白-1(186.84±33.45)ng/ml,高于A组的(145.43±11.45)ng/ml;B组抵抗素(0.86±0.25)μg/ml,高于A组的(0.46±0.16)μg/ml。两组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。妊娠期高血压、轻度子痫前期、重度子痫前期胰岛素样生长因子-Ⅱ分别为(19.64±2.95)ng/ml、(14.84±1.83)ng/ml、(12.64±1.65)ng/ml,随着病情加重,胰岛素样生长因子-Ⅱ水平呈下降趋势;胰岛素样生长因子结合蛋白-1分别为(156.53±9.34)ng/ml、(186.45±13.45)ng/ml、(224.64±19.43)ng/ml,随着病情加重,胰岛素样生长因子结合蛋白-1水平呈上升趋势;抵抗素分别为(0.68±0.19)μg/ml、(0.86±0.25)μg/ml、(0.97±0.32)μg/ml,随着病情加重,抵抗素水平呈上升趋势。组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论胰岛素样生长因子-Ⅱ、胰岛素样生长因子结合蛋白-1、抵抗素对妊娠期高血压的诊断及严重程度判断具有一定的临床价值。     

骨形态发生蛋白-2基因转染骨髓间充质干细胞移植对糖尿病大鼠骨折愈合的影响

目的 观察骨形态发生蛋白-2(BMP-2)基因转染大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对糖尿病骨折愈合的影响,探讨糖尿病骨折治疗的新方法.方法 Wistar雄性成年6周龄大鼠50只,按随机数字表法分为对照组和实验组,均制成糖尿病骨折模型,体外高糖环境下腺病毒介导的BMP-2转染BMSCs,分别于骨折局部移植相应的BMSCs.术后1,2,3,4,6周行X线检查;取骨痂行HE染色,免疫组化检测骨痂中BMP-2的灰度值;ELISA法检测血清中BMP-2的浓度.结果 第4周实验组骨痂BMP-2灰度值为83±3,对照组为118±4(P＜0.01).第4周实验组血清BMP-2浓度为(203.80±8.96)ng/L,对照组为(139.15±4.19)ng/L(P＜0.01).结论 BMP-2基因转染的BMSCs移植能促进糖尿病大鼠骨折的愈合.     

骨形态发生蛋白-2在诱导兔颅骨再生过程中对转化因子-β1表达的影响

目的研究外源性重组人骨形态发生蛋白-2（rhBMP-2）在诱导兔颅骨再生过程中对内源性转化生长因子-β1（TGF-β1）表达的影响。方法建立颅骨缺损模型，利用免疫组化方法检测缺损区颅骨膜内源性TGF-β1在rhBMP-2作用下的表达情况。结果术后早期实验组颅骨膜聚集的大量间充质细胞即开始表达TGF-β1，且随着间充质细胞的分化表达水平迅速提高，表达高峰出现在术后17，19d，术后7，15，21d实验组和对照组诱导区颅骨膜TGF-β1阳性表达差异有统计学意义（P〈0．01）。结论在诱导颅骨再生过程中，外源性rhBMP-2能诱导并增强内源性TGF-β1的表达。     

长骨骨折后血清生长激素/胰岛素样生长因子-Ⅰ轴的变化及临床意义

目的 研究创伤致长骨骨折患者血清生长激素(growth hormone,GH)/胰岛素样生长因子-Ⅰ(insulin -like growth factors,IGF-Ⅰ)水平的变化及临床意义. 方法 2009年11月-2010年4月共收治创伤致四肢长骨骨折患者21例,所有患者均来自同一创伤治疗中心,其中男14例,女7例;年龄22 ～60岁,平均45.0岁.17例(81％)为闭合性损伤,4例(19％)为开放性损伤.采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清GH、IGF-Ⅰ在骨折后14 d内的变化,并分析GH - IGF -Ⅰ轴的变化与损伤严重度评分(ISS)的关系,同时设立GH、IGF-Ⅰ正常对照组8例.结果 骨折后1d外周血GH水平较正常对照组明显升高(P＜0.05),5d时迅速下降并趋于稳定.骨折后1 d ISS≥18分的患者GH水平明显高于ISS＜ 18分的患者(P＜0.05),骨折后5～10 d ISS≥18分的患者IGF-Ⅰ水平明显高于ISS＜ 18的患者(P＜0.05). 结论 长骨骨折后下丘脑GH - IGF -Ⅰ轴在骨折创伤急性期对机体代谢与早期骨折愈合的启动发挥着重要作用.     

2型糖尿病患者血清胰岛素样生长因子及其结合蛋白水平改变

已经证实胰岛素样生长因子 (ＩＧＦ)及其异性结合蛋白 (ＩＧＦＢＰ)在 1型和 2型糖尿病均有异常改变 ,并可能参与糖尿病多种慢性并发症的发生和发展。笔者采用免疫放射分析法 (ＩＲＭＡ)测定了12 4例早期 2型糖尿病患者血清ＩＧＦ Ⅰ、ＩＧＦ Ⅱ、ＩＧＦＢＰ 1和ＩＧＦＢＰ 3水平 ,以了解其变化特点及其相关影响因素。一、资料与方法1.研究对象。对照组为同年龄段体格检查者 ,共 12 5例 ,男 75例 ,女 5 0例 ,平均 (5 4.1± 11.7)岁。 12 4例 2型糖尿病患者 ,男 6 9例 ,女 5 5例 ,年龄 30～ 75(5 4.9± 10 .6 )岁 ,平均空腹血糖 (12 .49±4.8…     

21 d尾吊大鼠承重骨中骨形态发生蛋白、转化生长因子β含量的变化

目的观察21 d 模拟失重对大鼠胫骨骨形态发生蛋白(BMP)、转化生长因子-β(TGF-β)含量及股骨生长情况的影响.方法雄性SD大鼠14只按体质量配对后随机等分为对照组(CON)和尾部悬吊模拟失重组(TS),21 d实验结束后处死大鼠,取股骨检测物理性状,取胫骨免疫组化法检测BMP、TGF-β变化情况.结果 21 d悬吊期间大鼠生长良好,未出现明显应激反应.21 d模拟失重后大鼠股骨湿重、干重、灰分、直径和密度均显著降低(P<0.01);免疫组化结果显示大鼠胫骨中BMP和TGF-β减少.结论 21 d模拟失重使大鼠后肢骨生长受抑, BMP、TGF-β在局部合成及分泌降低.     

骨形态发生蛋白-2诱导成骨过程中血管内皮生长因子的表达及分析

近年来，骨形态发生蛋白（bone mophorgenetic protein，BMP）作为一种有价值的生长因子越来越受到人们的重视，然而其诱导成骨的机制目前却并不完全清楚。最近的研究发现，血管内皮生长因子（VEGF）在骨形成和修复过程中发挥着重要的调节作用，多种生长因子可促进VEGF的分泌，如转化生长因子-β1（TGF-β1）、成纤维细胞生长因子（FGF）、成骨蛋白-1（OP-1）等，从而提示VEGF可能是某些骨生长因子的中介因子。     

大鼠弥漫性脑损伤后胰岛素样生长因子-1的治疗时间窗研究

 目的研究胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对大鼠弥漫性脑损伤(Diffuse brain injury,DBI)的治疗时间窗.方法应用Marmarou方法制成大鼠弥漫性脑损伤模型,于损伤后10、30min,1、2、4、8 h等不同时间点经侧脑室注入2μgIGF-1,5 d后取脑组织进行病理学检查,比较不同处理对大鼠皮层神经元的影响.结果损伤后2 h内给予IGF-1均能明显减少神经元死亡(P＜0.05),以损伤后10 min时给药的保护作用最强.损伤后超过4 h给予IGF-1,则神经保护作用明显减弱,与损伤对照组无显著性差异(P＞0.05).结论IGF-1对大鼠弥漫性脑损伤的治疗时间窗为2 h.     

2型糖尿病并发骨质疏松患者胰岛素样生长因子-1、骨碱性磷酸酶及1,25羟维生素D3表达水平及意义

目的探讨2型糖尿病并发骨质疏松患者胰岛素样生长因子-1、骨碱性磷酸酶及1,25羟维生素D3表达水平及意义。方法将淮北矿工总医院自2015年1月至2017年12月收治的86例2型糖尿病并发骨质疏松患者纳入C组,将同期收治的50例单纯2型糖尿病患者纳入B组,将同期健康体检者30例纳入A组。检测3组研究对象的胰岛素样生长因子-1、骨碱性磷酸酶、1,25羟维生素D3、骨密度及Betatrophin水平,采用Pearson法分析胰岛素样生长因子-1、骨碱性磷酸酶、1,25羟维生素D3与骨密度、Betatrophin的相关性。结果 A组、B组、C组的胰岛素样生长因子-1分别为(234.99±73.50)ng/ml、(191.34±65.43)ng/ml、(132.57±46.32)ng/ml,呈下降趋势;骨碱性磷酸酶分别为(65.32±21.11)ng/ml、(81.44±23.59)ng/ml、(115.33±38.25)ng/ml,呈上升趋势;1,25羟维生素D3分别为(20.59±6.92)ng/ml、(15.43±5.26)ng/ml、(10.57±3.48)ng/ml,呈下降趋势;骨密度分别为(1.14±0.13)g/cm~2、(0.91±0.25)g/cm~2、(0.76±0.13)g/cm~2,呈下降趋势;Betatrophin分别为(0.51±0.13)ng/ml、(4.58±1.06)ng/ml、(8.33±2.17)ng/ml,呈上升趋势。3组指标两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。骨密度与胰岛素样生长因子-1呈正相关(r=0.624,P<0.05),与骨碱性磷酸酶呈负相关(r=-0.645,P<0.05),与1,25羟维生素D3呈正相关(r=0.537,P<0.05);Betatrophin与胰岛素样生长因子-1呈负相关(r=-0.703,P<0.05),与骨碱性磷酸酶呈正相关(r=0.712,P<0.05),与1,25羟维生素D3呈负相关(r=-0.578,P<0.05)。结论胰岛素样生长因子-1、骨碱性磷酸酶、1,25羟维生素D3表达水平与2型糖尿病并发骨质疏松关系密切,定期检测可辅助诊疗。     

胰岛素样生长因子1受体抑制剂对人食管癌移植瘤放射增敏研究

目的 观察胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)抑制剂AG1024对裸鼠EC9706食管癌模型的放射增敏作用及机制。方法 裸鼠皮下接种人食管癌EC9706细胞建立模型,待肿瘤长至100 mm³时按随机表将小鼠分成4组,对照组、单纯照射组、AG1024组、联合组。对照组:不处理;单纯照射组:第1、8天分别给予6 MV X射线,照射剂量单次8 Gy;AG1024组:AG1024腹腔注射30 μｇ/(kg·d),每周5次,共2周;联合组:给予AG1024腹腔注射和照射。每隔2天测肿瘤直径,第15天断颈处死小鼠计算抑瘤率。流式细胞仪检测各组肿瘤组织细胞周期改变;免疫组织化学法检测肿瘤组织细胞周期蛋白CyclinD1表达;TUNEL法检测肿瘤组织细胞凋亡。结果 各组瘤重较对照组减小,抑瘤率分别为39.16%、18.73%和57.04%(F=13.566,P<0.05)。流式细胞仪检测联合组肿瘤细胞G₀/G₁及G₂/M期增多,S期减少,较单纯照射组差异有统计学意义(t=-6.654、-16.738、12.871, P<0.05)。免疫组织化学法检测联合组肿瘤组织细胞周期蛋白CyclinD1表达下降;TUNEL法检测联合组肿瘤组织出现凋亡细胞。结论 IGF-1R抑制剂AG1024能增加食管癌移植瘤的放射敏感性,改变细胞周期、诱导凋亡可能是其机制之一。     

IGF-1及其受体在子宫平滑肌瘤中的表达以及与雌、孕激素关系

目的探讨胰岛素样生长因子1(IGF-1)及其受体(IGF-1R)在子宫肌瘤发病中的作用,以及与雌、孕激素的关系。方法采用ELISA方法测定23例子宫肌瘤患者平滑肌瘤、正常子宫平滑肌组织及血清中IGF-1、IGF-1R的表达;同时用E IA方法测定血清雌二醇(E2)、孕酮(P)水平。选择30例健康妇女作为血清指标测定的对照组。结果(1)子宫平滑肌瘤组织IGF-1、IGF-1R的表达较正常子宫平滑肌高(P<0.01)。(2)子宫肌瘤组血清IGF-1表达与对照组无统计学差异(P>0.05):IGF-1R表达较对照组增强(P<0.01)。(3)观察组血清增生期、分泌期E2、P水平均与对照组无统计学差异(P>0.05)。结论子宫平滑肌瘤组织中IGF-1、IGF-1R过度表达可能是子宫肌瘤发生的机制之一,雌、孕激素介导IGF-1对子宫肌瘤的作用,IGF-1对雌、孕激素诱导肌瘤细胞生长、分化主要以自分泌、旁分泌方式在局部起作用,IGF-1可能是子宫肌瘤生长的调节因子。     

BMP-4基因/TGF-β1对兔火器性股骨缺损的治疗作用

目的 观察BMP-4基因联合TGF-β1对火器性股骨缺损的修复作用. 方法 用火器性钢珠造成兔股骨中段缺损,伤后2周于骨缺损上、下端和中部注射经体外鉴定的BMP-4基因和TGF-β1.用RT-PCR和Western blot检测BMP-4 mRNA与蛋白在体内的表达,用碱性磷酸酶(ALP)活性和钙含量检测局部组织的成骨能力,用病理学和X线检查成骨过程和质量. 结果 注射后BMP-4 mRNA和蛋白可在体内表达6周.实验组ALP活性伤后8周时增加到(13.17±0.51)U/100 ml,显著高于对照组的(8.77±0.44)U/100 ml,提示实验组的成骨能力增强,钙含量检测与此相符.病理学和X线检查证明实验组成骨过程加快,成骨质量提高. 结论 BMP-4基因/TGF-β1对火器性骨缺损有明显的促修复作用.     

用99mTc标记胰岛素样生长因子1类似物的方法学研究

目的建立^99mTc标记胰岛素样生长因子1类似物（IGF-1A）的方法，探讨其标记条件。方法通过预锡化法标记IGF-1A，改变标记条件：Tween80的用量从0～10μl，在0．25～6h不同时间点测定标记率，SnCl2·2H2O质量浓度0．75～4g／L，IGF-1A的用量20～100μg，淋洗液的体积10～200μl，加入生理盐水或人血清后1h～24h测定放化纯度，纸层析法测定标记率及胶体水平。结果^99mTc-IGF-1A最高标记率为（94．43±0．75）%，放射性胶体质量分数为（3．47±0．71）％。室温下放置6h标记率为（85．57±2．81）%，加入人血清后放置24h标记率为（54．07±3．86）％。结论上述预锡化法进行^99mTc标记IGF-1A的最佳标记方法为：浓盐酸溶解SnCl2·2H2O后用葡萄糖酸钠溶液配成3g／L，吸取100μl后加入40μl　IGF-1A（2g／L）；300μlNa3PO4和2μl,0．1％Tween80混匀后加入50μl ^99mTc O4新鲜淋洗液；在IGF-1A体系中加入淋洗液体系，混匀，室温下反应0．5h；加入500μl NaH2O4将pH值调节到7左右。该方法简捷且具有较高标记率和良好稳定性。     

注射携人IGF-1基因的成肌细胞对小鼠损伤骨骼肌内源性mIGF-1表达的影响

目的:研究携人胰岛素样生长因子-1(human insulin-like growth factor-1,hIGF-1)基因的成肌细胞移植损伤小鼠体内后,内源性mIGF-1 mRNA及mIGF-1因子的表达情况。方法:雄性C3H小鼠(20~30g,7~11周)共76只随机分为3组:A组(转基因成肌细胞移植组)、B组(空白成肌细胞移植组)、C组(生理盐水对照组),每组24只。另4只鼠作正常对照。A、B、C各组小鼠于右下肢腓肠肌内侧面中段实施钝性打击,打击伤后第3天分别于致伤部位注入1×106个转基因成肌细胞、等量的空白成肌细胞或100μl生理盐水;打击伤后第2、5、10、15、20、30天,于各组中随机抽取4只小鼠处死,取右侧腓肠肌中段进行检测,以real time RT-PCR和免疫组化染色检测mIGF-1的表达。结果:(1)各组小鼠体内均有mIGF-1 mRNA的表达、mIGF-1免疫组化染色阳性;(2)A组小鼠mIGF-1 mRNA的表达和mIGF-1因子的分泌明显高于B、C组。结论:携hIGF-1基因的成肌细胞移植入钝挫伤的小鼠体内后,可促进mIGF-1 mRNA的表达和mIGF-1因子的分泌。     

2型糖尿病患者血清IGF-1水平与颈动脉粥样斑块的相关性研究

目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者血清胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平与双侧颈动脉粥样硬化斑块的相关性。方法应用超声检测186例患者双侧颈动脉内膜-中膜厚度,根据超声检查结果将其分为:(1)A组(颈动脉粥样硬化斑块阳性的T2DM患者)96例;(2)B组(颈动脉粥样硬化斑块阴性的T2DM患者)90例。并采用免疫放射分析法检测两组患者的血清IGF-1水平。结果 A组患者的血清IGF-1水平与B组比较显著降低,差异有显著统计学意义(P<0.01);T2DM患者血清IGF-1水平与双侧颈动脉粥样斑块的程度呈显著负相关(r=0.649,P<0.01)。结论 IGF-1参与了T2DM大血管病变的发生、发展,IGF-1水平与颈动脉粥样斑块程度密切相关。     

人外周血自然杀伤T细胞分泌胰岛素样生长因子-1的研究

目的:建立人外周血自然杀伤T细胞(NKT)体外扩增及检测NKT细胞分泌胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的方法。方法:采用IFN-γ,CD3和IL-2的方法从人外周血单个核细胞(PBMC)中扩增出NKT细胞,采用流式细胞仪检测扩增效率,并使用绝对实时定量PCR(real-time PCR)的方法检测扩增出的NKT细胞中IGF-1的 mRNA表达量。使用内源性管家基因GAPDH校正误差。结果:两周扩增后NKT细胞增加了4倍。受试者扩增的NKT细胞IGF-1 mRNA表达量为1.29±0.56拷贝数/10~6GAPDH。结论:从PBMC扩增NKT细胞可以获得良好的效果,扩增出的NKT细胞有IGF-1的表达,但是表达量相对较低。