白藜芦醇对糖尿病大鼠坐骨神经MnSOD的作用

探讨白藜芦醇对糖尿病大鼠坐骨神经锰超氧化物歧化酶（MnSOD）的作用。50只SD大鼠随机分为5组：正常组、糖尿病对照组、α-硫辛酸组、白藜芦醇小剂量组、白藜芦醇大剂量组,进行相应药物或生理盐水灌胃干预。12周后处死大鼠,检测各组坐骨神经抗氧化酶活力和MnSOD表达量,并观察其超微结构。结果显示,糖尿病对照组大鼠抗氧化酶活力降低,白藜芦醇能显著提高MnSOD的表达量和活性,坐骨神经髓鞘和雪旺细胞核出现退行性改变。以上数据表明,糖尿病大鼠坐骨神经中MnSOD活性下降;白藜芦醇能提高MnSOD表达和活性,改善糖尿病神经病变。     

生长相关蛋白及其mRNA在大鼠损伤坐骨神经中的表达

为了研究大鼠周围神经损伤后远侧端组织中生长相关蛋白 (GAP-4 3 )及其 m RNA的表达 ,采用正常 SD大鼠坐骨神经横断损伤的模型 ,于术后不同时间取坐骨神经远侧端组织 ,以 Western Blot和 RT-PCR法检测 GAP-4 3及其 m RNA的表达。RT-PCR法检测结果显示 ,正常大鼠坐骨神经组织中 GAP-4 3 m RNA表达量较低 ,而损伤坐骨神经的远侧段 GAP-4 3 m RNA的表达量明显增加 ,于损伤第 2周时达高峰。用抗 GAP-4 3抗体进行 Western Blot检测 ,结果表明 ,正常坐骨神经 43 k Da处出现弱阳性反应的蛋白区带 ,而损伤后坐骨神经远侧段 43 k Da处阳性反应条带着色明显加深 ,损伤后第 3周时阳性反应着色最强。本研究结果提示 ,GAP-4 3及其 m RNA在大鼠损伤坐骨神经远侧段组织中表达增强 ,其 m RNA表达上调高峰在神经损伤后的第 2周 ;而其蛋白合成增加最为明显的时间是在神经损伤后的第 3周。     

α-硫辛酸对糖尿病神经病变大鼠坐骨神经蛋白激酶C活性的影响

评价糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经蛋白激酶C(PKC)活性的变化以及抗氧化剂α-硫辛酸(ALA)是否对PKC通路产生有益的影响.采用链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型,饲养8周后随机分为糖尿病组和ALA治疗组.造模前设鼠龄和体重相当的正常组8只.ALA干预治疗12周后,检测各组大鼠坐骨神经外膜二酰基甘油(DAG)水平和PKC活性.结果表明,糖尿病组大鼠DAG水平和PKC活性升高(P＜0.01),ALA(100mg·kg-1·d-1)治疗后DAG水平及PKC活性明显降低(P＜0.01).实验结果提示,高血糖时大鼠坐骨神经外膜DAG-PKC途径明显激活,ALA可能部分通过降低DAG水平和PKC活性,从而对糖尿病大鼠周围神经起保护作用.     

白藜芦醇对糖尿病肾病大鼠醛糖还原酶的影响

目的:观察白藜芦醇对糖尿病肾病大鼠醛糖还原酶的影响。方法:将48只雄性SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、白藜芦醇低、中、高剂量组和依帕司他组(n=8)。除正常对照组外,其余各组大鼠腹腔注射STZ(55 mg.kg-1),成功造模后白藜芦醇组分别给予5、154、5 mg.kg-1白藜芦醇,依帕司他组给予10 mg.kg-1依帕司他,连续灌胃6 w后,检测大鼠血糖、体重,HE染色检测肾脏病理改变,ELISA法检测醛糖还原酶(AR)活性。结果:与正常对照组相比,糖尿病组血糖与AR活性明显升高(P<0.05),与模型组比较,白藜芦醇各组血糖与AR活性明显降低(P<0.05)。结论:白藜芦醇可降低糖尿病大鼠血糖,其降糖效应可能与抑制AR活性有关。     

周围神经65KD蛋白在损伤性大鼠坐骨神经中的表达

目的：研究周围神经６５ＫＤ蛋白在损伤性大鼠坐骨神经中的分布与表达。方法：取损伤１５ｄ后的大鼠坐骨神经近侧端及远侧端,冰冻切片,与抗６５ＫＤ蛋白单克隆抗体与切片孵育后,加羊抗小鼠ＩｇＧＨＲＰ,ＤＡＢ反应成色。结果：大鼠坐骨神经远侧端及近侧端中均有６５ＫＤ蛋白阳性免疫反应产物,阳性免疫反应产物位于雪旺氏细胞。阳性免疫反应产物的密度及强度在神经的远侧端大于近侧端。结论：神经诱向因子６５ＫＤ蛋白由雪旺氏细胞产生。在损伤后神经近、远侧端都存在６５ＫＤ蛋白,远侧端的强度大于近侧端,这一浓度梯度可能是诱导再生的神经纤维定向生长过程中的一个重要因素。     

VEGF和HIF-1在糖尿病大鼠坐骨神经的表达及NGF的调节作用

目的探讨血管内皮细胞生长因子(VEGF)及缺氧诱导因子-1(H IF-1)在糖尿病周围神经病变中的表达及神经生长因子的调节作用。方法大鼠糖尿病造模后分成糖尿病(DM)组及神经生长因子(NGF)治疗组,治疗2周后采用蛋白印迹及免疫组化法观察坐骨神经VEGF及H IF-1动态变化。结果蛋白印迹显示正常组坐骨神经纤维无VEGF和H IF-1表达,DM组VEGF及H IF-1表达呈阳性,NGF治疗组无表达。免疫组织化学结果显示,坐骨神经VEGF阳性产物位于轴突及雪旺氏细胞中,DM组积分光密度明显高于正常组及NGF组(P<0.01)。结论局部应用外源性NGF减少糖尿病大鼠坐骨神经VEGF和H IF-1的表达。     

丙烯酰胺染毒对大鼠坐骨神经MBP和MAG表达的影响

目的:通过检测染毒大鼠坐骨神经中髓鞘碱性蛋白(MBP)和髓磷脂相关糖蛋白(MAG)表达量的变化,探讨丙烯酰胺(ACR)对大鼠周围神经系统的毒性影响。方法:成年雄性SD大鼠32只,随机分为对照组、9、18、36 mg/kg ACR组,每组8只,灌胃染毒21 d后取材。每周一次步态评分,记录大鼠步态改变;利用HE染色和劳克坚牢蓝染色,观察坐骨神经及其髓鞘的改变;通过免疫组织化学方法检测蛋白MBP和MAG表达量的变化。结果:大鼠步态得分与染毒剂量和染毒时间呈正相关; HE染色显示随染毒剂量增大,坐骨神经神经纤维排列紊乱、髓鞘结构发生改变、轴突数目减少;劳克坚牢蓝染色结果显示与对照组相比,染毒组髓鞘染色较浅、着色不均,髓鞘变细;免疫组化结果显示,MBP和MAG在坐骨神经中的表达量均随染毒剂量增大而下降。结论:ACR染毒对大鼠坐骨神经髓鞘的毒性损伤,可能与MBP和MAG蛋白表达量的下降有关。     

丝胶对糖尿病大鼠坐骨神经及相关神经元胞体的保护作用

目的:探讨丝胶对Ⅱ型糖尿病大鼠坐骨神经及相关神经元胞体的保护作用,为防治糖尿病周围神经病变提供理论依据和实验基础.方法:雄性SD大鼠,随机分为正常对照组、糖尿病模型组和丝胶治疗组.采用免疫组织化学显色观察坐骨神经神经微丝蛋白(NFP),脊髓前角细胞、脊神经节细胞神经生长因子(NGF)和神经肽Y(NPY)蛋白的表达.结果:NFP免疫阳性产物为棕黄色,位于轴索;NGF蛋白免疫阳性产物为棕黄色细腻颗粒状,位于脊神经节细胞和脊髓前角细胞的胞质和胞核,以胞质为主;NPY蛋白免疫阳性产物为棕褐色颗粒状,位于脊神经节细胞和脊髓前角细胞的胞质.与正常对照组大鼠比较,糖尿病模型组大鼠坐骨神经NFP蛋白的表达、脊神经节细胞和脊髓前角细胞NGF蛋白的表达降低;脊神经节细胞和脊髓前角细胞NPY蛋白的表达增高.与糖尿病模型组大鼠比较,丝胶治疗组大鼠坐骨神经NFP蛋白的表达、脊神经节细胞和脊髓前角细胞NGF蛋白的表达增高;脊神经节细胞和脊髓前角细胞NPY蛋白的表达降低.结论:丝胶可通过上调Ⅱ型糖尿病大鼠坐骨神经NFP的表达、脊神经节细胞和脊髓前角细胞NGF蛋白的表达,下调糖尿病大鼠脊神经节细胞和脊髓前角细胞NPY蛋白的表达,发挥对Ⅱ型糖尿病大鼠坐骨神经及相关神经元胞体的保护作用.     

老化大鼠坐骨神经Fas与FasL的表达及纤维结构变化

为了观察老化对神经纤维组成和结构的影响以及对凋亡相关因子Fas及其配体FasL表达的影响,随机取3月龄(成年组)和24月龄(老年组)正常SD大鼠各16只进行以下实验:采用透射电镜(TEM)观察坐骨神经的超微结构变化;苏木精-伊红(HE)染色计数轴突数与Schwann细胞数的比例;免疫组织化学染色检测大鼠坐骨神经老化时Fas和FasL的表达变化。结果显示:透射电镜下可见老年大鼠坐骨神经轴突直径增加,轴突周围间隙扩大,多数髓鞘分离,部分板层结构排列紊乱、破坏甚至呈气球样变。老年组的轴突数与Schwann细胞数的比例较成年组变大(P<0.01)。两组动物坐骨神经的髓鞘与轴突均可见Fas和FasL免疫组化阳性染色,但老年组大鼠的Fas和Fasl表达量明显增多(P<0.05)。以上结果提示老化大鼠坐骨神经神经纤维的形态结构发生很大的变化,可能与凋亡相关基因产物Fas及其配体FasL的表达增加有关。     

远志对糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经相关神经元胞体凋亡的影响

目的:探讨远志对糖尿病周围神经病变(DPN)大鼠坐骨神经相关神经元胞体的保护作用。方法:雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组、DPN模型组和远志治疗组,DPN模型组和远志治疗组均建立DPN模型。待建模后,远志治疗组大鼠给予远志灌胃6周。尼氏染色法观察背根节神经元胞体形态,免疫组织化学显色检测背根节神经元胞体Bcl-2、Bax蛋白的表达,TUNEL法检测背根节神经元凋亡指数。结果:与空白对照组比较,DPN模型组大鼠背根节神经元胞体形态异常,Bcl-2表达降低,Bax表达升高,凋亡指数升高;与DPN模型组比较,远志治疗组大鼠背根节神经元胞体形态接近正常,Bcl-2表达升高,Bax表达降低,凋亡指数降低。结论:远志可通过上调DPN大鼠背根节神经元胞体Bcl-2的表达,减少Bax的表达,抑制背根节神经元凋亡,发挥对DPN大鼠背根节神经元胞体的保护作用。     

Protective effect of gliclazide on diabetic peripheral neuropathy through Drp-1 mediated-oxidative stress and apoptosis

Objective: To investigate the protective effect of gliclazide and the role of dynamin-related protein l (Drp-1)-mediated oxidative stress and apoptosis in diabetic peripheral neuropathy (DPN). Methods: Diabetic rats developed through intra-peritoneal injection of streptozotocin were randomly assigned to treatment group receiving gliclazide or non-treatment group without gliclazide treatment. Rats in control group received intra-peritoneal injection of vehicle and no gliclazide treatment. Eight weeks later, the nerve conduction velocity (NCV) of sciatic nerve was measured and the morphological alterations, the malondialdehyde (MDA) level and superoxide-dismutase (SOD) activity, the expressions of Drp-1, caspase-3, Bax and Bcl-2 in sciatic nerve were evaluated. Results: When compared to rats in control group, rats in non-treatment group showed significantly decrease of NCV, obvious demyelinative alteration of sciatic nerve, increased expressions of Drp-1, caspase-3, Bax, Bcl-2 and MDA, and decreased SOD activity. Compared to rats in non-treatment group, rats in treatment group showed significantly increase of NCV, less demyelination of sciatic nerve, decreased expressions of Drp-1, caspase-3, Bax and MDA, and increased activity of SOD. The expression of Bcl-2 was not significantly different between treatment and non-treatment groups. Conclusion: Gliclazide showed protective effect on DPN through modulating Drp-1-mediated oxidative stress and apoptosis.     

Spatiotemporal Expression of SSeCKS in Injured Rat Sciatic Nerve

SSeCKS (src suppressed C kinase substrate) functions in the control of cell signaling and cytoskeletal arrangement. It is expressed in brain and spinal cord, but little is known about its expression in peripheral nerves. In this study, in rats, real‐time polymerase chain reaction and Western blot analysis showed that expression of SSeCKS in crushed sciatic nerve reached its highest level 6 hr after crushing, whereas in a transection model, SSeCKS peaked at 2 days in the proximal stump and 12 hr in the distal stump. Immunohistochemical analysis demonstrated up‐regulation of SSeCKS protein surrounding the crush site and in the two stumps of the transected nerve. In addition, SSeCKS colocalized with growth‐associated protein 43 and with S100, which also changed with time after injury. These findings support the idea that SSeCKS participates in the adaptive response to peripheral nerve injury and may be associated with regeneration. Anat Rec, 291:527–537, 2008. © 2008 Wiley‐Liss, Inc.     

坐骨神经损伤修复机制及其治疗的研究进展

坐骨神经损伤是坐骨神经干或分支受到外界创伤而引起的躯体感觉、运动及自主神经功能障碍的一种临床综合症。坐骨神经损伤修复的机制复杂,对其修复机制的深入研究将有利于提高本病的诊疗水平。本文就近年来坐骨神经损伤修复机制及其治疗方面的进展作一综述。     

半活体和离体大白鼠坐骨神经轴向力学性质的差异

成年Ｗｉｓｔａｒ大鼠坐骨神经（ＳＣＮ）１４侧，随机分为２组，分别在半活体和离体两种不同状态下进行单轴拉伸试验，结果表明：当轴向应力在０￣３６ｋＰａ范围时，半活体和离体的ＳＣＮ应力应变关系为指数函数关系，但材料常数Ｘ，间有显著性差异。     

Effects of Resveratrol on the Proliferation and Apoptosis in Synoviocytes of Rheumatoid Arthritis

Rheumatoid arthritis (RA) is a chronic systemic inflamma-tory disorder of unknown etiologic cause, and characterizedby symmetric involvement of the peripheral joints with thetypical histopathological changes, showing hyperplasia ofthe synovium, and often …     

槲皮素和依那普利对糖尿病大鼠肾组织的PDGF-B和VEGF-1含量的影响研究

了解槲皮素和依那普利对糖尿病大鼠尿蛋白排泄及肾组织的血小板衍生生长因子(PDGF-B)和血管内皮生长因子(VEGF-1)含量的影响。将29只糖尿病大鼠分成3组糖尿病对照组(D组,n=12);依那普利治疗组(E组,n=10);槲皮素治疗组(Q组,n=7)。另有一组正常对照组(N组,n=5)。分别于4、8、12周收集大鼠24h尿测定尿蛋白的量,并于12周处死大鼠并取出肾脏测定PDGF-B和VEGF-1的含量。糖尿病大鼠在8、12周尿蛋白的排泄明显高于正常对照组,E、Q组的尿蛋白量明显低于D组,E组和Q组无明显差异。糖尿病大鼠肾组织中PDGF-B和VEGF-1的含量明显高于正常对照组,E、Q组的PDGF-B和VEGF-1的含量低于D组,E组和Q组无明显差异。槲皮素和依那普利能降低糖尿病大鼠尿蛋白的排泄和肾组织中的PDGF-B和VEGF-1含量。提示槲皮素和依那普利对糖尿病大鼠具有保护作用,这种作用可能与抑制PDGF-B和VEGF-1的产生有关。     

种植施万细胞的脱细胞同种异体神经移植物对大鼠坐骨神经缺损的修复作用

目的观察种植施万细胞的脱细胞同种异体神经移植物,桥接大鼠坐骨神经缺损后的神经再生。方法应用酶反复消化法与差速贴壁法体外分离培养乳鼠施万细胞;显微注射法将施万细胞种植到脱细胞同种异体神经移植物内;再应用种植施万细胞的脱细胞同种异体神经移植物桥接大鼠坐骨神经10 mm缺损。光镜、透射电镜和扫描电镜观察再生神经的形态结构、有髓神经纤维数量、平均髓鞘厚度并进行统计学分析。结果光、电镜观察到实验组(SCs+ARSN)的施万细胞在再生神经纤维中互相连结纵行排列成类似Büngner带样细胞链,对照组(ARSN)未见到施万细胞的链状排列。实验组再生有髓神经纤维的髓鞘厚度较对照组均匀且较厚,有髓神经纤维数量和平均髓鞘厚度明显多于对照组(P<0.05)。结论种植施万细胞的脱细胞同种异体神经移植物对缺损的坐骨神经再生有更加有效的促进作用。     

Drp1在高糖诱导的大鼠心肌细胞肥大中的作用研究

目的:探讨发动蛋白相关蛋白1(Drp1)在高糖诱导的心肌细胞肥大模型中的表达及其作用机制。方法:原代乳大鼠心肌细胞培养,用高糖诱导建立心肌细胞损伤模型,将细胞分为对照组、高渗透压组、DMSO组、高糖组和高糖+线粒体分裂抑制剂1(Mdivi-1)组。用麦胚凝集素荧光染色检测单个心肌细胞表面积;用线粒体膜电位(MMP)检测试剂盒(JC-1)检测心肌细胞MMP水平;Western blot检测心肌细胞肥大标志物心房钠尿肽(ANP)及Drp1和Drp1在Ser616/Ser637位点的磷酸化蛋白[p-Drp1(Ser616/Ser637)]的蛋白水平。结果:与对照组相比,高渗透压组各检测结果均无显著差异(P>0.05)。与对照组和高渗透压组相比,高糖组心肌细胞的表面积均显著增大(P<0.01),MMP显著降低(P<0.01),而Drp1总蛋白表达无显著变化(P>0.05);心肌细胞ANP表达显著增加(P<0.01),p-Drp1(Ser616)水平显著升高(P<0.05),而p-Drp1(Ser637)水平显著降低(P<0.05)。与高糖组相比,高糖+...