肝硬化大鼠下丘脑神经元的形态观察

本文通过对肝硬化大鼠下丘脑神经元形态及数目的定量研究 ,探讨出现复杂症状的组织学基础。材料与方法一、建立肝硬化模型ＳＤ大鼠 40只 ,购自昆明医学院重点实验室 ,雌性 ,体重15 0～ 2 0 0ｇ。随机分成 2组 :实验组 (ｎ =2 0 )予 2 0 %四氯化碳∶橄榄油混合溶液腹部皮下注射     

改良大鼠腹主动脉瘤模型的建立

目的研究一种简便、稳定、可靠的构建大鼠腹主动脉瘤模型的方法。方法选用SD雄性大鼠50只,随机分为弹力蛋白酶(Elastase)组、CaCl2组、CaCl2+Elastase组、生理盐水组、正常组,每组10只。五组大鼠分别于术中进行不同处理,术后14 d观察各组大鼠的存活率,计算腹主动脉的直径扩张率,取腹主动脉组织进行HE染色,维多利亚蓝弹力纤维染色以及平滑肌凋亡实验。结果 Elastase组、CaCl2组、CaCl2+Elastase组、生理盐水组、正常组大鼠的术后存活率分别为:80%,100%,70%,100%,100%;腹主动脉的直径扩张率分别为:220.3%,100%,220.3%,112.3%,100%;HE染色:Elastase组、CaCl2组、CaCl2+Elastase组的各层结构分界不明显,动脉壁破坏明显,其中CaCl2组和CaCl2+Elastase组炎症细胞浸润增多;维多利亚蓝弹力纤维染色:Elastase组和CaCl2+Elastase组主动脉壁结构紊乱,中膜弹力纤维减少或消失,胶原纤维增多。平滑肌凋亡实验:Elastase组和CaCl2+Elastase组中凋亡小粒明显增多。结论注入20 U Elastase并用浸润有CaCl2溶液的纱布包绕腹主动脉所制作的大鼠腹主动脉瘤模型,较为符合人腹主动脉瘤的病理改变。     

牛磺酸对糖尿病心肌病大鼠的保护作用

目的:探讨牛磺酸对糖尿病大鼠心肌的保护作用机制。方法:用Wistar大鼠52只,高糖高脂饮食 喂养4周造成胰岛素抵抗后,随机选其中7只腹腔注射枸橼酸钠缓冲液为对照组1;其余用链脲菌素(STZ)腹腔 注射诱发2型糖尿病,20周后成功复制糖尿病心肌病,通过颈动脉插管将等容舒张期左室内压下降的最大速率 (-dp/dtmax)≤93.1kPa/s的糖尿病大鼠(24只)分组:7只用双蒸水腹腔注射,为对照组2;8只通过腹腔注射 AT2激动剂(CGP42112A),为实验组1;9只腹腔注射牛磺酸,为实验组2。以上注射每天1次,连续4周。称心 脏重量(HW),通过凋亡试剂盒检测心肌细胞凋亡指数(CAI),用WesternBlot法、免疫组化染色法检测心肌细胞 上AT2和bcl 2蛋白质量。结果:实验组1和2、对照组2,-dp/dtmax、显著低于对照组1(均P<0.01);三组糖尿 病大鼠心肌CAI、AT2的蛋白质表达量及HW均显著高于对照组1(P<0.01);实验组1、2心肌CAI、AT2的蛋 白质表达量分别显著高于、显著低于对照组2(均P<0.01);实验组1心肌CAI、AT2的蛋白质表达量及心脏重 量测定分别显著高于实验组2(均P<0.01);bcl 2变化正好与AT2变化相反。结论:AT2高表达促进糖尿病大 鼠心肌细胞的凋亡,是糖尿病心肌病的重要促发因素之一;牛磺酸通过下调AT2的高表达保护糖尿病     

COX-2在OVX大鼠骨组织中的表达

目的 通过检测绝经后骨质疏松(PMOP)模型大鼠骨密度及骨组织中COX-2的表达探讨COX-2在双侧卵巢切除(OVX)大鼠骨丢失中可能的作用.方法 3月龄成年雌性Sprague/Dawley大鼠30只,随机分为2组,每组15只:①Sham组,②OVX组.实验12 w后,检测大鼠股骨及腰椎骨密度后处死大鼠,以免疫组化法观察骨组织中COX-2的表达水平.结果 与Sham组相比,OVX 组BMD下降;OVX组骨小梁周边COX-2表达阳性细胞数明显增多且表达增强.相关分析显示,OVX组大鼠骨组织中,COX-2表达与BMD呈负相关;而Sham组大鼠骨组织中,COX-2蛋白表达水平与BMD无明显相关性.结论 大鼠去卵巢后伴随COX-2在骨组织中表达增强,BMD下降,COX-2在PMOP的发病机制中可能起重要作用,COX-2可能作为判定防治PMOP疗效的一种细胞因子而应用于临床.     

大鼠胃损伤适应性作用的观察

目的　建立大鼠无水乙醇胃损伤的适应模型 ,观察大鼠胃损伤适应性保护作用。方法　采用 40 %、75 %乙醇 1ml胃饲 ,并且在 0、2、4d内予以重复刺激 ,诱发胃损伤适应模型 ,观察损伤模型胃黏膜病理形态变化。结果　对照组大鼠胃黏膜损伤指数 (UI)为 47 2 5± 2 .0 5 ;40 %乙醇处理组大鼠胃黏膜UI为 2 5 .2 5± 3 .71,较对照大鼠显著降低 (P <0 .0 5 ) ;75 %乙醇处理组大鼠胃黏膜UI为 67.40± 10 .81,较对照大鼠显著增高 (P <0 .0 5 )。提示在给予 40 %乙醇 3次刺激后 ,大鼠胃能产生适应性保护作用 ,减轻了再给予无水乙醇刺激时的胃损伤 ;而在给予 75 %乙醇 3次刺激后 ,大鼠胃不能产生适应性保护作用 ,反而加重了再给予无水乙醇刺激时的胃损伤。结论　能够促使胃产生适应性保护作用的损伤刺激有一定的程度范围     

抑郁症大鼠脑脊液细胞因子动态变化及临床意义

目的探讨IL-2、IL-6及IL-10在抑郁症（MOD）发生、发展中的作用。方法将40只SD大鼠随机分为抑郁组25只和对照组15只。抑郁组制备MOD模型,对照组不处理,分别于制模0、2、4、6、8周测定两组体质量及行为学指标（MOD快感消失、空间立体记忆能力）,采用ELISA法检测脑脊液IL-2、IL-6及IL一10水平。结果抑郁组4、6．8周体质量明显低于对照组、平均潜伏期明显高于对照组,2、4、6、8周糖水偏爱百分比明显低于对照组,P〈0．05或0．01;抑郁组2、4、6、8周IL-6水平明显高于对照组,4周IL-10水平明显低于对照组,4、6、8周IL-2水平明显高于对照组,P〈0．05或0．01。结论MOD大鼠的脑脊液细胞因子IL-2、IL-6及IL-10随着刺激时间延长呈动态变化,可促进MOD的发生发展。     

前列腺素E_2对四氧嘧啶所致糖尿病大鼠及正常大鼠糖代谢作用的初步观察

本文报告了PGE_2对Alloxan所致糖尿病大鼠及对正常大鼠血糖、胰岛素和胰升血糖素的影响。结果表明:PGE_2对正常大鼠和糖尿病大鼠均有降低血糖作用,对胰岛素的分泌有抑制作用,对胰升血糖素有刺激分泌的趋势。PGE_2对糖尿病大鼠的降血糖作用似乎有剂量依赖性。PGE_2降血糖作用可能与短暂性高血糖和抑制胰升血糖素的肝糖原分解作用有关。     

双氢青蒿素干预实验大鼠肺纤维化机制的研究

目的研究双氢青蒿素干预肺纤维化的作用机制。方法构建博来霉素诱导的大鼠肺纤维化模型[1],造模后行灌胃治疗。用HE染色、Masson染色法观察大鼠肺组织病理变化,碱水解法检测羟脯氨酸含量,Ellisa法检测血清中TGFβ1(转化生长因子β1)含量,荧光定量PCR法检测TGFβ1、SMAD2、SMAD3基因表达,免疫组化法检测大鼠肺组织中TGFβ1、SMAD2/3、p SMAD2/3蛋白表达。结果双氢青蒿素可减轻肺纤维化模型大鼠肺组织炎症和纤维化程度,抑制TGFβ1、SMAD2、SMAD3基因表达和TGFβ1、SMAD2/3、p SMAD2/3蛋白表达。结论双氢青蒿素可能通过抑制TGFβ1-SMAD2/3通路干预肺纤维化。     

RNA干扰治疗慢性心力衰竭大鼠的实验研究

目的利用RNA干扰(RNAi)技术抑制心力衰竭(心衰)大鼠受磷蛋白(PLN)mRNA的表达,改善心脏功能。方法选用SD大鼠40只,对照组7只;其余33只造心衰模型,存活21只,随机分为心衰组、rAAV2-phRi1组,rAAV2-phRi2组,每组7只;rAAV2-phRi导入后30天测定血流动力学,逆转录聚合酶链反应检测心肌PLN mRNA,定磷法测定肌浆网Ca2+-ATP酶(SERCA2a)活性。结果rAAV2-phRi导入30天时,与心衰组比较,rAAV2-phRi1及rAAV2-phRi2对PLN mRNA的抑制效率为85.32%和67.65%,SERCA2a活性增加了104%和74%,血流动力学显著改善(P<0.05),达到对照组水平(P>0.05);rAAV2-phRi1的抑制效率、对心功能的改善显著优于rAAV2-phRi2。结论体内水平上,RNAi能够抑制心衰大鼠PLN mRNA表达,改善心脏功能。     

高钙血症加重大鼠血管钙化

目的探讨高钙血症对血管钙化的影响。方法用维生素D3加尼古丁诱导大鼠血管钙化模型,von Kossa染色、钙含量测定、45Ca2 聚集及碱性磷酸酶活性测定判断钙化程度,用竞争性半定量逆转录聚合酶链反应方法测定血管钙化标志分子骨桥蛋白和β-actin mRNA水平。结果钙化组大鼠血压升高,收缩压较对照组高28%(P<0.05);血管von Kossa染色见血管中膜弹性纤维间可见大量棕黑色颗粒沉积。主动脉钙含量、45Ca2 沉积及碱性磷酸酶活性分别较对照高3.7倍、1.3倍和1.4倍(P<0.01)。钙化血管组织骨桥蛋白mRNA表达上调46%(P<0.01)。与对照组比较,高钙摄入增加血钙而降低血磷水平(2.49±0.14比2.20±0.12;1.25±0.05比1.40±0.07,P<0.01),单纯高钙摄入组主动脉钙含量、45Ca2 沉积及碱性磷酸酶活性与对照组比较差异无显著性(P>0.05)。而诱导钙化后给予高钙饮食可增加血管钙化程度,与单纯钙化组比较,主动脉钙含量、45Ca2 沉积及碱性磷酸酶活性分别升高了12%(P>0.05)、38%(P<0.01)和15%(P<0.01);骨桥蛋白表达上调34%(P<0.01)。结论高钙摄入可以加重大鼠血管钙化。     

常压缺氧性大鼠肺动脉高压模型的改进

目前 ,国内建立常压缺氧性大鼠肺动脉高压模型常采用薛全福等〔1〕方法。但该方法存在缺氧舱内温度不恒定及不能完全排除 CO2 和水蒸气的影响等不足之处 〔2〕。为此 ,我们对这一常规方法进行改进 ,建立常压低氧大鼠肺动脉高压模型。1　材料与方法1 .1 　 动物分组雄性 Wistar大鼠 50只 ,体重 (BW) 2 0 0～ 2 50g,随机分为对照、缺氧 1、2、3、4周 5组 ,每组 1 0只。1 .2 　 低氧方法将大鼠置于改进的常压低氧装置 (图 1 )内 ,通入氮气 ,用自动测氧仪调控氧浓度至 (1 0± 0 .5) %。CO2 传感器可反馈控制钠石灰装置的电磁阀门 ,使舱内 CO…     

催乳素对老年大鼠细胞免疫功能的影响

目的　观察催乳素 (prolactin,PRL)对老年大鼠 T淋巴细胞功能的影响。方法　采用 MTT法测定 PRL对脾淋巴细胞增殖反应和IL- 2活性的影响。结果　 PRL能提高 3月龄青年大鼠和 2 4月龄老年大鼠脾淋巴细胞增殖能力和 IL - 2分泌量 ,但 PRL对老年大鼠脾淋巴细胞的增殖指数 (Stimulation Index,SI)和产生 IL- 2的能力均低于青年大鼠 (P<0 .0 1 )。结论　 PRL在体外能提高老年大鼠 T淋巴细胞增殖和 IL - 2生成 ,但其作用低于青年大鼠。     

丙烯腈对大鼠肝脏的毒性

研究丙烯腈对大鼠肝脏的毒性。对 4 0只雄性大鼠随机分成 4组 ,每组 10只 ,以丙烯腈剂量分别为 0ｍｇ/ｋｇ(Ａ组 )、5ｍｇ/ｋｇ(Ｂ组 )、15ｍｇ/ｋｇ(Ｃ组 )和 30ｍｇ/ｋｇ(Ｄ组 )灌胃染毒每天 1次、每周 5次 ,持续 15周后每组处死 7只 ,其余继续灌胃至 2 2周处死。结果显示 ,4     

利用RNA干扰技术治疗慢性心衰大鼠的研究

目的利用RNA干扰（RNA interference，RNAi）技术抑制心衰大鼠受磷蛋白（phospho—lamban，PLN）mRNA的表达，改善心脏功能。方法构建表达PLN shRNA的重组腺相关病毒载体（rAAV2-phRi1及rAAV2-phRi2）；通过经腹心包穿刺术将rAAV2-phRi1及rAAV2-phRi2注入心衰大鼠心包内，基因导入后10d，30dRT—PCR法检测RNAi对心肌细胞PLN mRNA的抑制效应，并测定肌浆网Ca^2＋-ATP酶（sarcoplasmic reticulum Ca^2＋-ATPase，SERCA2a）活性，比较血流动力学的变化。结果rAAV2-phRi1及rAAV2-phRi2心包注射后，与心衰组比较，10d时PLN mRNA分别降低18．76％／16．36％，SERCA2a活性及血流动力学指标无明显改善；30d时rAAV2-phRi1及rAAV2-phRi2对PLN mRNA的抑制效率为85．32％／67．65％，SERCA2a活性增加104％／74％，血流动力学显著改善（P〈0．05），达到假手术组水平（P〉0．05）；rAAV2-phRi1的抑制效率，对心功能的改善显著优于rAAV2-phRi2（P〈0．05）。结论在体水平上，RNAi能够抑制心衰大鼠PLN mRNA表达，改善心脏功能，rAAV2-phRi1优于rAAV2-phRi2。     

颈椎病大鼠模型的建立

目的研究大鼠颈椎病动物模型的建立。方法80只SD大鼠随机分成4组,模型组2组行颈后肌切除术,另2组为对照假手术组。于术后3月、术后6月分别处死模型组和对照组动物各1组,对颈椎间盘进行组织学观察。结果大鼠椎间盘在增龄的过程中逐渐发生退变,椎间盘由外周规则排列的纤维环、中央大的髓核及较完整软骨终板逐渐转变成纤维环出现玻璃样变、断裂,髓核出现皱缩、变小或消失,软骨板变薄、缺损。而模型组退变发生更为严重。结论模型的产生符合颈椎病慢性进展性退变过程。     

模拟失重对大鼠实验性胃溃疡愈合的影响

目的:探讨模拟失重对乙酸诱导的大鼠实验性胃溃疡愈合的影响及可能机制.方法:32只SD大鼠随机分为4组,即尾部悬吊7d组、尾部悬吊14d组和相应的同步对照组.采用乙酸烧灼法制备大鼠慢性胃溃疡模型,造模后第3天悬吊组大鼠采用尾悬吊法建立模拟失重动物模型.游标卡尺检测胃溃疡面积,电镜下观察再生黏膜结构,放免法检测胃液EGF含量,观察大鼠胃溃疡愈合分期.结果:与对照7d组相比,悬吊7d组大鼠溃疡面积明显增大(6.0mm2±1.7mm2vs2.2mm2±0.7mm2,t=5.661,P<0.01),溃疡分期明显降低(χ2=12.771,P<0.01);与对照14d组相比,悬吊14d组溃疡面积明显增大(3.0mm2±1.2mm2vs1.1mm2±0.4mm2,t=4.233,P<0.01),胃液EGF含量明显增高(0.155ng/mL±0.052ng/mLvs0.103ng/mL±0.019ng/mL,t=2.635,P<0.05);与悬吊7d组比较,悬吊14d组溃疡面积明显减小(3.0mm2±1.2mm2vs6.0mm2±1.7mm2,t=3.805,P<0.01),胃液EGF含量明显降低(0.155ng/mL±0.0...     

雌激素水平对大鼠内皮功能的影响

目的:观察性激素对雌性大鼠血管内皮细胞(VEC)增殖的影响,比较成年雌性大鼠人工绝经前、后及补充不同剂量性激素后内皮功能的变化。方法:(1)以MTT法检测含不同浓度的17-β雌二醇(E2),孕酮(P)的培养基对细胞增殖的影响;(2)将48只成年SD雌性大鼠随机分为5组:假手术组、单纯去势组、去势+补充大剂量E组、去势+补充中剂量E组、去势+补充小剂量E组。观测各组血管壁一氧化氮合成酶(NOS)含量及血中一氧化氮(NO)、内皮素(ET)、前列环素(PGI2)、血栓烷A2(TXA2)的含量。结果:(1)3×10-8、3×10-7ME2可促进雌性大鼠VEC增殖,Tamoxifen可阻断E的这种作用;(2)与假手术组比较,单纯去势组大鼠血管壁NOs、血清NO含量降低;血浆ET含量、TXA2/PGI2比值增加(P<0.01)。与单纯去势组比较补充适量雌激素组或雌孕激素组可改善这一状况。结论:绝经后雌激素水平下降可引起内皮功能障碍,补充适量雌激素可改善这一状况。     

衰老大鼠急性肺损伤诱导肝功能受损的研究

目的　观察脂多糖 (LPS)致衰老大鼠的急性肺损伤 (ALI)是否可进一步诱发肝功能受损及银杏叶提取物 (GBE)对其是否有保护作用。方法　雄性Wistar大鼠 3 0只复制成衰老模型。再随机分成对照组 (静脉注射生理盐水 ) ;LPS组 (静脉注射LPS)及GBE +LPS组 (注LPS前 7天开始每天GBE灌胃 1次 )。注LPS后 2、6h收集血液并取肺、肝。制备肺、肝组织匀浆待测。结果　衰老大鼠在注射LPS后 2、6h时形成ALI。对照组注射LPS表明 ,2h血中总胆红素含量及谷丙转氨酶 (GPT)活性为(10 9± 0 6)mg/L、(2 6± 3 )U ,LPS 6h组为 (3 0 1± 2 1)mg/L、(88± 12 )U ,两组比较差异有显著性 (P均<0 0 0 1) ;对照组注射LPS表明 ,2h血和肺组织中每毫克蛋白中丙二醛 (MDA)含量分别为 (15 9±1 8) μmol/L、(18 8± 2 1)nmol,LPS 2h组为 (2 2 1± 1 9) μmol/L、(2 8 8± 3 1)nmol,两组比较差异有显著性 (P均 <0 0 0 1) ;而每毫克蛋白血和肺组织中超氧化物歧化酶 (SOD)活性对照组分别为 (2 5 5±2 6)mU/L、(3 6 1± 2 4)U ,LPS 2h组分别为 (2 0 6± 1 9)mU/L、(3 2 0± 2 7)U ,两组比较差异有显著性(P <0 0 1和 0 0 5 )。对照组注射LPS表明 ,2h时肺组织中每毫克蛋白中谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH PX)及Na+ K+ ATP酶活性     

神经生长因子对糖尿病大鼠坐骨神经形态学的影响

目的 研究神经生长因子(NGF)对糖尿病大鼠周围神经病变的影响。方法 糖尿病大鼠造模后2周开始连续后肢肌注 NGF(800 U·kg~(-1)·d~(-1)),应用甲苯胺蓝染色及透射电镜观察大鼠坐骨神经的形态学变化。结果 糖尿病造模后2周电镜下坐骨神经即出现葱管样改变,且该病理改变随时间加重,6个月出现脱髓鞘。3个月及6个月NGF治疗组(NGF组)大鼠坐骨神经的神经纤维髓鞘及轴突面积较相应的糖尿病组(DM组)均增加,3个月NGF组及DM组坐骨神经纤维髓鞘面积分别为(47.48±11.84)μm~2和(44.86±12.28)μm~2(P<0.05);6个月分别为(57.76±10.33)μm~2和(46.34±11.57)μm~2(P<0.05)。3个月NGF组及DM组坐骨神经纤维的轴突面积分别为(22.86±9.59)μm~2和(19.86±7.78)μm~2(P<0.05);6个月分别为(23.90±7.18)μm~2和(20.29±6.67)μm(P<0.05)。6个月NGF组较3个月组髓鞘面积增加,并可减少坐骨神经纤维脱髓鞘。结论 早期、长期应用NGF可以有效改善糖尿病大鼠周围神经病变的形态。     

一氧化氮对哮喘大鼠基质金属蛋白酶的表达调控

目的　观察一氧化氮 (NO)对哮喘大鼠基质金属蛋白酶 (MMP)及金属蛋白酶组织抑制物表达的影响 ,探讨其在哮喘气道结构重建中的作用。方法　 30只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、哮喘组和左旋精氨酸组 (L Arg组 ) ,每组 1 0只。肺组织作病理切片并HE染色 ,通过病理图像分析系统测定支气管基底膜周径 (Pbm)、总管壁面积 (WAt)、内壁面积 (WAi) ,平滑肌面积 (WAm)等形态学参数。用NO与一氧化氮合酶 (NOS)试剂盒测定肺组织中亚硝酸盐 /硝酸盐 (NO- 2 /NO- 3)水平与NOS活性。半定量逆转录聚合酶链反应技术 (RT PCR)分析肺组织中MMP 2与TIMP 1mRNA的表达。结果(1 )WAt/Pbm、WAi/Pbm及WAm/Pbm哮喘组 [分别为 (2 5 3± 2 1 ) μm2 / μm、(2 0 4± 2 3) μm2 / μm、(4 2±2 0 ) μm2 / μm]和L Arg组 [分别为 (35 1± 2 6) μm2 / μm、(2 5 3± 2 0 ) μm2 / μm、(8 7± 1 5) μm2 / μm]与对照组 [分别为 (2 0 8± 1 3) μm2 / μm、(1 5 3± 2 1 ) μm2 / μm、(3 1± 1 1 ) μm2 / μm]比较 ,差异有显著性(P <0 0 1 ) ;L Arg组与哮喘组比较差异亦有显著性 (P <0 0 5)。 (2 )肺组织中NO- 2 /NO- 3水平哮喘组[(7 2± 2 1 )nmol/mg]和L Arg组 [(1 1 8± 1 7)nmol/mg]与对照组 [(3 1± 1 2 )n