对硫磷与对氧磷抑制的人脑乙酰胆碱酯酶的老化及重活化

目的　了解对硫磷与对氧磷在试管内对人脑乙酰胆碱酯酶 (AChE)的抑制 ,膦酰化酶的老化速率及肟类药物的重活化效能有何差别。方法　微量羟胺比色法测定AChE活性。结果　对硫磷与对氧磷抑制人脑AChE 5 0 %活性的摩尔浓度的负对数值(pI50 )分别为 4 .10及 7.5 1,抑制人脑AChE 90 %活性的摩尔浓度的负对数值 (pI90 )值分别为 2 .5 5及6 .5 7。氯磷定、双复磷、双磷定和酰胺磷定 4种重活化剂对对硫磷与对氧磷抑制的人脑AChE的重活化作用有较大差异 ,等摩尔浓度条件下 ,其对对氧磷的重活化作用普遍好于对硫磷。且双肟类重活化剂作用普遍强于单肟类重活化剂 ;对硫磷与对氧磷的最佳重活化剂均为双复磷。对硫磷与对氧磷人脑AChE磷酰化酶的半老化时间 (t0 .5)分别为 14及 12h ,老化达到 99%的时间 (t0 .99)分别为 95及 81h。结论　对硫磷或对氧磷中毒时应尽早使用双复磷或双磷定。且在急性中毒症状控制后 ,仍须连续使用重活化剂 4d。     

神经性毒剂对人脑乙酰胆碱酯酶的抑制及肟类药物的重活化作用

本文观察了神经性毒剂沙林，梭曼，塔崩和ＶＸ对纯化人脑乙酰胆碱酯酶的抑制作用及肟类药物对这些毒剂抑制的酶的体外重活化作用。结果表明，毒剂抑制人脑乙酰胆碱酯酶的ｐＩ５０为７．９一９．１，毒剂的抑制能力为：梭曼＞沙林≈ＶＸ＞塔崩，脂类药物氯磷定，双解磷，双复磷和ＨＩ一６对沙林和ＶＸ抑制的人脑乙酰胆碱酯酶的重活化作用非常显著，但对梭曼和塔崩抑制的酶则弱，且不同药物对这两种毒剂抑制的乙酰胆碱酯酶的重活化作用也明显不一样，与大鼠脑乙酰胆碱酯酶的实验结果相似。     

甲氟膦酸环己酯与甲氟膦酸异丙酯合用在试管内对大鼠脑乙酰胆碱酯酶的抑制及其重活化

为进一步了解甲氟膦酸环己酯 (GF)与甲氟膦酸异丙酯 (GB)的联合特性 ,为制订医学防护措施提供更多的理论依据 ,用微量 DTNB法对 GF,GB和 GF与 GB混合对大鼠脑乙酰胆碱酯酶 (ACh E)的抑制及肟类重活化剂酰胺磷定 (HI- 6)和氯磷定(2 - PAM- Cl)的重活化作用进行了研究 .结果表明 ,GF,GB和 GF与 GB混合抑制 90 %左右 ACh E活力的终浓度分别为 3.98,39.8和 2 1 .9nmol·L-1,p I50 分别为 1 0 .3,9.1和 9.2 .GF与 GB合用对ACh E的抑制强度未见增加 . HI- 6对 ACh E的抑制有较强的重活化作用 ,与 2 - PAM- Cl比较有显著差异 . HI- 6和 2 - PAM- Cl对 GF与 GB合用的重活化比单独的 GF更容易     

甲氟膦酸环己酯与甲氟膦酸异丙酯合用在试管内对大鼠脑乙酰胆碱酯酶的抑制及其重活化

为进一步了解甲氟膦酸环己酯(GF)与甲氟膦酸异丙酯(GB)的联合特性,为制订医学防护措施提供更多的理论依据, 用微量DTNB法对GF,GB和GF与GB混合对大鼠脑乙酰胆碱酯酶(AChE)的抑制及肟类重活化剂酰胺磷定（HI-6）和氯磷定（2-PAM-Cl）的重活化作用进行了研究. 结果表明, GF,GB和GF与GB混合抑制90%左右AChE活力的终浓度分别为 3.98, 39.8和21.9 nmol·L^-1, pI₅₀ 分别为10.3, 9.1和9.2. GF与GB合用对AChE的抑制强度未见增加. HI-6对AChE的抑制有较强的重活化作用,与2-PAM-Cl比较有显著差异. HI-6和2-PAM-Cl对GF与GB合用的重活化比单独的GF更容易.     

急性氧乐果中毒脑AChE和ChAT免疫组化的实验研究

氧乐果是高毒类有机磷农药，被广泛应用于农业生产。有机磷农药的急性毒性作用主要归因于对胆碱能神经突触后膜上乙酰胆碱酯酶（AChE）的抑制，造成突触间隙神经递质乙酰胆碱（ACh）的堆积，后者持久地作用于ACh受体而引起一系列的胆碱能神经兴奋症状。ACh的水解酶和合成酶分别是AChE和胆碱乙酰转移酶（ChAT）。脑内AChE的抑制直接影响ACh的降解，在中枢神经系统的胆碱能损害中起着主要作用。而ChAT在急性有机磷中毒后的改变国内未见报道。本实验应用40％氧乐果制作家猫急性中毒模型。应用免疫组化的方法测定染毒前后猫脑组织中AChE和ChAT免疫阳性细胞面积比，为进一步研究急性有机磷农药中毒的作用机制提供实验依据。     

沙林对猴全血乙酰胆碱酯酶老化的抑制及重活化作用

目的 采用沙林抑制猴全血乙酰胆碱酯酶（AChE）,研究磷酰化酶的老化速率及肟类药物的重活化作用。方法 （1）37℃恒温水浴条件下,采用沙林抑制猴全血AChE的90%活性,后分别加入浓度为0.1, 0.33和1 mmol·L^-1双复磷、氯解磷定（PAM-2-Cl）、碘解磷定（PAM-2-I）,用DTNB法分别测定各样品AChE活性,计算重活化率;（2）37℃水浴条件下,采用沙林抑制猴全血AChE的90%活性,每隔10 min, 1, 2, 4和14 h取出100 μl,然后,加入终浓度为1 mmol·L^-1的氯解磷定,用DTNB法测定AChE活性,计算重活化率。以重活化剂重活化率的对数对时间作图,可得磷酰化酶的老化曲线,曲线的斜率即为重活化剂抑制AChE的老化速率常数（K_老化）,半老化时间（t_0.5）＝0.693／K_老化,老化率达到99％所需时间（t_0.99）＝4.605／K_老化。结果 在0.1, 0.33和1 mmol·L^-1的浓度下,氯解磷定对沙林抑制猴全血AChE的重化活率分别为16%, 45%和83%;双复磷对沙林抑制猴全血AChE的重化活率分别为18%, 39%和70%;碘解磷定对沙林抑制猴全血AChE的重化活率分别为14%, 41%和72%。在0.1 mmol·L^-1时,双复磷重活化效果最好;氯解磷定在低浓度时,其重活化效果稍差于双复磷,但是,随着其浓度提高,显示出比双复磷较好的重活化效果。采用氯解磷定1 mmol·L^-1为重活化剂时,沙林抑制猴全血AChE磷酰化酶的半老化时间约为12 h。结论 本文实验中使用的3种重活化剂均对沙林抑制的猴全血AChE有较好的重活化作用,其中,氯解磷定对沙林抑制的猴全血AChE有较高的重活化率,实际应用中可能会取得相对较好的急救效果;随着沙林对猴全血AChE抑制时间的延长,磷酰化胆碱酯酶可失去重活化的能力,而成为“老化酶”,很难被重活化,因此, 沙林中毒后应尽早使用氯解磷定等肟类重活化剂。研究发现有一些有机磷中毒用肟类治疗后,有中毒症状缓解后又发生反复的现象,因此使用氯解磷定为重活化剂时,急性中毒症状控制后,建议在磷酰化胆碱酯酶老化之前酌情重复使用重活化剂,直至中毒症状彻底缓解。     

丁酮肟及酰胺磷定对大鼠血液中梭曼消除的影响

采用电鳐胆碱酯酶抑制法测定大鼠血液中梭曼残留浓度 ,考察了丁酮肟 (DAM)及酰胺磷定 (HI 6)对大鼠血液中梭曼消除的影响 .结果表明 ,4 15μg·kg- 1梭曼 ( 5LD50 )iv后 3min ,DAM预处理有加速梭曼在大鼠血液中消除的趋势 ,使血中梭曼浓度由( 86± 2 2 ) μg·L- 1下降到 ( 53± 9) μg·L- 1,这可能与DAM加速了大鼠体内主要解毒器官中膦酰化羧酸酯酶 (CaE)的脱膦酰化速率有关 ,使有限的酶分子结合了更多的梭曼 .相比之下 ,HI 6预处理则对大鼠血液中梭曼浓度没有明显影响 .提示在大鼠体内 ,CaE对梭曼的解毒作用比胆碱酯酶更为重要