克拉霉素对肺炎支原体感染小鼠体内干扰素-γ白细胞介素-6白细胞介素-17表达的影响

目的通过建立肺炎支原体(MP)感染BALB/C小鼠模型,探讨克拉霉素对MP感染小鼠模型血清中和支气管肺泡灌洗液中的干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-17(IL-17)表达水平的影响。方法 60只无特殊病原体(SPF)级6周龄BALB/C小鼠(17~20 g)按随机数字表法分为正常组、MP感染组和克拉霉素治疗组,每组20只。感染组及克拉霉素治疗组小鼠鼻内接种50μl含1×106 cfu/ml的MP菌液,建立MP感染模型,正常组接种等量0.9%氯化钠注射液。成功建立MP感染模型后,治疗组用克拉霉素治疗5 d。酶联免疫吸附测定法(ELISA)和反转录实时荧光定量-聚合酶链反应法(RT-PCR)检测3组小鼠血清及支气管肺泡灌洗液中IFN-γ、IL-6、IL-17 m RNA及蛋白的表达。结果与正常组相比,MP感染组小鼠血清及支气管肺泡灌洗液中IFN-γ、IL-6、IL-17 m RNA及蛋白的水平显著升高(P<0.05)。克拉霉素治疗后,小鼠血清及支气管肺泡灌洗液中IFN-γ、IL-6、IL-17 m RNA及蛋白的表达水平显著低于MP感染组(P<0.05)。结论克拉霉素可显著降低MP感染小鼠血清及支气管肺泡灌洗液中IFN-γ、IL-6、IL-17的水平。     

SOD与别嘌呤醇对硫感病毒感染致小鼠病损的保护作用

目的：探讨超氧化物歧化酶（Ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ Ｄｉｓｍｕｔａｓｅ，ＳＯＤ）、黄嘌呤氧化酶抑制剂别嘌呤醇在流感病毒感染小鼠致病中的保护作用。方法：流感病毒Ａ／ＦＭ１／１４７（Ｈ１Ｎ１）鼠适应株，鼻腔内接种感染小鼠，分别于病毒感染后的不同时间对各用楷组小鼠取肺进行检测．结果：ＳＯＤ和别嘌呤醇可显著降低小鼠支气管肺泡灌洗液中氧自由基水平和肺组织中黄漂呤氧化酶活性，明显减轻小鼠肺组织损伤，从而使小鼠的生     

对呼吸道合胞病毒亚单位疫苗局部免疫的体液、粘膜和细胞免疫应答

本文用霍乱毒素B链(CTB)作为佐剂在小鼠体内评价了呼吸道合胞病毒(RSV)融合(F)蛋白局部免疫作用.免疫4周龄CD1小鼠、每组4～6只,亚单位疫苗鼻内接种(inl)10μl(含F蛋白2μg和CTB5～10μg),肌肉接种(im)100μl(只含F蛋白2μg),在0和4周各免疫1次,活病毒疫苗inl 50μl[含5×10~5蚀斑形成单位(pfu)],只免疫1次.最后一次免疫后4周用RSV10~6pfu inl攻击,取攻击前的血清检测抗体,攻击后5天的鼻洗液(NW)和支气管肺泡灌洗液(BAL)滴定病毒效价和抗体.     

冷重组流感活疫苗(CR35)和A/USSR/77(H1N1)流感灭活疫苗接种后血清和呼吸道分泌液中的免疫应答

本文比较了鼻腔接种流感病毒减毒活疫苗H1N1与局部和肠道外接种灭活单价 H1N1疫苗对有或无基础免疫者的免疫原性,并测定了鼻洗液和肺灌洗液中的血凝素(HA)抗体应答。对100名18～27岁成年志愿者分别接种两种类型A/USSR/77(H1N1)流感疫苗。灭活疫苗H1N1 HA含量为20μg/0.5ml,冷重组活疫苗(CR35)含2μgA/USSR HA。对     

小鼠重组乙肝病毒表面抗原鼻腔黏膜免疫效果评价

目的 评价小鼠重组乙肝病毒表面抗原(HBsAg)鼻腔黏膜免疫效果,寻找非注射乙肝免疫途径.方法 Balb/c小鼠分别经鼻腔、舌下及肌注给予重组HBsAg免疫3次,以支气管肺泡灌洗液(BALF)和血清抗HBsAg抗体水平评价3种途径的免疫效果.结果 经鼻腔免疫小鼠BALF可检测到IgA抗体,提示产生黏膜免疫:与肌注免疫类似,经鼻腔免疫小鼠血清IgG滴度大于1:500,提示产生体液免疫.结论 重组HBsAg经鼻腔免疫小鼠可同时产生体液免疫和黏膜免疫,提示鼻腔黏膜免疫可能是有效的非注射乙肝免疫途径.     

大肠杆菌不耐热肠毒素突变体可作为鼻腔免疫流感疫苗的佐剂

作者使用定点突变的大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)作为佐剂,与流感病毒血凝素(HA)疫苗一起经鼻腔接种小鼠,对其免疫效果及安全性进行了探讨.取6～8周龄雌性BALB/c小鼠为免疫对象,HA疫苗由流感病毒PR8(H1N1)制备.用定点诱变方法替换Al亚单位上某一氨基酸,得到LT7K、LT61F、LT112K、     

抗流感病毒卵黄免疫液抗病毒作用的研究

目的研制一种预防流感效果显著的免疫制剂。方法用流感病毒 (FM1株 )免疫母鸡 ,制备抗流感病毒 (FM1株 )卵黄免疫液。经动物实验 ,观察该免疫液抗流感病毒的效果。结果当对照组的小鼠开始病死时 ,生理盐水对照组、卵黄免疫液对照组与紧急预防组小鼠每日每只平均饮水量分别为 (3.0 6± 0 .86 )、(2 .93± 1.47)和(3.99± 0 .2 1)ml(P <0 .0 5 ) ,体重分别为 (15 .85± 2 .70 )、(14.5 8± 1.92 )和 (18.2 7± 1.71)g(P <0 .0 5 ) ;病死率分别为 5 3.84%、6 9.2 3%和 3.84% (P <0 .0 1) ;存活小鼠血清 (1∶10稀释 )抗体阳性率分别为 10 0 %、10 0 %和 0 (P <0 .0 1)。结论抗流感病毒卵黄免疫液抗病毒作用强 ,预防小鼠流感效果显著。     

灌洗法检测减毒鼠伤寒杆菌疫苗对幽门螺杆菌的免疫应答

目的应用高渗灌洗液法(灌洗法)检测表达幽门螺杆菌(Hp)尿素酶B亚单位(UreB)的减毒鼠伤寒杆菌活菌重组疫苗口服免疫小鼠后的免疫应答状况。方法将能表达UreB的重组减毒鼠伤寒杆菌SL326l/pTC01-UreB口服免疫Balb/c小鼠,12周后应用灌洗法或将小鼠处死直接获取小鼠肠液,检测小鼠的肠液和血清中针对UreB的特异性IgA和IgG抗体反应。结果疫苗组小鼠的肠液和血清中可分别检测到针对UreB的特异性IgA和IgG抗体,与对照组存在显著性差异(P<0.01)。灌洗法获取的小鼠肠液中的IgA抗体含量较将小鼠处死后直接获取的肠液中的IgA抗体含量明显为高(P<0.01)。病理学检查显示疫苗组小鼠胃粘膜炎症指数无改变。结论高渗灌洗液法是获取肠道抗体的理想方法;表达HpUreB的减毒鼠伤寒杆菌SL326l/pTC01-UreB可用作抗Hp感染的口服疫苗。     

支气管肺泡灌洗液聚合酶链反应检测TB-DNA在肺结核诊断中的价值

目的探讨用聚合酶链反应(PCR)法检测支气管肺泡灌洗液中结核分枝杆菌脱氧核糖核酸(TB-DNA)在肺结核诊断中价值。方法回顾分析我院合并有肺结核住院患者78例,均作支气管肺泡灌洗。同时收集灌洗液用PCR定量检测TB-DNA,化学比色法定量检测腺苷脱氨酶(ADA)并涂片镜检抗酸杆菌的结果。结果 78例支气管肺泡灌洗液定量检验值结核分枝杆菌脱氧核糖核酸、腺苷脱氨酶及涂片镜检找抗酸杆菌诊断肺结核的敏感度分别为71.79%(56/78)、37.18%(29/78)、25.64%(18/78)。用PCR检测支气管肺泡灌洗液结核分枝杆菌脱氧核糖核酸诊断肺结核的敏感度显著高于及腺苷脱氨酶定量检验值涂片镜检找抗酸杆菌(P<0.05)。结论采用支气管肺泡灌洗液结核分枝杆菌脱氧核糖核酸(TB-DNA)定量检验值诊断肺结核具有较高价值。     

联合接种流感疫苗和霍乱毒素B亚单位对流感病毒感染的防御作用

霍乱毒素B亚单位(CTB)是一种无毒性的霍乱毒素成分.CTB不仅是有效的肠道免疫原,也是一种肠粘膜佐剂.鼻内联合接种单剂流感病毒与CTB可诱导鼻分泌物中高水平IgA和血清中血凝抑制(HI)抗体.本文作者先给Balb/c小鼠鼻内联合接种甲型流感病毒HA疫苗和CTB,4周后再单独接种甲型流感病毒HA疫苗,观察接种后的免疫应答.小鼠接种两剂较高剂量(1.5μg)的A/PR/8/34(PR-8,H1N1)HA疫苗(第1剂与CTB联合接种)后,鼻洗液中的抗病毒IgA抗体和血清中的HI抗体应答都比第1次接种     

HIV-gp160、HIV-1 Env CTL表位肽(E7)与粘膜佐剂LT(R192G)联合鼻腔免疫的效果

大肠杆菌不耐热肠毒素 ( LT)是良好的粘膜佐剂。作者以人类免疫缺陷病毒 ( HIV)gp1 6 0及 E7为抗原与 LT突变体 R1 92 G联合投递 ,测定了对相关抗原的免疫应答及佐剂的效力。　　 2 0 μg gp1 6 0加或不加 R1 92 G5 μg,间隔1周鼻腔接种雌性 BAL B/c小鼠 ,共 3次。末次免疫后 1周采集小鼠支气管肺泡灌洗液及阴道洗液 ,以 EL ISA测定抗原特异性抗体应答。心脏穿刺采血并收集脾脏进行体外抗原再刺激试验。免疫 E7的小鼠 ,间隔 1周鼻腔接种 1 0 0 μg E7(加或不加 R1 92 G5 μg) ,共 4次。于末次免疫后 9天或 82天收获脾细胞进行铬释…     

Nod样受体蛋白 -3炎性小体在慢性阻塞性肺疾病大鼠气道重塑中的作用

目的 探讨Nod样受体蛋白-3(NLRP3)炎性小体在慢性阻塞性肺疾病(慢阻肺)大鼠气道重塑中的作用.方法 用随机数字表法将24只Wistar大鼠均分为慢阻肺组及空白组(各12只),模型制造成功后测定两组大鼠外周血淋巴细胞NLRP3 mRNA、肺泡灌洗液炎性因子、气管平滑肌厚度水平.结果 慢阻肺组外周血淋巴细胞NLRP3 mRNA水平高于空白组(P<0.05).慢阻肺组气管平滑肌厚度为(14.25±0.63)μm2/μm,空白组为(10.44±0.61)μm2/μm,慢阻肺组高于空白组(P<0.05).与空白组相比,慢阻肺组肺泡灌洗液的IL-18[(62.98±1.69)比(36.24±3.45)ng/L]、慢阻肺组肺泡灌洗液的IL-1β[(54.51±1.91)比(38.06±0.90)ng/L]水平升高(均P<0.05).气管平滑肌厚度与外周血淋巴细胞NLRP3 mRNA相对表达量的r值为0.799;与肺泡灌洗液IL-18的r值为0.938;与肺泡灌洗液IL-1β水平的r值为0.970(均P<0.05).结论 慢阻肺大鼠外周血淋巴细胞NLRP3炎性小体表达水平升高,在其气道重塑中发挥关键作用,为治疗慢阻肺提供了新的靶点.     

产肠毒素性大肠杆菌不耐热肠毒素作为口服流感灭活疫苗佐剂的活性

作者报告了以产肠毒素性大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)为粘膜佐剂,与全流感病毒灭活疫苗同时口服免疫小鼠的效果.甲型流感病毒X-31株经培养浓缩并以蔗糖梯度离心后,稀释成1mg/ml浓度,按0.025%浓度加入福马林于4C作用3天使病毒完全灭活;采用6～10周龄BALB/c雌性小鼠于轻度麻醉下口饲不同剂量纯化的灭活X-31病毒(加或不加25μgLT),间隔1周免疫3次.同时采用单剂腹腔注射(不加LT)或末次口服后1周腹腔注射加强免疫1剂(不加LT)作为对照.末次接种后3周采集小鼠血清及肺与鼻腔冲洗液标本,经霍乱弧菌受体破坏酶处理后,用ELISA检测样品的抗病毒IgG和IgA.以标准方法测定血凝抑制抗体及中和抗体滴度;在接种后3周或     

支气管肺泡灌洗对兔肺泡内TNF-α的影响

目的 观察生理盐水、亚胺培南、氟康唑支气管肺泡灌洗后对兔肺泡内炎症因子的影响.方法 新西兰白兔34只气管插管后分为四组:A组(3只)作为空白对照;B组(11只)用生理盐水支气管肺泡灌洗;C组(8只)用亚胺培南灌洗;D组(12只)用氟康唑灌洗.2 h后处死动物,ELISA法比较肺泡灌洗液及肺组织匀浆中肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量.结果 四组肺泡灌洗液的TNF-α水平各组间差异无统计学意义(P>0.05).C组肺组织匀浆TNF-α水平低于A、B、D组(P<0.05).结论 生理盐水、亚胺培南、氟康唑支气管肺泡灌洗并未增加局部TNF-α的释放.     

咽拭子、肺泡灌洗液肺炎支原体-DNA 水平与社区获得性肺炎支原体肺炎炎性反应及免疫功能的关系

目的探究咽拭子、肺泡灌洗液肺炎支原体-DNA(MP-DNA)水平与社区获得性肺炎支原体肺炎(CA-MPP)病儿病情、炎性反应及免疫功能指标的关系。方法选取2018年1月至2019年5月南阳市中心医院收治的92例CA-MPP病儿作为研究对象,对比重症组(n=30)与轻症组(n=62)病儿咽拭子、肺泡灌洗液MP-DNA水平。根据咽拭子、肺泡灌洗液MP-DNA水平分为低菌量组、中菌量组、高菌量组,比较三组血清炎性反应因子［C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-18(IL-18)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)］水平、免疫功能指标［免疫球蛋白A(IgA)、IgM、IgG］水平,分析咽拭子、肺泡灌洗液MP-DNA与炎性反应、免疫功能指标的相关性。结果重症病儿咽拭子［(5.68±0.73)比(5.14±0.51)］、肺泡灌洗液MP-DNA水平［(6.87±0.85)比(5.70±0.63)］高于轻症病儿(P<0.05);咽拭子、肺泡灌洗液MP-DNA高菌量组血清CRP、TNF-α、IL-18水平高于中菌量组、低菌量组(P<0.05);咽拭子、肺泡灌洗液MP-DNA表达量与CA-MPP病儿血清CRP、TNF-α、IL-18水平存在显著正相关关系(P<0.05);咽拭子、肺泡灌洗液MP-DNA高菌量组血清IgA低于中菌量组、低菌量组,IgM、IgG高于中菌量组、低菌量组(P<0.05);咽拭子、肺泡灌洗液MP-DNA表达量与CA-MPP病儿血清IgA水平存在显著负相关关系,与血清IgM、IgG水平存在显著正相关关系(P<0.05)。结论咽拭子、肺泡灌洗液MP-DNA水平随着CA-MPP病儿病情加重而升高,且与病儿炎性反应、免疫功能存在密切相关性,监测其水平有助于临床明确病儿病情,指导合理治疗方案的制定。     

鼻内接种流感疫苗和霍乱毒素B亚单位预防流感病毒感染

霍乱毒素(CT)与某种无关的抗原同时接种时,不但是有效的肠道免疫原,而且还是刺激对无关抗原的IgA和IgG抗体应答的免疫调节剂。本文作者将CT或霍乱毒素B亚单位(CTB)与流感疫苗同时接种小鼠,观察小鼠的免疫应答及流感病毒感染情况。流感HA疫苗由流感病毒A/山形/120/86(H1N1)株和A/PR/8/34(H1N1)株制成。对6～8周龄的雌性BALB/c小鼠鼻腔、腹腔或皮下接种HA疫苗和CTB或CT。4周后测定血清中血凝抑制(HI)抗体和鼻腔内流感特异性和CTB特异性IgA抗体。     

Nrf2在丙泊酚抑制内毒素性急性肺损伤中的作用

目的 观察丙泊酚对内毒素诱发的急性肺损伤的保护作用及与肺上皮细胞核内Nrf2表达的关系.方法 腹腔注射内毒素建立小鼠急性肺损伤模型,实验动物分为对照组、内毒素组、内毒素+丙泊酚组、内毒素+脂肪乳剂组和丙泊酚组,分别检测小鼠生存率、肺湿重/干重比、支气管肺泡灌洗液蛋白浓度和白细胞计数、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量、肺上皮细胞核内Nrf2水平.结果 腹腔注射内毒素导致小鼠生存率降低,肺湿重/干重比、支气管肺泡灌洗液蛋白浓度和白细胞计数增加,SOD活性降低和MDA含量增加,丙泊酚能明显提高小鼠肺上皮细胞核内Nrf2表达.结论 丙泊酚对内毒素诱发的急性肺损伤具有保护作用,这可能与丙泊酚激活肺上皮细胞核内Nrf2表达有关.     

麦角甾醇对LPS诱导的肺损伤小鼠的抗炎作用研究

目的研究麦角甾醇对LPS诱导的小鼠急性肺损伤的抗炎作用研究。方法取50只雄性BABL/c小鼠随机分为5组:空白对照组、模型组、地塞米松组(2 mg/kg)、麦角甾醇低剂量组(20 mg/kg)、麦角甾醇高剂量组(40 mg/kg)。空白对照组和模型组按体积给予生理盐水,地塞米松组(2 mg/kg)、麦角甾醇组(20、40mg/kg)灌胃给予相应药物。给药1 h后,除空白对照组,其余各组小鼠气管滴注20μg LPS。检测小鼠肺干湿重比(W/D),肺泡灌洗液(BALF)中超氧化物歧化酶(SOD)水平、丙二醛(MDA)含量,血清与肺泡灌洗液炎性细胞因子(TNF-α、IL-1β、IL-6)水平。取各组小鼠肺组织做HE染色,并检测肺组织Rho、ROCK1、ROCK2、p-NF-κBP65、NF-κBP65、p-IκBα、IκBα蛋白表达。结果麦角甾醇20、40 mg/kg能显著提升LPS诱导的急性肺损伤小鼠血清SOD水平,降低MDA含量;改善血清及肺泡灌洗液炎症因子水平和肺组织病理学改变;降低肺组织Rho、ROCK1、ROCK2、p-NF-κBP65、p-IκBα蛋白表达。结论麦角甾醇对LPS诱导的急性肺损伤小鼠有保护作用,其作用可能与Rho/ROCK/NF-κB信号通路有关。     

SOD与别嘌呤醇对流感病毒感染致小鼠病损的保护作用

目的：探讨超氧化物歧化酶（ＳｕｐｅｒｏｘｉｄｅＤｉｓｍｕ－ｔａｓｅ，ＳＯＤ）、黄嘌呤氧化酶抑制剂别嘌呤醇在流感病毒感染小鼠致病中的保护作用。方法：流感病毒Ａ／ＦＭ１／１／４７（Ｈ１Ｎ１）鼠适应株，鼻腔内接种感染小鼠，分别于病毒感染后的不同时间对各用药组小鼠取肺进行检测。结果：ＳＯＤ和别嘌呤醇可显著降低小鼠支气管肺泡灌洗液中氧自由基水平和肺组织中黄嘌呤氧化酶活性，明显减轻小鼠肺组织损伤，从而使小鼠的生存率提高。ＳＯＤ与抗病毒药物三氮唑核苷联合应用，其保护作用优于单一用药。结论：ＳＯＤ、别嘌呤醇对小鼠的保护作用是通过对氧自由基的清除和产生的阻断，减轻了其组织损伤来实现的。     

酚红外排水平评价肺上皮细胞多药耐药相关蛋白1的功能

目的：以酚红为多药耐药相关蛋白1（MRP1）的底物,丙磺舒为其抑制剂,通过酚红的外排水平建立评价肺上皮细胞MRP1的功能的方法。方法：小鼠静脉注射酚红（250mg/kg）,30min后进行肺泡灌洗,测定灌洗液中酚红的浓度,并以雾化吸入MRP1特异性抑制剂丙磺舒（150mg/kg）作为对照,观察给予抑制剂前后灌洗液中酚红浓度及灌洗液中酚红浓度/血浆中酚红浓度比值的变化,来评价小鼠肺上皮细胞MRP1功能的改变。结果：与未给予抑制剂相比,给予MRP1抑制剂丙磺舒后,血浆中酚红浓度无显著性差异,但与未给予抑制剂相比,给予MRP1抑制剂丙磺舒60min后,其肺泡灌洗液中酚红浓度、灌洗液中酚红浓度/血浆中酚红浓度比值显著性降低。结论：肺泡灌洗液中酚红的外排水平反映小鼠肺上皮细胞MRP1功能的改变。