硒对淋巴细胞抗大肠癌作用影响的基础和临床研究

目的 :探讨硒对淋巴细胞抗大肠癌的作用。方法 :包括实验与临床二部分 ,以半胱氨酸硒作为影响因素、人 T淋巴细胞为效应细胞 ,人结肠癌细胞 (L o Vo细胞株 )为靶细胞 ;采用 MTT比色法、凋亡细胞荧光计数检测凋亡细胞的数量 ;同时检测上清液中 TNF- α(肿瘤坏死因子 α)的含量。然后 ,于 1998年 3月至 1999年 3月 ,将 40例大肠癌患者 ,随机分成对照组和治疗组分别给予一般酵母和酵母硒 (6 0 0 μg/ d)持续两周 ,观察治疗前后血硒水平、T细胞亚群和免疫球蛋白 ,以及细胞因子 αTNF的变化。结果 :半胱氨酸硒在一定的浓度范围内 (0 .5 μg/ m l～ 1.0 μg/ m l)可增强人 T淋巴细胞的抗肿瘤活性(P <0 .0 5 ) ,促进人结肠癌细胞的凋亡 ,且肿瘤细胞的凋亡比例上升 (P <0 .0 5 ) ;T淋巴细胞抗肿瘤作用的增强与上清液中的 TNF- α的增高有关 (P <0 .0 5 )。大肠癌患者经补硒后 ,血硒由 (0 .76± 0 .17) μm ol/ L 上升到 (0 .99± 0 .2 3) μmol/L,P <0 .0 5 ;CD4由 (2 4.0 9± 4.10 ) %上升到 (2 7.95± 4.91) %,CD8由 (2 0 .18± 2 .48) %上升到 (2 3.0 9± 4.47) %,P <0 .0 5 ;血清中 Ig M从 (83.7± 2 3.37) mg上升到 (10 3.6 9± 35 .49) mg,P <0 .0 5。结论 :硒可提高淋巴细胞的抗肿瘤作用 ,改善机体的免疫     

5-氟脲嘧啶对大肠癌细胞功能性Fas配体表达的调控作用

目的 探讨5－氟脲嘧啶对大鼠癌细胞功能性Fas配体表达的调控作用。 方法 应用Western蛋白印变法检测130、260、400μmol/L5－氟脲嘧啶作用6、24h后的人大肠癌细胞株SW620细胞FasL蛋白表达水平的变化，应用流式细胞仪检测化疗药物作用后肿瘤细胞所诱导的Jurkat T淋巴细胞凋亡率的变化。结果 5－氟脲嘧啶刺激6h后SW620细胞FasL蛋白无明显变化，刺激2后FasL蛋白显著上调2.64-4.08倍，肿瘤细胞诱导Jurkat细胞凋亡的作用增强。结论 5－氟脲嘧啶具有上调大肠癌细胞功能性FasL蛋白表达的功能，并且表达的FasL能够诱导Jurkat淋巴细胞凋亡。     

硒增强淋巴细胞抑制裸鼠大肠癌生长的研究

目的　研究硒 (Se)作用后淋巴细胞对实验性裸鼠大肠癌的治疗效果及其抗肿瘤作用机制。方法　建立大肠癌细胞株LoVo裸鼠移植瘤的动物模型。将荷瘤裸鼠 72只随机分成对照组、硒组、淋巴细胞组、淋巴细胞 硒组。观察大肠癌移植瘤的生长以及荷瘤动物的肿瘤发生率和生存率 ,采用免疫组织化学法检测肿瘤组织Fas/FasL的表达情况。结果　各组肿瘤体积分别为 (1.970±0 .5 6 6 )mm3 、(1.2 90± 0 .395 )mm3 、(0 .490± 0 .2 0 8)mm3 、(0 .2 70± 0 .139)mm3 ;肿瘤发生率分别为91.6 6 %、75 .0 0 %、5 0 .0 0 %、33.33% ;生存率分别为 16 .6 6 %、33.33%、5 0 .0 0 %、75 .0 0 %。肿瘤组织免疫组织化学结果表明 ,经硒作用后肿瘤细胞Fas和淋巴细胞FasL表达增强。结论　硒有增强淋巴细胞大肠癌细胞移植瘤的作用。     

化疗后大肠癌细胞凋亡、增殖和Fas/FasL表达的改变

本研究从分子生物学角度解释术前化疗的机理 ,为临床制定合理的化疗方案提供理论依据。材料与方法1.材料 :32例大肠癌标本取自我院 1998～ 1999年间结直肠癌病人手术标本 ,男 18例 ,女 14例 ,年龄为 31～ 84岁 ,中位年龄 6 3岁。所有病例均经病理检查证实。依据Ｄｕｋｅｓ标准进行临床分期 ,Ａ1期 2例 ,Ａ2 期 3例 ,Ｂ期 8例 ,Ｃ1期 5例 ,Ｃ2 期 10例 ,Ｄ期 4例。其中 2 5例行根治术 ,7例行姑息性癌灶切除术。术前将患者随机分入化疗组及对照组。2 .化疗方案 :术前化疗组行ＭＦ方案化疗 ,5 氟尿嘧啶(75 0ｍｇ/ｍ2 )静滴 5ｄ、丝裂霉素 (15…     

可溶性Fas阻断肝癌细胞通过Fas/FasL 途径触发T淋巴细胞的凋亡

目的　通过阻断Fas介导T细胞凋亡 ,建立快速大量激活制备肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞 (CTL)的方法。方法　分离肝癌细胞和肿瘤浸润淋巴细胞 (TIL)。选择FasL表达阳性的肝癌标本 ,在体外将两者混合 ,并在CD2 8单抗共刺激下 ,激活制备特异性CTL。应用可溶性Fas受体阻断肝癌细胞通过Fas FasL途径触发激活T细胞凋亡 ,与对照组比较观察阻断凋亡作用 ,通过3H掺入法和51 Cr释放法了解T细胞增殖杀伤活性。结果　流式细胞术仪检测未阻断组较阻断组和未阻断对照组凋亡率明显升高 ,未阻断组凋亡率达 4 7 82 %± 0 13% ,静息性T淋巴细胞组为 3 76 %± 0 2 5 % ,阻断组为 8 2 2 %± 0 2 6 % (P <0 0 1) ,DNAladder显示未阻断组T淋巴细胞出现明显梯状条带 ,阻断组为阴性。51 Cr释放法表明阻断后T淋巴细胞杀伤活性增加 ,较未阻断组及未阻断对照组差异有显著性 (P<0 0 1)。3H掺入法检测证实可溶性Fas受体阻断激活T细胞凋亡后 ,细胞增殖明显升高 ,较未阻断组差异有显著性 (P <0 0 1)。结论　体外实验可获得大量激活T细胞 ,并可杀伤肿瘤细胞 ,     

Fas/FasL表达和细胞凋亡在人类同种异体移植肾急性排斥中的作用

目的探讨移植肾急性排斥（ＡＲ）时细胞凋亡与Ｆａｓ和Ｆａｓ配体（ＦａｓＬ）表达的作用及其临床意义。方法分别用原位末端标记技术（ＴＵＮＥＬ法）和免疫组织化学方法检测２６例移植肾ＡＲ标本中细胞凋亡和Ｆａｓ／ＦａｓＬ表达情况。结果细胞凋亡和Ｆａｓ／ＦａｓＬ表达主要在ＡＲ移植肾小管上皮发生,且凋亡指数和Ｆａｓ／ＦａｓＬ表达与肾组织病理损伤程度平行,与正常肾对照组和移植肾功能稳定组比较差异显著（Ｐ＜０．０１）。结论肾小管上皮细胞凋亡在ＡＲ所致的移植肾损伤中起重要作用,Ｆａｓ／ＦａｓＬ系统可能参与移植肾ＡＲ,是造成肾小管上皮细胞凋亡的重要因素。ＴＵＮＥＬ法检测细胞凋亡可作为判断移植肾病理变化和预后的重要指标     

大肠癌原发灶及其肝转移灶组织Fas、FasL的表达比较

Ｆａｓ ＦａｓＬ系统诱导活化肿瘤浸润淋巴细胞(ＴＩＬｓ)凋亡 ,逃避机体免疫系统监视 ,在肿瘤发生、发展和转移中起重要作用。本文应用ＳＰ免疫组化法研究大肠癌原发灶及其肝转移灶的Ｆａｓ、ＦａｓＬ表达及其意义。1.资料与方法 :(1)选取我院 1993～ 2 0 0 0年手术切除经病理证实的同时具有大肠癌原发灶及其肝转移灶标本 30例 ,10 %福尔马林固定 ,石蜡包埋。男性 2 0例 ,女性 10例。年龄 16～ 72岁 ,平均 5 3岁。原发灶组织学类型 :管状乳头状或乳头状腺癌5例 ,管状腺癌 2 3例 ,粘液腺癌 1例 ,印戒细胞癌 1例 ;分级 :Ⅰ级 13例 ,Ⅱ级 9例 …     

Fas/FasL的表达与关节软骨

骨关节病 (ｏｓｔｅｏａｒｔｈｒｉｔｉｓ ,ＯＡ)是活动关节的一种慢性、进行性疾病 ,以关节软骨基质崩解、减少为主要特征 ,研究表明软骨细胞凋亡与ＯＡ进程密切相关 ,而Ｆａｓ在ＯＡ的发展过程中起着重要的作用。1　Ｆａｓ/ＦａｓＬ的基本结构ＡＰＯ 1/Ｆａｓ基因位于 10号染色体长臂 ,由 9个外显子和 8个内含子组成。Ｆａｓ(ＡＰＯ 1,ＣＤ95 )蛋白是一种含有 319个氨基酸的Ｉ型跨膜蛋白 ,相对分子质量为 4 0× 10 4,在结构上与ＴＮＦ、ＮＧＦ相似 ,属于ＴＮＦ受体 (ＴＮＦＲ)超家族。Ｆａｓ分子贯穿于细胞膜 ,且分为膜外区(15 7ＡＡ ,含…     

Fas/FasL途径在造血干细胞移植免疫中的实验研究

目的　探讨转染FasL的CD34+ 细胞对同种抗原特异性T细胞和白血病细胞凋亡的影响。方法　丝裂霉素C预处理表达外源FasL的骨髓CD34+ 细胞 ,分别与经过富集的T细胞 (刺激细胞 /效应细胞比例为 5∶1)和白血病细胞U937混合培养 ,借助原位末端标记法 (TUNEL)和流式细胞仪 (FCM )检测T细胞和白血病细胞的凋亡率。结果　分别以未转染和转染外源FasL的CD34+ 细胞为刺激细胞 ,5d后 ,T细胞凋亡率分别为 :3.2 %± 1.1%、12 .1%± 1.5 % (P <0 .0 1) ,经IL 2作用后 ,凋亡率上升至 17.6 %± 1.3% (P <0 .0 1) ;与白血病细胞U937混合培养 18h后 ,白血病细胞凋亡率分别为 :5 .0 %± 1.3%、10 .8%± 0 .6 % (P <0 .0 1) ,加入阿糖胞苷后 ,凋亡率上升至 17.9%±1.3% (P <0 .0 1)。结论　转染外源FasL的骨髓CD34+ 细胞 ,可诱导同种抗原特异性T细胞和白血病细胞凋亡。提示通过Fas/FasL途径可选择性清除移植物中同种抗原特异性T细胞 ,有望为造血干细胞移植中防治移植物抗宿主病 (GVHD) ,保留移植物抗白血病效应 (GVL)提供新的策略。     

Fas/FasL、p27、增殖细胞核抗原在老年大肠癌中的表达

我们通过应用免疫组织化学技术对100例老年大肠癌患者中Fas／FasL、p27、增殖细胞核抗原（PCNA）的表达进行了研究，探讨Fas／FasL及P27、PCNA在老年大肠癌发生、发展中的作用。     

Fas／FasL在胃癌中的表达及其意义

目的 探讨Fas/FasL基因蛋白在胃癌中表达及意义。方法 采用S－P法免疫组化染色，观察45例胃癌标本、22例胃粘膜不典型增生及21例正常胃粘膜标本的Fas/FasL表达。结果 胃癌、不典型增生及正常组的Fas阳性率分别为53．3％，54．5％和23．8％，FasL的阳性表达率分别为62．2％，9．1％和0。结论 Fas/FasL在胃癌的发生发展过程中是一个活跃的基因，二者的检测对胃癌的预后判断可能具有意义。     

Fas/FasL interaction of nucleus pulposus and cancer cells with the activation of caspases

Spinal metastatic disease is characterised by the preservation of the intervertebral disc structure, even after severe destruction of the vertebral body by neoplastic tissues. Anatomical features of the discs are thought to be the reason for the disc's resistance to metastatic cancer. However, little is known about the biochemical mechanism to prevent or attenuate the local invasion of cancer cells into the discs. The purpose of this study was to investigate the hypothesis that Fas ligand (FasL) produced by nucleus pulposus cells can kill Fas-expressing cancer cells infiltrating into the discs by the activation of caspases. Fas-expressing MCF-7 breast cancer cells were cultured with (experimental group) and without (control group) supernatant of nucleus pulposus cells containing FasL (50 pg/ml) for 48 h. The apoptosis of MCF-7 breast cancer cells was determined by the TUNEL technique. In addition, the activation of caspase-8, -9 and -3 was investigated by Western blot analysis. After treatment with supernatant of the nucleus pulposus cells containing FasL, the apoptosis of MCF-7 breast cancer cells was significantly increased, along with the activation of caspase-8, -9 and -3 compared with those of the control group. Our results suggest that the Fas/FasL interaction of nucleus pulposus and cancer cells might be a potential mechanism of the disc's resistance to metastatic cancer.     

Fas/FasL在各阶段婴幼儿血管瘤中的表达及意义

目的 检测Fas／FasL在各阶段婴幼儿血管瘤组织中的表达，探讨Fas／FasL在婴幼儿血管瘤细胞凋亡中的作用。方法 应用EnVision法免疫组化染色和RT-PCR检测Fas／FasL蛋白及mRNA在各阶段血管瘤组织中的表达。结果 ①增生早期和增生中期，部分血管瘤细胞表达Fas；增生晚期，阳性细胞明显增多，Fas mRNA表达最强；消退早期，仍有少量微血管内皮细胞表达Fas，之后Fas表达迅速减弱。②最早期细胞团中没有FasL（＋）细胞；增生中期，血管瘤组织中出现少量FasL（＋）细胞；增生晚期FasL（＋）细胞显著增多，FasL mRNA表达最强；消退早期之后，FasL（＋）细胞迅速减少以至消失。结论 Fas／FasL与婴幼儿血管瘤演变过程有密切联系，Fas／FasL介导的血管瘤细胞凋亡可能是婴幼儿血管瘤自行消退的重要原因。     

Fas/FasL基因转染联合顺铂对直肠癌细胞杀伤作用的研究

目的探讨Fas/FasL基因转染联合顺铂对直肠癌细胞的杀伤作用。方法构建pcDNA3.1-Fas/FasL真核表达载体,将人Fas/FasL基因通过脂质体导入直肠癌8348细胞中,并利用RT-PCR方法检测直肠癌8348细胞的Fas/FasL基因mRNA表达。用MTT法分析顺铂对转染前后的8348细胞抑制增殖和诱导凋亡的能力。结果Fas/FasL基因转染可明显增强直肠癌8348细胞的Fas/FasL表达。分别加入不同浓度顺铂(1、5、10、20、40μg/ml),Fas转染组8348细胞抑制率分别为47.2%、51.8%、57.2%、65.4%、71.0%;后者细胞抑制率分别为29.6%、33.0%、37.8%、41.4%、47.0%,其差异有显著性意义(t=15.33,P<0.01);FasL转染组8348细胞抑制率分别为11.0%、25.4%、31.2%、37.8%、42.4%;对照组8348细胞抑制率分别为26.1%、34.4%、37.6%、42.9%、53.2%,其差异有显著性意义(t=4.43,P<0.05)。结论转染的Fas/FasL基因可显著上调直肠癌8348细胞的Fas/FasL表达;Fas基因转染联合顺铂对直肠癌细胞有更强的杀伤作用;FasL基因转染可减弱顺铂对8348细胞的细胞毒作用,因此为直肠癌的基因治疗和化疗提供了理论依据。     

The significance of Fas/FasL molecular system in breast cancer

Fas (CD95/APO-1) and its natural ligand, FasL, are molecules expressed on cellular membranes, being involved in the induction of programmed cells death or apoptosis. Recently, it has been shown that malignant cells originating from solid tumors tend to inhibit the expression of Fas, as an escape mechanism from the immune cells' attack and to express FasL, as a counterstrike mechanism against the immune effector cells. The purpose of this study was to investigate, by immunohistochemistry, the presence of Fas and FasL in 15 breast carcinomas and to establish possible associations between the expression of these molecules and the histological type and grading of the tumors. Our results showed that 7 breast tumors have lost the expression of Fas and 11 tumors were positive for the Fas-ligand expression, important arguments for the mechanisms of immune escape and tolerance induction. Furthermore, 7 of the 11 FasL+ tumors were poorly differentiated invasive ductal carcinomas, suggesting a possible association between FasL expression and tumor aggressivity.     

Fas、FasL和Bcl-2在膀胱癌组织的表达及意义

目的　研究Fas蛋白 (CD95 /Apol 1,Fas)、Fas配体 (Fasligand ,FasL)及Bcl 2在膀胱癌组织中的表达 ,并探讨其临床意义。方法　采用免疫组化LSAB法检测 5 0例膀胱癌组织及 6例正常膀胱黏膜中Fas、FasL和Bcl 2的表达。结果　Fas、FasL及Bcl 2在膀胱癌组织中的阳性表达率分别为 5 0 %、38%、4 2 %。膀胱癌组织FasL和Bcl 2的阳性表达率明显高于正常组织 (P <0 .0 5 ) ,Fas明显低于正常组织 (P <0 .0 5 )。Fas的表达与膀胱癌病理分级、复发有关 (P <0 .0 5 ) ;FasL、Bcl 2表达与各项病理指标均无关 (P >0 .0 5 )。结论　Fas的表达降低与膀胱肿瘤的恶性化程度有关。     

Fas和FasL在胃癌组织中的表达

目的:研究Fas和Fas配体(FasL)在胃癌组织中的表达规律及可能的意义.方法:采用免疫组化方法,检测58例胃癌组织和26例非胃癌组织(对照)中Fas和FasL蛋白的表达.结果:胃癌组织中胃癌细胞和对照组织中胃上皮细胞Fas阳性率分别为19.0%和61.5%;胃癌组阳性率明显低于对照组(χ2=14.918;P=0.000).胃癌组织中胃癌细胞和对照组织中胃上皮细胞FasL阳性率分别为63.8%和53.8%,两组差异无统计学意义.结论:胃癌细胞Fas-FasL系统平衡失调,可能与胃上皮细胞癌变及免疫逃逸有关.