人参茎叶总皂甙对小鼠遗传物质损伤的防护作用

本文以染色体畸变试验为指标，诱变剂丝裂霉素Ｃ为阳性对照物，研究了人参茎叶总皂甙对小鼠遗传物质损伤的影响，并对其作用机理进行了探讨。结果表明，无论是先给动物ＧＮＳ后给ＭＭＣ，还是ＧＮＳ与ＭＭＣ同时给药，均能使ＭＭＣ诱发的小鼠骨髓细胞ＣＡ率明显降低，但在给予ＭＭＣ之前先给动物ＧＮＳ，比二者同时给药效果好，因此，作者认为ＧＮＳ对遗传物质损伤具有防护作用。     

人参茎叶总皂甙对实验性小鼠生殖细胞遗传物质损伤的影响

本文采用小鼠精原细胞姐妹染色单体互换（ＳＣＥ）实验方法，研究了人参茎叶总皂甙（ＧＮＳ）对丝裂霉素Ｃ（ＭＭＣ）引起的小鼠精原细胞遗传物质损伤的影响。结果表明，ＧＮＳ不能诱发小鼠精原细胞ＳＣＥ，而且在腹腔注射ＭＭＣ的同时给予ＧＮＳ，可使ＭＭＣ诱发的小鼠精原细胞ＳＣＥ频率明显降低。为此，我们认为ＧＮＳ对小鼠生殖细胞遗传物质具有保护作用。     

人参茎叶总皂甙对实验性小鼠生殖细胞遗传物质损伤的影响

本文采用小鼠精原细胞姐妹染色单体互换实验方法，研究了人参茎叶总皂甙对丝裂霉素引起的小鼠精原细胞遗传物质损伤的影响，结果表明，ＧＮＳ不能诱发小鼠精原细胞ＳＣＥ，而且在腹腔注射ＭＭＣ的同时给予ＧＮＳ，可使ＭＭＣ诱发的小鼠精原细胞ＳＣＥ频率明显降低。为此我们认为ＧＮＳ对小鼠生殖细胞遗传物质具有保护作用。     

人参茎叶总皂甙对丝裂霉素C诱发小鼠精子畸形的抑制作用

本实验中作者采用小鼠精于畸形试验方法，观察了人参茎叶总皂甙（ＧＮＳ）对丝裂霉素Ｃ（ＭＭＣ）诱发小鼠精子畸形的抑制作用。结果表明，在腹腔注射ＭＭＣ同时给ＧＮＳ，可使ＭＭＣ诱发的小鼠精子畸形率明显降低。提示ＧＮＳ具有抗诱变作用。     

人参茎叶总皂甙对丝裂霉素C诱发小鼠精子畸形的抑制作用

本实验中作者采用小鼠精子畸形试验方法，观察了人参茎叶总皂甙（ＧＮＳ）对丝裂霉素Ｃ（ＭＭＣ）诱发小鼠精子畸形的抑制作用。结果表明，在腹腔注射ＭＭＣ同时经ＧＮＳ，可使ＭＭＣ诱发的小鼠精子畸形率明显降低。提示ＧＮＳ具有抗诱变作用。     

人参二醇组皂甙对小鼠骨髓细胞遗传物质损伤的抑制作用

本实验观察了人参二醇组皂甙对小鼠骨髓细胞遗传物质的损伤作用和保护作用。结果表明，二醇组皂甙对遗传物质无诱变作用。二醇组皂甙可明显抑制裂霉素所诱发的小鼠骨髓细胞微核率，且预防给药后抑制效果最佳，与诱变剂同时给药效果次之。     

人参皂甙对雄性小鼠骨髓细胞染色体的辐射防护作用

利用小鼠腹腔注射人参皂甙，观察人参皂甙对Ｘ射线照射小鼠骨髓细胞染色体损伤的防护作用，结果表明，不同浓度的人参皂甙 对０．５ＧｙＸ射线诱发小鼠骨髓细胞染色体畸变具有明显的防护作用，且以５０ｍｇ／ｋｇ防护效果最佳。     

人参茎叶总皂甙对孕鼠及胎鼠的抗诱变作用的比较

本实验以姊妹染色单体互换和微核试验为指标，研究了人参茎叶总皂甙对孕鼠骨髓和胎鼠的抗诱变作用，结果证明ＧＮＳ可同时抑制由ＭＭＣ诱发的母鼠及胎鼠ＳＣＥ率和ＭＮ率的增高，并且在两项指标中母鼠和胎鼠对ＧＮＳ的敏感性不同。     

人参茎叶总皂甙对小鼠雄性生殖细胞的诱变研究

<正> 人参具有多种药理作用,临床应用极为广泛。现代药理学研究证明,人参茎叶部与根部具有相似的药理活性,国内外许多文献报道人参茎叶总皂甙(GNS)对机体各系统及多种酶活性均有明显的调节作用。我们以小鼠早期精细胞微核试验和初级精母细胞染色体畸变试验为指标,检测GNS对小鼠雄性生殖细胞有无损害作用。     

益母草提取液对小鼠遗传物质损伤的保护作用及对淋巴细胞功能的增强作用

目的：观察中草药益母草抗突变作用和对脾T淋巴细胞增殖的影响。方法：小鼠骨髓嗜多染红细胞微核实验(ＭＮＴ):30只小鼠随机分为6组(每组5只),即阴性对照组(NS)、环磷酰胺(CP)组(30 mg•kg^-1)及益母草抗诱变组(益母草1.0、2.0、4.0和8.0 g•kg^-1 +CP 30 mg•kg^-1),按改良方法制片检测微核频率;淋巴细胞转化实验:24只小鼠随机分为4组(每组6只),即生理盐水组、CP组(30 mg•kg^-1)、益母草水煎液组(2.0 g•kg^-1)及益母草水煎液+CP组(2.0 g•kg^-1益母草+CP 30 mg•kg^-1),采用MTT法计算刺激指数(SI)。结果：益母草2.0、4.0和8.0 g•kg^-1剂量组微核率低于CP组(Ｐ<0.05);生理盐水组、益母草水煎液组、益母草水煎液+CP组、CP组的SI分别为1.89±0.19、 2.17±0.14、1.73±0.13和1.45±0.09; 益母草水煎液组的SI显著高于生理盐水组,差异有显著性(P<0.05) ;益母草水煎液+CP组SI高于CP组,差异有显著性(P<0.05)。结论：益母草具有抗诱变作用,即对遗传物质具有保护作用,并且益母草能提高淋巴细胞功能。     

骨髓间充质干细胞移植对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用

目的研究骨髓间充质干细胞（BMSCs）移植对新生SD大鼠缺血缺氧性脑损伤（HIBD）的治疗作用。方法新生SD大鼠随机分为假手术组、模型组、BMSCs移植组;结扎左侧颈总动脉制备大鼠缺氧缺血性脑损伤模型,3 d后BMSCs组左侧脑室接种1×105个BMSCs;分别于移植后第2周和第4周处死各组大鼠,取脑组织行HE染色及免疫荧光染色观察病理变化。结果 HE染色假手术组脑组织结构正常核仁大而圆,胞质丰富;模型组大鼠脑神经元大量坏死,出现空洞;BMSCs移植组与模型组相比较,损伤细胞较少,但是多于假手术组,无空泡,可见新生毛细血管生成。移植4周后BMSCs移植组神经元凋亡指数（0.170±0.0002）与假手术组（0.094±0.0003）相比,无统计学意义（P〉0.05）,但明显小于模型组（0.342±0.0002）,有统计学意义（P〈0.05）。结论 BMSCs移植可降低缺氧缺血性脑损伤新生大鼠神经元凋亡指数,能够促进神经功能恢复,对新生SD大鼠缺血缺氧性脑损伤有治疗作用。     

大鼠骨髓间充质干细胞在体外向神经元样细胞的分化

目的探讨2-ME与BHA对大鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）分化为神经元样细胞的作用。方法大鼠股骨中分离MSCs,贴壁法体外扩增、传代。以二巯基乙醇（2-ME）预诱导,再加入2-ME、3-叔丁基-4羟基茴香醚（BHA）诱导。免疫细胞化学染色检测巢蛋白（nestin）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）、微管联合蛋白-2（MAP-2）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、乙酰胆碱酯酶（AchE）、1-氨基丁酸（GABA）、酪氨酸羟化酶（TH）的表达,以鉴定分化细胞的表型特征。尿嘧啶脱氧核苷（BrdU）作为细胞分裂标记检测MSCs增殖特性。结果细胞诱导后具有神经细胞的形态,并被BrdU标记,nestin、NSE、MAP-2、AchE、GABA表达阳性,而GFAP、TH表达为阴性。结论2-ME和BHA在体外能够有效的诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞。     

阿曼托双黄酮对辐射损伤小鼠骨髓细胞的保护作用

目的 探讨阿曼托双黄酮(amentoflavone,AF)对辐射小鼠骨髓细胞的防护作用及可能机制。方法 培养C57BL/6小鼠骨髓原代细胞,分为正常对照组、照射对照组、AF 2.5和5μmol/L组,每组3复孔,给药12 h后换成普通培养基,给予12Gy60Coγ射线一次性照射,于照后6和12 h分别用Hoechst染色法检测细胞的凋亡,用PI染色和流式细胞仪检测细胞周期,用酶联免疫吸附法检测细胞培养基中TNF-α的浓度。结果 AF对辐射后小鼠骨髓细胞凋亡及细胞周期变化无明显影响,但能显著降低辐射后细胞上清中TNF-α的浓度,且对照后6 h细胞作用明显(2.5μmol/L组P<0.05,5μmol/L组P<0.01);照后12 h也具有同样趋势,与照射对照组相比,5μmol/L组细胞上清中TNF-α表达明显降低(P<0.05)。结论 AF对C57BL/6小鼠骨髓细胞具有一定的辐射防护作用,它可能是通过抑制辐射后骨髓细胞TNF-α的表达来发挥辐射防护作用。     

NADH对昆明小鼠辐照后造血系统的影响

目的探讨NADH对小鼠辐照后造血系统的影响。方法昆明小鼠60只,随机分为3组,每组20只,实验Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组分别为正常对照组、辐照前注入生理盐水组和辐照前注射NADH药物组。生理盐水和NADH药物均采用腹腔注射,2次/d,照射前3 d给药。辐照采用6.0 Gy 60Co一次性辐照小鼠。尾静脉采血计数连续观察辐射后不同时期对外周血白细胞总数的影响;辐照后24 h,取股骨骨髓涂片,显微镜下计算骨髓有核细胞数和其分裂指数;通过DNA琼脂糖凝胶电泳观察昆明小鼠辐照后24、48 h骨髓细胞凋亡的改变。结果NADH能够抑制受照后小鼠外周血白细胞减小,增加骨髓有核细胞数及分裂指数,但并不能抑制DNA凋亡片段形成。结论NADH能够明显抑制辐射诱导的造血系统损伤,但并不通过抑制骨髓细胞凋亡途径。     

中草药远志对环磷酰胺所致小鼠遗传物质损伤的保护作用和淋巴细胞功能的增强作用

目的:探讨中草药远志抗突变作用和对脾T淋巴细胞增殖的影响。方法:小鼠骨髓嗜多染红细胞微核实验：30只小鼠随机分为6组（每组5只）,即阴性对照组( NS)、环磷酰胺(CP)组(30 mg·kg^-1)及远志抗诱变组(远志0.5、1.0、2.0、4.0 g·kg^-1+CP 30 mg·kg^-1),按改良方法制片检测微核频率;淋巴细胞转化实验：24只小鼠随机分为4组（每组6只）,即生理盐水组、CP组(30 mg·kg^-1)、远志水煎液组（2.0 g·kg^-1）及远志水煎液+CP组（2.0 g·kg-1远志+CP 30 mg·kg^-1）,采用MTT法计算刺激指数(SI)。结果:阴性对照组、远志各剂量组的微核率低于CP组(P<0.05);生理盐水组、远志水煎液组、远志水煎液+CP组、CP组的SI分别为2.11±0.13、2.37±0.18、1.97±0.06和1.34±0.19;远志水煎液组的SI生理盐水组的SI比较差异有显著性（P<0.05）;远志水煎液+CP组SI与CP组比较差异有显著性（P<0.05）。结论:远志具有抗诱变作用,即对遗传物质具有保护作用;远志能提高昆明种小鼠脾细胞对ConA的反应性,并能改善由CP所致的小鼠脾细胞ConA反应性降低,即远志能提高淋巴细胞功能。     

差速贴壁法分离培养早期人胚骨髓间充质干细胞

目的:探讨差速贴壁法从早期人胚股骨分离、纯化骨髓间充质干细胞(MSCs)的可行性,并观察培养细胞是否向神经元样细胞诱导分化。方法:取2～3月龄新鲜健康流产人胚股骨,切碎,接种玻璃培养瓶内培养8～12h,待较多的成纤维细胞贴壁,立刻将未贴壁细胞转种至塑料培养瓶培养,并多次传代;用甲氧酚(BHA)和二甲亚砜(DMSO)诱导培养的细胞,免疫细胞化学方法检测诱导后细胞神经元烯醇化酶(NSE)、神经巢蛋白(Nestin)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达情况。结果:原代培养3d可见塑料培养瓶内有长梭形细胞生长,至第10天前后形成集落样克隆,传至第4代后呈单层漩涡状排列的长梭形的成纤维样细胞,已无明显细胞克隆形成,经多次传代,细胞保持良好的增殖能力和稳定的性状;免疫细胞化学方法显示未诱导细胞NSE、Nestin、GFAP阴性,诱导后细胞NSE、Nestin呈阳性,GFAP阴性,间接证实培养所得细胞是MSCs。结论:差速贴壁培养法从早期人胚股骨中分离纯化MSCs,去除可能的成纤维细胞污染,是简便有效的,可供有关研究参考选择。     

小鼠骨髓间充质干细胞、骨髓单核细胞和胚胎成纤维细胞重编程为诱导性多能干细胞的效率比较

目的比较小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)、小鼠骨髓单核细胞(BM-MNCs)和小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)重编程为诱导性多能干细胞(iPS细胞)的效率。方法用慢病毒LV-ef1a-mOct4-IRES-EGFP、LV-ef1a-mSox2-IRES-EGFP、LV-ef1a-mKlf4-IRES-EGFP和LV-ef1a-mc-Myc-IRES-EGFP感染BMSCs、BM-MNCs和MEFs,通过计算碱性磷酸酶染色阳性克隆数比较这3种细胞重编程为iPS细胞的效率。用胚胎干细胞表面标记检测、胚胎干细胞内源基因检测、拟胚体形成实验和畸胎瘤形成实验验证重编程获得的iPS细胞的多能性。结果起源于小鼠BMSCs、BM-MNCs及MEFs的3种iPS细胞均能形成边缘光整的致密克隆,可表达干性基因Nanog、Rex-1、SSEA-1,并能在体内外分化为三胚层组织。但是BMSCs来源的碱性磷酸酶阳性克隆数低于BM-MNCs和MEFs来源的克隆数。结论小鼠BMSCs、BM-MNCs及MEFs均可重编程为iPS细胞,但BMSCs重编程为iPS细胞的效率低于BM-MNCs和MEFs。     

大鼠骨髓间充质干细胞向心肌细胞的体外诱导分化

目的 通过体外药物诱导骨髓间充质干细胞（MSCs）向心肌样细胞分化，进一步验证其多能分化特性。方法 分离培养大鼠MSCs，5－脱氧杂氮胞苷（5－Aza－cdR）作用24h后继续培养4wk，电镜超微结构观察，免疫细胞化学染色鉴定。结果 5－Aza-cdR诱导4wk后的部分大鼠骨髓间充质干细胞α-Actinin,Troponin T阳性表达，电镜观察可见横纹样结构形成，核呈卵圆形，位于细胞中央位置，胸质中可见富集的糖原颗粒及大量线粒体。结论 MSCs是存在于骨髓中的多能干细胞，能在体外条件下经5－Aza-cdR诱导分化成心肌细胞。