运动神经元病的研究进展

运动神经元病（motor neuron disease，MND）是以损害脊髓前角、脑干脑神经运动核和锥体束为主的一组慢性进行性变性疾病。临床以上运动神经元或／和下运动神经元损害引起的瘫痪为主要表现。近年有关自身免疫障碍的证据逐年增多，但免疫治疗效果尚不肯定。本文综述了运动神经元病的发病机制及诊治进展。     

甲基泼尼松龙冲击疗法对大鼠脊髓损伤后细胞凋亡的影响

目的观察甲基泼尼松龙(MP)对脊髓损伤大鼠脊髓胶质细胞、神经元凋亡的影响。方法将72只健康成年大鼠随机分为单纯损伤组及MP组各36只,制成脊髓损伤动物模型。MP组经大鼠尾静脉给予MP冲击治疗,单纯损伤组经大鼠尾静脉每日注射生理盐水0.2 mL。2组大鼠分批于1,3,5,8,14,21 d各处死6只,常规制成脊髓切片,行Bcl-2检测,TUNEL原位末端标记,检测大鼠脊髓损伤后细胞凋亡的情况。结果单纯损伤组Bcl-2高峰发生在损伤后3 d,而MP组于伤后1 d达到高峰。此时Bcl-2蛋白在神经细胞中表达,在胶质细胞中大量表达,且一直维持到伤后14 d才开始下降,伤后21 d仅少量表达(P<0.05)。TUNEL原位标记检测单纯损伤组24 h已出现不少阳性细胞,以胶质细胞为主,3~8d达到高峰,此后逐渐回落,但21 d时仍有阳性细胞;MP组凋亡细胞明显减少(P<0.05)。结论MP在脊髓损伤中通过改善微循环,促进Bcl-2蛋白表达,清除氧自由基,抑制脊髓损伤早期神经细胞和胶质细胞的凋亡,从而减轻脊髓继发性损伤,促进脊髓神经功能的恢复。     

川芎嗪对大鼠脊髓损伤后caspase-3表达及细胞凋亡的影响

目的探讨大鼠脊髓损伤后应用川芎嗪对caspase-3表达及细胞凋亡的影响。方法采用Allen’s法将72只成年SD大鼠造成脊髓中度损伤模型,分别给予川芎嗪及生理盐水治疗,用HE染色观察损伤脊髓组织病理变化,用免疫组化染色检测caspase-3阳性细胞,原位末端标记法(TUNEL法)标记凋亡细胞。结果HE染色镜检发现脊髓组织病理学改变川芎嗪组明显轻于损伤组。两组均发现caspase-3表达及凋亡细胞,损伤组caspase-3表达及神经细胞凋亡指数均高于川芎嗪组(P<0.05)。结论川芎嗪注射液能抑制脊髓损伤后caspase-3表达及神经细胞凋亡。     

针刺对实验性脊髓损伤前角运动神经元酶学的影响

目的：探讨针刺对大鼠脊髓损伤前角运动神经元酶学的影响。方法：采用酶组织化学染色方法定性分析针刺治疗前后脊髓前角运动神经元乙酰胆碱酯酶（ＡＣＨＥ），琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）、酸性磷酸酶（ＡＣＰ）的含量变化；同时，运用全自动义系统进行定量分析。结果：脊髓损伤后ＡＣＨＥ和ＳＤＨ含量减少；ＡＣＰ含量增加。而针刺组针刺后均较对照组同时段点ＡＣＨＥ、ＳＤＨ酶含量高；ＡＣＰ酶含量低，结论：针刺能调节脊髓损伤后前角     

电针对大鼠脊髓损伤后细胞凋亡相关基因影响的研究

目的：观察电针对大鼠急性脊髓损伤后神经细胞凋亡表达及变化规律。试图从线粒体启动凋亡途径相关主要因素的研究角度进一步揭示电针治疗脊髓损伤作用机制。方法：采用A1len’s法制备急性脊髓损伤模型。动物分为电针组、药物组（Caspase-3抑制剂组）、模型组、假手术组。用Tunel法对细胞凋亡进行标记。结果：脊髓损伤后1d即发现神经细胞凋亡,1d凋亡的细胞主要是神经元细胞。凋亡的细胞主要位于脊髓灰质前角。结论：大鼠急性脊髓损伤后存在细胞凋亡现象,是脊髓继发性损伤主要病理机制。     

电针对大鼠脊髓损伤后细胞凋亡Caspase-3影响的研究

目的：采用大鼠急性脊髓损伤模型,观察电针对脊髓损伤后神经细胞凋亡与其相关基因Caspase-3表达及变化规律。试图从线粒体启动凋亡途径相关主要因素的研究角度进一步揭示电针治疗脊髓损伤作用机制。方法：采用A llen＇s法制备急性脊髓损伤模型。动物分为电针组、药物组（Caspase-3抑制剂组）、模型组、假手术组。应用Tunel法对细胞凋亡进行标记。结果：药物组治疗结果表明,Caspase-3在3天,药物组表达量低于模型组（P〈0.05）;电针组治疗结果表明,Caspase-3在14天,电针组表达量低于模型组（P〈0.05）。结论：大鼠急性脊髓损伤后存在细胞凋亡现象,是脊髓继发性损伤主要病理机制。Caspase-3在大鼠脊髓损伤后神经元中表达量随着时间推移逐渐增加,提示上述相关基因可能促进神经元的凋亡,参与了脊髓继发性损伤。电针通过抑制Caspase-3在大鼠脊髓损伤神经元中表达,抑制神经细胞凋亡,减轻了脊髓继发性损伤,促进神经功能恢复。     

电针对大鼠脊髓损伤后细胞凋亡相关基因Caspase-9的研究

目的:采用大鼠急性脊髓损伤模型,观察电针对脊髓损伤后神经细胞凋亡与其相关基因Caspase-9表达及变化规律的影响,进一步揭示电针治疗脊髓损伤的作用机制。方法:采用A llen's法制备急性脊髓损伤模型。动物分为电针组、药物组(Caspase-3抑制剂组)、模型组、假手术组。免疫组化法检测Caspase-9的表达变化。结果:免疫组化方法检测结果表明:Caspase-9在14d时,电针组表达量低于模型组(P<0.05)。结论:电针通过抑制Caspase-9在大鼠脊髓损伤神经元中表达,抑制神经细胞凋亡,减轻了脊髓继发性损伤,促进神经功能恢复。     

川芎嗪对急性脊髓损伤大鼠神经细胞早期凋亡的影响

目的:观察川芎嗪对大鼠急性脊髓损伤(SCI)后神经细胞的早期凋亡的影响,进一步认识其在脊髓损伤后细胞凋亡中的作用机制.方法:采用改良Allen's重物打击法建立大鼠急性脊髓损伤模型,120只成年SD大鼠,随机分成4组:正常组(A组)、模型组(B组)、甲基强的松龙组(C组)及川芎嗪组(D组),每组各30只,造模后B组、C组和D组分别按时注射同体积的生理盐水、甲基强的松龙及川芎嗪注射液.损伤后各时间采用BBB法行神经功能评分,流式细胞术观察细胞凋亡情况,透射电镜观察细胞形态学变化情况.结果:D组伤后各时间点细胞凋亡与C组伤后各时间点细胞凋亡比较,差异无统计学意义(P＞0.05),但D组和C组与模型组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论:早期使用川芎嗪能减轻大鼠急性脊髓损伤后的神经细胞凋亡,对大鼠急性脊髓损伤有一定神经保护作用,主要机制可能和抑制细胞凋亡的“级联反应”有关.     

三七、川芎注射液对脊髓损伤后神经细胞凋亡及脊髓血流量变化的影响

目的：本文观察了三七、川芎（sqcx）注射液对脊髓损伤后神经细胞凋亡及脊髓血流量变化的影响。方法：将60只SD大鼠随机分为脊髓损伤后应用三七、川芎注射液组和单纯脊髓损伤组。用改良的Allen＇s方法造模成功后，分别在术后1，2，4，8，12，24h用Hochesst荧光染色法对脊髓损伤区进行细胞凋亡的检测，采用氢清除法测量脊髓血流量（SCBF）变化。结果：两组中均发现细胞凋亡，模型组损伤8h后损伤节段灰质中阳性细胞达到高峰，12h后灰质中阳性细胞减少，但白质中出现凋亡细胞达到高峰。用药组8h后细胞凋亡数与模型组有明显差异（P〈0．05），24h后两组比较有显著性差异（P〈0．01）。SCBF在损伤后1h明显下降，4h后略有回升，8h后达到最低。24h两组比较有显著性差异（P〈0．01）。结论：脊髓损伤后可导致神经细胞凋亡，三七、川芎注射液能明显抑制细胞凋亡并提高脊髓血流量。     

电针联合中药熏蒸疗法对痉挛性偏瘫患者脊髓运动神经元兴奋性的影响

目的探讨电针联合中药熏蒸疗法对脑卒中后痉挛性偏瘫患者的脊髓运动神经元兴奋性的影响。方法选择80例脑中风后遗症并伴有单侧上肢痉挛性偏瘫患者,随机分成对照组和治疗组各40例,分别采用单纯电针和电针结合中药熏蒸的方法进行治疗,以诱发肌电图作为判定脊髓运动神经元兴奋性变化的客观指标。结果治疗1个疗程后,2组患侧肢体H/Mmax均有降低,痉挛程度均有减轻,但治疗组改善程度明显优于对照组,有非常显著性差异（P均〈0.01）。结论电针联合中药熏蒸疗法对脑中风后遗症患者脊髓运动神经元异常活动的抑制效果明显好于单纯电针疗法,其机制可能是通过交互抑制的反射活动,对脊髓α运动神经元兴奋性产生了调整作用,从而起到降低肌紧张、缓解肢体痉挛的作用。     

金匮肾气丸对大鼠脊髓近距离放射损伤细胞凋亡形态学的影响

目的观察金匮肾气丸对192Ir近距离照射大鼠脊髓后细胞凋亡的影响.方法将120只SD大鼠随机分成为模型组、金匮肾气丸组、泼尼松组和正常组,各组每日给予相应的药物,连续给药14天后,除正常组外,其它各组均采用后装技术在大鼠脊髓进行192Ir近距离照射,照射剂量均为22Gy,大鼠分别在照射后8h、24h、4周时取损伤节段脊髓,应用HE、TUNEL染色,光镜和电镜观察.结果近距离照射各组大鼠脊髓后8h、24h时HE染色均未观察到明显组织结构上的改变,4周时脊髓白质区出现组织疏松和出血等病理改变.TUNEL染色和电镜显示：与模型组比较,金匮肾气丸组和泼尼松组照射后8h大鼠脊髓的细胞凋亡指数显著下降（P＜0.01）,而在照射后24h、4周时间点则差异无显著性.结论金匮肾气丸具有肾上腺皮质激素样作用,可对抗大鼠近距离放射性损伤早期胶质细胞的凋亡作用.     

火针对脊髓损伤模型大鼠凋亡细胞的影响

目的:观察火针改善脊髓损伤大鼠凋亡细胞的表达情况,为临床治疗脊髓损伤提供实验依据。方法:本研究以随机对照法进行动物分组,采用改良的Allen s法制备脊髓损伤模型,以火针、毫针分别进行干预,采用TUNEL法观察大鼠凋亡细胞的变化。结果:治疗手段干预后,与模型组比较,火针组、毫针组72 h、1 w的细胞凋亡表达存在显著性差异(P<0.05)。结论:火针能较好的减少脊髓损伤大鼠凋亡细胞的表达数量。     

夹脊电针对ALS-SOD1G93A小鼠腰髓运动神经元细胞凋亡及Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达的影响

目的:通过观察夹脊电针对肌萎缩侧索硬化症转基因小鼠(ALS-SOD1G93A)腰髓运动神经元细胞凋亡及Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达的影响,探讨夹脊电针防治ALS的作用机制.方法:将36只雄性ALS-SOD1G93A小鼠随机分为模型组、手针组和电针组,每组12只,同窝12只雄性野生型小鼠作为野生组.手针...     

运动神经元病中医病因病机与治法综述

运动神经元病（motor neuron disease,MND）是病因未明的选择性侵犯脊髓前角细胞、脑干（后组）颅神经运动核、大脑皮质锥体细胞及锥体束的慢性进行性神经变性致死性疾病。临床特征为上、下运动神经元受损的症状和体征共存,表现为肌无力、肌萎缩、锥体束征的不同组合,而感觉和括约肌功能一般不受影响。     

电针对大鼠脊髓损伤后细胞凋亡PARP-1裂解片段表达的影响

目的：观察电针对脊髓损伤后神经细胞凋亡基因PARP-1裂解片段表达的影响。方法：采用Allen＇s法制备急性脊髓损伤模型。动物分为电针组、药物组（Caspase-3抑制剂组）、模型组、假手术组。应用TUNEL法对细胞凋亡进行标记。结果：脊髓损伤后6h即发现神经细胞凋亡,1d达到高峰,3d、7d、14d随后下降。凋亡的细胞主要位于脊髓灰质前角。且电针对PARP-1裂解片段在1d、14d有明显抑制作用。结论：PARP-1裂解片段可能促进神经元的凋亡而参与了脊髓继发性损伤。电针通过抑制PARP-1裂解片段在大鼠脊髓损伤神经元中表达,抑制神经细胞凋亡而减轻脊髓继发性损伤。     

针刺对痉挛性偏瘫患者脊髓运动神经元兴奋性影响的实验研究

以诱发肌电图成分H波与M波的振幅比值 (H/Mmax)为指标 ,对针刺前后的痉挛性偏瘫患者脊髓运动神经元兴奋性变化进行分析。结果 :针刺时H/Mmax比值明显降低 ,而且针刺非痉挛侧穴位时下降幅度明显大于针刺痉挛侧穴位时的变化。因此 ,针刺非痉挛侧穴位时产生信息沿着Ⅰa类传入纤维 ,兴奋了脊髓内Ⅰa抑制性中间神经元 ,后者对痉挛侧肌群的脊髓α运动神经元活动性产生了抑制作用 ,使痉挛侧肌群的α -γ环路活动性降低、肌紧张度下降 ,从而有利于缓解肌痉挛状态     

电针“大椎”“命门”对脊髓损伤大鼠神经元细胞凋亡及JNK信号通路相关蛋白表达的影响

目的:观察督脉电针对脊髓损伤(SCI)大鼠不同时间窗下神经元细胞凋亡及磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-c-Jun)表达的影响,探讨督脉电针在脊髓损伤与修复过程中的作用机制。方法:SD大鼠随机分为3个时间窗组(术后1、3、7d组),每个时间窗组再随机分3个组:正常对照组、模型组和督脉电针组。采用改良式的Allens打击法复制脊髓损伤模型。督脉电针组选取"大椎""命门"进行电针干预,每日1次,每次20min,连续治疗至相应天数。采用BBB评分法评估大鼠后肢运动神经功能的变化,TUNEL法检测各组大鼠受损脊髓神经元细胞凋亡数量,Western blot法检测各组脊髓损伤组织中p-c-Jun蛋白的表达情况。结果:BBB评分结果显示,模型组评分显著低于正常对照组(P0.01),术后3、7d督脉电针组BBB分值均高于模型组(P0.05,P0.01)。与正常对照组相比,在3个时间窗下,模型组大鼠受损脊髓组织内凋亡阳性细胞数目均显著升高(P0.01);与模型组相比,在3个时间窗下,督脉电针组较模型组凋亡细胞显著减少(P0.01)。与正常对照组相比,在3个时间窗下,模型组大鼠受损脊髓组织内p-c-Jun蛋白表达均显著升高(P0.05,P0.01);与模型组相比,术后3、7d督脉电针组大鼠受损脊髓组织中p-c-Jun表达显著降低(P0.01,P0.05)。结论:脊髓损伤后受损脊髓组织中p-c-Jun蛋白表达水平升高;督脉电针可以改善脊髓损伤大鼠运动神经功能,其对脊髓损伤的保护作用机制可能与下调受损脊髓组织中p-c-Jun蛋白表达有关。     

电针对大鼠脊髓损伤后细胞凋亡PARP-1全长影响的研究

目的：采用大鼠急性脊髓损伤模型,观察电针对脊髓损伤后神经细胞凋亡与其相关基因PARP-1全长表达影响及变化规律,试图从线粒体启动凋亡途径角度揭示电针治疗脊髓损伤作用机制。方法：急性脊髓损伤模型以Allen＇s法制备,将大鼠分为电针组、药物组（Caspase-3抑制剂组）、模型组、假手术组。对凋亡细胞采用Tunel法予以标记。结果：Tunel标记结果表明：脊髓损伤后6 h,PARP-1全长在模型组开始有表达,1 d表达量最高,在3 d、7 d逐渐下降,14 d最低。模型组在1 d、3 d表达量分别高于假手术组和药物组（P〈0.05）。电针组在3 d表达量低于模型组（P〈0.05）。结论：①细胞凋亡现象发生在大鼠急性脊髓损伤后,这是脊髓继发性损伤主要病理机制;②PARP-1全长在大鼠脊髓损伤后神经元中表达量随着时间推移逐渐增加,提示PARP-1全长可能参与了脊髓继发性损伤;③电针通过抑制PARP-1大鼠脊髓损伤神经元中PARP-1全长的表达,从而抑制了神经细胞的凋亡,减轻脊髓继发性损伤。     

土荆皮酸诱导宫颈癌细胞系HeLa凋亡的实验研究

目的研究土荆皮酸(PAB)对体外培养的HeLa细胞的生物学效应和作用机制。方法用MTT法、流式细胞术、透射电镜检测体外培养的HeLa细胞在PAB作用下的增殖抑制及凋亡程度,用RT-PCR法检测p53/bcl-2/bax的表达水平。结果(1)PAB对HeLa细胞的增殖抑制作用随浓度升高而明显增强,其IC_(50)约10μmol/L。(2)流式细胞术证实10μmol/L PAB呈时间依赖性改变细胞周期分布,一方面降低G_0/G_1期的细胞比例,另一方面增高G_2/M期细胞的比例。(3)RT-PCR法显示HeLa细胞在10μmol/L PAB作用12、24、48 h均显示bax上调和bcl-2的下调,p53则未检测到表达。结论在体外PAB能抑制HeLa细胞增殖,诱导其凋亡,其诱导凋亡机制可能与bax的上调和bcl-2的下调相关。     

电针联合中药熏蒸疗法对痉挛性偏瘫患者脊髓运动神经元兴奋性的影响

目的探讨电针联合中药熏蒸疗法对脑卒中后痉挛性偏瘫患者的脊髓运动神经元兴奋性的影响。方法选择80例脑中风后遗症并伴有单侧上肢痉挛性偏瘫患者,随机分成对照组和治疗组各40例,分别采用单纯电针和电针结合中药熏蒸的方法进行治疗,以诱发肌电图作为判定脊髓运动神经元兴奋性变化的客观指标。结果治疗1个疗程后,2组患侧肢体H/Mmax均有降低,痉挛程度均有减轻,但治疗组改善程度明显优于对照组,有非常显著性差异(P均<0.01)。结论电针联合中药熏蒸疗法对脑中风后遗症患者脊髓运动神经元异常活动的抑制效果明显好于单纯电针疗法,其机制可能是通过交互抑制的反射活动,对脊髓α运动神经元兴奋性产生了调整作用,从而起到降低肌紧张、缓解肢体痉挛的作用。