羧甲基壳聚糖对人肺上皮细胞短路电流影响的研究

目的探讨羧甲基壳聚糖对人肺上皮细胞短路电流的影响及其在肺上皮液体转运中的作用。方法应用尤斯灌流室装置测定H441单层细胞的短路电流。由总电流减去阿米洛利可抑制的电流算得阿米洛利敏感性电流,以用药前H441单层细胞的阿米洛利敏感性电流初始值为100%对照。结果羧甲基壳聚糖能够剂量依赖性增加H441单层细胞的短路电流,此电流可被阿米洛利明显抑制;0.1%、0.2%、0.3%羧甲基壳聚糖处理的人H441单层细胞阿米洛利敏感性电流分别增加至(151±16)%、(192±27)%、(222±34)%,与对照值相比P均<0.05。结论羧甲基壳聚糖通过增加人肺上皮细胞阿米洛利敏感性电流而增加肺泡上皮离子转运,可能参与肺水肿液的吸收。     

硝苯地平对肺泡液体清除率的作用研究

目的探讨硝苯地平与肺泡液体清除率(AFC)之间的关系,进一步阐明硝苯地平所致非心源性肺水肿发生的病理生理学机制。方法应用酶标仪测定小牛血清白蛋白浓度的方法测定小鼠在体AFC。结果硝苯地平气管内给药对AFC无明显抑制作用,为(49±5)%。结论临床上硝苯地平引起的非心源性肺水肿可能不是通过调节肺泡上皮钠主动转运机能,抑制肺水肿液的吸收而起作用的。     

慢性阻塞性肺疾病患者肺泡液体清除作用机制研究

目的本研究旨在探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者离体肺段肺泡液体清除率(AFC)的改变及其与环磷酸鸟苷(cGMP)依赖性蛋白激酶2(PKG2)的关系。方法应用临床外科手术肺切除患者的肺段标本,将药物通过插管注入远端肺组织。应用考马斯亮兰法测定肺泡液体内小牛血清白蛋白浓度的方法测定人离体肺段AFC。应用相关酶联免疫试剂盒检测PKG2。结果 COPD患者肺组织AFC增加,PKG2明显高于对照组。结论 COPD患者气道黏液分泌增多肺脏液体清除作用增强,其机制可能与上皮钠通道功能增强有关。     

纤溶酶对小鼠肺泡上皮液体清除作用的研究

目的探讨纤溶酶对在体小鼠肺泡液体清除率(AFC)的作用。方法应用考马斯亮蓝法测定小牛血清白蛋白浓度的方法测定小鼠在体AFC。结果特异性上皮细胞钠通道阻断剂阿米洛利组能明显降低AFC,气管内注入60μg/mL纤溶酶后,AFC明显增加(38.2±2.1)%,与对照组相比P<0.05,n=6)。纤溶酶+阿米洛利组对AFC的影响与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05,n=5),与单独使用纤溶酶比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论纤溶酶能明显增加肺泡上皮液体的清除,可能通过增强阿米洛利敏感性钠通道活性而影响AFC。     

氯胺酮对小鼠肺泡上皮液体清除作用的研究

<正>肺泡液体清除率(alveolar fluid clearance,AFC)对肺脏生理和病理状态下的液体平衡,如肺水肿、急性肺损伤和成人呼吸窘迫症,均起重要的调控作用。肺泡上皮细胞顶侧膜的上皮钠通道(epithelial sodium channel,ENaC)是影响AFC的     

右旋美托咪啶对小鼠肺泡上皮液体清除作用的研究

目的探讨右旋美托咪啶与在体小鼠肺泡液体清除率(AFC)之间的关系,以明确其在肺脏液体清除中的作用。方法应用酶标仪测定伊文思蓝标记的小牛血清白蛋白浓度的方法测定小鼠在体AFC。结果与1mmol/L阿米洛利抑制效应相反,气管内注入1.5μg/kg右旋美托咪啶后,能显著增加小鼠在体AFC。与阿米洛利合用后此增强效应受到抑制,表明右旋美托咪啶能够增加与上皮钠通道有关的阿米洛利敏感性AFC。结论临床上对合并肺脏损害的患者进行镇静时,可以考虑右旋美托咪啶对肺脏液体清除作用的影响,应用其进行相应的治疗。     

β3肾上腺素能受体激动剂对离体人肺脏肺泡液体清除的作用

目的：制备离体人肺脏模型,探讨β3肾上腺素能受体激动剂CGP-12177对肺泡液体清除率（AFC）的作用及其机制。方法：以肺泡内Evans蓝标记的白蛋白浓度的变化测定AFC。首先将10^-4 mol/L到10^-7 mol/L的CGP-12177分别灌注到离体人肺脏肺泡腔内,测定AFC的变化。然后将10^-5 mol/L CGP-12177分别与α受体阻滞剂酚妥拉明、β1受体阻滞剂阿替洛尔、β2受体阻滞剂ICI-118551、β3受体阻滞剂SR59230A、钠通道阻断剂氨氯吡咪、Na^＋-K^＋-ATP酶阻断剂哇巴因混合后灌注到离体人肺脏肺泡腔内,测定AFC的变化。结果：10^-7 mol/L和10^-4 mol/L CGP-12177对离体人肺脏肺泡液体清除率没有影响,10^-6 mol/L和10^-5 mol/L的CGP-12177能够显著提高离体人肺脏肺泡液体清除率。CGP-12177增加离体人肺脏AFC的作用能够被SR59230A、氨氯吡咪和哇巴因抑制。结论：高选择性CGP-12177主要通过调节Na^＋-K^＋-ATP酶的活性提高离体人肺脏肺泡液体清除能力。     

咪达唑仑对小鼠肺泡上皮液体清除作用的研究

目的探讨咪达唑仑与在体小鼠肺泡液体清除率(AFC)之间的关系,以及β2肾上腺素受体激动剂特布他林对其作用的影响。方法应用酶标仪测定小牛血清白蛋白浓度的方法测定小鼠在体AFC。结果气管内注入0.1mmol/L咪达唑仑后,能显著降低小鼠AFC。与1mmol/L阿米洛利(特异性钠通道阻断剂)合用后抑制效应未见进一步增强,表明咪达唑仑能够抑制与上皮钠通道有关的阿米洛利敏感性AFC。β2肾上腺素受体激动剂特布他林能明显增加小鼠AFC,与咪达唑仑合用后,特布他林几乎完全逆转咪达唑仑对AFC的抑制作用。结论临床上对合并肺脏损害的患者应用咪达唑仑时应考虑其可能对肺脏液体清除作用的影响,必要时可以考虑应用β2肾上腺素受体激动剂特布他林进行治疗。     

壳聚糖和羧甲基壳聚糖纳米银复合物的抑菌作用

目的研究自制的壳聚糖和羧甲基壳聚糖纳米银复合物对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和大肠埃希菌的抑制作用。方法采用纸片琼脂扩散法及试管液体培养基稀释法进行试验。结果壳聚糖纳米银复合物对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的抑菌效果均明显优于壳聚糖、AgNO3及壳聚糖银。羧甲基壳聚糖纳米银复合物抑菌效果稍低于AgNO3和羧甲基壳聚糖银。结论壳聚糖和羧甲基壳聚糖纳米银复合物对这三种常见致病细菌均有抑制作用。     

羧甲基壳聚糖的含量测定

羧甲基壳聚糖含量的测定通常采用的方法为乙酰丙酮法,但由于市售羧甲基壳聚糖样品中氨基的的脱乙酰化程度和取代度差异,导致用乙酰丙酮法测定市售样品含量时实测值与理论值偏差较大.因此,采用测还原总糖含量的3,5-二硝基水杨酸比色法(DNS法)对羧甲基壳聚糖进行含量测定.经过方法学验证,该方法线性的平均相关系数r=0.999 5,以D-盐酸氨基葡萄糖计线性范围在200～1800μg,重复性实验RSD＝1.23%,平均回收率为100.06%,RSD＝2.45%,显色后吸收值在2 h内稳定.用DNS法对市售羧甲基壳聚糖样品的含量测定结果与理论含量基本相符.因此,该方法更适用于羧甲基壳聚糖的含量测定.     

巴豆醛对肺泡液体清除率的影响及相关机制的研究

目的探讨巴豆醛对肺泡液体清除率的影响,并探讨其潜在的作用机制。方法应用考马斯亮蓝测定小牛血清白蛋白浓度的方法,评估小鼠在体肺泡液体清除率;采用蛋白质印迹法实验研究巴豆醛对细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)1/2蛋白磷酸化的影响以及其对肺泡上皮钠通道表达的影响;用活性氧检测试剂盒检测巴豆醛对细胞内活性氧含量的影响。结果巴豆醛能够降低小鼠肺泡液体清除率,蛋白质印迹法结果显示其能够促进ERK1/2的磷酸化,抑制上皮钠通道亚基的表达,并且呈剂量依赖性提高细胞内的活性氧水平。结论巴豆醛能够抑制肺上皮细胞的液体清除,该抑制作用可能与其增加ERK1/2蛋白磷酸化,抑制上皮钠通道蛋白表达以及增加细胞内的活性氧水平有关。     

乳糖化羧甲基壳聚糖的合成及转运质粒DNA的作用

目的 探讨乳糖化羧甲基壳聚糖（Lac-CMCS）的合成及其对DNA的转运作用。方法 还原胺化法共价连接乳糖和羧甲基壳聚糖（CMCS），并使其与含HBV反义x基因的质粒DNA进行复合，转染细胞进行培养，用酶联免疫吸附试验（ELISA）观察对细胞内病毒复制的抑制作用。结果 制备出的Lac-CMCS共价结合物中乳糖与CMCS的摩尔比为15：1。DNA与Lac-CMCS形成复合物的最佳质量比是1：10。此复合物能有效携带药物进入细胞发挥作用，最大抑制率达83．6％。结论 乳糖化羧甲基壳聚糖在体外能有效转运DNA进入细胞。     

羧甲基壳聚糖与阿霉素联合用药的体外抗肿瘤作用

目的：探讨羧甲基壳聚糖与阿霉素联合应用对人宫颈癌Hela细胞及人结肠腺瘤LS174-T细胞增殖的影响。方法：采用MTT比色法测定单独和合用羧甲基壳聚糖与阿霉素对癌细胞的生长抑制作用。应用金氏公式进行联合用药分析。结果：羧甲基壳聚糖和阿霉素均可有效地抑制癌细胞生长,且同时给药对癌细胞可产生单纯相加至增强的协同杀伤效果。序贯给药法中先给阿霉素后给羧甲基壳聚糖结果为协同作用,先给羧甲基壳聚糖后给阿霉素为拮抗作用。结论：羧甲基壳聚糖与阿霉素同时联合用药可产生协同作用,序贯联合用药产生单向协同作用。     

羧甲基壳聚糖与阿霉素联合用药的体外抗肿瘤作用

目的：探讨羧甲基壳聚糖与阿霉素联合应用对人宫颈癌Hela细胞及人结肠腺瘤IS174-T细胞增殖的影响。方法：采用MTT比色法测定单独和合用羧甲基壳聚糖与阿霉素对癌细胞的生长抑制作用。应用金氏公式进行联合用药分析。结果：羧甲基壳聚糖和阿霉素均可有效地抑制癌细胞生长,且同时给药对癌细胞可产生单纯相加至增强的协同杀伤效果。序贯给药法中先给阿霉素后给羧甲基壳聚糖结果为协同作用,先给羧甲基壳聚糖后给阿霉素为拮抗作用。结论：羧甲基壳聚糖与阿霉素同时联合用药可产生协同作用,序贯联合用药产生单向协同作用。     

特普他林对大鼠烟雾吸入伤后肺泡液体清除功能的影响

目的　观察特普他林对大鼠烟雾吸入伤后肺泡上皮液体清除能力变化的影响。方法　采用大鼠烟雾吸入性损伤模型。伤后 2 4h经气管滴注特普他林 ( 10 -4 mol·L-1)溶液 5ml·kg-1;1h后检测肺泡内液体清除率 (ALC)、总肺水量 (TLW )、肺血管外肺水量 (EVLW)和动脉血气指标。结果　大鼠伤后 2 4hALC降低 46 8% ,TLW和EVLW明显增加 ,出现严重的低氧血症。特普他林组ALC增高 5 7 6 % ,TLW和EVLW显著减少 ,低氧血症明显改善。钠转运特异性抑制剂阿咪洛利或哇巴因能部分抑制特普他林刺激肺泡内液体清除的作用。结论　特普他林通过上调钠主动转运机能 ,促进肺水肿液的吸收 ,从而改善换气功能 ,对吸入伤后肺水肿有一定的治疗作用     

磺胺嘧啶银涂膜剂的研制

目的研制磺胺嘧啶银涂膜剂并建立质量控制方法。方法拟定处方组成及制备工艺,以羧甲基壳聚糖、聚乙烯醇为辅料制备涂膜剂;用永停滴定法测定主药含量。结果羧甲基壳聚糖、聚乙烯醇不影响主药理化性质,对含量测定无干扰。主药平均回收率为100．6％,RSD=0．81（n=9）。结论该制剂制备工艺简单,含量测定方法准确,质量可控。     

水溶性壳聚糖包覆多西他赛纳米脂质体的制备及性能研究

目的:制备羧甲基壳聚糖包衣多西他赛纳米脂质体,并考察其体外释放度。方法:采用薄膜分散法制备多西他赛阳离子脂质体,并用不同浓度的羧甲基壳聚糖包覆阳离子脂质体;用超滤法测定其包封率;用激光电位粒径测定仪分别测定其Zeta电位和粒径大小,并用透射电镜观察其形态;用透析法考察其体外释药性质。结果:所制的羧甲基壳聚糖包覆的脂质体包封率达99.98%;Zeta电位为-12.8 mV,平均粒径为(150±17)nm。结论:本实验制备的羧甲基壳聚糖包衣多西他赛纳米脂质体具有高包封率,粒径大小均匀,体外能显著延缓药物释放的性质。     

羧甲基壳聚糖抗肿瘤及免疫增强活性研究

目的:评价羧甲基壳聚糖抗肿瘤和免疫增强活性。方法:MTT法研究羧甲基壳聚糖体外活性,S180实体瘤模型用于评价羧甲基壳聚糖体内抗肿瘤活性,流式细胞术分析肿瘤细胞的周期变化和细胞凋亡,ELISA法测定羧甲基壳聚糖对免疫功能的调节。结果:羧甲基壳聚糖抑制肿瘤细胞增殖,IC_(50)为30μg/mL,肿瘤抑制率为27.9%～43.6%。用药后细胞周期阻滞在G_1期,肿瘤细胞凋亡明显增加。体内具有明显的抑瘤和免疫增强作用。结论:羧甲基壳聚糖可以通过直接杀伤肿瘤细胞和增强免疫而发挥抗肿瘤效应。     

羧甲基壳聚糖体外抗幽门螺杆菌作用的研究

目的研究羧甲基壳聚糖体外对Hp的抑菌作用,为其体内应用提供理论和实验依据。方法①将羧甲基壳聚糖溶于不同浓度乙酸溶液中,得到不同pH值和浓度的溶液。②采用打孔法检测羧甲基壳聚糖溶液对Hp菌株的抑菌作用,并分别做对照。结果①羧甲基纤维素及乙酸对照液对Hp无抗菌作用。②羧甲基壳聚糖在pH值为6和5时无抗Hp作用,只在pH为4时有抗Hp作用,相比之下差异显著（P〈0.01）;羧甲基壳聚糖抗Hp作用存在菌株间差异（P〈0.01或P〈0.05）。③在1%～5%浓度范围内羧甲基壳聚糖抗Hp作用无显著差异。结论①羧甲基壳聚糖对Hp有普遍抑菌作用,可望成为一种新型的抗Hp药物。②其抗Hp作用受pH值影响最为明显。     

羧甲基壳聚糖钙对小鼠CCl_4造成的急性肝损伤的保护作用

目的观察羧甲基壳聚糖钙对CCl4损伤小鼠丙氨酸转氨酶(ALT)和天门冬氨酸转氨酶(AST)活性及肝脏抗氧化能力的影响。方法将小鼠分为正常对照组、CCl4肝损伤模型组、羧甲基壳聚糖钙低、中、高剂量实验组,灌胃给予受试物。连续20 d后腹腔注射CCl4,24 h后采血测ALT、AST活性,同时取肝脏制匀浆,用试剂盒测定丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总抗氧化能力(T-AOC)值。结果羧甲基壳聚糖钙能显著降低ALT和AST活性,抑制脂类过氧化,提升SOD活性和T-AOC水平,对GSH-Px无显著影响。结论羧甲基壳聚糖钙对CCl4引起的急性肝损伤小鼠具有一定的抗氧化能力和肝保护作用。