ＮＡＮＯＧ基因在侧群表型干细胞样肝癌细胞中的表达及意义

摘要：【目的】基于侧群（ＳＰ）细胞分选方法,从肝癌细胞Ｈｕｈ７和Ｈｅｐ３Ｂ中分选ＳＰ表型干细胞样肝癌细胞,观察干细胞标记物ＮＡＮＯＧ基因在该ＳＰ表型肝癌细胞中的表达。【方法】采用流式细胞术检测和分选肝癌细胞Ｈｕｈ７和Ｈｅｐ３Ｂ中的ＳＰ细胞和非侧群（ＮＳＰ）细胞,细胞生长曲线法检测ＳＰ和ＮＳＰ细胞的增殖能力,Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ侵袭实验检测ＳＰ和ＮＳＰ细胞的侵袭能力,ＭＴＴ法检测ＳＰ和ＮＳＰ细胞对５－氟尿嘧啶（５－ＦＵ）和阿霉素（ＤＯＸ）的药物敏感性;Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅＰＣＲ和ＷＢ检测ＳＰ与ＮＳＰ细胞中ＮＡＮＯＧ基因的表达。【结果】肝癌细胞Ｈｕｈ７和Ｈｅｐ３Ｂ中分选的ＳＰ细胞比例分别为（５．３±０．８）％和（１３．４９±１．０）％。生长曲线表明Ｈｕｈ７和Ｈｅｐ３Ｂ的ＳＰ细胞的增殖速度快于ＮＳＰ细胞（Ｐ＜０．０５）,体外侵袭实验结果显示Ｈｕｈ７和Ｈｅｐ３Ｂ的ＳＰ细胞体外侵袭能力高于ＮＳＰ细胞（Ｐ＜０．０５）,ＭＴＴ结果显示Ｈｕｈ７和Ｈｅｐ３ＢＳＰ细胞对５－ＦＵ和ＤＯＸ有耐药性,高于ＮＳＰ细胞（Ｐ＜０．０５）。Ｈｕｈ７和Ｈｅｐ３ＢＳＰ细胞ＮＡＮＯＧｍＲＮＡ平均表达水平分别是ＮＳＰ细胞的４．１７和５．５１倍（Ｐ＜０．０５）,ＮＡＮＯＧ蛋白平均表达水平分别是ＮＳＰ细胞的３．７８和５．０１倍（Ｐ＜０．０５）。【结论】肝癌细胞Ｈｕｈ７和Ｈｅｐ３Ｂ中分选的ＳＰ细胞符合肿瘤干细胞的部分生物学特征,ＮＡＮＯＧ基因在ＳＰ表型干细胞样肝癌细胞中高表达。     

血清肌酸激酶同功酶BB和神经元特异性烯醇酶用于小细胞肺癌的临床价值

用层析荧光法和ＡＢＣ－ＥＬＩＳＡ法检测了２０例小细胞肺癌（ＳＣＬＣ），３０例非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ），２５例良性肺疾病和３０例正常对照者血清中肌酸激酶同功酶ＢＢ（ＣＫ－ＢＢ）和神经元特异性烯醇酶（ＮＳＥ）。结果表明：ＳＣＬＣ组血清ＣＫ－ＢＢ和ＮＳＥ含量高于其它３组（Ｐ＜０．００１）；４组血清的ＣＫ－ＢＢ均值分别为３０．２、８．４、６．３和４．３ＩＵ／Ｌ，ＮＳＥ分别为５２．２、１２．７、１０．３、和９．２ｎｇ／ｍｌ．以９．５ＩＵ／Ｌ（ＣＫ－ＢＢ）和２０．８ｎｇ／ｍｌ（ＮＳＥ）为正常值上限，ＳＣＬＣ组的阳性率分别是７０％（ＣＫ－ＢＢ）和８０％（ＮＳＥ），高于ＮＳＣＬＣ组（Ｐ＜０．００５）。ＳＣＬＣ血清ＣＫ－ＢＢ和ＮＳＥ显著相关（ｒ＝０．７９３４，Ｐ＜０．００１），联合检测可使敏感性提高到９０％，特异性提高到９４％。因此，作者认为血清ＣＫ－ＢＢ和ＮＳＥ可以作为ＳＣＬＣ的诊断指标，联合检测可提高临床应用价值。     

移植沉默ＴＳＧ－６基因的骨髓间充质干细胞对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响

摘要：【目的】在大鼠肝脏缺血再灌注模型中,观察移植沉默ＴＳＧ－６基因的骨髓间充质干细胞（ＢＭＳＣ）对大鼠肝脏缺血再灌注损伤（ＨＩＲＩ）的影响。【方法】全骨髓培养法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,流式细胞学鉴定,慢病毒载体（ＬＶ３－ｓｈＴＳＧ－６）感染下调ＴＳＧ－６基因的表达;６０只ＳＤ雌性大鼠７０％肝脏缺血再灌注损伤模型的建立,随机分４组,ＰＢＳ组、ＢＭＳＣ组,ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组、ＴＳＧ－６－ｓｈＲＮＡ－ＢＭＳＣ组;各组大鼠分别于恢复灌注后３、６、２４ｈ取血检测血清中ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＴＮＦ－α、ＩＬ－６含量,恢复灌注后６ｈ取中叶肝脏组织,ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ检测ＴＳＧ－６蛋白表达,切片ＨＥ染色后光镜观察肝组织显微结构。【结果】体外分离培养的ＢＭＳＣ状态稳定,增殖能力强,表达ＣＤ２９及ＣＤ４４,不表达ＣＤ３４及ＣＤ４５,慢病毒感染下调ＢＭＳＣ的ＴＳＧ－６基因表达效率达７３．９９％;大鼠肝脏７０％缺血再灌注损伤模型稳定,各时间点ＴＳＧ－６－ｓｈＲＮＡ－ＢＭＳＣ组的ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＴＮＦ－α、ＩＬ－６含量均高于ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组（Ｐ＜０．０５）;ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组的ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＴＮＦ－α、ＩＬ－６含量均低于ＰＢＳ组（Ｐ＜０．０５）;ＴＳＧ－６－ｓｈＲＮＡ－ＢＭＳＣ组的肝脏ＴＳＧ－６蛋白表达低于ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组（Ｐ＜０．０５）,ＰＢＳ组未见ＴＳＧ－６蛋白表达;ＴＳＧ－６－ｓｈＲＮＡ－ＢＭＳＣ组的肝组织损伤较ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组重,与ＰＢＳ组无明显区别,ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组的肝组织损伤较ＰＢＳ组明显减轻。【结论】移植ＢＭＳＣ能改善肝缺血再灌注损伤,移植沉默ＴＳＧ－６基因的骨髓间充质干细胞削弱了其对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。     

小剂量G—CSF对化疗引起的粒细胞减少症的治疗作用

应用小剂量（２μｇ／ｋｇ）粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）于１８例肺癌患者化疗中，以观察预防发生中性粒细胞减少症的疗效。其中小细胞肺癌５例，非小细胞肺癌１３例，随机分成Ｇ－ＣＳＦ组及对照组各９例，化疗方案为ＣＥ（卡铂－ＶＰ１６）。结果Ｇ－ＣＳＦ组粒细胞绝对计数（ＡＮＣ）＜２．０×１０９／Ｌ，发生例数５例，持续天数为３．６±３．５天；对照组持续天数１６．８±７．１天，Ｐ＜０．０５。ＡＮＣ最低值至恢复正常（ＡＮＣ＞２．０×１０９／Ｌ）的天数Ｇ－ＣＳＦ组及对照组分别为２．６±１．３天，８．９±５．３天（Ｐ＜０．０５）。Ｇ－ＣＳＦ组化疗后的第２０天ＡＮＣ均已恢复正常，ＡＮＣ为（９．７±６．８）×１０９／Ｌ故可在第２２天顺利接受第二周期化疗。对照组ＡＮＣ（１．６６±０．８）×１０９／Ｌ（Ｐ＜０．０１）。由此可见，小剂量Ｇ－ＣＳＦ能有效地防治肺癌化疗引起的粒细胞减少症     

DDPH对缺氧内皮细胞条件培养液致肺动脉平滑肌细胞PDGF mRNA表达的影响

利用地高辛标记的ｃＤＮＡ探针，原位检测ＤＤＰＨ［１－（２，６－二甲基苯氧基）－２－（３，４－二甲氧基苯乙胺基）丙烷酸盐］对缺氧内皮细胞条件培养液致猪ＰＡＳＭＣＰＤＧＦ基因表达的影响。实验分６组：常氧、低氧无血清培养液组（Ｎ、Ｈ组），常氧、低氧内皮细胞条件培养液组（ＮＥＣＣＭ、ＨＥＣＣＭ组），ＮＥＣＣＭ＋ＤＤＰＨ、ＨＥＣＣＭ＋ＤＤＰＨ组。用自动图像分析仪检测各组细胞ＰＤＧＦ－Ａ和－Ｂ链杂交产物的平均光密度（ＯＤ）值。结果：ＨＥＣＣＭ组ＰＤＧＦ－Ａ和－Ｂ链ｍＲＮＡ表达量分别是ＮＥＣＣＭ组的１．４０、１．４９倍（Ｐ＜０．０１），分别是Ｎ组的１．８倍、１．７倍（Ｐ＜０．０１），ＨＥＣＣＭ＋ＤＤＰＨ组ＰＤＧＦ－Ａ、－Ｂ链ｍＲＮＡ表达量分别为ＨＥＣＣＭ的０．７３倍、０．６５倍（Ｐ＜０．０１），与ＮＥＣＣＭ组相比，均无显著差异。提示ＤＤＰＨ在ＰＤＧＦ基因转录水平抑制ＨＥＣＣＭ诱导的ＰＡＳＭＣ的增殖。     

重组人粒细胞集落刺激因子在恶性肿瘤化疗中的应用

目的评价基因重组人粒细胞集落刺激因子（ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｈｕｍａｎｇｒａｎｕｌｏｃｙｔｅｃｏｌｏｎｙ－ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇｆａｃｔｏｒ，ｒｈＧ－ＣＳＦ）对恶性肿瘤化疗后白细胞（ＷＢＣ）和中性粒细胞（ＡＮＣ）减少的防治作用。方法全组５２例；对照组２０例，为化疗后ＷＢＣ计数在１．０×１０９／Ｌ～３．０×１０９／Ｌ之间者，采用利血生、鲨肝醇等一般性治疗及中医药治疗；治疗组３２例，为化疗后ＷＢＣ计数＜３．０×１０９／Ｌ者，其中包括ＷＢＣ计数＜１．０×１０９／Ｌ，采用一般性治疗加ｒｈＧ－ＣＳＦ治疗。结果治疗组ＷＢＣ和ＡＮＣ在治疗后恢复至正常所需时间明显小于对照组（Ｐ＜０．０１）。结论ｒｈＧ－ＣＳＦ可明显缩短ＷＢＣ和ＡＮＣ降至正常以下持续的时间，促进早日恢复，使化疗可以如期进行     

8—Br—cAMP对肺癌NSCLC—3细胞凋亡相关基因表达的影响

目的：观察８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ对人肺癌ＮＳＣＬＣ－３细胞凋亡相关基因表达的影响。方法：将体外培育的ＮＳＣＬＣ－３细胞分为实验组和对照组,采用原位杂交方法观察８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ对ＮＳＣＬＧ－３细胞ｃ－ｍｙｃ、ｂｃｌ－２基因表达的影响。结果：８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ处理后的实验且较未加８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ的对照组－ｃ－ｍｙｃ,ｂｃｌ－２基因表达降低（Ｐ〈０．０１）。结论：８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ可下调与ＮＳＣＬＣ－３     

不均称型胎儿宫内生长迟缓动物模型的建立及其母鼠胎盘一氧化氮等含量的变化

为探索不均称型胎儿宫内生长迟缓动物模型的建立及探讨一氧化氮（ＮＯ）、内皮素（ＥＴ）在大鼠ＩＵ－ＧＲ发病中的作用,将ＳＤ系雌性大鼠分为３ 组。Ａ组：孕７ ｄ 起被动吸烟,饮酒;Ｂ组：孕７ ｄ 起被动吸烟,孕１５ ｄ起饮酒;Ｃ组（对照组）：并于孕２０ ｄ 检测３ 组孕鼠胎盘ＮＯ 及ＥＴ含量。结果：Ａ、Ｂ两组ＩＵＧＲ发生率较对照组明显增加（Ｐ＜ ０．０１）。Ｂ组胎死率低于Ａ 组（Ｐ＜ ０．０５）。且胎仔体重减轻以肝脏为主,同时Ａ、Ｂ两组ＮＯ含量明显低于正常对照组,而ＥＴ－１ 水平则远高于对照组（Ｐ＜ ０．０１）。ＥＴ与ＮＯ比值显著增大（Ｐ＜ ０．０１）。结论：孕早期被动吸烟、饮酒可产生混合型ＩＵＧＲ动物模型。孕晚期饮酒则产生不均称型ＩＵＧＲ动物模型。且ＩＵＧＲ的发病可能与ＮＯ合成、释放减少及ＥＴ－１ 合成、释放增加有关。     

1,6—二磷酸果糖抗失血性休克实验研究

本实验观察了ＦＤＰ抗失血性休克作用。３组失血性休克大鼠分别接受５％ＦＤＰ溶液（Ａ组）、５％葡萄糖溶液（Ｂ组）和生理盐水（Ｃ组）静注。给药６０ｍｉｎ后，Ａ组ＭＡＰ为１０．４±２．１ｋＰａ，与Ｂ、Ｃ组７．９±２．４和７．７±２．６ｋＰａ间均有差异（Ｐ＜０．０１）；Ａ组动物存活率７５％，而Ｂ、Ｃ组分别为２５％和１５％（Ｐ＜０．０１）；Ａ组动脉血ｐＨ和ＰａＯ２分别为７．２４±０．１４和１３．４６±１．２２ｋＰａ，与Ｂ、Ｃ组７．１４±０．１４和１０．２９±３．８４ｋＰａ与７．０２±０．１０和７．２５±２．１２ｋＰａ间有显著差异（Ｐ＜０．０１）；Ａ组回输血液再灌流后血浆ＳＯＤ和ＭＤＡ分别为１２００±１２６Ｕｍｌ－１和０．４７±０．２５ｎｍｏｌｍｌ－１，同Ｂ、Ｃ组１０８１±１１９Ｕｍｌ－１和０．９１±０．２９ｎｍｏｌ－１与８３５±９Ｕｍｌ－１和１．１３±０．１６ｎｍｏｌ－１间均有显著差异（Ｐ＜０．０１）。结果表明ＦＤＰ保护组织损伤而产生抗休克作用。     

Masugi肾炎血清抗体,补体含量的变化及意义

目的：了解马杉肾炎（ＭＧＮ）血清抗体、补体的变化及意义。方法：建立家兔ＭＧＮ模型，测定血清ＩｇＭ、ＩｇＧ、ＩｇＡ、Ｃ３、Ｃ５、ＢＵＮｅｙ ＳＣｒ含蜈。结果：家兔于造模后第５，１０，１５ｄ血清ＩｇＭ分别是对照组的２．６，２．９，２．３倍（Ｐ〈０．０１），Ｃ３是对照组的１．３，２．５，２．６倍（Ｐ〈０．０１）。并且Ｃ３与ＢＵＮ、ＳＣｒ，Ｃ５与ＢＵＮ、ＳＣｒ含量分别是对照组的３．７，３．８倍及４．２，７     

微波和中药治疗慢性宫颈炎临床观察

将２７９例慢性宫颈炎患者随机分为三组，Ａ组单用微波行组织凝固治疗；Ｂ组用中药妇科千金片治疗；Ｃ组微波加中药治疗。结果Ａ组治疗慢性宫颈炎一次治愈率９１％，Ｂ组一次治愈率３４１％，Ｃ组一次治愈率９８９％。经统计学方法数据采用χ２检验处理，３组疗效差异有非常显著意义（Ｐ＜０．００５）。３组治疗后的不良反应，Ａ、Ｃ两组各有２例出血，并有阴道排液、Ｂ组无不良反应，结果表明：微波加中药治疗组一次性治愈率高，单用微波次之，单用中药最差。     

刺五加在大鼠实验性肝癌诱发过程中作用的探讨

目的探讨大鼠实验性肝癌发病中刺五加对肌体免疫功能和抗氧化酶活性的影响。方法４６只ＳＤ雄性大鼠被随机分成对照组（喂普通饲料）、３－甲基４－双甲氨基偶氮苯（３－Ｍｅ－ＤＡＢ）组（喂含０．０６％３Ｍｅ－ＤＡＢ饲料 １０周）和刺五加组（饲喂同 ３－Ｍｅ－ＤＡＢ外、另加入刺五加 ４．５ｇ／ｋｇ饲料,用常规方法检测全血谷光甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－ＰＸ）、血清超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性和丙二醛（ＭＤＡ）含量,用微量化学发光造检测吞噬细胞活性（ＰＭＮ－ＣＬ）。结果１．ＰＭＮ－ＣＬ检测峰值、积分值和吞噬细胞指数,３－ＭｅＤＡＢ组较正常组和刺五加组均有显著升高（Ｐ＜０．０５和Ｐ＜０．０１）２．全血ＧＳＨ－ＰＸ活性、ＳＯＤ活性,刺五加组较３－ＭｅＤＡＢ组均有显著升高（Ｐ＜０．０５）。ＭＤＡ含量刺五加组和３－ＭｅＤＡＢ组均较正常组升高（均Ｐ＜０．０５）。结论刺五加在大鼠实验性肝癌诱发过程中有提高抗氧化酶活性和对抗致癌剂引起的机体中性粒细胞吞噬功能代偿性增高的作用。     

5/6肾大部分切除大鼠甲状旁腺细胞凋亡的变化及钙三醇的调节作用

目的：探讨慢性肾功能衰竭（ＣＲＦ）大鼠甲状旁腺细胞凋亡的变化以及钙三醇的调控作用。方法：研究对象为ＳＤ大鼠，分３组：Ａ组：ＣＲＦ组；Ｂ组：ＣＲＦ加用钙三醇组，每天皮下注射钙三醇５０ｎｇ；Ｃ组：假手术对照组。术后８周，采用流式细胞术检测大鼠甲状旁腺凋亡细胞比率（ＡＰＯ）和细胞周期，同时检测血清肌酐（ＳＣｒ）、Ｃａ＋｛２＋｝、Ｐ＋｛３－｝、碱性磷酸酶（ＡＬＰ）、全段甲状旁腺素（ｉＰＴＨ）以及尿内生肌酐清除率（ＣＣｒ）。结果：Ａ组和Ｂ组大鼠ＣＣｒ均较Ｃ组下降了近一半；Ａ组ＡＬＰ和ｉＰＴＨ显著高于Ｂ组和Ｃ组（％Ｐ％＜０．０１），而Ｂ组和Ｃ组差异无显著性（％Ｐ％＞０．０５）；Ａ组ＡＰＯ、Ｓ期细胞比率（ＳＰＲ）和增殖指数（ＰＩ）分别为（０．２３±０．１９）％、（１１．９９±２．７３）％和（１６．９３±３．４２）％，Ｂ组分别为（１．３２±０．５１）％、（２．９５±１．５８）％、（５．２４±２．２９）％，Ｃ组分别为（１．２９±０．４５）％、（０．７３±０．４６）％、（１．７６±０．７０）％，Ａ组ＡＰＯ显著低于Ｂ组和Ｃ组（％Ｐ％＜０．０１），Ａ组ＳＰＲ和ＰＩ显著高于Ｂ组和Ｃ组（％Ｐ％＜０．０１），但Ｂ组ＳＰＲ和ＰＩ仍高于Ｃ组     

涎腺肿瘤中C—erbB—2,PCNA和p16蛋白的表达及临床病理学意义

目的：探讨抑癌基因ｐ１６、原癌基因Ｃ－ｅｒｂＢ－２、增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）在涎腺肿瘤中的异常表达与肿病理生物学特征间的关系及临床意义,为涎腺恶性肿瘤有效防治提供实验科学依据。方法：应用免疫组化ＬＳＡＢ法检测涎腺恶性肿瘤３０例、涎腺多形性腺瘤３１例及涎腺非肿瘤组织１４例的Ｃ－ｅｒｂＢ－２、ＰＣＮＡ及ｐ１６蛋白的表达及变化。结果：多形性腺瘤中Ｃ－ｅｒｂＢ－２、ＰＣＮＡ、ｐ１６阳性率分别为３８．７％、７１．０％、７７．４％,均低于涎腺恶性肿瘤阳性率７６．７％、８６．７％、８０．０％,但仅Ｃ－ｅｒｂＢ－２两者间Ｐ〈０．０５。涎腺恶性肿瘤中ＰＣＮＡ与Ｃ－ｅｒｂＢ－２、ｐ１６间无相关性（Ｐ〉０．０５）。结论：（１）免疫组化法检测抑癌基因ｐ１６、原癌基因Ｃ－ｅｒｂＢ－２、ＰＣＮＡ在细胞内的表达可对良恶性病变从分子水平进行     

颗粒细胞集落刺激因子在白细胞减少血液病中的应用

对２４例恶性血液病患者于化疗结束后次日应用颗粒细胞集落刺激因子（ｒｈＧ－ＣＳＦ）１００μｇ·ｄ－１，皮下注射，连用５～７天，最短３天，最长２０天。并选择同期恶性血液病化疗２０例作为对照组。结果发现化疗后末梢血ＷＢＣ＞４．０×１０９·Ｌ－１或ＡＮＣ＞２．０×１０９·Ｌ－１；恢复时间，治疗组明显短于对照组（Ｐ＜０．０１）；治疗组化疗后发热并发感染的天数短于对照组（Ｐ＜０．０５）。在治疗组患者中未出现明显副作用。表明ｒｈＧ－ＣＳＦ有使化疗后患者末梢血ＷＢＣ、特别是ＡＮＣ恢复加快，减少感染的作用。     

神经母细胞瘤中NSE、S-100、CGA及p53、p21、C-erb-B_2蛋白表达与分化程度关系的研究

回顾性研究了４９例原诊断为神经母细胞瘤（ＮＢ），神经节神经母细胞瘤（ＧＮＢ）和神经节细胞瘤（ＧＮ）的病理资料。结果表明，这３种肿瘤为分化程度不同的同源性肿瘤，统称为神经母细胞瘤。应用免疫组化方法检测ＮＳＥ、Ｓ－１００、ＣＧＡ和ｐ５３、Ｃ－ｅｒｂ－Ｂ２、ｐ２１在该肿瘤中的表达和分布，发现ＮＳＥ、Ｓ－１００和ＣＧＡ阳性率分别为８５％、７３％和５０％，在肿瘤的Ⅰ～Ⅳ级之间，分化越好者阳性率越高（Ｐ＜０．０５），可做为临床鉴别诊断的估计预后的指标；ｐ５３、Ｃ－ｅｒｂ－Ｂ２和ｐ２１在肿瘤各级中均有表达，提示在该肿瘤发生中抑癌基因突变和原癌基因激活起一定的作用，其中低分化组ｐ５３蛋白的表达明显强于高分化组（Ｐ＜０．０５），亦可做为估计肿瘤预后的指标     

重组人血管抑素的纯化和生物活性鉴定

目的：纯化大肠杆菌表达的重组人血管抑素（ｒｈＡＧＮ）并鉴定其抗血管生成生物活性。方法：通过超声破碎、包涵体洗涤、Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－１００ 凝胶过滤层析等步骤初步纯化ｒｈＡＧＮ,Ｌｏｗｒｙ法测定蛋白浓度,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析观察其纯度;应用 ＭＴＴ法观察在终浓度为 ０．１～３．０ ｍｇ／Ｌ范围内 ｒｈＡＧＮ对 １０ μｇ／Ｌ ＥＧＦ刺激的人真皮微血管内皮细胞系ＨＤＭＥＣ的增殖抑制活性;以ＰＢＳ为对照（ｎ＝５）,应用原位鸡胚绒毛尿囊膜（ＣＡＭ）技术观察１００ μｇ／只（ｎ＝５）和２００ μｇ／只（ｎ＝５）ｒｈＡＧＮ作用７２ ｈ对３０ｎｇ ｂＦＧＦ 诱导的鸡胚ＣＡＭ毛细血管生成的抑制作用。结果：①ｒｈＡＧＮ电泳纯度达到 ９６％,总回收率为 ６１．７％;②ｒｈＡＧＮ对 ＨＤＭＥＣ细胞增殖的最大抑制剂量约为 ２．０ ｍｇ／Ｌ,抑制率约９２．３％．半数最大抑制剂量在１．０ ｍｇ／Ｌ附近;③１００ μｇ／只和２００ μｇ／只ｒｈＡＧＮ组鸡胚ＣＡＭ 载样滤纸片下毛细血管数目分别为７９±２３条和３７±１１条,两组间比较差异显著（Ｐ＜０．０５）;与对照组（１４５±３６条）相比,均有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。结论：ｒｈＡＧＮ达到了较高的电泳纯度,     

PCR-SSCP法检测小儿原发性肾病综合征载脂蛋白E基因多态性

目的探讨小儿原发性肾病综合征（ＮＳ）脂质代谢紊乱机制。方法测定了６８例小儿ＮＳ及 １２０例健康对照组 ７项血脂指标,采用聚合酶链反应－单链构象多态性（ ＰＣＲ－ ＳＳＣＰ）技术检测其载脂蛋白Ｅ（ＡｐｏＥ）基因多态性。并采用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测ＮＳ组尿蛋白类型。结果所有７项指标在携不同 ＡｐｏＥ等位基因（Ａｐｏε２、Ａ ｐｏε３及 Ａｐｏε４）的患儿之间均无显著性差异（ Ｐ＞０． ０５）,而携Ａｐｏε３等位基因型的选择性蛋白尿（ＳＰＵ）组血总胆固醇（ＴＣ）、甘油三酯（ＴＧ）显著高于同型的非选择性蛋白尿组（ＮＳＰＵ）（ Ｐ＜ ０． ０５）。 ＮＳＰＵ组的 Ａｐｏε２等位基因频率显著高于健康儿童组（ １２．９６％ ｖｓ ５． ００％, Ｐ＜ ０． ０５）。结论小儿原发性 ＮＳ的脂质紊乱主要与其蛋白代谢异常有关而与ＡｐｏＥ基因多态性无明显关系。但携 Ａｐｏε２等位基因的 ＮＳＰＵ患儿有进行性肾脏损害的可能。     

胰岛素样生长因子及其结合蛋白水平在儿童肾病综合征中的变化

目的：了解胰岛素样生长因子（ＩＧＦⅠ）及其结合蛋白（ＩＧＦＢＰｓ）水平在儿童肾病综合征（ＮＳ）中的变化。方法：用免疫放射法和放射免疫法对２０名ＮＳ患儿,即ＮＳ活动期组（ＮＳＡ组,ｎ＝１１）和ＮＳ缓解期组（ＲＥ组,ｎ＝９）进行了血清ＩＧＦⅠ和ＩＧＦＢＰｓ水平测定;并以同年龄组正常儿童（ＮＣ组,ｎ＝１０）作对照。结果：与ＮＣ组比较,ＮＳＡ组血清ＩＧＦⅠ、ＩＧＦＢＰ３明显下降（Ｐ＜００１）,ＩＧＦＢＰ１和ＩＧＦＢＰ２均明显升高（Ｐ＜００１）;ＲＥ组的血清ＩＧＦⅠ及ＩＧＦＢＰ１、ＩＧＦＢＰ２和ＩＧＦＢＰ３均可恢复正常;ＮＳＡ组血清ＩＧＦＢＰ３与白蛋白存在明显相关关系（ｒ＝０７６,Ｐ＜００１）。结论：ＮＳ活动期存在着ＩＧＦⅠ和ＩＧＦＢＰｓ的异常改变,但缓解期可完全恢复正常;ＩＧＦⅠ和ＩＧＦＢＰｓ的异常改变可能与ＮＳ患儿生长障碍有关     

肾脏疾病患者血脂及载脂蛋白：AⅠB100CⅡ的测定及其临床意义探讨

对２８例肾病综合征（ＮＳ），２４例慢性肾炎，１９例慢性肾衰（ＣＲＦ）及５０例健康人血脂及载脂蛋白进行了测定，结果显示：ＮＳ组和慢性肾炎组病人甘油三脂（ＴＧ）明显高于正常组（Ｐ＜０．０１）健康者，尤以ＮＳ组为著（Ｐ＜０．０５），两组高ＴＧ血症发生率分别为７５．６％和６２．５％；ＮＳ组ａｐｏＡⅠ和ＣⅡ明显升高（Ｐ＜００５和＜００１），ａｐｏＢ１００无明显变化，ａｐｏＡⅠ／ａｐｏＢ比值升高；慢性肾炎组载脂蛋白无显著变化。ＣＲＦ组高ＴＧ血症发生率为４５．６％，但其含量与正常组比较无明显改变（Ｐ＞００５）；ａｐｏＡⅠ，ａｐｏＣⅡ含量明显降低（Ｐ＜００１和＜００５），ａｐｏＢ１００明显升高（Ｐ＜００１），ａｐｏＡⅠ／ａｐｏＢ１００比值明显下降。