免疫酶标法检测犬脑组织狂犬病毒的实验研究

目的 用免疫酶标技术对犬脑组织狂犬病毒抗原进行分析。方法 应用单克隆抗体和免疫酶标技术标记犬脑组织中狂犬病毒抗原。结果 在以HE法检测全部阴性的48例狗脑组织中，有2例呈阳性反应，阳性率为4.17％。大脑、海马区出现明显的弥漫型和局灶型阳性颗粒，结论 免疫组化单克隆抗体标记狂犬病毒其敏感度高，可提高狂犬病毒的诊断率；对研究狂犬病毒在犬脑组织神经细胞的分布有一定的意义。     

提高石蜡切片ABC法免疫组化染色质量的改进方法

免疫组化染色是目前病理形态研究和临床病理诊断中新兴起的重要技术手段,免疫组化染色技术日新月异,发展速度惊人。在免疫组化酶标染色方法中,卵白素一生物化过氧化物酶复合物法(简称ABC法)是当今较为理想的一种免疫组化酶标染色法,它具有敏感性高、特异性强、方法简便、应用面广等特点。我们经过多次实际应用,认为ABC法在敏感性、特异     

免疫组化染色、常规特染及组织化学套染技术探讨

<正> 免疫组化技术已日趋普及,随之发展的免疫酶标染色与常规特染及组化染色的套染技术亦屡见报道。我们在纤维组织细胞性肿瘤的组织学、组织化学、超微结构和免疫组化研究中,除制做免疫组化染色外,还需做HE染色、网状纤维、Pollak’s三重染色、弹力纤维染色、普鲁氏蓝铁反应、AB—PAS染色等多种染色。我们取其需要观察的切片,应用免疫酶标的常规ABC法,在其第六步DAB显色后,对上述特染及组织化学套染技术进行了初步探讨,现小结如下。     

免疫荧光技术和免疫酶标法在T淋巴细胞亚群检测中的应用体会

用McAb检测T淋巴细胞亚群的方法有多种，如生物素一亲和生物素一辣根过氧化物酶复合法，免疫金银法，免疫酶标法(APAAP法)、荧光抗体技术和流式细胞仪技术，其中FACS方法先进，但仪器价格昂贵，目前还只能在少数实验室使用。我们实验室目前使用的是荧光抗体技术和APAAP法，经反复摸索实验，将两种方法介绍如下。     

金标与酶标测乙肝表面抗原阳性率的比较

目的 比较金标与酶标测乙肝表面抗原的阳性率。方法 用免疫胶体金和酶联免疫吸附实验测乙肝表面抗原。结果 酶标测得阳性率为5．04％，金标测得的阳性率为4．71％。结论 酶标的方法要比金标敏感。     

碱性磷酸酶与免疫金银混合双重染色

常用的免疫组化双重标记方法有免疫荧光双重标记、免疫酶双重标记、免疫胶体金双重标记。随着免疫组织化学技术的发展,新近相继建立了混合双重免疫组化技术,如免疫荧光——PAP法、免疫荧光——ABC法、胶体金——ABC法及胶体金——PAP法等。本     

应用国产过氧化物酶标抗体法检测血清抗核抗体——大白鼠肝组织印片单层细胞法

近年来,应用酶标技术测定血清抗核抗体以诊断自身免疫性疾病陆续有所报道。此法灵敏度可与放射免疫法相当,其技术要求和设备较免疫荧光法简便,在一般光学显微镜下即可观察,酶标染色细胞结构清晰,标本也可保存。本文介绍用国产过氧化物酶自行制备酶标抗体,对比了酶标法和荧光法的优缺点,并对实验方法中某些有关因素进行了探讨。     

免疫组化S-P法操作1010例病理切片体会

免疫组织化学染色方法繁多,正确选择染色方法对免疫组化技术的普及和开展至关重要.S-P方法是(链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法)20世纪90年代出现的免疫组化染色方法,因其灵敏度高、操作简便、价格较低而在我国逐渐普及.近年来,我科共做了1010例免疫组化,结果较稳定,现总结如下.     

酶标法的基本理论和技术

免疫酶标技术由于具有灵敏度高、特异性强、操作简便快速、无放射性物质污染和不需要昂贵仪器设备等优点已成为当今应用最广、发展最快的免疫标记技术之一。而酶联免疫吸附试验简称酶标法(ELISA)是根据酶免疫测定发展的一种固相免疫酶技术,它具有简便、快速、准确、特异性强、灵敏度高、可重复性强,试剂制备容易、稳定、有效期长、剂量少,设备为一般实验室所具备,易于推广等优点,结果可以用肉眼观察,也可借助简单仪     

一种改良NaIO_4标记法应用于HRP-IgG及其在GSH-Px研究

谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)是体内一种重要的抗脂质过氧化物酶,近年来,免疫酶技术在研究GSH-Px细胞内分布、代谢等方面得到广泛应用。这种技术需要重复性好,效果优良的标记法和高效稳定的酶标抗体。传统的辣根过氧化物酶(HRP)标记抗体的过碘酸钠法(Nakane法),酶活性显著下降和IgG-HRP大分子聚合物的形成,影响了GSH-Px抗原抗体反应的敏感性,为克服这一缺陷,木文采用一种新的HRP标记IgG过碘酸钠法,将标记物用于GSH-Px的酶联免疫吸附测定(ELISA)法、免疫组化及免疫电镜研究,取得满意结果。     

用于石腊切片的简便免疫酶标方法

<正> 利用特异抗体与过氧化物酶结合的免疫酶标方法,可以检查组织、细胞内存在的多种物质、如激素、抗体、病原体、甲胎蛋白和某些酶等。这种方法特异性高,能较为精确地确定所要检查物质的部位和性质,所以已经广泛应用于各种研究工作中。免疫酶标技术也常用来研究淋巴系细胞表面或/和胞浆内的免疫球蛋白,以及检查单     

小巨核细胞免疫酶标染色在骨髓增生异常综合症诊断中的应用

小巨核细胞常见于恶性骨髓增生疾病的骨髓中,由于形态与淋巴细胞相似,故易混淆.而单克隆抗体免疫酶标染色对巨核细胞具有标异性.我们应用免疫酶标ABC染色观察了某些类型贫血性疾病骨髓小巨核细胞.结果表明,用免疫酶标染色检查小巨核细胞,对各类型贫血性疾病与骨髓增生异常综合症(MDS)有鉴别诊断价值.……     

表面微粒化酶联免疫固相载体的开发研究

目的:比较表面微粒化酶联免疫固相载体与平整光滑聚苯乙烯固相载体对HCV实验的影响.方法:在相同条件下,在采用华大吉比爱丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒(酶联免疫法)原理的前提下,运用表面微粒化酶联免疫固相载体包被酶标板,与华大吉比爱试剂盒对照检测企业内部质控血清.结果:用表面微粒化酶标板包被的酶标板试验灵敏度、特异性及精密度明显好于华大吉比爱聚苯乙烯酶标板.结论:表面微粒化酶联免疫固相载体包被酶标板的开发研究应用将是未来发展的新趋势.     

蝙蝠血清IgG的纯化及兔抗蝙蝠IgG酶标抗体的制备

目的纯化蝙蝠血清IgG,制备兔抗蝙蝠IgG酶标抗体。方法采用亲和层析纯化法纯化蝙蝠血清IgG,SDS-PAGE电泳鉴定蝙蝠IgG纯度。免疫大白兔制备兔抗蝙蝠IgG抗血清,免疫双扩散法测定抗血清效价,亲和层析纯化法纯化抗血清IgG。用改良过碘酸钠标记法制备兔抗蝙蝠IgG酶标抗体,直接ELISA和Western blot法对兔抗蝙蝠IgG酶标抗体进行工作浓度测定。结果纯化的蝙蝠血清IgG,其SDS-PAGE测定纯度大于95%;免疫大白兔所制备的抗血清免疫双扩散效价为1∶64;用改良过碘酸钠标记法制备兔抗蝙蝠IgG酶标抗体,其直接ELISA和Western blot工作浓度分别为1∶12800和大于1∶2000。结论制备了蝙蝠血清IgG的抗血清和酶标抗体,为蝙蝠的血清学检测体系提供了技术和资源储备。     

免疫酶标—PCR技术在耐甲氧苯青霉素葡萄球菌检测中的应用

免疫酶标—ＰＣＲ技术在耐甲氧苯青霉素葡萄球菌检测中的应用娄金丽李颖赵玉坤白华１刘丽文１小林芳夫２（基础医学院微生物教研室，沈阳１１０００１）关键词耐甲氧苯青霉素葡萄球菌；ＭｅｃＡ基因；免疫酶标－ＰＣＲ耐甲氧苯青霉素葡萄球菌是医院内感染的重要病原菌之一...     

免疫组织化学实验技术及其临床应用（第一部分）

免疫组织化学实验技术及其临床应用（第一部分）于颖彦附属二院病理科（０５００００）关键词免疫组织化学；实验技术；临床应用免疫组织化学是在组织或细胞上进行的一种化学反应。７０年代杂交瘤技术与单克隆抗体的问世，特别是免疫酶标技术在福尔马林固定、石蜡包埋组织...     

酶标免疫实验假阴阳性原因探析

目的 比较血凝法、酶标免疫一步法与二步法测定乙肝表面抗原(HBsAg)的优缺点，避免实验中影响蛄果的因素，提高准确性。方法 分别同时用血凝法和酶标一步法测定50份血清；用一步法和二步法测定22份血清的HBsAg。结果 血凝法高效价的3份血清用酶标一步法出现假阴性；本该用酶标一步法的试剂改成二步法做的22份血清与阴性阳性对照血清全部出现假阳性。结论 酶标一步法比血凝法敏感，但可出现前带现象造成假阴性；而改用二步法，若试剂不纯则可导致假阳性。故用一步法还是二步法，应按试剂说明书的要求进行操作。     

单克隆抗体连接APAAP桥联酶标技术用于单疱性角膜炎的病毒抗原检测

将单克隆抗体连接APAAP桥联酶标技术用于免实验性Ⅰ型单纯疱疹病每性角膜炎病毒抗原的检测,确定了该方法的敏感性和诊断效果,通过与组织培养病毒分离法和间接免疫荧光法比较,提示APAAP复合物免疫酶标技术是用于诊断实验性单疱性角膜炎的一种简便、快速、特异和敏感的方法。     

大鼠心脏神经与内关穴区正中神经投射同源关系及其递质属性的实验研究

目的：观察内关穴区正中神经终末支和心脏神经的投射定位及神经递质属性。方法：本实验采用酶标示踪、免疫组化和非荧光双标方法，观察酶标阳性细胞，以确定大鼠心脏与内关穴区的神经投射定位，并检测神经元的肽类性质。结果：在C5～C7脊神经节和迷走神经节中出现辣根过氧化物酶(HRP)和类霍乱原β亚单位(CB)均为阳性的双标阳性神经元；脊神经节中有P物质(SP)、神经肽Y(NPY)、降钙素基因相关肽(CGRP)免疫组化阳性的双标细胞，迷走神经节中有SP和NPY免疫组化阳性的双标细胞。结论：心脏和内关穴区的神经纤维有一部分来自脊神经节和迷走神经节中的同一个神经元。     

微波在免疫组化染色中的应用

我们对微波炕内的免疫组化标记，与常温下的常规免疫组化标记进行观察比较。结果：利用微波进行免疫组织化学染色方法，缩短了标记染色时间，微波处理标记在阳性强度上有显著判别，而阳性分布与染色背景无明显差异。结论：利用微波技术不仅缩短了免疫标记的时间，而且可提高免疫标记的质量。