人宫颈癌组织中c-myc基因的表达

目的研究人宫颈癌组织中ｃ－ｍｙｃ基因的表达。方法应用Ｄｉｇ标记ｃＤＮＡ探针，ＤＮＡ－ｍＲＮＡ原位杂交技术检测３７例人宫颈鳞状细胞癌内癌基因ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ。结果３７例中１６例有ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ表达，检出率为４３．２４％，ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ主要分布在癌细胞胞浆内。结论ｃ－ｍｙｃ癌基因表达在宫颈癌发生中可能起作用，宫颈癌的发生可能还有更多的癌基因参与。     

慢性肝病HBVDNA,HDVRNA原位杂交及HBsAg,HBcAg研究

以特异性和敏感性较高的地高辛配基探针原位分子及免疫组化技术，对云南６８例病毒性肝炎ＣＰＨ，ＣＡＨ，肝细胞癌及癌周组织进行ＨＢＶＤＮＡ，ＨＤＶＲＮＡ，ＨＢｓＡｇ，ＨＢｃＡｇ研究，结果表明：ＨＢｓＡｇ作为靶抗原诱发机体免疫反应，参与炎症过程；除浆膜型ＨＢｃＡｇ，弥漫型，膜型ＨＢｓＡｇ外，ＨＢＶＤＮＡ在肝组织中表达也与肝炎活动性有关；     

人宫颈癌组织中c—myc基因的表达

目的 研究人宫颈癌组织中ｃ－ｍｙｃ基因的表达。方法 应用Ｄｉｇ标记ｃＤＮＡ探讨，ＤＮＡ－ｍＲＮＡ原位杂交技术检测３７例人宫颈鳞状细胞癌内癌基因ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ。结果 ３７例中１６例有ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ表达，检出率为４３．２４％，ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ主要分布在癌细胞胞浆内。结论 ｃ－ｍｙｃ癌基因表达在宫颈癌发生中可能起作用，宫颈癌的发生可能还有更多的癌基因参与。     

地高辛标记探针原位杂交对肝细胞癌HBV DNA分布的研究

为了探讨ＨＢＶ与肝细胞癌（ＨＣＣ）发病的关系，作者应用地高辛标记ＨＢＶ ＤＮＡ探针原位杂交及免疫组化检测了８０例ＨＣＣ组织及癌周肝组织的ＨＢＶ ＤＮＡ、ＨＢｓＡｇ。结果显示，癌周肝组织ＨＢＶ阳性６３例（７９％），癌组织ＨＢＶ阳性４９例（６０％），癌周阳性细胞数明显多于癌内。癌周ＨＢＶ ＤＮＡ，以复制型为主，而癌组织的ＨＢＶ ＤＮＡ大多属整合型。结果表明大多数ＨＣＣ病例与ＨＢＶ存在密切相关，而且整合     

肝细胞癌HBVDNA和癌基因表达的分子病理研究

目的：从分子水平观察肝细胞癌组织ＨＢＶＤＮＡ和癌基因的表达情况及与发病的关系。方法：应用原位核酸分子杂交技术研究４５例原发性肝细胞癌和２５例肝硬化的石蜡切片组织中ＨＢＶＤＮＡ和ｎ－ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ癌基因表达情况。结果：在肝细胞癌中见有ｎ－ｒａｓ和ｃ－ｍｙｃ表达增强，其检出率分别为６８．９％（３１／４５）和４０．０％（１８／４５），高于肝硬化组（２８．０％，８．０％）（Ｐ＜０．０５）。４０％肝细胞癌病例（１８／４５）两种癌基因同时过量表达，４５例肝细胞癌组织中有１９例存在有ＨＢＶＤＮＡ序列（４２．２％）并均具有ｎ－ｒａｓ或ｃ－ｍｙｃ过度表达。结论：两种癌基因ＨＢＶＤＮＡ可能有激活癌基因作用，肝细胞癌发生中可能起着重要的协同作用。ＨＢＶ感染与肝细胞癌发生有密切关系。     

肝细胞癌c-fos的表达及其与乙型肝炎病毒的关系

目的 研究肝癌组织中ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｃｏｆ ｍＲＮＡ的表达及其与乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）的关系。方法 采用免疫组化及原位杂交技术检测５９例肝细胞癌组织及５６例癌旁组织中ＨＢｓＡｇ、ＨＢＶ ＤＮＡ、ｃ－ｆｏｓ蛋白及ｃ－ｆｏｓ ｍＲＡＮ的表达。结果 癌旁肝组织ＨＢｓＡｇ阳性率为８７．５％（４９／５６）。肝癌组织ＨＢＶ ＤＮＡ阳性率为５９．３％（３５／５９）。肝细胞癌组织、癌旁肝组织ｃ－ｆｏｓ蛋白 阳性率     

肝细胞癌HBVDNA和癌基因表达的分子病理研究

从分子水平观察肝细胞癌ＨＢＶＤＮＡ和癌基因的表达情况及发病的关系。应用原位核酸分子杂交技术研究４５例原发性肝细胞癌和２５例肝硬化和石蜡切片组织中ＨＢＶＤＮＡ和ｎ－ｒａｓ，ｃ－ｍｙｃ癌基因表达情况。     

重庆地区HBV、HCV感染的肝癌组织中癌基因与抑癌基因的表达

提示重庆地区肝癌患者ＨＢＶ和／或ＨＣＶ的感染与癌组织中癌基因和抑癌基因表达之间的联系。方法：应用免疫组织化学方法检测ＨＢＶ和ＨＣＶ抗原以诊断ＨＢＶ和ＨＣＶ感染,癌基因ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ、ｃ－ｅｒｂＢ－２和抑癌基因Ｐ５３蛋白的表达也用免疫 经方法检测。结果４６例肝癌患者中,ＨＢＶ感染３４例,ＨＣＶ感染２０例;其癌组织中ｒａｓ ｐ２１、ｃ－ｍｙｃ、ｃ－ｅｒｂＢ－２和Ｐ５３蛋白表达阳性率分别为５８．７％     

人肝细胞癌及癌旁肝组织HBV-DNA的原位杂交检测

①目的探讨乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ与增生结节和肝癌的关系。②方法应用原位杂交技术检测５８例肝细胞癌（ＨＣＣ）及癌旁组织中ＨＢＶ－ＤＮＡ的表达。③结果肝细胞癌及癌旁组织中ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率分别为３７．９％（２２／５８）和４４．８％（２６／５８），差异无显著性（χ２＝０．５６，Ｐ＞０．０５）。ＨＢＶ－ＤＮＡ在癌旁组织中主要位于胞浆内，而肝癌组织中以胞核定位为主。２２例ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性的ＨＣＣ中，１６例ＨＣＣ及癌旁组织均阳性，６例ＨＣＣ单独阳性，两者差异有显著性（χ２＝９．０９，Ｐ＜０．０１）。６例癌旁增生结节中ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性（６／２７），以胞核定位为主。④结论ＨＢＶ感染与ＨＣＣ存在密切关系。癌周组织ＨＢＶ－ＤＮＡ以复制型为主，癌组织内ＨＢＶ－ＤＮＡ以整合型为主；癌旁增生结节为ＨＣＣ的癌前病变。     

肝细胞癌和癌旁肝组织中c－myc，N－ras癌基因的表达

应用生物素标记的ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓｃＤＮＡ探针对２１例肝细胞癌石蜡切片进行原位杂交研究，结果显示，在２１例肝癌组织中９例呈ｃ－ｍｙｃ阳性（４２．９％），４例为Ｎ－ｒａｓ阳性（１９％），而癌旁肝组织中仅有４例呈ｃ－ｍｙｃ弱阳性，１例呈Ｎ－ｒａｓ弱阳性．Ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓ，ｍＲＮＡ多分布于肝癌细胞胞浆中，显微分光光度计检测结果显示，肝癌细胞中ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓ，ｍＲＮＡ阳性信号明显高于癌旁肝细胞．作者认为，ｃ－ｍｙｃ，Ｎ－ｒａｓ癌基因在肝细胞癌中均可呈较高水平表达．二者参与了肝癌的恶性转化过程并在肝癌的发生过程中相互协同以维持肝癌的恶性表型．     

HBV DNA原位杂交与HBsAg免疫金银法双标记技术

用生物素标记HBV DNA探针与免疫金银法相结合,对5例慢性活动性乙型肝炎肝组织进行了原位杂交与免疫组化双染色。结果显示,在同一组织切片上,HBV DNA阳性物(鲜红色)与HBsAg阳性物(黑色)对比鲜明,背景清晰,组织结构完整,方法稳定。文中讨论了影响双染色的几个重要因素。     

乙型肝炎病毒相关性肝癌与p53基因变化的关系

目的：探讨与ＨＢＶ感染相关的肝癌其ｐ５３基因变化及意义，方法：收集１６例西安地区的肝癌及其旁肝组织，应用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交检测了组织中ＨＢＶＤＮＡ的状态，免疫组化确定ＨＢＶ的ＨＢｓＡｇ，ＨＢｘＡｇ和肿瘤抑制基因Ｐ５３蛋白的分布，采用ＰＣＲ扩增后直接ＤＮＡ序列分析，检测了ｐ５３基因第５～８外显子的基因序列。结果：１６例中１３例ＨＢＶＤＮＡＳｏｕｔｈｅｒｎ杂交阳性，１０例癌组织和１３例癌旁组织ＨＢｘ     

原发型肝癌的肝内HBVDNA整合状况

应用~(32)P标记的克隆HBVDNA片段探针对30例原发型肝癌病人的肝内组织进行了DNA电泳转移Southern杂交。结果检出HBVDNA整合者21例(70％),其中癌组织整合者18例(60％),癌外组织整合者16例(53％),双份组织均整合者13例(43％)。杂交带分析发现,不同例和同例肝内不同组织的HBVDNA整合模式都不相同,提示整合具随机性并可能发生整合和/或侧翼序列的基因重排。由于探针含HBV基因组中1.4～2.8kb的DNA顺序,故结果实际反映S基因及其下游增强子的整合状况。基因重排和增强子插入整合并活化细胞原癌基因的致癌机理在本文也进行了初步探讨。     

慢性肝病,肝癌及癌旁组织的免疫组织化学和组织化学研究

作者应用PAP组织化学法和组织化学染色法,对39例慢性肝病(CLD)、8例肝癌(HCC)和癌旁组织HBsAg、HBcAg表达和分布与CLD病变活动性的关系,以及乙肝病毒(HBV)与HCC发生的关系进行了探讨,并观察了CLD中网状纤维和胶原纤维的改变。发现慢活肝和活动性肝硬变以浆膜HBcAg和胞膜HBsAg表达为主,与活动性病变关系密切,观察到网状纤维较早出现于碎屑状坏死区。同时发现癌旁肝组织HBsAg和HBcAg检出数较高,且常见于双核肝细胞内,而肝癌为阴性。结果提示:浆膜HBcAg和胞膜HBsAg可能为CLD肝细胞免疫损伤的主要靶抗原,是引起CLD病变反复活动、呈慢性化的主要原因之一。结果也提示:HBV感染与HCC发生的关系极为密切。     

乙型病毒性肝炎与肝癌关系的流行病学研究

本文综合扶绥等地10多年来进行乙型病毒性肝炎与肝癌关系的系列流行病学研究结果:(1)肝癌高低发区HBsAg对比调查,凡采用灵敏性较差的检测方法,往往有不平行关系;若采用灵敏性高的RIA法,无论成人或儿童都表现出明显的平行关系.(2)反复、多次肝癌户与非肝癌户家庭成员的HBsAg检测及病例(对照)研究、前瞻性研究都一致证明乙型肝炎与肝癌有非常密切的关系.病例对照研究最高的OR值达21倍,前瞻性研究最高的RR为44.03倍.(3)两次前瞻性研究结合HBV感染,黄曲霉毒素的调查分析;认为扶绥县肝癌高发,HBV感染是一重要因素,但不是唯一的因素,明显的表示与黄曲霉毒素摄入有相互的协同作用.     

生物素标记HBV DNA探针在肝石蜡切片上作原位杂交技术的研究——各型肝病时HBV DNA的定位及形态

报告用生物素标记HBV DNA探针原位杂交技术,现察75例慢性肝病者肝石蜡切片上HBV DNA定位及形态。共检出HBV DNA阳性者25/75例(33.33％)。其中:CPH2/7例、CAH10/21例、肝硬化0/3例、SS4/11例、无症状HBsAg携带者4/21例和HCC5/12例。HBVDNA在肝切片上呈棕黄色粗颗粒状,主要分布于肝细胞浆内,个别核内亦可见少数浅染棕黄色颗粒。阳性肝细胞分布有三种形式:Ⅰ型(弥漫型):25例中有4例(16％),Ⅱ型(局灶型):20例(80％),Ⅲ型(散在型):仅1例(4％)。颗粒在胞浆内亦有a型(密集)和b型(稀疏)之分。各型乙型肝炎HBV DNA在肝切片上定位与分布不完全相同,可能表示不同的病毒感染状态和复制的活跃程度。HCC只在癌旁肝组织内查见HBV DNA。     

丁型肝炎病人肝组织HDAg与HBsAg/HBcAg和HBV DNA表达及关系

目的：探讨丁型肝炎病人肝组织中ＨＤＡｇ与ＨＢｓＡｇ／ＨＢｃＡｇ和ＨＢＶＤＮＡ表达及关系。方法：应用免疫组化双重染色和原位杂交,检测７９例丁型肝炎病人肝组织ＨＤＡｇ、ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ和ＨＢＶＤＮＡ表达,以５２例乙型肝炎作对照。结果：丁型肝炎ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ检出率（８１％、７１％）较乙型肝炎（９４％、９２％）低（Ｐ〈０．０５或０．０１）。ＨＤＡｇ以肝细胞核表达为主,ＨＢｓＡｇ以肝细胞浆表达     

肝细胞浆内HBV DNA与HBV感染状态关系的探讨

在原位杂交研究的基础上,本文对慢性乙肝患者胞浆型HBV DNA及肝内其它乙肝指标进行综合分析。发现胞浆型HBV DNA可分3种类型:①肝内同时有核衣壳蛋白(HBcAg)与包膜蛋白(HBsAg)表达,此与HBV复制的产物表达特征一致;②肝内仅有HBsAg表达,此与HBVDNA和宿主基因组整合后的表达特点相似;③肝内HBsAg、HBcAg表达均缺如,可能代表一种HBV非复制状态。由此表明在HBV非复制期,出现胞浆HBV DNA杂交信号可能系DNA RNA杂交体所致。     

原发性肝细胞癌p53基因突变检测

为了解在黄曲霉毒素Ｂ１（ＡＦＢ１）低含量区以ＨＢＶ为主要危险因素的ＨＣＣｐ５３基因突变情况，并分析它与ＨＢＶ及其它因素的关系，作者筛检了成都地区３２例原发性肝癌（ＨＣＣ），分别应用ＰＣＲ－ＲＦＬＰＳｏｕｔｈｅｒｎ吸印杂交及免疫组化染色法检测了３２例ＨＣＣ及２７份癌旁肝组织中ｐ５３基因突变、ＨＢＶＤＮＡ整合及ＨＢｓＡｇ表达。结果：所有ＨＣＣ病例均感染过ＨＢＶ，肝癌细胞中ＨＢＶＤＮＡ整合率７１．９％，癌旁组织均有肝硬化或／和慢活肝病变，且ＨＢｓＡｇ表达率９６．３％。３２例ＨＣＣ中检出８例Ｐ５３蛋白阳性（２５％），这种改变与ＨＢＶＤＮＡ整合及ＨＢｓＡｇ表达无明显关系，而与ＨＣＣ发生年龄有关；３２例ＨＣＣ组织中有２例ｐ５３基因第２４９号编码子突变（６．２５％），明显低于ＡＦＢ１高含量区ＨＣＣ，而与台湾、日本等ＡＦＢ１低含量区报道一致，提示：成都地区ＨＣＣ与ＨＢＶ感染确有密切关系；ｐ５３改变在ＨＣＣ发生上有一定作用，但是多数ＨＣＣ并无ｐ５３基因突变又提示ＨＣＣ发生尚涉及其它复杂机制；ＨＢＶ在ＨＣＣｐ５３基因改变中的作用机制值得进一步探索。