Expression of interleukin-12 and its signaling molecules in peripheral blood mononuclear cells in systemic lupus erythematosus patients

目的：检测白细胞介素-12(IL-12)在系统性红斑狼疮（SLE）患体外培养的外周血单个核细胞的表达及对STAT3和STAT4信号传导分子的作用。方法：采用RT-PCR和免疫印迹分别对39例SLE病人和11例正常人进行对照研究,培养的细胞上清液中的IL-12水平应用ELISA法检测。结果：IL-12的蛋白和基因水平在狼疮活动及静止期均较正常对照高,PHA能促进IL-12的表达。IL-12能够单独诱导STAT3和STAT4的活化,尤其是在SLE活动期;然而IL-12对正常PBMC没有作用;以IL-12 PHA处理正常PBMC时,可以观察到STAT3和STAT4的活化。结论：IL-12可通过异常磷酸化的STAT3和STAT4信号分子在SLE中发挥生物学作用。     

系统性红斑狼疮患者STAT4基因mRNA和血清中IL-12、IFN-γ的表达

目的研究SLE患者STAT4的表达与患者血清中细胞因子IL-12、IFN-γ的关系,探讨它们在SLE发病中的作用与狼疮疾病活动程度的关系.方法应用QPCR检测患者血液中STAT4的表达.应用ELISA方法检测正常对照组与SLE患者血清中IL-12、IFN-γ的水平.所有数据资料用Plink 1.06及SPSS16.0软件进行统计分析.结果 (1)SLE病人STAT4 mRNA的相对表达量高于正常对照组(P<0.01),STAT4表达水平与SLEDAI评分成正相关(r=0.385,P<0.05);(2)rs10181656 G等位基因的突变与STAT4 mRNA的表达水平升高有关;(3)SLE组IFN-r、IL-12含量高于正常组(P<0.01);IFN-r、IL-12含量与SLEDAI评分呈正相关(P<0.05);(4)STAT4 mRNA的表达与IFN-γ(r=0.335,P<0.05)、IL-12(r=0.401,P<0.05)显著正相关,与其他临床及实验室指标蝶形红斑(r=0.471,P<0.000)、粘膜溃疡(r=0.552,P=0.000)、浆膜炎(r=0.311,P=0.014)、肾损害(r=0.247,P=0.042)、血液损害(r=0.256,P=0.003 7)成正相关(P<0.05).结论 (1)SLE患者中STAT4基因的表达水平增高并与SLE疾病活动相关,可以作为监测病情活动性的检测指标;(2)SLE患者的IFN-γ、IL-12异常高表达,而且与SLEDAI评分呈正相关,IFN-γ、IL-12可以作为判断SLE疾病活动的参考指标.STAT4对IL-12、IFN-γ的表达有正相调节作用,在基因水平上调控IL-12、IFN-γ并促进其mRNA的表达.     

SLE患者外周血单个核细胞中信号转导子及转录激活因子4mRNA的表达及其与血清IFN-γ水平之间的相关性

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)外周血单个核细胞(PBMC)中信号转导子及转录激活因子4(STAT4)mRNA表达及其与血清干扰素(IFN-γ)水平之间的相关性。方法用TaqMan实时荧光定量聚合酶链反应法检测60例SLE患者及30例正常对照者PBMC中STAT4mRNA表达水平,用酶联免疫吸附法检测SLE患者血清中IFN-γ的水平,并分析两者之间的相关性。结果 PBMC中STAT4mRNA表达水平在SLE患者组中要显著高于正常对照组(P<0.05),并且在SLE患者病情活动组中显著高于病情非活动组(P<0.05)。SLE患者血清中IFN-γ水平检测结果为(12.71±5.68)ng/ml,并与患者PBMC中STAT4mRNA表达呈正相关(r=0.769,P<0.05)。结论 SLE患者PBMC中STAT4mRNA的表达水平高于正常,并与病情活动性及患者血清中IFN-γ水平相关。     

系统性红斑狼疮患者信号转导及转录激活因子4基因单核苷酸多态性与其mRNA表达水平的相关性研究

目的探讨系统性红斑狼疮中信号转导和转录激活因子4(STAT4)基因rs7574865位点单核苷酸多态性(SNP)与其mRNA表达水平之间的相关性。方法以TaqMan MGB探针法在163例SLE患者中对STAT4基因rs7574865位点的SNP进行分型,用TaqMan实时荧光定量聚合酶链反应法检测以上患者外周血单个核细胞(PBMC)中STAT4 mRNA表达水平,并分析两者之间的关系。结果 SLE患者中G等位基因频率为49.7%,T等位基因频率为50.3%,G/G型纯合子患者的比例为22.7%,G/T型杂合子患者的比例为65.0%,T/T型纯合子患者的比例为12.3%。具有G/T型的SLE患者的STAT4 mRNA表达水平显著高于具有G/G型或T/T型的SLE患者(P<0.05)。结论 STAT4 rs7574865位点SNP与STAT4 mRNA表达水平具有相关性,具有G/T型的SLE患者的STAT4 mRNA表达水平显著增高。     

系统性红斑狼疮患者JAK/STAT信号通路相关基因的表达水平及临床意义

目的:探讨JAK/STAT信号通路相关基因的mRNA表达水平与系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)的关联。方法:以SLE新发病例作为研究对象,以健康个体为正常对照。收集研究对象的血样,采用Q-PCR基因芯片技术检测JAK/STAT信号通路相关基因的mRNA表达水平。结果:本研究共收集SLE新发病例31例,正常对照22例。共有16个基因表达异常。其中有12个基因的表达量增加,分别是SH2B2、CDKN1A、CRK、FAS、ISG15、IFNGR1、IRF9、JAK2、OAS1、OSM、SOCS3、SPI1;有4个基因表达量减少,分别是FCER1A、PDGFRA、SIT1、RPL13A。结论:SLE患者JAK/STAT信号通路上多个环节的相关基因表达水平发生了改变。这些基因涉及信号转导、细胞凋亡、转录调节及免疫应答等多方面功能,提示JAK/STAT信号通路可能是SLE发病的重要免疫调控信号通路之一。     

STAT4基因单核苷酸多态性与云南汉族人群SLE发病的相关性研究

目的研究云南地区汉族人群STAT4基因单核甘酸多态性(SNP),探讨其与SLE疾病的易感性.方法结合国内外全基因组关联分析数据及本课题组前期研究结果,采用Sequenom MassArray质谱阵列技术对378例SLE患者和389例正常对照进行SATA4基因(rs10168266,rs10181656,rs11889341,rs13017460,rs1551443,rs16833249,rs2459611,rs3024879,rs3024886,rs3024894,rs3024895,rs3024933,rs3821236,rs4555370,rs6712821,rs7568275,rs7574865,rs7599504,rs8179673,rs932169)20个位点的基因分型.结果(1)STAT4的6个SNP等位基因频率在云南人群SLE患者和正常对照组之间的差异有统计学意义(P<0.05),并以rs10181656最为显著(P=5.41E-09),且相关程度较欧洲人群高;(2)对STAT4的SNP位点rs10181656进行分层分析,病例组中的蝶型红斑、粘膜溃疡、血液改变、肾损害、抗ds-DNA、ANA和浆膜炎与对照组之间G等位基因频率比较分布均有统计学意义(P<0.01).结论 STAT4基因多态性与云南汉族人系统性红斑狼疮易感性相关;STAT4基因rs10181656 G等位基因增加了SLE病人发生关节炎、蝶型红斑、肾损害、粘膜溃疡、抗ds-DNA、ANA、血液改变、浆膜炎的风险.     

JAK抑制剂治疗系统性红斑狼疮的研究进展

系统性红斑狼疮(SLE)是一种自身免疫性疾病,可引起致病性自身抗体和免疫复合物形成并介导器官组织损伤。常规治疗包括糖皮质激素和免疫抑制剂等,副作用较大。研究表明, JAK/STAT通路与SLE的发生息息相关,靶向JAK/STAT信号通路的JAK抑制剂治疗SLE目前虽仍处于临床试验中,但其靶向性及安全性高,是治疗SLE具有吸引力的选择。本文将就JAK抑制剂对系统性红斑狼疮的治疗进展情况进行阐述。     

喘可治注射液对慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织STAT4、STAT6蛋白表达的影响

【目的】探讨喘可治注射液对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺组织STAT4、STAT6蛋白表达的作用。【方法】采用香烟烟雾吸入加脂多糖气管滴注法复制COPD大鼠模型,随机分为正常组、模型组、卡介菌多糖核酸注射液组、喘可治注射液治疗组(中药高、中、低剂量组,7.5、3.75、1.875 mg·kg-1·d-1腹腔注射给药)。采用Western blot蛋白质印迹法检测大鼠肺组织STAT4、STAT6蛋白表达,观察喘可治注射液对COPD大鼠肺组织STAT4、STAT6蛋白表达的影响。【结果】与正常组比较,COPD大鼠肺组织STAT4蛋白表达亢进(P0.01),STAT6蛋白表达受抑(P0.01);喘可治注射液能抑制大鼠STAT4蛋白表达(P0.01),促进STAT6蛋白表达(P0.05或P0.01),作用效果与卡介菌多糖核酸注射液相仿(P0.05);STAT4、STAT6蛋白表达呈负相关性,且喘可治注射液作用后STAT6蛋白表达量越多,STAT4相应的表达量越少。【结论】喘可治注射液防治COPD的可能作用机制是通过影响STAT4和STAT6蛋白表达,干扰IL-12/STAT4和IL-4/STAT 6信号通路对Th1和Th2细胞基因表达,抑制Th1极化,进而调节Thl/Th2细胞分化失衡,减轻T细胞介导的肺部炎症和病理损害作用。     

SLE患者血清IL-4、IL-10的检测及意义

系统性红斑狼疮（SLE）是一种原因不明自身免疫性疾病。以B淋巴细胞活化增殖，产生大量自身抗体，并出现多器官非感染性炎症为特征。T淋巴细胞尤其T辅助淋巴细胞通过分泌一些细胞因子促进B淋巴细胞活化增殖、调节免疫应答，在SLE发生、发展中起重要作用，故细胞因子网络的改变在SLE发病及病程的转归中的作用不可忽视。我们采用ELISA法检测SLE患者血清IL-4及IL-10含量，以探讨SLE患者体内Th2型细胞因子IL-4、IL-10状况及意义。     

基于数据挖掘及网络药理学探讨治疗系统性红斑狼疮经验

目的 探讨系统性红斑狼疮（systemic lupuseryth ematosus,SLE）的临床用药规律以及核心药对的潜在作用机制。方法 收集2018年2月至2022年1月浙江中医药大学附属第二医院风湿免疫科,建立处方数据库,进行频数分析及关联规则分析挖掘核心治疗药对,并利用网络药理学方法对核心药对机制进行分析。结果 共有116例医案纳入研究,关联分析后发现生地黄-牡丹皮-赤芍是治疗SLE的核心药对;应用网络药理学方法筛选该药对后共获得115个药物-疾病共同靶点;hub基因网络发现STAT3、MAPK1、AKT1和白细胞介素-6（interleukin 6,IL-6）可能是核心药对治疗SLE的关键疗效靶点。结论 SLE关键病位在肝,病机以“热毒、阴虚、血瘀”为主,治疗上以调肝、清热、滋阴、祛瘀为要,并以生地黄-牡丹皮-赤芍为核心治疗药对,该药对的关键疗效靶点可能是STAT3、MAPK1、AKT1和IL-6通路。     

大鼠哮喘模型肺组织信号转导子和转录激活子4及mRNA的表达及其意义

目的 研究大鼠哮喘模型肺组织信号转导子和转录激活因子4（STAT4）蛋白及其mRNA表达的变化，探讨其在哮喘性气道炎症形成中的作用。方法 复制大鼠哮喘模型，采用免疫组织化学和组织原位杂交法检测哮喘组及对照组大鼠肺组织STAT4蛋白及其mRNA的表达。结果 STAT4蛋白及其mRNA在两组大鼠气道平滑肌细胞和肺细小动脉的血管平滑肌细胞及内皮细胞上均呈不同强度的阳性表达。对照组STAT4蛋白及其mRNA含量均高于哮喘组（均P〈0．01）。结论 哮喘大鼠气道平滑肌细胞、血管平滑肌细胞及内皮细胞STAT4蛋白及其mRNA的表达被抑制。     

信号转导通路在心肌营养素-1调解心肌转录因子GATA4表达中的作用

目的探讨（CT-1）3条主要作用通路（STAT3、ERK和PI3-K）在其致心肌肥大过程中的作用及相互关系。方法应用Parthenolide（STAT3通路阻断剂）和（或）U0126（ERK通路阻断剂）及（或）LY-294002（PI3-K通路阻断剂）预处理，再加入CT-1（0．1nmol／L）作用6h后测定各组GATA4 mRNA，作用60min后测定GATA4结合活性。结果Parthenohde可抑制CT-1引起的GATA4 mRNA的表达（P〈0.01）及结合活性的增强，U0126可以增加GATA4转录表达（P〈0．01）及GATA4结合活性，LY294002对上述过程均无影响。U0126引起的GATA4的表达增加可被Parthenohde抑制。结论CT-1主要主要通过STAT3通路发挥致肥大作用，ERK通路通过负调节STAT3通路参与CT-1肥大刺激过程，而PI3-K通路则不参与此过程。STAT3与ERK通路的相互作用共同参与CT-1的致肥大过程。     

STAT4基因缺失增强髓系抑制性细胞动员促进小鼠炎症相关肠癌的发生

目的探索信号转导与转录因子4（STAT4）对髓系抑制性细胞（MDSCs）动员和分化的调控及其在结肠癌发生发展中的作用。方法应用信号转导与转录激活因子4基因敲除（STAT4-/-）小鼠建立炎症相关肠癌模型,STAT4-/-小鼠通过腹腔注射氧化偶氮甲烷（AOM）和饮用含DSS水诱发急性肠炎,建立炎症相关结肠肿瘤模型并鉴定;应用流式细胞技术分析STAT4基因缺失对免疫细胞亚群分化和动员的影响。结果 STAT4-/-小鼠表现为明显的结肠肿瘤病变,而野生型（WT）对照组在结肠的中下段和肛门处只有炎性病变和上皮组织增生;CD11b＋Gr-1＋MDSCs在STAT4-/-小鼠的外周血、脾脏和骨髓内的百分率较WT对照组小鼠显著增加（P〈0.05）。结论 STAT4缺失能促进小鼠结肠肿瘤的发生,其机制可能与STAT4信号通路抑制导致CD11b＋Gr-1＋MDSCs的异常分化和动员有关。     

IgG4在系统性红斑狼疮患者外周血中的表达及其临床意义

目的:探讨IgG4在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血中的表达及其临床意义。方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)和条带免疫印迹法(IBT)分别检测SLE患者外周血中IgG4及IgG4型自身抗体水平，并与健康体检者对照，分析IgG4与SLE临床特征的关系。结果:在59例SLE患者中，有30例IgG4型自身抗体阳性，而健康体检者中则无。SLE患者血浆IgG4水平较健康体检者升高(P<0.05)。血浆IgG4水平升高组SLE患者间质性肺炎和胰腺受累(包括血胰淀粉酶和脂肪酶升高)的发生率均高于血浆IgG4水平正常组(P<0.05)。IgG4型自身抗体阳性的SLE患者雷诺现象、血液系统受累及间质性肺炎的发生率高于IgG4型自身抗体阴性患者(P<0.05)。结论:SLE患者血浆IgG4水平较健康体检者升高，血浆IgG4水平升高的SLE患者更易出现间质性肺炎及胰腺受累；SLE患者血清中存在IgG4型自身抗体，且IgG4型自身抗体阳性的SLE患者更易出现雷诺现象、血液系统受累及间质性肺炎。     

STAT_4基因缺失增强髓系抑制性细胞动员促进小鼠炎症相关肠癌的发生

目的探索信号转导与转录因子4(STAT4)对髓系抑制性细胞(MDSCs)动员和分化的调控及其在结肠癌发生发展中的作用。方法应用信号转导与转录激活因子4基因敲除(STAT4-/-)小鼠建立炎症相关肠癌模型,STAT4-/-小鼠通过腹腔注射氧化偶氮甲烷(AOM)和饮用含DSS水诱发急性肠炎,建立炎症相关结肠肿瘤模型并鉴定;应用流式细胞技术分析STAT4基因缺失对免疫细胞亚群分化和动员的影响。结果 STAT4-/-小鼠表现为明显的结肠肿瘤病变,而野生型(WT)对照组在结肠的中下段和肛门处只有炎性病变和上皮组织增生;CD11b+Gr-1+MDSCs在STAT4-/-小鼠的外周血、脾脏和骨髓内的百分率较WT对照组小鼠显著增加(P<0.05)。结论 STAT4缺失能促进小鼠结肠肿瘤的发生,其机制可能与STAT4信号通路抑制导致CD11b+Gr-1+MDSCs的异常分化和动员有关。     

白细胞介素12促血管平滑肌细胞增殖的实验研究

目的 观察白细胞介素12/信号传导子及转录激活子4(IL-12/STAT4)信号途径激活对体外培养的人脐动脉平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMC)增殖的影响.方法 不同浓度(2.5、5、10和20ng/mL)IL-12刺激后,用MTT法、Hoechst 33258染色法观察VSMC增殖和凋亡情况,RT-PCR、Westernblot分别检测STAT4的mRNA表达和STAT4、磷酸化STAT4(P-STAT4)的蛋白表达变化.结果 IL-12呈剂量和时间依赖促VSMC增殖,同时抑制VSMC凋亡.RT-PCR 检测发现STAT4的mRNA表达随IL-12浓度增高而增加、Western blot检测发现STAT4、P-STAT4的蛋白表达随IL-12浓度增高而增加.结论 IL-12可促进VSMC增殖,该作用可能与激活IL-12/STAT4途径有关.