近十余年先天愚型儿出生频率及其产前诊断效率探讨

通过近十余年出生的１０３名先天愚型儿、４８１名健康儿以及５０－７０年代出生的２５９６名健康人出生时母亲年龄比较发现，虽然高龄（≥３５岁）妇女与先天愚型儿出生之间的联系依然存在，但因＂一个家庭，一个孩子＂政策的实施，高龄孕产妇占孕产妇总数的比例已明显下降，这既有助于降低先天愚型儿总的出生频率，又使依赖母龄的产前诊断先天愚型胎儿的难度加大。     

Angelman综合征的诊断及其产前诊断

目的 对临床疑似Angelman综合征(Angelman syndrom,AS)的患者进行诊断并对已确诊的患儿家庭行产前诊断.方法 用高分辨染色体和荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术对患者进行检测.结果 诊断出两例AS患者和一名正常胎儿.结论 结合临床症状、高分辨核型分析、FISH可确诊Ⅰ型AS患者,为临床提供准确的遗传咨询和产前咨询,并可对有AS生育史的家庭行产前诊断.     

软性接触镜透氧系数测量方法研究

阐述利用极谱法(FATT)测量软性接触镜透氧系数(Dk)的原理,测试步骤和数据处理方法.并通过实验验证了该方法的可行性.     

实时动态连续检测呼吸气体二氧化碳和氧的生物医学传感技术研究

基于直接电流法检测非电活性气体ＣＯ２及Ｏ２干扰机理的研究，提出使用微电极并结合计算机控制的电位调制技术，发展建立了用于快速联合检测ＣＯ２和Ｏ２气体的调制电位脉冲库仑／电流法。一次测量时间快达４０ｍｓ，Ｏ２浓度检测范围不受限制，ＣＯ２分压在０～８０ｍｍＨｇ范围。通过编程设计特定的调制电位——时间波形，保持连续检测的长期稳定性。这一新的生物医学传感技术可用来无创、实时、动态连续检测呼吸气体ＣＯ２和Ｏ２     

孕中期羊水染色体产前诊断异常检出率与临床诊断相关性的研究

目的应用羊水进行细胞遗传产前诊断,探讨孕中期胎儿染色体的送检趋势,以及临床诊断与染色体异常检出率之间的相关性。方法对产前诊断送检的羊水样本进行染色体分析。收录、统计2012年10月至2013年12月共2026份送检羊水染色体检查标本的临床诊断资料与染色体结果,总结羊水染色体送检的变化,分析各临床诊断中染色体异常检出率的差异,评估在染色体异常方面的风险值。结果 2012年第四季度至2013年第二季度产前诊断羊水染色体送检数量同比变化不大,2013年第三、四季度明显下降。异常检出率最高的组别是不良孕史组,为8.77%,与总样本的异常检出率相比,差异有统计学意义(卡方检验,P值为0.03,小于0.05)。评估临床诊断检查染色体异常的风险值,无高风险或低风险诊断组别。结论孕妇无创产前筛查和CGH的开展使羊水细胞遗传产前诊断显著减少,不良孕产史的羊水染色体遗传产前检出率最高,有统计学意义;所有临床分组的风险值升高或降低不明显。     

应用~(14)C鞘磷脂为基质测定鞘磷脂酶活性-诊断和产前诊断Niemann-Pick病的方法

神经鞘磷脂贮积症（Ｎｉｅｍａｎｎ－Ｐｉｃｋ）是一种严重的致命的先天性代谢障碍病,由于鞘磷脂酶缺乏引起。临床症状常与Ｇａｕｃｈｅｒ′ｓ,病以及其他一些先天性代谢病相似。早期诊断尤为重要。本文报道应用１４Ｃ－鞘磷脂为基质,测定正常早孕绒毛细胞,培养的皮肤成纤维细胞以及白细胞的鞘磷脂酶活性的结果以供临床鉴别诊断时参考。本法比较以前采用的成色底物法灵敏、准确、简便。     

不同氧体积分数对人胚胎干细胞基因表达谱的影响

背景：低氧培养人胚胎干细胞的相关研究主要集中在干细胞多能性的维持及分化方面,而低氧对人胚胎干细胞基因表达水平的影响研究甚少。 目的：观察不同氧体积分数对人胚胎干细胞基因表达谱的影响。 方法：分别在低氧(体积分数5%O2)和常氧(体积分数21%O2)的条件下持续培养FY-hES-7细胞,收集晚期(第52代)细胞,运用全基因组表达谱芯片技术检测不同氧体积分数组FY-hES-7细胞的基因表达谱,并进行差异基因的功能富集分析及通路分析。 结果与结论：与常氧组相比,低氧组表达上调(>2倍)的基因1 840个,表达下调(>2倍)的基因1 676个。利用基因本体分析发现低氧组表达上调基因与细胞表面受体信号转导、免疫反应、离子转运、生物代谢及细胞活动等功能相关,而表达下调基因则与转录调控,依赖DNA的转录调控、神经分化、细胞形态、胚胎形态、胚胎器官及各系统发育等功能相关。通路分析发现低氧组表达上调的基因与细胞因子受体的相互作用、免疫反应以及造血系统等通路的改变相关,而表达下调的基因则多与胚胎发育及肿瘤通路改变相关。不同氧体积分数下长期培养的人胚胎干细胞基因表达谱存在明显的差异,低氧组出现差异表达基因的功能分析表明低氧有助于人胚胎干细胞的自我更新,防止分化及降低成瘤性。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的SCCmec基因型及耐药谱研究

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin-resistant Staphylococcus aureus ，MRSA）常引起医院感染的暴发流行。MRSA由于获得了外源性甲氧西林耐药决定子A（methicillin resistance determinant A，mecA），该基因编码青霉素结合蛋白2a，造成对所有β内酰胺类药物耐药。mec基因存在于葡萄球菌盒式染色体（Staphylococcal cassene chromosome mec，SCCmec）中，SCCmec是一种新型的可移动元件，不同于噬菌体和转座子，而且该元件还携带除mecA基因外的其他抗生素耐药基因，造成多重耐药。     

宽谱红外光（1100nm-1800nm）嫩肤仪的研究与设计

目的:比较现有的各种剥脱性与非剥脱性嫩肤技术的优缺点,并在介绍一种新型的利用特定波段(1100nm～1800nm)的宽谱红外光嫩肤的机理的基础上,进行相应红外光嫩肤仪器的研究与设计.方法:本文首先介绍了利用该特定波段的宽谱红外光进行嫩肤的机理,然后在借鉴国内外相关产品的基础上,自主研发,使其既能在技术指标上达到国际同行产品的规格,又能极大地降低研发及生产成本.对该嫩肤仪器的总体结构采用模块化设计,包括:控制系统模块、电源模块、红外光产生模块、人机交互模块、水冷却循环模块及开关控制模块,同时详细讨论了仪器设计中需要重点考虑的如何产生治疗所要求的红外光脉冲、人机交互界面、抗干扰设计三个方面的问题.结果:本文给出了仪器的总体结构图和所实现的人机交互界面.由实验测得的该仪器产生的宽谱红外光的技术参数完全达到了设计要求并可投人临床使用.经过反复测试,该仪器在整机运行的稳定性、可靠性,以及光头出光能量的均匀性、稳定性均方面达到红外光嫩肤美容治疗的要求.结论:该产品将具有良好的医疗美容的应用前景及市场前景.     

应用分子生物学技术产前诊断Down综合征

目的 探讨应用PCR分子生物学方法产前诊断Down综合征（Down syndrome,DS)。方法 取产前诊断病例：羊水100例，绒毛16例。提取DNA，PCR扩增21号染色体的6个多态位点，电泳，膜转移，等位基因位点分析，诊断。结果 正常人为两种带型：杂合型显示两条带，纯合型一条带。Down综合征患者为三种带型：完全杂合型显示三条带，半杂合型两条带（信号增强的2：1带），纯合型一条带。100例羊水中2例阳性，16例绒毛标本中1例阳性，3例患者，至少有2个位点检出三个等 基因，患者为2个位点时，表现2：1带型；无一例正常检出三个等位基因。所有结果均与细胞染色体核型检查相符。结论 本分子生物学方法产前诊断DS简便、快速、可行，是一种值得推广的方法。     

怀化市孕中期唐氏综合征的血清筛查和产前诊断分析

目的探讨孕中期采用甲胎蛋白(AFP)、游离β-绒毛膜促性腺激素(Free-β-HCG)、游离E3(uE3)联合筛查法在孕中期筛查唐氏综合征(DS)、神经管缺陷(NTD)及其他胎儿异常的可行性。方法应用时间分辨免疫荧光法检测孕妇血清中AFP、Free-β-HCG、uE3浓度,结合母龄、体重、孕周等个体参数,经过软件计算风险率;对高风险孕妇在知情的情况下,自愿选择进行染色体核型分析。结果 12 559例样本共筛查出高危孕妇862例,其中457例进行羊水染色体核型诊断;检出唐氏综合征儿16例,染色体结构异常27例,染色体多态11例。结论孕中期应用母血清三联法筛查,结合产前诊断是减少出生缺陷发生的有效手段之一。     

PCR-短串联重复法快速产前筛查唐氏综合征的应用价值

目的 探讨PCR短串联重复(PCR-short tandem repeat,PCR-STR)法快速产前筛查唐氏综合征(Down syndrome,DS)的应用价值及7个STR位点多态性分布特点.方法 选择21号染色体核心区域(21q22.1-21q22.2)及其附近的7个STR位点(D21S11、D21S1411、D21S1412、D21S1413、D21S1414、D21S1432、D21S2039),应用PCR-STR扩增对978例高危孕妇羊水样本和82例疑似DS患者外周血样本进行基因诊断筛查检测,并与细胞培养染色体核型分析结果比较.结果 (1)978例羊水和82例外周血样本PCR-STR检测全部成功,7个STR位点多态信息联合分析,以检出2个位点面积比或强度为1∶1∶1三条带;或1个位点1∶1∶1三条带,同时有2个位点面积比或强度为1∶2或2∶1两条带为DS基因诊断标准,共检出DS阳性40例,其中羊水14例阳性,外周血26例阳性.(2)羊水细胞培养染色体核型分析成功961例(98.3％),17例培养失败(1.7％),检出异常染色体核型44例(4.6％),其中14例为DS核型,包括12例标准DS核型,1例易位DS核型,1例嵌合DS核型.17例培养失败羊水经脐带血染色体分析证实均为正常核型.(3)82例可疑DS患者外周血培养全部成功,检出异常染色体核型30例(36.6％),其中26例为DS核型,包括22例标准DS核型,4例易位DS核型;其它异常核型4例.(4)PCR-STR法对7个STR位点联合分析,单例样本可检出1～4个位点为1∶1∶1三条带,或可见2～4个位点为面积比率或强度比为2∶1或1∶2的两条带.羊水和外周血样本DS基因诊断结果与细胞培养染色体核型分析诊断结果完全一致,PCR-STR法快速产前基因诊断DS筛查的灵敏度为100％,未发现假阳性和假阴性结果.(5)7个STR位点杂合率在0.624～0.812,D21S2039和D21S1412位点杂合度最高(＞0.80),D21S1411和D21S1432位点杂合度较低(＜0.70).D21S11和D21S2039位点检出1∶1∶1三条带比率最高(≥40％),而D21S1411、D21S1432、D21S1413位点检出单一条带(纯合率)比率最高(≥30％).结论 PCR-STR法是产前诊断DS的一种快速、有效的筛查方法,7个STR位点联合分析,提供的诊断信息量大,结果准确、可靠.     

Rapid prenatal diagnosis of Down Syndrome using quantitative fluorescent PCR in uncultured amniocytes

Rapid prenatal diagnosis of common chromosome aneuploidies have been successful through quantitative fluorescent PCR (QF-PCR) assays and small tandem repeat (STR) markers. The purpose of our study was to investigate the clinical feasibility for rapid prenatal detection of Down syndrome using the quantitative fluorescent PCR in uncultured amniocytes. DNA was extracted from uncultured amniotic fluid of normal karyotype (n=200) and of Down syndrome (n=21). It was amplified using QF-PCR with four STR markers located on chromosome 21. Among normal samples, the ranges of diallelic peaks for at least one STR marker were 1.0-1.3 for D21S11, 1.0-1.4 for D21S1411 and 1.0-1.5 for D21S1270. Down syndrome samples showed trisomic triallelic patterns or trisomic diallelic patterns. The sensitivity, specificity, and efficiency of the assay for detecting Down syndrome were 95.4%, 100%, and 99.5%, respectively. Rapid prenatal diagnosis of Down syndrome using QF-PCR is a reliable technique that aids clinical management of pregnancy.     

AIRE基因在21-三体综合征无创性产前诊断中应用的可行性研究

目的利用AIRE基因母、胎间差异甲基化,探讨其在无创性产前诊断21-三体综合征患儿中的应用价值。方法随机选择健康的孕妇、非妊娠妇女、21-三体妊娠的孕妇血浆、血细胞、绒毛和胎盘组织,利用甲基化敏感限制性内切酶法,酶切后进行常规PCR检测目的基因AIRE的甲基化模式,分析其影响因素。结果AIRE基因在非妊娠妇女的血细胞和血浆中及妊娠妇女的血细胞中均未甲基化,而在孕妇血浆中高甲基化,且与孕妇绒毛组织和胎盘组织AIRE基因甲基化状态相同,两组间甲基化率差异显著有统计学意义（P〈0．0001）。且母胎间差异甲基化不受孕妇年龄、孕周和胎儿性别的影响。孕早、中、晚期孕妇血浆中甲基化检出率分别为87％、97％、97％稍有不同,但无统计学意义。21-三体妊娠妇女血浆中游离胎儿DNA浓度约为正常孕妇血浆中游离胎儿DNA的2倍。结论在母体和胎儿DNA中AIRE基因甲基化有显著差异,可作为孕妇血浆中胎儿游离DNA表观遗传学标记,有望进行21-三体综合征的无创性产前诊断。     

孕中期超声软性标记在21三体综合征产前诊断中的作用

目的评价孕中期超声软性标记在21三体综合征产前诊断中的作用。方法对70例在孕中期因超声检查发现软性标记的孕妇进行产前诊断,超声软性标记包括胎儿颈皮厚度增加、双肾盂轻度分离、心室内强回声点、肠管回声增强、股骨及肱骨短小、脑室轻度扩张,其中仅含有一项超声软性标记的孕妇34例,含有两项或两项以上超声软性标记的孕妇36例,产前诊断方法采用羊膜腔穿刺术和脐血管穿刺术。结果在仅含有一项超声软性标记的34例孕妇中发现胎儿染色体异常5例,其中确诊21三体综合征4例,1例是染色体平衡易位。而含有两项或两项以上超声软性标记的36例孕妇未发现胎儿染色体异常。结论孕中期超声软性标记的出现增加胎儿21三体综合征的风险,特别对高龄孕妇或唐氏综合征血清筛查高风险的孕妇,应建议尽早产前咨询并考虑产前诊断。     

荧光定量PCR产前快速诊断唐氏综合征

目的探索荧光定量PCR方法在产前快速诊断唐氏综合征中的作用。方法收集65例妊娠20~24w,进行羊水穿刺胎儿细胞培养染色体核型分析的胎儿羊水,采用荧光定量PCR技术对标本D21S11位点进行PCR扩增、检测,并与染色体核型分析的结果进行对照分析。结果65例未培养羊水标本经过荧光定量PCR检测,发现2例唐氏综合征,显示1:1:1三条或2:1两条D21S11位点等位基因带,63例显示1:1两条带;与细胞培养染色体核型分析的结果基本一致。结论荧光定量PCR技术具有检测速度快、需要模板量少,检测结果准确等特点,可用于染色体异常的产前快速诊断。     

Determinants of parental decisions after the prenatal diagnosis of Down syndrome

We evaluated demographic factors and factors specific to the current pregnancy, and their relationship to the decision to continue or terminate a pregnancy after prenatal diagnosis of Down syndrome. All cases of Down syndrome (DS) managed at a tertiary care center from 1989–1997 were retrospectively analyzed with respect to maternal age, parity, gestational age, sonographic findings, insurance status, and race. Of 145 cases of trisomy 21, 19 (13.1%) of women chose continuation of pregnancy, while 126 (86.9%) chose termination. There were no differences between groups in parity, sonographic findings, insurance status, or race at the time of diagnosis. However, patients who chose termination were significantly older and earlier in gestation than those electing to continue their pregnancy. When Down syndrome is diagnosed prenatally, the choice of termination is related to maternal age and gestational age, but only gestational age is a significant independent predictor of pregnancy termination. Am. J. Med. Genet. 79:172–174, 1998. © 1998 Wiley-Liss, Inc.     

Rates of Down syndrome at livebirth by one-year maternal age intervals in studies with apparent close to complete ascertainment in populations of European origin: A proposed revised rate schedule for use in genetic and prenatal screening

Precision and accuracy in determining rates of Down syndrome at livebirth are indispensible to algorithms which determine eligibility for prenatal cytogenetic diagnostic services. We derived Down syndrome rates by single year of maternal age which we propose as a revised rate schedule for background risk. Data on European-origin populations were obtained from 5 sources judged most likely to have complete ascertainment of cases. A “constant plus exponent” regression model and variants extending the analysis to higher powers of maternal age were applied to several ranges of maternal age. Confidence intervals about the rates were calculated. This analysis results in rates significantly higher than those in widespread use though the confidence intervals show a need for caution in assuming precision. Sources of variation in rates are also considered. © 1996 Wiley-Liss, Inc.     

A Study of GluK1 Kainate Receptor Polymorphisms in Down Syndrome Reveals Allelic Non-Disjunction at 1173(C/T)

Mechanisms underlying Down syndrome (DS)-related mental retardation (MR) remain poorly understood. In trisomic offspring, non-disjunction may result in the reduction to homozygosity of a susceptibility allele inherited from a heterozygous parent. Accordingly, we sought evidence for allelic non-disjunction in the GluK1 gene that encodes the critical kainite-binding glutamate receptor subunit-5, maps to chromosome 21q22.1 in the DS critical region and is expressed in brain regions responsible for learning and memory. Three polymorphisms of GluK1 [522(A/C) rs363538; 1173(C/T) rs363430 and 2705(T/C) rs363504] were genotyped in 86 DS patient families by means of PCR-coupled RFLP assays and evaluated with respect to allele frequency, heterozygosity, linkage disequilibrium, stage and parental origin of allelic non-disjunction. We report that the distribution of allele frequencies is in Hardy-Weinberg equilibrium. Moderate heterozygosity (0.339) and a major allele frequency of 0.78 render the 1173(C/T) marker informative. Pair-wise comparisons reveal that 522(A/C)-1173(C/T) [χ² = 31.2, df = 1, p = 0.0001; D’ = 0.42] and 1173(C/T)-2705(T/C) [χ² = 18.3, df = 1, p = 0.0001; D’ = 0.34] are in significant linkage disequilibrium of weak magnitude. The estimated ratio of meiosis-I to meiosis-II errors arising from allelic non-disjunction of 1173(C/T) is 4:1 in maternal cases and 2:1 in paternal cases. Studies including additional markers and patient samples are warranted to further substantiate present findings.