Toll样受体4在抗β2GPⅠ抗体诱导小鼠血管表达黏附分子及组织因子中的作用

目的探讨Toll样受体4(TLR4)在抗β2糖蛋白Ⅰ(β2GPⅠ)抗体诱导小鼠动脉血管黏附分子及组织因子(TF)表达中的作用。方法腹腔注射抗β2GPⅠ抗体,分别刺激C3H/He N(TLR4正常)与C3H/He J(TLR4点突变)小鼠72 h,用免疫组织化学法观察血管内膜组织中细胞黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)及E-选择素的蛋白质表达水平,用实时荧光定量PCR和western blot方法分别检测血管组织匀浆中ICAM-1、VCAM-1、E-选择素的mRNA和蛋白质表达水平,用实时荧光定量PCR和TF活性检测试剂盒分别检测血管组织匀浆中TF mRNA表达水平及其活性。结果免疫组化结果示抗β2GPⅠ抗体刺激后的C3H/He N小鼠血管内膜中ICAM-1、VCAM-1及E-selectin蛋白均表达增强。与生理盐水对照组相比,C3H/He N小鼠和C3H/He J小鼠经抗β2GPⅠ抗体刺激后,其血管组织匀浆中ICAM-1、VCAM-1、E-选择素的mRNA和蛋白质表达水平均显著增加(P均0.05);但C3H/He J小鼠的ICAM-1、VCAM-1、E-选择素的mRNA和蛋白质表达水平均明显低于C3H/He N小鼠(P均0.05)。经抗β2GPⅠ抗体刺激的C3H/He J小鼠血管匀浆中TF mRNA表达及生物学活性明显低于C3H/He N小鼠(P0.05)。结论 TLR4与抗β2GPⅠ抗体刺激上调小鼠动脉血管组织表达活性分子ICAM-1、VCAM-1、E-选择素及TF密切相关,其分子机制及其在抗磷脂综合征(APS)血栓形成中的病理机制有待深入研究。     

oxLDL/β2GP Ⅰ/β2GP Ⅰ-Ab复合物调节A7r5表型转化及脂质转运分子表达

目的探讨氧化型低密度脂蛋白/β2糖蛋白Ⅰ/抗β2糖蛋白Ⅰ抗体复合物(oxLDL/β2GPⅠ/β2GPⅠ-Ab complex)对大鼠胸主动脉平滑肌细胞株(A7r5)表型转化和细胞表面脂质转运分子的影响,以及toll样受体4(toll like receptor 4,TLR4)信号通路在其中的作用。方法分别用oxLDL、oxLDL/β2GPⅠ复合物、oxLDL/抗β2GPⅠ抗体复合物、β2GPⅠ/抗β2GPⅠ抗体复合物、oxLDL/β2GPⅠ/抗β2GPⅠ抗体复合物刺激A7r5,收集总RNA和蛋白质,利用实时定量PCR、western blot及免疫荧光染色等方法检测细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、巨噬细胞表面标志CD68、半乳糖凝集素3(galectin-3,LGALS3)、B类清道夫受体3(CD36)和ATP结合盒转运体(ATP-binding cassette transporter)A1/G1(ABCA1/ABCG1)的表达情况;用TLR4阻断剂TAK-242(5μmol/L)或c-Jun氨基末端激酶1/2(c-Jun N-terminal kinases 1/2,JNK 1/2)阻断剂SP600125(90 nmol/L)预处理的方式,观察TLR4及下游信号分子在oxLDL/β2GPⅠ/β2GPⅠ-Ab复合物诱导A7r5表型转化和脂质转运分子表达变化的作用。结果 oxLDL/β2GPⅠ/β2GPⅠ-Ab复合物明显上调细胞CD68和LGALS3水平,降低α-SMA表达,而TAK-242能够反转该现象;oxLDL/β2GPⅠ/β2GPⅠ-Ab复合物能够促进细胞表达CD36,同时抑制ABCA1/ABCG1表达,TAK-242和SP600125能够逆转该过程。结论 oxLDL/β2GPⅠ/β2GPⅠ-Ab复合物促进A7r5细胞向"巨噬样"细胞发生表型转变,调节脂质转运相关分子的表达,增强脂质向细胞内转运的能力;TLR4和JNK1/2与该过程密切相关。     

抗β2GPI/β2GPI复合物激活THP-1细胞表达炎性相关因子

目的探讨抗β2糖蛋白I(抗β2GPI)自身抗体与β2糖蛋白I(β2GPI)复合物刺激单核细胞株THP-1表达炎性因子IL-6、IL-8、TNF-α及可能机制。方法用荧光定量PCR法检测抗β2GPI/β2GPI复合物刺激THP-1细胞不同时间(0.5、1、1.5、2、6 h)后IL-6、IL-8、TNF-αmRNA表达,用免疫荧光染色法及western blot观察THP-1细胞表达IL-6、IL-8、TNF-α蛋白的情况。荧光定量PCR及western blot观察Toll样受体4(TLR4)途径抑制物(TAK-242)干预抗β2GPI/β2GPI复合物对THP-1细胞的刺激作用。结果抗β2GPI/β2GPI复合物(100μg/mL)刺激THP-1细胞不同时间,可使细胞表达IL-6、IL-8及TNF-αmRNA水平逐渐上升,于刺激2 h时IL-6、IL-8及TNF-α达到峰值(P<0.01),免疫荧光染色及western blot证实细胞表达IL-6、IL-8及TNF-α蛋白水平也明显增加。TAK-242(5μmol/L)可显著抑制抗β2GPI/β2GPI复合物诱导的细胞IL-6、IL-8及TNF-α表达。结论抗β2GPI/β2GPI复合物通过TLR4途径,激活THP-1细胞表达炎性细胞因子IL-6、IL-8及TNF-α,参与抗磷脂综合征的病理机制。     

β2GP Ⅰ/抗β2GP Ⅰ抗体复合物抑制oxLDL介导的THP-1巨噬细胞脂质蓄积和FAK活化

目的探讨β2糖蛋白Ⅰ/抗β2糖蛋白Ⅰ抗体复合物(β2/aβ2)对氧化低密度脂蛋白(oxLDL)介导的THP-1巨噬细胞脂质蓄积和黏着斑激酶(FAK)活化的影响,以及Toll样受体4(TLR4)在该过程中的作用。方法用PMA(100 ng/mL)将THP-1细胞诱导为THP-1巨噬细胞。用RPMI 1640培养液、oxLDL、oxLDL+β2/aβ2和oxLDL+脂多糖(LPS)处理THP-1巨噬细胞,利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测脂质转运相关分子ACAT1、ABCA1和ABCG1的mRNA水平;利用Trinder法检测THP-1巨噬细胞内总胆固醇(TC)、游离胆固醇(FC)含量,并计算胆固醇酯(CE)含量和其占TC的比例;利用免疫荧光和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测FAK的蛋白质和mRNA表达并采用western blot检测其磷酸化;最后,利用TLR4阻断剂TAK-242(1μg/mL)预处理的方式,观察TLR4对上述过程的影响。结果β2/aβ2复合物能够抑制oxLDL引起的THP-1巨噬细胞脂质蓄积和FAK表达与磷酸化,阻断TLR4可以部分逆转这一现象。结论β2/aβ2可以抑制oxLDL引起的巨噬细胞的脂质蓄积和FAK活化,该过程与TLR4有关。     

β2GPⅠ及其抗体与抗磷脂综合征的研究进展

抗磷脂综合征(APS)是一种以血栓形成和(或)习惯性流产为临床特征的自身免疫性疾病。β2糖蛋白Ⅰ(β2GPⅠ)是该病的主要抗原,抗β2GPⅠ抗体是以β2GPⅠ为靶抗原的自身抗体。研究表明,β2GPⅠ及其自身抗体在APS血栓形成的致病过程中起到重要作用。目前APS的诊断与治疗也越来越受到人们的重视,检测抗β2GPⅠDⅠ抗体能特异性诊断APS,分子水平的研究也成为治疗APS的新方向。该文就β2GPⅠ、抗β2GPⅠ抗体与APS的相关性进展作以综述。     

β2糖蛋白Ⅰ、抗β2糖蛋白Ⅰ抗体与抗磷脂综合征

β2糖蛋白Ⅰ(β2-glycoproteinⅠ,β2GPⅠ)作为抗磷脂抗体(antiphospholipid antibody,aPL)的主要靶抗原,在抗磷脂综合征(antiphospholipid syndrome,APS)的血栓形成过程中发挥重要作用。虽然抗β2GPⅠ抗体较抗心磷脂抗体(anticardiolipinantibody,aCL)对APS的诊断具有更高的特异性,但抗β2GPⅠ抗体与抗心磷脂抗体联合检测更利于APS的诊断。本文对β2GPⅠ的结构、生理功能及其与抗β2GPⅠ抗体的结合、抗β2GPⅠ抗体诱发血栓形成的机制等方面进行较详细的阐述。APS是在1985年被正式命名的一种非器     

EGCG干预抗β2GPI/β2GPI复合物对THP-1细胞的诱导活化作用

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)干预抗β2GPI/β2GPI复合物诱导人急性单核细胞白血病细胞系(THP-1细胞)活化的作用。方法用一定剂量的EGCG、脂多糖(LPS)、抗β2GPI/β2GPI复合物等不同刺激物处理THP-1细胞,实时荧光定量PCR检测细胞组织因子(TF)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达;发色底物法检测TF活性;ELISA测定TNF-α蛋白的表达。结果 50 mg/L EGCG能抑制抗β2GPI/β2GPI复合物刺激的THP-1细胞TF mRNA和活性的表达(t值为6.97、3.89,P均<0.05),同时下调该复合物诱导的THP-1细胞TNF-αmRNA和蛋白质的表达水平(t值为3.23、4.65,P均<0.05)。结论 EGCG可干预抗β2GPI/β2GPI复合物诱导THP-1细胞TF及TNF-α的表达,抑制THP-1细胞活化。     

抗β2糖蛋白Ⅰ抗体、膜糖蛋白GPⅠb及抗链球菌溶血素O检测在类风湿关节炎急性阶段的诊断价值

目的探讨抗β_2糖蛋白Ⅰ抗体、膜糖蛋白GPⅠb、抗链球菌溶血素O检测在类风湿关节炎急性阶段的诊断价值。方法收集67例类风湿关节炎急性阶段患者为病例组,选取院内体检健康者50例为对照组。采用酶联免疫吸附试验检测抗β_2糖蛋白Ⅰ抗体,流式细胞术检测血小板膜糖蛋白GPⅠb的表达,免疫比浊法检测抗链球菌溶血素O的水平。采用Pearson分析进行相关分析,利用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析抗β_2糖蛋白Ⅰ抗体、血小板膜糖蛋白GPⅠb、抗链球菌溶血素O诊断类风湿关节炎急性阶段的曲线下面积(AUC)。结果病例组抗β_2糖蛋白Ⅰ抗体、膜糖蛋白GPⅠb、抗链球菌溶血素O水平均高于对照组,差异有统计学意义(P0.01)。Pearson相关性分析中,抗β_2糖蛋白Ⅰ抗体、膜糖蛋白GPⅠb、抗链球菌溶血素O与类风湿关节炎急性阶段呈正相关(r=0.514、0.620、0.710)。ROC曲线分析显示,抗β_2糖蛋白Ⅰ抗体、膜糖蛋白GPⅠb、抗链球菌溶血素O的AUC分别为0.82、0.82、0.91,最佳诊断界值分别为21.84RU/mL、14.79%、51.32IU/mL。结论抗β_2糖蛋白Ⅰ抗体、膜糖蛋白GPⅠb、抗链球菌溶血素O检测对类风湿关节炎急性阶段具有一定的诊断价值,可作为类风湿关节炎急性阶段的辅助诊断指标。     

a-β2 GPⅠ、Hcy水平检测及临床风险因子对缺血性脑卒中患者的意义

目的 探讨抗β2糖蛋白Ⅰ抗体(a-β2 GPⅠ)、同型半胱氨酸(H cy)水平检测及临床风险因子对缺血性脑卒中患者的意义.方法 将2018年12月至2020年3月于该院就诊并确诊为缺血性脑卒中的患者共167例纳入研究,作为患者组.另外,选取同期于该院行体检健康者120例作为对照组.检测上述人群血清a-β2GPⅠ、Hcy水平及白细胞计数(WBC)、大血小板比率(LPR)、血小板计数(PLT)、血小板平均体积(MPV),对a-β2GPⅠ和Hcy水平进行组间比较.采用受试者工作特征(ROC)曲线分析a-β2GPⅠ、Hcy在缺血性脑卒中诊断中的价值.分析a-β2GPⅠ、Hcy水平、临床风险因子之间的相关性.将患者组167例患者分为初发组(107例)和复发组(60例),比较两组a-β2 GPⅠ、Hcy水平及高血压、冠心病、糖尿病、手术史、颈动脉斑块形成等临床风险因子的情况.结果 患者组a-β2GPⅠ和Hcy水平均高于对照组(P<0.05).ROC曲线分析显示,a-β2GPⅠ和Hcy检测在缺血性脑卒中的诊断中有一定的应用价值,两者联合检测时表现出更高的灵敏度,曲线下面积(AUC)最大.通过相关性分析发现,缺血性脑卒中患者a-β2 GPⅠ和Hcy水平与高血压、糖尿病以及冠心病呈正相关(r>0,P<0.05),但a-β2GPⅠ与Hcy水平无相关性(P>0.05).缺血性脑卒中患者a-β2GPⅠ、Hcy水平与其他实验室指标间的相关性分析显示,仅Hcy与PLT之间呈负相关(r=-0.169,P<0.05).复发组患冠心病、糖尿病和颈动脉斑块形成发生率均高于初发组(P<0.05).结论 a-β2GPⅠ、Hcy水平联合检测并结合临床风险因子进行评估有助于对缺血性脑卒中患者病情进行判断.     

溃疡性结肠炎患者血清抗β2糖蛋白Ⅰ抗体水平的检测及其意义

目的探讨溃疡性结肠炎患者血清中抗β2糖蛋白Ⅰ抗体（aβ2GPⅠ）水平及其意义。方法采用ELISA方法分别对活动期溃疡性结肠炎组、缓解期溃疡性结肠炎组及正常对照组血清中的aβ2GPⅠ水平和阳性率进行检测分析。结果①活动期及缓解期溃疡性结肠炎患者血清中IgM和IgG型aβ2GPⅠ水平明显高于正常对照组；活动期溃疡性结肠炎组与缓解期组相比，IgG型aβ2GPⅠ水平差异亦有统计学意义（P〈0．05）。②在aβ2GPⅠ阳性率的比较中，活动期溃疡性结肠炎组与缓解期溃疡性结肠炎组比较差异有统计学意义；二者与正常对照组相比，差异均有统计学意义。而活动期溃疡性结肠炎组与正常对照组相比差异有统计学意义（P〈0．01）。结论抗β2糖蛋白Ⅰ抗体可能和溃疡性结肠炎的发病机制有关，是其高凝状态的可能原因之一。     

Toll样受体3对胰岛β细胞增殖及胰岛素分泌的影响

目的：通过 Toll 样受体3（TLR3）激动剂 Poly（I ∶ C）（PIC）刺激小鼠胰岛β细胞,观察 TLR3对细胞增殖,炎性因子表达及胰岛素分泌的影响。方法用小鼠胰岛β细胞株 NIT-1为研究对象,首先测定胰岛素释放以鉴定胰岛β细胞生物活性,再分别用不同浓度 PIC（0．1、1、10μg/mL）刺激 NIT-1细胞,CCK-8法检测细胞增殖;酶联免疫法（ELISA）检测炎性因子白细胞介素-1β（IL-1β）,IL-6及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达;葡萄糖刺激下的胰岛素释放试验（GSIS）测定 NIT-1细胞分泌胰岛素功能。结果 NIT-1细胞株呈贴壁、成簇及多边形生长;胰岛β细胞生物活性较好。与对照组相比,用不同浓度 PIC（0．1、1、10μg/mL）刺激时,NIT-1细胞增殖明显受到抑制,且呈剂量依耐性（P＜0．05）。 PIC 刺激组炎性因子（IL-1β,IL-6及 TNF-α）表达明显高于对照组（P＜0．05）。 PIC 刺激可明显抑制高糖介导下的 NIT-1细胞分泌胰岛素（P＜0．05）。结论 PIC 激活胰岛β细胞 TLR3,通过释放 IL-1β、IL-6及 TNF-α,抑制胰岛β细胞生长及胰岛素分泌。     

系统性红斑狼疮患者血清抗β2糖蛋白Ⅰ抗体与抗心磷脂抗体亚型水平及关系

目的：采用间接ELISA法对41例系统性红斑狼疮（SLE）患者的血清进行了抗β2糖蛋白Ⅰ（β2GPⅠ）抗体及抗心磷脂抗体亚型进行测定并相互比较，分析其在APS—SLE中可能的临床意义，探讨SLE患者抗β2GPⅠ抗体及抗心磷脂抗体亚型与血脂水平和凝血酶原时间之间的关系。方法：采集2006年8月至2007年1月温州医学院附属第一医院收治的SLE患者血液标本41例，采用ELISA法测定血清中ACA及aβ2GPⅠ水平，同时检测ds-DNA抗体、TG、CH、APTT、PT等相关指标。结果：①41例SLE患者中aβ2GPⅠ升高者10例（24．4％），ACA-IgG阳性者20例（48．8％），ACA-IgA阳性者7例（17．1％）与正常对照组比较差异均有显著性意义（P分别〈0．001或〈0．05）；②10例aβ2GPⅠ阳性SLE患者中有4例同时存在ACA阳性，其中3例为同时ACA-IgG、ACA-IgA阳性，1例为ACA-IgG阳性。41例SLE患者aβ2GPⅠ阳性率与ACA-IgG、ACA-IgA间差异无显著性意义（P均〉0．05）；③伴有继发性磷脂综合征的SLE和无继发性磷脂综合征SLE患者相关指标的比较，差异均无显著性意义（P均〉0．05）；①41例SLE患者ds-DNA抗体、TG、CH、APTT、PT与抗β2GPⅠ抗体和ACA亚型进行相关性分析，结果CH与ACA-IgA存在正相关，r=0．66，p〈0．05；APTT与ACA-IgG存在负相关，r=-0．313，p〈0．05。结论：结果提示抗β2GPⅠ抗体可作为SLE继发APS的诊断指标，但若联合ACA检测将会提高检出率从而降低漏诊率；虽然ACA-IgG的存在将会导致凝血瀑布反应，使机体处于高凝状态；及ACA-IgA可能与其靶抗原β2GPⅠ结合，造成胆固醇堆积；或β2GPⅠ发挥其天然抗凝作用，但抗β2GPⅠ抗体和ACA水平与SLE活动性无关，同时SLE患者是否继发抗磷脂综合征与血脂水平和凝血酶原时间无关。     

不同亚型ACL和aβ2GPⅠ在SLE患者发病及病情发展中的临床意义

目的 探讨不同亚型抗心磷脂抗体(ACL)与抗β2糖蛋白Ⅰ抗体(aβ2GPⅠ)在系统性红斑狼疮(SLE)患者发病及病情发展中的临床意义.方法 将该院2017年2月至2019年2月收治的73例SLE患者纳为SLE组,30例非SLE结缔组织病患者纳为对照组A,30例健康体检者纳为对照组B,应用IgA/G/M多亚型筛选试剂与I...     

糖脂毒性诱导胰岛β细胞炎症因子过表达的研究

目的了解高糖、高脂环境对胰岛β细胞功能和Toll受体3(TLR3)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)、补体C3及补体C4表达的影响。方法培养小鼠胰岛β细胞株(NIT-1)经高糖高脂刺激后,应用CCK-8试剂盒检测细胞增殖情况,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测TLR3mRNA的表达,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6、CRP、补体C3及补体C4的表达。结果高糖高脂刺激后,胰岛β细胞增殖被抑制,TLR3mRNA、TNF-α、IL-1β、IL-6、CRP、补体C3及补体C4的表达明显增加;并且高糖高脂(GZ)组胰岛β细胞损伤和炎症因子过表达程度明显高于高糖(G)组和高脂(Z)组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论高糖高脂可能通过激活TLR3信号通路等途径产生大量炎症因子和免疫因子,抑制胰岛β细胞增殖,导致胰岛β细胞功能障碍,并且糖、脂协同作用明显大于单独的糖、脂毒性。     

苏州地区正常人群GPⅠ bα基因HPA-2和VNTR多态性研究

ＧＰⅠｂ由两个亚单位组成 ,即ＧＰⅠｂα(相对分子质量 145× 10 3)和ＧＰⅠｂβ(相对分子质量 2 4× 10 3)以二硫键连接而成。ＧＰⅠｂ与ＧＰⅨ以非共价键结合形成ＧＰⅠｂ Ⅸ复合物。ＧＰⅠｂ Ⅸ复合物具有血管性血友病因子 (ｖＷＦ)受体和凝血酶受体功能 ,在高剪切力状态的初期止血过程中起重要作用 ,此复合物缺陷在临床上可引起巨大血小板综合征 (ＢＳＳ)。ＧＰⅠｂα基因具有多种遗传多态性 ,迄今 ,国外已相继在美国白人、日本、德国和意大利等人群中发现了ＧＰⅠｂα的多态性 ,国内这方面的报道很少。我们应用ＰＣＲ技术结合限制性内…     

脂多糖刺激后腹腔巨噬细胞表面Toll样受体表达的变化

目的探讨LPS刺激后小鼠腹腔巨噬细胞表面TLR2、TLR4表达的动态变化。方法常规方法从BALB/C小鼠腹腔中分离出巨噬细胞,调整细胞数为2×106/孔,分为6组,每组设3个复孔,加入LPS使其终浓度为1μg/ml,在终浓度为1μg/mlLPS刺激下,5%CO2,37℃孵育0、1.5、3、6、16、24h。用异硫氢酸荧光素(FITC)标记的大鼠抗小鼠TLR2抗体和藻红蛋白(PE)标记的大鼠抗小鼠TLR4抗体对小鼠腹腔巨噬细胞进行免疫荧光染色,流式细胞仪(FCM)测定FITC、PE阳性细胞数及其平均荧光强度(MFI)。结果1.随着LPS刺激时间的延长,TLR2阳性率逐步上升,6h达到高峰后出现缓慢下降趋势,各刺激组阳性率与对照组组相比,P<0.01。TLR2MFI则随着LPS刺激时间的延长而缓慢下降,各刺激组与对照组相比,P<0.05。2.随着LPS刺激时间的延长,TLR4阳性率逐步上升,刺激达24h时,阳性率为14.02%±1.23%,与对照组(8.98%±1.06%)相比,P<0.01。TLR4MFI也随着刺激时间的延长而上升,各刺激组与对照组相比,P<0.05。结论LPS能够引起巨噬细胞TLR2/4表达和分布发生变化,说明TLR2与TLR4均参与针对LPS的反应。     

脂多糖刺激后腹腔巨噬细胞表面Toll样受体表达的变化

目的探讨LPS刺激后小鼠腹腔巨噬细胞表面TLR2、TLR4表达的动态变化.方法常规方法从BALB/C小鼠腹腔中分离出巨噬细胞,调整细胞数为2×106/孔,分为6组,每组设3个复孔,加入LP S使其终浓度为1μg/ml,在终浓度为1μg/ml LPS刺激下,5%CO2,37℃孵育0、1.5、3、6、16、24h.用异硫氢酸荧光素(FITC)标记的大鼠抗小鼠TLR2抗体和藻红蛋白(PE)标记的大鼠抗小鼠TLR4抗体对小鼠腹腔巨噬细胞进行免疫荧光染色,流式细胞仪(FCM)测定FITC、PE阳性细胞数及其平均荧光强度(MFI).结果1.随着LPS刺激时间的延长,TLR2阳性率逐步上升,6h达到高峰后出现缓慢下降趋势,各刺激组阳性率与对照组组相比,P＜0.01.TLR2 MFI则随着LPS刺激时间的延长而缓慢下降,各刺激组与对照组相比,P＜0.05.2.随着LPS刺激时间的延长,TLR4阳性率逐步上升,刺激达24h时,阳性率为14.02%+1.23%,与对照组(8.98%±1.06%)相比,P＜0.01.TLR4 MFI也随着刺激时间的延长而上升,各刺激组与对照组相比,P＜0.05.结论LPS能够引起巨噬细胞TLR2/4表达和分布发生变化,说明TLR2与TLR4均参与针对LPS的反应.     

NOD2受体在抗β2GPⅠ抗体诱导血小板炎性反应促血栓形成中的作用研究

目的明确核苷酸结合寡聚域2(NOD2)受体在抗β₂糖蛋白Ⅰ抗体(anti-β₂GPⅠ)诱导血小板炎性反应,进而促血栓形成中的作用机制,探讨以NOD2受体为干预靶点对anti-β₂GPⅠ诱导的相关血栓形成机制的影响。方法选取2018年1月至2021年3月哈尔滨医科大学附属第二医院经CT、MRI或动静脉造影诊断为血栓且anti-β₂GPⅠ阳性的患者69例为血栓组;选取同期体检健康者78例作为健康对照组。分别提取血栓患者、健康对照者的血小板和血浆,其中健康对照者血小板需与anti-β₂GPⅠ/β₂GPⅠ共孵育。利用实时定量PCR(RT-PCR)检测NOD2受体mRNA表达;ELISA检测白细胞介素(IL)-1β水平;免疫印迹法(Western blot)检测Toll样受体4(TLR4)、NOD2受体、p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)活化情况;FeCl₃诱导小鼠颈总动脉血栓形成,利用激光散斑超声血流仪监测血管闭塞时间。结果与健康对照组相比...     

脑梗死患者血清抗心磷脂抗体及 β2糖蛋白Ⅰ抗体水平及其临床意义

目的研究脑梗死患者血清抗心磷脂抗体(ACA)及β2糖蛋白Ⅰ抗体水平及其临床意义。方法选取2017年1月至2018年10月,到北京丰台右安门医院进行治疗的122例脑梗死患者,同时,选取68例同期到我院进行健康体检者作为对照组,所有受检者均进行ACA-IgG、ACA-IgM、β2 GPⅠ水平检测。结果脑梗死组患者β2GPⅠ[(3.05±1.02)μg/ml]、ACA-IgG[(3.43±1.77)mmol/L]、ACA-IgM[(3.41±1.75)μg/ml]水平均高于健康对照组[(1.64±0.75)μg/ml、(1.90±0.92) mmol/L、(1.89±1.30)μg/ml],差异有统计学意义(P0.05)。脑梗死组患者中,β2 GPⅠ阳性患者的总胆固醇、低密度胆固醇水平均明显高于阴性组,颈动脉狭窄、颈动脉斑块、颈动脉内膜增厚比例高于阴性组(P0.05),ACA-IgG阳性患者复发率高于阴性患者(P0.05)。结论脑梗死患者ACA、β2 GPⅠ抗体水平明显上升,对病情判断及复发预测均具有重要意义。     

卵巢癌患者TLR1、TLR2、TLR6信号通路活化诱导PBMC前炎症细胞因子分泌

目的观察卵巢癌(OC)患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中Toll样受体1(Toll-like receptors 1,TLR1)、TLR2及TLR6信号通路活化后前炎症细胞因子分泌水平,研究其在OC发病中的可能机制。方法纳入OC患者、女性妇科良性疾病(BC)患者及同期体检健康女性(NC)各13例,用密度梯度离心法分离PBMC并用TLRs的相应配体刺激PBMC,用CBA免疫荧光法检测细胞中前炎症细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的分泌水平;用western blot检测MyD88、TRAF6、TANK、NF-κB和P-NF-κB的表达水平。结果 OC组、BC组、NC组未加配体刺激前,PBMC中IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α分泌水平差异均无统计学意义(P>0.05)。与未经配体刺激PBMC相比,OC组PBMC经TLR1配体Pam3CSK4刺激24 h后,IL-1β分泌水平增高,差异具有统计学意义(t=-2.667,P<0.05);TLR2配体HKLM刺激24 h后,OC组IL-1β、TNF-α分泌水平亦增高,差异有统计学意义(t分别为-5.391和-3.564,P均<0.05);相较于未经配体刺激时,BC组、NC组的PBMC在相应TLRs配体刺激后,IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α分泌水平变化无统计学意义。OC患者PBMC经Pam3CSK4、HKLM、FSL-1刺激后,TLRs信号通路蛋白MyD88、TRAF6、TANK及P-NF-κB表达上调。结论 OC患者PBMC中TLR1、TLR2、TLR6经相应配体刺激后可活化TLR信号通路,并诱导前炎症细胞因子IL-1β、TNF-α分泌水平增加,在OC的发生发展中发挥作用。