肝细胞癌组织细胞因子信号转导抑制因子-1表达的研究

目的探讨细胞因子信号转导抑制因子(SOCS1)、血管内皮生长因子受体(VEGFR)-2和表皮生长因子受体(EGFR)在肝硬化、肝细胞癌组织中的表达变化。方法采用免疫组化法检测63例HCC组织、51例癌周肝组织、11例肝硬化组织及11例正常肝组织SOCS1蛋白的表达;另分别检测VEGFR2和EGFR在27例和41例HCC组织中的表达情况。结果癌周肝组织中SOCS1蛋白表达为阴性1例,弱阳性15例,阳性30例,强阳性5例,HCC组织中SOCS1蛋白表达为阴性11例,弱阳性38例,阳性14例,癌周肝组织中SOCS1蛋白表达强度显著高于HCC组织(P0.01);SOCS1蛋白在肝硬化组织和正常肝组织中无表达;SOCS1表达在瘤体大小间(瘤体5cm和≥5cm)有显著性差异(P0.001);SOCS1蛋白在HCC组织中的表达与VEGFR2和EGFR的表达无显著相关性(P0.05)。结论 SOCS1蛋白表达与HCC的发生发展密切相关。     

肝细胞癌组织SOCS1和STAT3蛋白的表达意义

目的:探讨SOCS1和STAT3蛋白在HCC组织中的表达、相互关系及在HCC发生发展中的意义.方法:应用免疫组化方法检测48例HCC组织和癌周肝组织、肝硬化(liver cirrhosis,LC)组织(n=11)及正常肝组织中(n=11)SOCS1和STAT3的表达水平.结果:癌周肝组织中SOCS1蛋白表达强度显著高于HCC组织,SOCS1蛋白在LC组织及正常肝组织中全部呈阴性表达.HCC组织和癌周肝组织STAT3蛋白阳性表达率显著高于LC组织和正常肝组织;SOCS1在瘤体大小间的表达有显著性差异(P<0.01).STAT3在表达AFP阴性和阳性癌组织组间有显著性差异(P<0.05).HCC组织中SOCS1和STAT3表达具有显著等级正相关(rs=0.431,P<0.01).结论:SOCS1和STAT3表达与HCC的发生密切相关,且两者之间的表达强度具有显著等级正相关.     

原发性肝细胞癌组织中Cyclin D1的表达及意义

目的探讨Cyclin D1在原发性肝细胞癌（HCC）组织中的表达及其在HCC发病中的作用。方法采用免疫组化法检测50例HCC、20例正常肝组织中的Cyclin D1。结果HCC中Cyclin D1阳性表达率为44.0％（22／50），正常肝组织组均为阴性表达，两者相比P〈0.001；Cyclin D1的阳性表达率与HCC的肝内转移和肝癌的分化程度有关（P均〈0.05），与患者术后3a生存期相关（P〈0.05）。结论Cyclin D1在HCC的发生发展过程发挥作用，检测Cyclin D1有助于HCC的预后判断。     

低流行地区HBsAg阴性原发性肝癌病人持续存在HBV和HCV基因组

作者前瞻性研究居住在HBV和HCV感染低流行的法国的24例HB_SAg阴性原发性肝细胞癌(HCC)病人(其中6例为南非裔),23例有肝硬化,11例有长期饮酒史。对该组病例用RIA法检测HB_SAg、抗HB_C和抗HB_S;用ELISA法和RIBA法检测HCV;用PCR法检测肝组织的病毒基因组。结果24例中11例ELISA和RIBA法检测抗HCV均为阳性,1例仅RIBA法阳性。11例长期饮酒史者中6例抗HCV阳性。12例血清HCV RNA阳性者的抗HCV也均为阳性。检测9例病人肝脏肿瘤和非肿瘤组织的HCV RNA,其中4例检出病毒基     

肝细胞癌中脯氨酸羟化酶1、2、3的表达及其临床意义

目的探讨肝细胞癌(HCC)中脯氨酸羟化酶(PHD)1、PHD2、PHD3的表达及临床意义。方法运用组织芯片技术,通过免疫组织化学Envision法检测103例HCC和14例癌旁肝组织、13例正常组织中PHD1、PHD2和PHD3的表达情况,并结合临床病理因素进行分析。结果PHD1在HCC中表达明显高于正常肝组织(P0.05),而PHD2在HCC中表达明显低于正常肝组织(P0.05),PHD3在HCC中表达明显高于癌旁肝组织及正常肝组织(P0.05)。PHD1表达与HCC分化程度、脉管内瘤栓、TNM分期和术后3年生存率显著相关(P0.05);PHD2表达与HCC分化程度、TNM分期、包膜侵犯和术后复发转移显著相关(P0.05);PHD3表达与肝细胞癌分化程度、脉管内瘤栓和术后3年生存率显著相关(P0.05)。PHD1与PHD3呈正相关(r=0.274,P=0.001)。生存分析显示PHD1、PHD3阳性表达患者生存期较阴性表达患者明显缩短(P0.05)。COX多因素分析显示PHD3表达是HCC的独立预后因素。结论 PHD1、PHD2和PHD3在HCC的发生、发展中起着不同程度的作用,联合检测PHD1、PHD2和PHD3可能有助于判断HCC的恶性程度、转移潜能及预后分析。     

肝癌组织中ZHX2基因启动子甲基化及其与临床病理特征的关系

目的 运用变性高效液相色谱(Denature High-Performance Liquid Chromatography,DHPLC)法检测原发性肝癌细胞中ZHX2基因启动子甲基化的情况,为进一步探讨其与原发性肝细胞癌(HCC)临床病理特征之间的关系奠定基础.方法 采用亚硫酸氢钠-DHPLC技术,以体外甲基化的DNA和人类胎盘DNA分别为甲基化和非甲基化对照,建立ZHX2基因启动子甲基化DHPLC分析方法.在55℃部分变性条件下,对ZHX2基因启动子重要区域甲基化水平进行检测,并对24例HCC癌组织及癌旁肝组织和6例正常肝组织标本进行检测.结果 建立了ZHX2基因启动子甲基化DHPLC分析方法,使用该方法检测结果显示正常肝组织未检测到甲基化,24例HCC癌组织中有11例存在甲基化(45.8％),而24例HCC癌旁组织中有3例(16.6％)存在甲基化.结论 本研究建立了ZHX2基因启动子甲基化DHPLC分析方法,并首次将其应用于肝癌组织标本的检测,为深入探讨ZHX2基因与HCC发生发展之间关系奠定了基础.     

patched基因在肝细胞癌中的表达及意义

目的探讨patched(Ptc)基因在肝细胞癌(HCC)中的表达及其临床意义。方法采用组织芯片技术和免疫组化(ABC-HRP)法对150例HCC手术切除标本进行Ptc检测,评估Ptc的表达与HCC临床病理的关系。结果150例肝癌组织,脱片9例,141例中39例有高表达(26.6%);25例癌旁肝组织无脱片,阳性表达3例(12.0%)。二者比较有显著性差异(P<0.05)。Ptc阳性表达与HCC的转移、淋巴浸润、包膜形成及细胞分化密切相关(P<0.05)。结论Ptc检测对估计HCC的转移、复发及预后具有意义。     

精氨酸酶1在肝细胞癌中的表达及其临床病理意义

目的 检测人类精氨酸酶1(ARG1)在肝细胞癌(HCC)中的表达,分析其与患者临床病理特征的关系.方法 利用高通量组织芯片技术和免疫组织化学方法评价167例HCC及癌旁肝组织中ARG1蛋白的表达情况,采用x2检验和Spearman秩相关分析ARG1蛋白表达与各临床病理特征间的关系.应用实时荧光定量PCR方法检测68例HCC及其癌旁肝组织中的ARG1 mRNA表达水平.结果 HCC中ARG1蛋白表达水平为3.540±3.702,明显低于癌旁肝组织(10.290±2.303;t=-22.421,P=0.000).ARG1表达与HCC分化程度、组织学分级、微血管侵犯、术前甲胎蛋白水平、术后复发有关(P值均＜0.05).68例HCC组织中ARG1 mRNA表达水平为0.0997(0.213),低于癌旁肝组织0.563(0.459);u=-6.544,P=0.000].结论 ARG1在HCC中低表达,其可能参与HCC发生发展.检测ARG1表达可能有助于HCC辅助诊断、评估分化程度及预后判断.     

Glypican-3蛋白在肝细胞癌患者血清和组织中的表达及意义

目的:探讨肝细胞癌(HCC)患者血清和组织中Glypican-3(GPC3)蛋白的表达及临床意义.方法:收集HCC患者27例和肝良性病变患者28例的术前1d空腹血清及组织标本,采用Western blot检测血清中GPC3蛋白,同时采用免疫组织化学SP法检测组织标本中GPC3的表达情况.结果:27例HCC患者HCC组织、癌旁组织和远癌肝组织中GPC3蛋白阳性的表达率分别为81.5%,0%和0%(HC:23.4689,P<0.001),术前血清中GPC3蛋白阳性率分别为55.6%;28例肝良性病变患者组织和血清中阳性率均为0%;GPC3蛋白对HCC诊断的敏感性为55.6%,特异性为100%,误诊率为0%.HCC患者血清中GPC3蛋白表达与其瘤体大小和病理分级之间差异有显著性(P<0.05),而与患者年龄、性别、HBsAg及AFP值之间差异无显著性(P>0.05).结论:GPC3蛋白在HCC患者血清和组织中有较高的表达,对诊断HCC有较高的敏感性和特异性,可作为HCC早期诊断的标志物.     

VEGF与MMP-2在肝细胞肝癌中的表达及其临床意义

目的　研究肝细胞肝癌 (HCC)血管内皮生长因子 (VEGF)和基质金属蛋白酶 - 2 (MMP- 2 )表达的相关性和临床意义。方法　应用免疫组化方法检测 6 7例 HCC组织、41例癌旁组织以及正常肝组织 VEGF和MMP- 2的蛋白表达。结果　 6 7例肿瘤组织 41例 VEGF呈阳性表达 ;41例癌旁组织 11例 VEGF呈表达阳性 (P<0 .0 1)。VEGF的表达与 HCC癌灶大小、镜下门静脉癌栓发生以及肿瘤 TNM分期密切相关 (P<0 .0 5 )。 6 7例肿瘤组织 36例 MMP- 2呈阳性表达 ;癌旁组织仅有 13例阳性表达 (P<0 .0 5 )。MMP- 2的表达与 HCC癌灶大小、肿瘤 TNM分期密切相关 (P<0 .0 5 )。 VEGF与 MMP- 2同时阳性表达者为 2 7例。结论　 VEGF和 MMP- 2在HCC肿瘤组织中表达上调 ,且与 HCC临床病理特征有一定相关性。VEGF与 MMP- 2在 HCC肿瘤组织中的表达具有相关性。表明 VEGF与 MMP- 2在 HCC发生发展过程中起重要作用。     

双重免疫组化染色检测DLK1与PCNA在肝细胞癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨双重免疫染色检测DLK1蛋白与增殖细胞核抗原(PCNA)在不同分化程度肝细胞癌(HCC)中的表达及临床意义.方法 用双重免疫组化染色方法检测HCC组织(45例)、癌周肝硬化组织(20例)及肝局灶性结节性增生(FNH)组织(20例)中DLK1及PCNA的表达.结果 DLK1与PCNA在HCC组、肝硬化组织及FNH组织中表达率均为100％;两者阳性表达水平与HCC恶性程度呈正相关.DLK1与PCNA在癌周肝硬化组及FNH组中的表达水平均较HCC组低(P＜0.05),DLK1/PCNA在FNH组中的表达水平较癌周组织低(P＜0.05).结论 DLK1与PCNA的表达均与HCC的恶性程度呈正相关,同时高阳性表达DLK1与PCNA的HCC恶性程度更高,双重免疫组化染色检测DLK1与PCNA的表达更能体现肿瘤的恶性程度.     

CDK5在肝细胞癌中的异常表达

目的:研究周期素依赖性激酶5(cyclin-dependent kinase5.CDK5)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)发生发展中的异常表达.方法:应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测CDK5 mRNA的表达水平;免疫组织化学技术检测CDK5蛋白在正常肝组织、肝硬化和HCC组织中的表达:分析CDK5与临床病理学特征的关系.结果:CDK5 mRNA在HCC中呈上调表达,阳性表达率在正常肝组织、肝硬化和HCC组织中分别为35.3%、64.3%、89.7%;正常肝组织与HCC组织有显著差异(P<0.05),肝硬化组织与HCC组织也有显著差异(P<0.01).CDK5蛋白在HCC中高表达,阳性表达率在人正常肝组织、肝硬化和HCC组织之间分别为29.4%.64.3%,89.7%,三组之间差异有统计学意义(x2=58.095,P<0.01).HCC组织中CDK5蛋白表达强度与肿瘤的病理学分级显著相关(x2=19.330,P<0.01).结论:CDK5在HCC中上调表达,他的异常表达在HCC的发生发展过程中发挥重要的作用,且与肿瘤的分化程度相关.     

肝癌细胞表达差异片段MRG 98.2的临床意义

目的 筛选肝细胞癌（HCC）相关基因,探讨其在HCC发病中的临床意义。方法 用差异显示技术对比研究正常肝组织、HCC组织及癌旁肝组织之间mRNA的表达差异,以肝cDNA片段MRG98．2为探针,对10例HCC及癌旁肝组织进行斑点印渍分析,并通过逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）方法检测这些标本血管内皮生长因子（VEGF）mRNA的表达水平。结果 从HCC组织中获得的差示片段MRG98．2在7例HCC标本中表达阳性（70％）,癌旁肝组织弱表达（2／10）或无表达。VEGF mRNA在7例MRG98．2 阳性表达的HCC组织中的6例表达上调。结论 MRG98．2是HCC相关的基因片段,其表达与VEGF mRNA相关,并可能与肿瘤浸润转移、患者的预后不良有关。     

MIF与JNK1在原发性肝细胞癌中的表达及相关性研究

目的研究巨噬细胞移动抑制因子(MIF)和c-Jun氨基末端蛋白激酶1(JNK1)蛋白在肝细胞癌(HCC)组织和HepG2肝癌细胞中的表达,并探讨二者的相互关系。方法选择有乙肝肝硬化基础的HCC患者52例,取手术切除的癌组织及相应的癌旁组织为实验组,另选取20例肝血管瘤、肝破裂手术切除的肝组织标本作正常对照,应用免疫组织化学法检测MIF、JNK1和pJNK1的表达;原位杂交法检测MIF mRNA和JNK1 mRNA表达。将不同浓度的rMIF分别与HepG2肝癌细胞和L-O2人正常肝细胞共培养,通过Western blotting法检测JNK1和pJNK1蛋白的表达,通过RT-PCR检测相应蛋白在核酸水平的表达。结果 MIF、JNK1、pJNK1和MIF mRNA、JNK1 mRNA在HCC癌组织和癌旁组织中的阳性表达率均明显高于正常肝组织(P均0.05);经不同浓度的rMIF刺激后,HepG2肝癌细胞中pJNK1和JNK1mRNA的相对表达量均呈浓度依赖性升高,尤以rMIF浓度为200 ng/ml升高最明显,与L-O2细胞比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论 MIF、MIF mRNA、JNK1、JNK1 mRNA、pJNK1在HCC组织和HepG2肝癌细胞中均呈高表达,MIF参与HCC进展,可能是通过激活JNK1信号通路来实现的。     

肌肽二肽酶作为肝细胞癌诊断及预后评估潜在新型标志物的初步探讨

目的探索肌肽二肽酶(CNDP1)作为肝细胞癌(HCC)诊断和预后评估的潜在价值。方法通过基因芯片及GO分析筛选HCC诊断候选标志分子CNDP1。收集HCC癌组织125例, 癌旁组织85例, 肝硬化组织125例, 肝血管瘤远离部位相对正常肝组织32例, 以及66例HCC和82例非HCC患者血清样本。分别采用实时荧光定量PCR、免疫组织化学、蛋白质印迹法和酶联免疫吸附法检测HCC组织及血清CNDP1在mRNA和蛋白表达水平的差异;以受试者操作特征(ROC)曲线和Kaplan-Meier生存分析评估CNDP1在HCC患者诊断和预后中的价值。结果 CNDP1在HCC癌组织中的表达水平显著降低;在HCC患者癌组织和血清中CNDP1的水平均显著低于肝硬化患者及正常对照。ROC曲线分析显示血清CNDP1诊断HCC患者的曲线下面积为0.753 2(95%CI 0.676～0.830 5), 敏感度和特异度分别为78.79% 、62.50%。血清CNDP1与血清甲胎蛋白(AFP)联合检测能较显著提高诊断效能(AUC = 0.820 6, 95%CI 0.753 5～0.887 8)。血清CNDP1诊断A...     

肝细胞癌组织中Ebp1蛋白的表达变化及意义

目的观察肝细胞癌(HCC)组织中ErbB-3结合蛋白Ebp1的表达变化,并探讨其意义。方法采用免疫组化SP法检测36例HCC组织和癌旁组织中的Ebp1蛋白。结果 HCC组织中Ebp1蛋白阳性20例(55.6%),癌旁组织中3例(8.3%);两者比较,P<0.01。HbsAg阳性者Ebp1蛋白阳性表达显著高于HbsAg阴性者(P<0.01)。结论 HCC组织中Ebp1蛋白表达上调;Ebp1在HCC发生发展中发挥重要作用,且其表达与HBV感染有关。     

磷脂酰肌醇蛋白聚糖3在肝穿刺活检标本中鉴别诊断的意义

目的:探讨磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)在肝细胞癌(HCC)等不同肝病组织中的表达情况及其对肝癌早期诊断的意义.方法:采用免疫组织化学方法检测126例肝穿刺活检标本(包括13例极早期HCC、44例早期HCC、16例不典型增生、29例肝硬化和24例肝炎)及57例中晚期HCC手术标本中GPC3和甲胎蛋白(AFP)的表达,...     

癌-睾丸抗原SSX基因在肝细胞癌中的表达及临床意义

目的: 检测癌-睾丸抗原SSX1-5 mRNA在肝细胞癌(HCC)组织中的表达, 探讨其用于HCC免疫治疗的可能性.方法: 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术, 检测61例HCC组织及52例配对的HCC癌旁组织中SSX1-5 mRNA, 结合临床相关指标进行统计学分析. 随机抽取PCR阳性产物进行DNA测序.结果: SSX1、SSX2、SSX4和SSX5 mRNA在HCC中的表达率分别为42.6%(26/61)、8.2%(5/61)、39.3%(24/61)和6.6%(4/61);未检测到SSX3的表达. 在癌旁组织中, 未检测到SSX1-5 mRNA;HCC组织中, 至少表达1个SSX基因者达50.8%(31/61);表达2个或2个以上者达32.8%(20/61), 表达3个或3个以上者达9.8%(6/61), 同时表达4个者达3.3%(2/61). SSX的表达与临床相关指标关系的分析结果显示:门静脉癌栓形成与SSX1的表达、患者的年龄与SSX4的表达均具有显著性差异( P<0.05);DNA测序证实PCR阳性产物为目的基因.结论: SSX1、SSX2、SSX4和SSX5在HCC组织中表达频率不尽相同, 但具有较强的特异性, 提示有可能成为HCC免疫治疗的靶抗原.     

肝癌组织RhoC蛋白表达与微血管密度的关系

目的:探讨RhoC蛋白表达和肝细胞癌 (hepatocellular carcinoma,HCC)临床病理的关系及其和微血管生成之间的联系．方法:应用免疫组织化学法,检测49例HCC、 22例肝癌转移灶组织、9例正常肝组织内 RhoC蛋白表达和微血管密度(microvessel density,MVD),并将检测结果与患者的临床资料进行统计分析．结果:RhoC蛋白在9例正常肝组织中有1例呈阳性表达,占11．1％,而在49例HCC中有36 例阳性表达,占73．5％,22例肝癌转移灶中有 18例呈阳性表达,占81．8％,正常肝组织组与另两组比较有显著性差异(P<0．01);RhoC蛋白表达强度与年龄、性别、肝癌大小、AFP 表达量、HBsAg是否阳性及有无包膜无关 (P>0．05),而与肝癌分化程度、有无侵袭转移有显著关系(X2=8．037,P=0．005;X2=7．335, P=0．007)．肝癌、肝癌转移灶中MVD显著高于正常肝组织(H=4．564,P<0．01;H=4．442． P<0．01)．RhoC阳性表达的肝癌MVD值为93．3 ±25．0／mm3,阴性表达的肝癌MVD值为55．7 ±23．4／mm3,前者明显高于后者(t=4．715, P<0．01)．结论:RhoC在HCC组织中的表达上调与其血管生成和侵袭转移有关．     

整合素β1和固生蛋白Tenascin共表达与肝癌浸润转移的关系

目的:研究整合素β1及其配体固生蛋白Tenascin(TN)在肝细胞癌(HCC)中的表达,探讨TN和整合素β1对HCC浸润转移的影响.方法:分别采用RT-PCR和免疫组织化学法检测42例HCC、10例肝硬化和7例正常肝组织内整合素β1和TN的表达,观察其与HCC病理学特点之间的关系.结果:整合素β1在HCC中的阳性表达率显著高于非肝癌组织(c2=6.33,P<0.05);整合素β1在有包膜侵犯组、病理分级Ⅲ-Ⅳ组及有转移HCC中的表达水平明显高于无包膜侵犯组(u=3.06,P<0.01)、病理分级Ⅰ-Ⅱ级组(u=3.78,P<0.01)以及无转移组(u=3.65,P<0.01);病理分级Ⅲ-Ⅳ组、有包膜侵犯、有转移组的TN表达明显高于病理分级Ⅰ-Ⅱ级组(t=2.467,P<0.05)、无包膜侵犯(t=2.912,P<0.01)及无转移组(t=2.742,P<0.01);整合素β1阴性表达HCC中的TN表达水平明显低于整合素β1阳性和强阳性表达HCC中的TN(t=2.351,P<0.05;t=2.849,P<0.01).结论:TN和整合素β1可能协同参与了HCC的浸润和转移,检测其表达可做为判断HCC浸润转移的重要指标.