内耳病患者血清抗体免疫荧光试验的改进

某些内耳病患者的血清中存在有自身抗体,许多进行性感音神经性聋患者的血清中有抗肌纤维膜及血管内皮的抗体。以往许多学者采用耳蜗组织切片进行免疫组化试验来查内耳病患者的血清抗体。鉴于肾组织的敏感性最高、切片技术简单,本文作者们试图用肾组织取代耳蜗组织来查血清中抗微粒体和抗线粒体抗体,并确定血清及荧光标记物最适宜的稀释浓度。分别将不同稀释度的病人(1例进行性感     

人体抗内耳组织自身抗体的检测方法

相关研究表明某些感音神经性聋患者血清中存在各种类型的抗内耳组织自身抗体。为了对临床上此类疾病的诊断提供客观依据,我们参考了临床上其它学科诊断自身免疫性疾病自身抗体的检测方法,用豚鼠内耳石蜡切片,采用免疫荧光法检测此类耳聋患者血清中的抗内耳组织自身抗体,具体方法如下。     

抗内耳结缔组织抗体与听神经病

目的 研究听神经病患者血清中是否存在抗内耳抗体,探讨听神经病的病因和发病机制.方法 以听神经病患者为研究对象,询问病史、纯音听力测试、脑干诱发电位以及耳声发射筛查.采用豚鼠内耳石蜡切片作为抗原,用间接免疫荧光法检测听神经病患者体内的抗内耳自身抗体.结果 36例听神经病患者中有31例存在抗内耳组织抗体,阳性率86.1%,其中20例为抗骨螺旋板结缔组织(中间有连接螺旋神经节和毛细胞的神经纤维通过)抗体阳性,并存在抗螺旋神经节周围包膜抗体和内耳神经纤维包膜抗体,阳性率55.6%,对照组44例,抗内耳血管内皮抗体阳性4例,阳性率9%.经统计学处理有显著性差异,P＜0.01.结论 听神经病患者血清中存在各种类型的抗内耳结缔组织抗体.     

人体抗内耳组织自身抗体的检测方法

相关研究^[1]表明某些感音神经性聋患者血清中存在各种类型的抗内耳组织自身抗体。为了对临床上此类疾病的诊断提供客观依据，我们参考了临床上其它学科诊断自身免疫性疾病自身抗体的检测方法，用豚鼠内耳石蜡切片，采用免疫荧光法检测此类耳聋患者血清中的抗内耳组织自身抗体，具体方法如下。     

耳廓假性囊肿免疫学病因的初步探讨

目的　探讨耳廓假性囊肿发病与全身免疫功能及局部免疫状态的关系。方法　采集４４ 例耳廓假性囊肿患者的囊液和外周静脉血标本，用免疫单扩散法分别检测囊液和血清中的抗体ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ 和补体Ｃ３ 水平；用聚乙二醇比浊法分别检测囊液和患者血清中的免疫复合物含量；用聚合酶链反应检测囊液中巨细胞病毒ＤＮＡ；用免疫荧光技术检测囊液和血清中的抗核抗体，用间接荧光抗体检测法（ｉｎｄｉｒｅｃｔｉｍｍｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅ ａｓｓａｙ，ＩＦＡ） 检查囊液和患者血清与健康小鼠耳廓冰冻组织切片的反应情况。结果　耳廓假性囊肿患者囊液中抗体ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ 和补体Ｃ３ 水平均明显低于血清中者（ Ｐ＜ ０．０１），囊液和患者血清中均未检出免疫复合物，囊液中也未检测出巨细胞病毒ＤＮＡ；但在部分（３／１０） 患者囊液中发现了抗核抗体，在小鼠冰冻切片中发现了位于软骨组织上的抗原抗体复合物。结论　耳廓假性囊肿中部分患者可能是局限于耳廓的自身免疫性疾病，可能是由于自身抗体与耳廓组织发生自身免疫反应导致反应性渗出液在局部聚集形成囊肿。     

自身免疫性内耳病（附1例报告）

本文报告1例不明原因进行性感音神经性聋,其血清IgM、CIC含量升高,改良的Sainte-Marie法检测显示血清中存在抗内耳血管纹及Corti器自身抗体。给予地塞米松治疗,表现为用药后听力改善,停药则加重,再用药又改善,加用环磷酰胺后听力稳定,最终听阈改善40dBpeSPL以上,根据McCabe提出的诊断依据,可以认为此例内耳疾病是由自身免疫因素介导所致。     

感音神经性聋病人的抗内耳血管抗体测定的研究

目的 :研究某些感音神经性聋患者血清中是否存在抗内耳血管抗体。方法 :通过临床详细询问病史、纯音测听、声导抗测试及耳声发射筛查 ,选择耳蜗性聋患者 4 0 7例为研究对象 ,其中突发性耳聋 35例 ,Ménière′s病 4 1例 ,不明原因耳蜗性耳聋 331例。以豚鼠内耳石蜡切片作为抗原 ,用间接免疫荧光法检测患者血清中的抗内耳血管抗体。结果 :4 0 7例患者中有 6 9例血清中抗内耳血管抗体阳性 ,阳性率为 16 .95 %。其抗体类型有抗毛细血管内皮抗体 ,抗血管壁弹力纤维抗体 ,抗血管壁内膜和外膜抗体等。 6 9例患者中 ,单纯抗血管壁抗体阳性者 31例 ,占 4 4 .93% ,其余 38例患者还同时存在其它抗内耳抗体。在 6 9例患者中临床诊断突发聋者 12例 ,Ménière′s病者 13例 ,不明原因耳蜗性聋者 4 4例 ,占6 3.77%。 6 9例患者纯音测听结果显示低频听力下降者 4 2例 ,平坦型听力下降者 2 4例 ,高频听力下降者 3例。结论 :某些感音神经性聋患者血清中存在各种类型的抗内耳血管抗体。     

系统性红斑狼疮患者血清中抗内耳组织自身抗体的免疫转印…

为了解系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者血清中是否存在在抗内耳组织交叉反应性自身抗体，提取制备豚鼠内耳膜迷路抗原、应用免疫转印技术，对１８例尚无听力下降的ＳＬＥ患者进行分析。结果发现：１６例（占８８．９％）患者血清中存在着抗内耳组织交叉反应性自身抗体，而１１例正常照血清全部为阴性。提示内耳也可能是ＳＬＥ多器官受损的靶器官之一。     

仓鼠头部切片在自身免疫性内耳病中的实验观察

目的含有组织抗体的内耳病患者血清与未固定及未脱钙的仓鼠头部冰冻切片反应可避免抗原性的改变,而且在同一张切片上耳蜗以外的组织可以用来对照.方法66份前庭听觉功能障碍或听力正常的患者血清和一份正常人的血清与仓鼠头部切片进行反应,结果抗血管内皮抗体、抗核抗体以及抗线粒体抗体阳性的血清和仓鼠头部切片上的内耳以及其它组织呈现阳性反应.表明患者血清中的这些抗体对内耳来说不是器官特异性的.50例前庭听觉功能障碍的患者血清中只有2例有耳硬化的患者血清在免疫发病机理上可以看作是半器官特异性的.抗内膜抗体和抗平滑肌抗体阳性的血清对内耳组织反应阴性.对头皮肌和镫骨动脉壁及内耳动脉壁有反应.Corti氏器的盖膜显示出非特异性的自身绿色荧光.结论头部切片对于区分器官特异性抗体以及诊断自身免疫性内耳病是一种新的、方便的且安全的技术.单纯的免疫组化测定并没有对内耳疾病的单因素病因学给出一个提示.在使用患者血清中的组织抗体时,其它的额外因素也应该被考虑在内,因为前庭听觉功能障碍在病因学可能是多因素的.     

梅尼埃病血清抗Ⅱ型胶原抗体的研究

目的了解梅尼埃病与自身免疫之间的关系。方法测试了30例正常人和30例梅尼埃病患者血清中的非特异性免疫球蛋白（IgG、IgM和IgA），补体（C3和C4），以及抗Ⅱ型胶原抗体。结果梅尼埃病患者血清中非特异性IgG、IgM和IgA以及C3和C4均在正常范围；而患者中53．3％的抗Ⅱ型胶原抗体IgG明显增高，在正常对照组的血清中抗Ⅱ型胶原抗体均不增高。结论自身免疫反应可能是该病的原因之一。     

低频感音神经性聋患者的内耳免疫学探讨

目的 测定抗内耳自身抗体,以研究低频感音神经性耳聋患者与内耳免疫的相关性。方法 通过临床详细询问病史、纯音测听、声导抗测试及ABR测试,选择低频感音神经性聋患者30例做为研究对象。以豚鼠内耳石蜡切片作为抗原,用间接免疫荧光法检测患者血清中的抗内耳抗体。结果 30例患者中有26例血清中抗内耳抗体阳性,阳性率为86.67%,P<0.01有极显著性差异;低频感音神经性聋在青少年组(≤25岁)和女性组呈高发,阳性率均为63.33％(19／30),P<0.05有显著性差异;低频感音神经性聋多为双侧耳聋,少数为单侧耳聋,双侧耳聋阳性率为86.67%(26／30),P<0.01有极显著性差异。结论 自身免疫反应参与了低频感音神经性聋的发病过程;低频感音神经聋与年龄和性别有关;低频感音神经性聋发病多为双侧聋;同时检测患者血清ⅠgM和ⅠgG内耳抗体,可协助诊断。     

自身免疫性内耳病抗内耳组织相关抗体检测及…

按ＭｃＣａｂｅ诊断标准筛选出疑为自身免疫性内耳病患者４１例，进行临床听力学检查及有关免疫学检查，并采用免疫细胞化学（ＡＢＣ）方法，对４１例患者的血清进行抗内耳组织相关抗体的检测，发现４例有明显的阳性反应。结果表明部分自身免疫性内耳病患者血清中可能存在有抗内耳组织的特异性抗体，结果还显示免疫介导的内耳病可能是耳蜗或蜗后起源的。对自身免疫性内耳病的临床检测方法、诊断标准和治疗原则进行讨论。     

系统性红斑狼疮患者血清中抗内耳组织自身抗体的免疫转印分析

为了解系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者血清中是否存在抗内耳组织交叉反应性自身抗体，提取制备豚鼠内耳膜迷路抗原，应用免疫转印技术，对１８例尚无听力下降的ＳＬＥ患者进行分析。结果发现：１６例（占８８．９％）患者血清中存在着抗内耳组织交叉反应性自身抗体，而１１例正常对照血清全部为阴性。提示内耳也可能是ＳＬＥ多器官受损的靶器官之一。     

抗内耳抗体与突发性聋

目的研究突发性聋患者血清中是否存在抗内耳抗体,探讨内耳抗体与突发性聋的相关性。方法经病史询问、耳科检查和听力学检查,由北京同仁医院耳科门诊诊断的突发性聋患者为研究对象。采用豚鼠内耳石蜡切片作为抗原,用间接免疫荧光法检测突发性聋患者体内的抗内耳自身抗体。结果74.0%（37/50）的突聋患者存在各种抗内耳组织抗体,12.8%（9/70）的对照组个体存在抗内耳抗体;经统计学分析P〈0.01,有显著性差异。44.0%（21/50）的突聋患者存在抗内耳血管内皮抗体和抗内耳血管壁抗体,突聋患者还存在其他类型的抗内耳组织抗体。结论突发性聋患者血清中存在各种类型的抗内耳组织抗体。抗内耳抗体与突发性聋的关系需要进一步探讨。     

三种原因不明内耳病抗内耳组织自身抗体的检测

提取，制备豚鼠内耳膜迷路抗原，成功地建立了免疫转印法，对３３例不明原因内耳病（不明原因进行性感音性聋１０例、突发性聋１５例、Ｍｅｎｉｅｒ病８例）进行分析，发现１０例（３０．３％）患者血清中存在抗内耳组织自身抗体，提示自身免疫反应可能参与部分原因不明内耳病的发病过程，本研究表明，应用免疫转印技术检测抗内耳组织自身抗体，对进一步认识和探讨自身免疫因素在原因不明内耳病的发病机制中的作用有重要价值。     

三种原因不明内耳病抗内耳组织自身抗体的检测

提取、制备豚鼠内耳膜迷路抗原，成功地建立了免疫转印法（ｉｍｍｕｎｏｂｌｏｔｔｉｎｇ），对３３例不明原因内耳病（不明原因进行性感音性聋１０例、突发性聋１５例、Ｍｅｎｉｅｒ病８例）进行分析，发现１０例（３０．３％）患者血清中存在抗内耳组织自身抗体，提示自身免疫反应可能参与部分原因不明内耳病的发病过程。本研究表明：应用免疫转印技术检测抗内耳组织自身抗体，对进一步认识和探讨自身免疫因素在原因不明内耳病的发病机制中的作用有重要价值。     

耳廓假性囊肿免疫学病因的初步探讨

目的 探讨耳廓假性囊肿发病与全身免疫功能及局部免疫状态的关系。方法 采集４４例耳廓假性囊肿患者的囊液和外周静脉血标本,用免疫单扩散法分别检测囊液和血清中的抗体ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ和补体Ｃ３水平;用聚乙二醇比浊法分别检测囊液和患者血液中的免疫复合物含量;用聚合酶链反应检测囊液中巨细胞病毒ＤＮＡ;用免疫荧光技术检测囊液和血清中的抗核抗体,用间接荧光抗体检测法（ＩＦＡ）检查囊液和患者血清与健康小鼠耳廓     

豚鼠膜迷路蛋白组成分析及免疫转印法检测感音神经…

比较了多种条件提取的豚鼠膜迷路蛋白，发现用十二烷基磺酸钠（ＳＤＳ）或Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００提取效率高，冻融法较超声粉碎法更可取。成功地建立了免疫转印（Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ）法，并初步运用于血清抗膜迷路蛋白抗体的检测。４２例不明原因感音神经性聋患者中１６例患者血清中抗６８ｋＤ抗体阳性，同时伴有ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ升高。部分正常对照组血清中也存在该抗体，但反应弱，重复性差。     

豚鼠膜迷路蛋白组成分析及免疫转印法检测感音神经性聋患者抗68kD抗体

比较了多种条件提取的豚鼠膜迷路蛋白，发现用十二烷基磺酸钠（ＳＤＳ）或ＴｒｉｔｏｎＸ－１００提取效率高，冻融法较超声粉碎法更可取。成功地建立了免疫转印（Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ）法，并初步运用于血清抗膜迷路蛋白抗体的检测。４２例不明原因感音神经性聋患者中１６例患者血清中抗６８ｋＤ抗体阳性，同时伴有ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ升高。部分正常对照组血清中也存在该抗体，但反应弱，重复性差。     

梅尼埃病:抗基底膜抗体的作用

近年来发现梅尼埃病(MD)患者血清中抗Ⅱ型胶原(C)抗体水平增高,认为MD病因与自身免疫有关,但文献结果矛盾不一。在许多自身免疫疾病如进行性系统性硬化(PSS)、雷诺氏现象(RP)患者中发现抗CN和抗基膜(Iaminin,la)抗体,表明其他存在于基底膜中的胶原的免疫反应亦可能与MD有关。本文对45例MD、24例PSS、24例RP和25例正常对照组进