射干麻黄汤对哮喘豚鼠气道ECP和嗜酸性粒细胞凋亡的影响

目的观察中药射干麻黄汤对哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中嗜酸性粒细胞(EOS)凋亡、嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)水平的影响。方法健康雄性Hartley系豚鼠随机分为射干麻黄汤组、哮喘组和正常对照组,采用原位细胞凋亡(TUNEL)、荧光酶标记法和RT-PCR技术检测BALF中EOS凋亡、ECP水平。结果射干麻黄汤组BALF中EOS较哮喘组明显下降,EOS凋亡明显上升;ECP水平较哮喘组明显下降。结论射干麻黄汤可抑制哮喘豚鼠气道EOS的上升,增加EOS的凋亡,降低ECP水平,从而减轻气道炎症反应。     

复方辛夷口服液对实验性哮喘豚鼠气道炎症的影响

目的:观察中药疏风宣肺、利气平喘的复方辛夷口服液对实验性支气管哮喘豚鼠气道炎症的作用,并探讨其作用机理。方法:采用卵蛋白(OA)致敏豚鼠哮喘模型,60只豚鼠随机分为6组,空白组、模型组、阳性对照组、中药3个剂量组,分别观察引喘时间、肺组织病理学、支气管肺灌洗液(BALF)中嗜酸细胞(EOS)数目和凋亡情况。结果:复方辛夷口服液3个剂量组均能延长豚鼠引喘潜伏期,与模型组比较差异非常显著(P<0.01);模型组BALF细胞计数EOS量显著增高,中药组各剂量组BALF中EOS数均少于哮喘组(P<0.05~0.01)。模型组支气管黏膜轻度水肿,部分支气管内皱褶减少伴部分上皮脱落,支气管壁、管周及肺泡区见炎细胞浸润,其中较多嗜酸细胞浸润,支气管壁增厚;电镜见模型组细支气管破坏,肺泡Ⅱ型细胞变性,肺泡内EOS浸润。中药各剂量组以上改变显著较轻,见BALF中EOS凋亡。结论:疏风宣肺、利气平喘可以减轻哮喘的气道炎症,其作用与抑制嗜酸细胞浸润、促进嗜酸细胞凋亡有关。     

小青龙汤对不同周龄哮喘豚鼠气道重塑的影响

目的探讨小青龙汤对不同周龄哮喘豚鼠气道重塑及相关炎性因子的作用,并与糖皮质激素干预比较。方法豚鼠用卵清蛋白(OVA)腹腔注射系统致敏,并用1%OVA雾化吸入激发的方式建立哮喘豚鼠模型,HE染色观察肺组织病理,酶联免疫法(ELISA)测定血清中MMP-9及TIMP-1含量,图像分析软件测量气道重塑程度的指标。结果地塞米松组4周龄与模型组4周龄豚鼠相比WAt/Pbm,WAi/Pbm,WAm/Pbm明显降低(P0.01,P0.01,P=0.01),地塞米松组6周龄与模型组6周龄相比WAt/Pbm,WAi/Pbm,WAm/Pbm明显降低(P0.01,P=0.01,P=0.01),小青龙汤组4周龄与模型组4周龄相比WAt/Pbm,WAi/Pbm,WAm/Pbm明显降低(P0.01,P0.01,P0.01),小青龙汤6周龄与模型组6周龄相比WAt/Pbm,WAi/Pbm,WAm/Pbm明显降低(P0.05,P0.05,P0.05)。结论与地塞米松相比,小青龙汤在改善的气道重塑方面作用无明显差别。     

平喘颗粒通过抑制miR-21的表达对气道炎症及Eotaxin mRNA的影响

目的观察平喘颗粒通过抑制miR-21的表达对气道炎症及Eotaxin mRNA的影响。方法选择120只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、miR-21抑制表达组、miR-21抑制表达载体对照组、miR-21抑制表达+中药组、中药组。正常组给予生理盐水雾化,模型组、miR-21抑制表达组、miR-21抑制表达载体对照组、miR-21抑制表达+中药组、中药组应用卵蛋白吸入法制成慢性哮喘动物模型。miR-21抑制表达组、miR-21抑制表达载体对照组、miR-21抑制表达+中药组、中药组在造模前给予miR-21慢病毒溶液滴鼻造模。在末次激发24 h后观察大鼠的一般状态、BALF及外周血中EOS计数、用图像分析方法测定支气管基底膜厚度(WAi/Pi)和平滑肌层厚度(WAm/Pi)、Real-time PCR法检测miR-21、Eotaxin m RNA的表达。结果与空白组比较,模型组的BALF及外周血中EOS计数、WAi/Pi、WAm/Pi、miR-21、Eotaxin m RNA表达量显著升高(P<0.01);与模型组比较,miR-21抑制表达+中药组、中药组均可明显降低上述指标(P<0.05或P<0.01)。结论平喘颗粒能够通过抑制miR-21的表达,降低Eotaxin m RNA表达,从而影响EOS水平,减轻气道炎症,起到治疗作用。     

三拗汤加味对哮喘豚鼠肺内嗜酸细胞凋亡的影响

目的:观察三拗汤加味(SATJW)对哮喘豚鼠肺内EOS凋亡的影响.方法:60只豚鼠分为正常组、哮喘模型组、中药3个剂量组及博利康尼组,末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿嘧啶缺口末端标记(TdT-mediated dUTPnick end labelling,TUNEL)技术原位标记细胞凋亡,计算机图像分析技术对气道壁EOS浸润和EOS凋亡进行定量检测,电镜观察BALF中凋亡细胞形态学改变.结果:哮喘模型组豚鼠支气管壁浸润显著增多.肺内凋亡细胞较少;各SATJW组EOS的浸润量较哮喘模型组有明显降低,凋亡较哮喘模型组明显.BALF中SATJW组电镜下见嗜酸性细胞染色质浓缩、边集、聚集在核膜周边.胞核发生固缩,胞膜皱缩等凋亡现象.结论:SATJW在哮喘发生过程中有诱导EOS凋亡的作用.     

中药补肺益肾方对幼龄哮喘豚鼠血清超氧化物歧化酶、丙二醛的影响

目的：研究中药补肺益肾方的全身免疫调节作用，探讨其防治小儿哮喘的机理。方法：利用幼龄哮喘豚鼠模型，在迟发相哮喘反应阶段，观察中药补肺益肾方对血清SOD、MDA的影响。结果：补肺益肾方可使豚鼠血清MDA含量下降而SOD升高。结论：补肺益肾方具有全身免疫调节作用，从而可阻断气道炎症和气道高反应性的发生。     

消喘膏贴敷对哮喘豚鼠Th1/Th2类细胞因子的影响

目的观察消喘膏贴敷对哮喘豚鼠Th1/Th2类细胞因子的影响.方法采用卵蛋白(OVA)腹腔注射致敏加雾化吸入激发的方法复制豚鼠哮喘模型,外用贴敷给药,测定哮喘模型组和消喘膏组豚鼠用药前后引喘潜伏期的变化;光镜下检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数和嗜酸粒细胞(EOS)数量,用酶联免疫吸附法测定BALF上清中白细胞介素-4(IL-4)和γ-干扰素(IFN-γ)水平,并进行组间比较.结果(1)贴敷后消喘膏组豚鼠引喘潜伏期延长,与哮喘模型组相比有显著差异(P＜0.01);(2)消喘膏组豚鼠BALF中细胞总数和EOS计数与哮喘模型组相比减少(P＜0.01),但与正常对照组相比仍增高(P＜0.01);(3)消喘膏组豚鼠BALF上清中IL-4水平与哮喘模型组相比降低(P＜0.01),但与正常对照组相比仍增高(P＜0.01);IFN-γ水平略增高,但与哮喘模型组及正常对照组相比均无显著差异(P＞0.05);(4)消喘膏组IL-4/IFN-γ比值低于哮喘模型组(P＜0.01),但仍高于正常对照组(P＜0.01).结论消喘膏贴敷后可将哮喘豚鼠模型中以IL-4升高为主的Th2优势逆转为以IFN-γ为主的Th1优势,进而减轻哮喘豚鼠的气道炎症.     

穴位贴敷对慢性哮喘小鼠气道重塑及转化生长因子β1/Smad 3表达的影响

目的:探讨转化生长因子β1(TGF-β1)/Smad 3信号通路在穴位贴敷改善慢性哮喘小鼠气道重塑中的作用机制。方法:BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组、假穴位贴敷组、穴位贴敷组、地塞米松组,每组8只,采用卵白蛋白致敏的方法制备慢性哮喘模型。穴位贴敷组运用白芥子、延胡索、生甘遂、细辛组方药贴贴敷双侧"肺俞""心俞""膈俞",假穴位贴敷组运用凡士林药贴贴敷双侧"肺俞""心俞""膈俞",两组均每次贴敷6h,每日1次,共治疗14d;地塞米松组腹腔注射地塞米松1mg/kg,每日1次,共治疗14d。应用小鼠肺功能仪检测气道阻力,应用苏木精-伊红染色在光镜下观察各组小鼠气道病理学改变,应用图像分析软件测定肺内支气管管壁面积(WAt)/管腔内周长(Pi)、管壁平滑肌面积(WAm)/Pi,应用免疫组化法检测小鼠肺组织中TGF-β1及Smad 3蛋白表达。结果:与正常组相比,模型组和假穴位贴敷组小鼠气道阻力、WAt/Pi、WAm/Pi、肺组织TGF-β1和Smad 3蛋白表达均显著增高(P0.01);穴位贴敷组、地塞米松组与模型组、假穴位贴敷组比较,小鼠气道阻力、WAt/Pi、WAm/Pi、肺组织中TGF-β1及Smad 3蛋白表达均下降(P0.05);穴位贴敷组和地塞米松组之间比较,各指标差异均无统计学意义(P0.05)。模型组支气管管壁大量炎性细胞浸润,管腔狭窄,气道上皮增生,支气管黏膜水肿增厚;穴位贴敷组肺泡内少量炎性细胞浸润,肺间隔未见明显增厚;地塞米松组小气道黏膜上皮较完整,肺间隔未见明显增厚。结论:穴位贴敷可通过下调慢性哮喘小鼠气道TGF-β1/Smad 3通路以改善气道重塑,从而治疗慢性哮喘。     

洋果胶囊治疗支气管哮喘的实验研究

目的:研究洋果胶囊治疗支气管哮喘的机理.方法:健康BALB/c小鼠50只,随机分为对照组、模型组、中药组、西药组、中西医结合组,除对照组外,其他4组应用OVA制作小鼠支气管哮喘模型.中药组给予洋果胶囊混悬液、西药组给予氨茶碱混悬液和地塞米松混悬液、中西医结合组给予氨茶碱混悬液和地塞米松混悬液外还给予洋果胶囊混悬液,分别检测5组小鼠肺组织中EOS的数量及凋亡率以及外周血免疫球蛋白(IgE)水平.结果:中西医结合组在诱导和促进肺组织内EOS凋亡、减少肺组织中EOS数量、降低IgE水平方面疗效显著,优于中药组与西药组(P<0.05或P<0.01).结论:洋果胶囊能够诱导和促进肺组织内EOS凋亡,减少肺组织中EOS数量,降低IgE水平,从而减轻气道炎症强度,抑制气道炎症,缩短炎症过程,从而达到治疗支气管哮喘的目的,其与西医结合应用,疗效更好.     

佛手挥发油对支气管哮喘小鼠外周血、肺泡灌洗液及肺组织中嗜酸性粒细胞的影响

目的 观察支气管哮喘模型小鼠外周血、支气管肺泡灌洗液(BALF)及肺组织中嗜酸性粒细胞(EOS)的改变以及佛手挥发油对以上指标的影响.方法 Cs,小鼠以卵白蛋白(OVA)致敏造成哮喘模型,分为模型组,对照药物组,佛手挥发油高、中、低3个剂量组,另外10只为健康对照组,分别检测各组小鼠外周血、BALF中EOS的水平并观察肺组织病理切片中EOS的浸润情况.结果 模型组外周血、BALF与对照组比较,EOS均明显增加(P<0.01);肺组织病理切片显示支气管及血管周围大量EOS浸润,各佛手挥发油组与模型组相比外周血BALF中EOS均有不同程度下降,高剂量组差异尤为显著(P<0.01),各组肺组织病理切片中EOS浸润较模型组减少,剂量越大此作用越明显.结论 佛手挥发油可抑制哮喘小鼠外周血、BALF中EOS水平,减少肺组织EOS浸润,拮抗气道炎症而发挥平喘作用,作用强度与剂量有关.     

补脾益气中药对哮喘大鼠BALF中IL-5及GM-CSF含量的影响

目的:探讨白细胞介素-5(IL-5)及粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)在哮喘发病过程中的作用及补脾益气中药对其含量的影响。方法:24只大鼠随机分成3组,每组8只,即:正常对照组、哮喘模型组和中药组。采用卵蛋白、灭活百日咳杆菌疫苗和氢氧化铝干粉配制的溶液腹腔注射致敏以及卵蛋白雾化吸入激发制备大鼠哮喘模型;正常对照组用等量生理盐水替代抗原液;中药组则胃饲补脾益气中药(加味玉屏风散)水溶液。观察支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-5及GM-CSF含量的变化。结果:与正常组比较,模型组BALF中IL-5及GM-CSF含量均显著增高(均P<0.05或P<0.01),尤其是IL-5增高更显著;相关分析表明,GM-CSF与IL-5、呈显著正相关(r1=0.519,r2=0.521,均P<0.05)。补脾益气中药能降低BAFL中IL-5及GM-CSF的含量(P<0.05或P<0.01)。结论:IL-5、GM-CSF在哮喘大鼠的气道炎症细胞浸润过程中起重要作用,可能加速了哮喘非特异性气道炎症的发生和发展;GM-CSF与IL-5之间存在密切的联系,可能对嗜酸粒细胞的聚集、迁移、活化和黏附有协同作用。补脾益气中药(加味玉屏风散)可以通过降低细胞因子水平来改善气道的炎症状况。     

疏风通络方对哮喘大鼠不同时相外周血和肺泡灌洗液嗜酸细胞数量变化的影响

目的：探讨疏风通络方对哮喘大鼠血液和肺泡灌洗液（BALF）嗜酸细胞（EOS）数量变化的影响。方法：选择SPF级雄性Wistar大鼠为研究对象,随机分为正常组、模型组、氟美松组、DPI组、中药低、中、高剂量组,共7组,每组大鼠36只。第1d致敏：正常组给予生理盐水1mL代替抗原腹腔注射致敏,而其他6组给予1mL造模液（含Ⅴ级卵清蛋白100mg,氢氧化铝100mg和灭活百日咳杆菌6×10^9个）腹腔注射致敏;第15d开始激发：将各组大鼠分别置于相同大小的雾化箱内,正常组给予生理盐水6mL雾化激发,其他6组给予5％的Ⅴ级卵清蛋白（OVA）溶液6mL雾化激发,每次激发前2h正常组给予生理盐水1mL灌胃,而其他6组给予相应的药物灌胃。各组每天激发1次,每次激发30min,连续激发10d。距首次激发后的0h、6h、12h、24h、72h、10d各时点分别麻醉下每组取6只大鼠心脏采血和肺泡灌洗（取材结束后大鼠失血死亡）,然后迅速对血液和BALF标本进行EOS数量检测。结果：血中EOS数量变化：在不同时点模型组均高于正常组（P〈0．001）;各治疗组与模型组相比,氟美松组在0h、6h、12h、10d时点处于最低（P〈0．01或P〈0．001）,DPI组在24h、72h时点处于最低,但二者之间比较没有显著差异（P〉0．05）;其他治疗组之间相比,0—72h各时点DPI组处于最低（P〈0．001）,在10d时点中药高剂量组处于最低,且优于DPI组（P〈0．01）。BALF中EOS数量：在0h时点各组之间没有显著变化（P〉0．05）;在6h时除中药高剂量组外,模型组与其他治疗组和正常组之间均没有差异（P〉0．05）;在12h时点除模型组较正常组显著上升（P〈0．05）,各治疗组与模型组之间及各治疗组之间均没有差异（P〉0．05）;在24h时点,模型组显著高于正常组（P〈0．01）,各治疗组与模型组比较,只有氟美松有显著差异（P〈0．01）;在72h、10d时点模型组均显著高于正常组（P〈0．001）,DPI组和中药低剂量组与模型组比较均没有差异（P〉0．05）,氟美松组、中药中、高剂量组均与模型组比较有显著差异（P〈0．05或P〈0．01或P〈0．001）,三者比较,氟美松组EOS数值最低,中药中、高剂量组之间比较没有显著差异（P〉0．05）。结论：氟美松对哮喘大鼠血和BALF中EOS数量的影响最大,能显著降低血和BALF中EOS数量,而中药疏风通络方起效、显效慢,效果始终不及氟美松。     

扶正平喘汤对过敏性哮喘豚鼠NO、ET-1的影响术

目的探讨扶正平喘汤防治过敏性哮喘的机制。方法将40只豚鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、地塞米松组、扶正平喘汤组，用鸡卵清蛋白雾化激发制成哮喘模型。地塞米松组与扶正平喘汤组分别于激发前3d给药，至激发后3d停药。用计数板计数外周血嗜酸性细胞（EOS）数量，观察小支气管形态学改变和肺组织中EOS浸润情况；生化法和放免法测定血清和肺泡灌洗液（BALF）中一氧化氮（NO）和内皮素-1（ET-1）的含量。结果扶正平喘汤可明显改善模型豚鼠小支气管损伤情况，减轻外周血和肺组织的EOS浸润程度，降低血清和BALF中NO的含量，降低BALF中ET-1的含量。结论扶正平喘汤可能通过减轻EOS浸润、调节机体NO和ET-1产生，对过敏性哮喘发挥预防和治疗作用。     

定喘止哮颗粒对支气管哮喘动物模型的影响

目的研究定喘止哮颗粒对支气管哮喘动物模型呼吸曲线及血液中嗜酸性粒细胞（EOS）含量的影响。方法通过10%卵蛋白肌肉注射、超声雾化吸入致敏建立支气管哮喘大鼠模型。4周后,分别为对照组,模型组,阳性对照药氨茶碱0.025g/kg组,定喘止哮颗粒4、2、1g/kg三个剂量组。观察各组动物呼吸曲线变化,及血液中嗜酸性粒细胞（EOS）的含量变化情况。结果哮喘模型豚鼠的呼吸频率明显加快,与对照组比较有显著性差异（P〈0.01）,定喘止哮颗粒4g/kg剂量组能明显抑制豚鼠的加快的呼吸频率（P〈0.05）;定喘止哮颗粒4g/kg剂量组能显著降低血液中的EOS量（P〈0.05）。结论定喘止哮颗粒可以缓解哮喘引起的呼吸急促、频率加快;显著降低血液中的EOS量,从而达到减轻哮喘气道炎症的作用。     

中药组合方作用于流感病毒H1N1感染MDCK细胞的实验研究

目的：观察中药方剂大青叶、马齿苋、甘草组合物在流感病毒H1N1感染的MDCK细胞模型中抗流感病毒的作用。方法：建立流感病毒H1N1感染MDCK细胞模型,试验分为药物组、正常对照组和病毒对照组,37℃、5%CO2培养箱中培养18h后观察各组细胞的增殖变化,收集细胞上清液,检测各组流感病毒血凝效价及ELISA法检测TNF-ɑ、IFN-γ、IL-2与IL-6的含量。结果：与病毒对照组相比,用药后流感病毒的血凝效价从2-8降为2-4,二组流感病毒血凝效价比较,P〈0.01。与病毒对照组相比,中药方剂大青叶、马齿苋、甘草组合物组TNF-ɑ水平下降（P〈0.05）,IFN-γ水平升高（P〈0.05）,差异均有统计学意义,IL-2有升高的趋势（P〉0.05）。结论：用流感病毒H1N1感染MDCK细胞模型,可以较好的评价中药抗流感病毒的作用。中药方剂大青叶、马齿苋、甘草组合物可通过降低TNF-ɑ的含量以减轻病毒对宿主细胞的免疫病理损伤,并通过促进IFN-γ、IL-2等的分泌以提高机体的抗病毒能力;同时该中药组合物可较好的抑制流感病毒的复制。     

齐刺阳陵泉对胆绞痛豚鼠IL-1β、IL-6的影响

目的:观察齐刺胆的下合穴阳陵泉对胆绞痛豚鼠血清白介素1β(1L-1β)和白介素6(IL-6)的影响以及镇痛效果。方法:将60只成年雄性豚鼠随机分为空白组(10只)、模型组(10只)、药物组(20只)和针刺组(20只),空白组正常饲养,模型组、药物组、针刺组造模成功后,药物组给予双氯芬酸钠盐酸利多卡因注射液腹腔注射,针刺组取双侧阳陵泉穴进行齐刺,每日1次。治疗5天后于腹主动脉采取新鲜血液,匀浆、离心后分离血清,采用酶联免疫吸附法(ELISE)测定IL-1β,IL-6的含量。结果:①与空白组比较,模型组豚鼠血清IL-1β、IL-6含量明显升高,差异有非常显著意义(P0.01);②与模型组比较,药物组、针刺组血清IL-1β、IL-6含量明显偏低,差异有非常显著意义(P0.01);与药物组比较,针刺组IL-1β、IL-6含量明显偏低,差异有显著意义(P0.05)。结论:针刺治疗对胆绞痛豚鼠有一定的镇痛作用,且针刺疗效明显优于药物组。     

西药联合耳穴贴压对小儿CVA相关指标的影响

目的:观察西药联合耳穴贴压对咳嗽变异性哮喘(CVA)患儿的小气道功能、外周血嗜酸性粒细胞(EOS)计数、血清总IgE以及细胞因子TNF-α、IL-10、IL-13的影响。方法:根据随机原则,将80例咳嗽变异性哮喘患儿分为实验组和对照组,每组40例,对照组给予常规治疗,实验组在此基础上加用耳穴贴压,观察两组治疗前后小气道功能、EOS计数、血清总IgE以及TNF-α、IL-10、IL-13的变化。结果:两组治疗前各观察指标无差异(P0.05),治疗后均较治疗前明显改善(P0.05),实验组各项指标改善情况优于对照组(P0.05)。结论:西药联合耳穴贴压在改善咳嗽变异性哮喘患儿的小气道功能、EOS计数、血清总IgE以及TNF-α、IL-10、IL-13方面优于单纯西药治疗。     

针刺对重症肌无力模型兔血清IL-18的影响

目的:观察针刺阳陵泉对实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)兔乙酰胆碱受体抗体(AChR-Ab)和白介素18(IL-18)的影响。方法:选用3月龄雌性日本大白兔造模,评估后随机分组:模型组、单纯针刺组、单纯中药组、针药结合组。予以相应处理。各组于第0、4、8周取血,测定AChR-Ab和IL-18。结果:针刺阳陵泉和中药均能不同程度地降低EAMG兔血液AChR-Ab和IL-18的含量,针药结合有协同作用(P<0.01)。结论:针灸可以影响EAMG兔血液AChR-Ab和IL-18含量,这可能是针灸治疗重症肌无力的作用机制之一。     

益智健脑颗粒对阿尔茨海默病患者外周血清中IL-1β与TNF-α表达的影响

目的:探讨益智健脑颗粒对阿尔茨海默病(AD)患者外周血清中IL-1β与TNF-α表达的影响。方法:严格按照配对的原则选择AD患者及健康老人,应用双抗体夹心酶联免疫吸附测定(ELISE)检测IL-1β与TNF-α表达的水平。结果:血清IL-1β含量AD组与正常对照组比较,差异有显著性(P0.05);血清TNF-α含量AD组高于正常对照组,但差异无显著性(P0.05);中药组治疗前后IL-1β比较,P0.05,TNF-α治疗前后比较,P0.05;西药组治疗前后IL-1β比较,P0.05,TNF-α治疗前后比较,P0.05;中药组与西药组比较差异无显著性意义(P0.05)。结论:(1)AD患者血清IL-1β、TNF-α水平高于正常老年人,这可能与AD脑内炎症反应有关;(2)益智健脑颗粒可通过抑制细胞炎性因子而对AD患者发挥其治疗作用。