蜗牛多糖体外抗乙型肝炎病毒作用研究

目的:探讨蜗牛多糖抗乙肝病毒活性。方法:将不同浓度蜗牛多糖与HepG2.2.15细胞株共培养,以拉米夫定为阳性对照药,用ELISA法检测HBsAg和HBeAg分泌水平,实时荧光定量PCR检测HBV DNA含量,计算抑制率。结果:蜗牛多糖在体外能有效抑制HepG2.2.15细胞HBsAg和HBeAg分泌,最大抑制率分别为42.8%和52.1%;对HBV DNA的复制有一定抑制作用(P<0.05)。结论:蜗牛多糖在体外具有显著的抗乙型肝炎病毒作用,且毒性较小,具有良好应用前景。     

蛞蝓多糖体外抗乙型肝炎病毒作用研究

目的:研究蛞蝓多糖体外抗乙型肝炎病毒的作用。方法:以不同浓度的蜗牛多糖和拉米夫定与HepG2.2.15细胞混合培养,通过MTT法检测药物的细胞毒性,9d后用ELISA法检测细胞培养液中的HBsAg和HBeAg分泌水平,用实时荧光定量PCR技术检测培养液中的HBV-DNA含量。结果:蛞蝓多糖在1mg·mL^-1浓度以下对细胞无毒性。蛞蝓多糖在所稀释的各浓度下,对HBsAg、HBeAg均有抑制作用,最大抑制率分别为56.2%和58.1%;HBsAg、HBeAg的治疗指数分别大于19.98%、22.78%。蛞蝓多糖可抑制HBV-DNA的复制(P<0.05)。结论:蛞蝓多糖在体外具有显著抑制HBV的作用。     

氧化苦参碱体外抗乙型肝炎病毒作用

目的:体外观察氧化苦参碱(OM)抗乙型肝炎病毒(HBV)作用,并初步探讨其作用机制.方法:用125,250,500,1000,2000 mg·L-1OM连续作用于90％汇合度的HepG2.2.15细胞9d,以MTT比色法观察药物细胞毒性;用酶联免疫法测定细胞上清液中乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg),乙型肝炎病毒s抗原(HBsAg);采用荧光定量PCR法(FQ-PCR)测定细胞上清液中HBV DNA,细胞中HBV DNA和共价闭合环状DNA(cccDNA).结果:OM对细胞内HBV DNA和cccDNA,以及细胞外HBV DNA均有抑制作用,随着浓度升高抑制作用加强,2000 mg·L-1OM对细胞内HBV DNA,cccDNA和细胞外HBV DNA的抑制率分别为64.56％,52.12％,54.25％;对HBsAg和HBeAg的分泌也有抑制作用,且浓度越高、处理时间越长,抑制作用越明显;在相同条件下对HBsAg的抑制作用强于HBeAg,OM浓度为2000 mg·L-1时对HBsAg和HBeAg的抑制率分别为51.59％,17.88％.结论:OM能有效抑制HepG2.2.15细胞中HBV复制,该作用是抑制病毒核酸复制和基因表达的结果.     

鸡矢藤挥发油体外抗乙型肝炎病毒作用研究

目的 对鸡矢藤挥发油抗HBV作用进行体外抗病毒实验研究.方法 采用水蒸气蒸馏法提取鸡矢藤挥发油,以HepG 2.2.15细胞为实验对象,检测鸡矢藤挥发油对HepG 2.2.15肝癌细胞株的细胞毒性.并在最大无毒浓度下观察鸡矢藤挥发油对HepG 2.2.15细胞表达HBsAg,HBeAg的影响.结果 鸡矢藤挥发油在31～2 000 mg/L的浓度范围内,对HepG 2.2.15细胞有明显抑制作用,TC50为1 550 mg/L, TC0为500 mg/L.在最大无毒浓度下,鸡矢藤挥发油对HBsAg最大抑制率为72.49%,治疗指数为6.74,对HBeAg最大抑制率为23.64%.结论 鸡矢藤挥发油对HepG2.2.15细胞HBsAg,HBeAg分泌有较好抑制作用.     

毛鸡骨草含药血清体外抗乙型肝炎病毒作用的研究

目的:观察毛鸡骨草(Abrus mollis)含药血清体外抗乙型肝炎病毒(HBV)的作用。方法:采取中药血清药理实验方法,以HepG2.2.15细胞为研究模型,将毛鸡骨草含药血清加入HepG2.2.15细胞培养液中培养,分别在72 h和144 h收集细胞培养上清液,采用酶联免疫吸附实验法(ELISA法)和荧光定量PCR(FQ-PCR)法检测毛鸡骨草含药血清对HepG2.2.15细胞株表达的乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和HBV DNA复制的影响。结果:毛鸡骨草含药血清对HepG2.2.15细胞上清液中HBsAg的表达和HBV DNA复制都有不同程度的抑制,以给药剂量为30 g·kg-1·d-1的毛鸡骨草含药血清组作用144 h对HBsAg的抑制率和对HBV DNA复制的抑制率最明显,抑制率分别为34.4%和41.7%。结论:毛鸡骨草在体外有一定的抗HBV作用。     

miR-155抑制HepG2.2.15细胞中乙型肝炎病毒复制与表达的研究

目的研究人miR-155对HepG2.2.15细胞中乙型肝炎病毒(HBV)的抑制作用,为miRNAs治疗乙型肝炎提供理论依据。方法以HepG2.2.15细胞基因组为模板,PCR扩增人miR-155前体序列,双酶切连接到pmR-mCherry质粒,构建pmiR-155真核过表达载体,并转染到HepG2.2.15细胞。设重组组(pmiR-155质粒)、空载组(pmR-mCherry质粒)、转染试剂组和空白组。转染后24 h、48 h、72 h,应用实时荧光定量PCR法检测各组miR-155表达量和HBV DNA拷贝数,化学发光法定量检测HBs Ag和HBe Ag变化情况。结果实时荧光定量PCR结果显示,与空白组相比,重组组miR-155表达量明显提高。化学发光法结果示在转染后48 h,过表达的miR-155对上清培养液所分泌HBs Ag、HBe Ag抑制作用明显,抑制率分别为(83.96±1.52)%和(79.60±8.71)%。定量PCR检测示过表达的miR-155对HBV DNA拷贝数的抑制率分别为(51.87±0.36)%、(43.67±1.51)%和(68.21±6.02)%。结论 miR-155对HBV蛋白的抑制作用具特异性,呈负相关,在体外可抑制HepG2.2.15细胞中HBV的复制和表达。     

茵兰益肝颗粒剂体外抑制乙型肝炎病毒复制的实验研究

[目的]验证含有茵兰益肝颗粒剂药效成分的药物血清对转染乙型肝炎病毒基因的人肝癌细胞系2.2.15(HepG2.2.15)细胞分泌乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)和e抗原的(HBeAg)抑制作用。[方法]组织培养及酶联免疫吸附试验(ELISA)检测。[结果]药物血清第8天对HepG2.2.15细胞半数毒性浓度(TC50)为11.48%,最大药物血清无毒浓度(TC0)为6.0%。6.0%!3.0%、1.50%、0.75%4种药物血清浓度在HepG2.2.15细胞中第8天对HBsAg的抑制率分别为7.89%!5.8%、1.6%、1.6%,对HBeAg抑制率均为负值。[结论]茵兰益肝颗粒剂对HepG2.2.15细胞分泌HBsAg有较低的抑制率,对HBeAg无抑制作用。     

复方六月雪含药血清对HepG2.2.15细胞HBsAg和HBeAg的抑制作用

目的:观察复方六月雪(六月雪、白花蛇舌草、栀子根等)体外抗HBV的作用。方法:采用血清药理学法进行实验,复方六月雪含药血清作用于HepG2.2.15细胞,分别在第72h和144h收集细胞培养上清液,采用ELISA法测定上清液HBsAg和HBeAg的滴度。结果:复方六月雪含药血清在HepG2.2.15细胞培养中可有效地抑制细胞HBsAg和HBeAg的表达(P<0.05、P<0.01),抑制作用有明显的量效反应关系。结论:复方六月雪含药血清在体外具有显著的抗HBV作用。     

HepG2.2.15用于中药复方治疗乙型肝炎研究的相关问题探讨

本课题组前期完成了经方小柴胡汤含药血清对HepG2.2.15细胞干预作用的相关研究,在HepG2.2.15用于中药复方治疗乙型肝炎研究过程中摸索出一些经验,现就此细胞培养及相关血清药理学运用等方面内容与心得进行回顾与总结,以期为同仁提供参考与借鉴。     

六月青皂苷体外对乙型肝炎病毒共价闭合环状脱氧核糖核酸抑制作用的研究

目的 :观察六月青皂苷(terpenoids of Liuyueqing,TLYQ)体外抗乙型肝炎病毒(HBV)共价闭合环状脱氧核糖核酸(cccDNA)复制的作用。 方法 :取HepG 2.2.15细胞,分为正常对照组、阿昔洛韦(ACV)阳性对照组、TLYQ低、中、高剂量组,各组细胞置CO₂孵箱(37 ℃,5%CO₂)中培养24 h后,TLYQ低、中、高剂量组加入TLYQ(终浓度分别为21.25,42.5,85 mg ·L^-1),阳性对照组加ACV(终浓度为1.02 mg ·L^-1),正常对照组加等体积培养液,以上每个浓度设3瓶,于培养72 h,144 h分别取细胞上清液,用实时荧光定量PCR法检测HBV ccDNA拷贝数。 结果 :在细胞培养72 h时,TLYQ高剂量组HBV cccDNA拷贝数即明显下降(P<0.05),在144 h高、中剂量组下降显著(P<0.05或P<0.01),低剂量组下降不明显。TLYQ作用呈明显的量效和时效反应关系。 结论 :TLYQ在体外有明显的抑制乙肝病毒的作用,可能是六月青主要活性成分之一。     

复方肝舒康抗乙肝病毒活性研究

目的:研究复方肝舒康各提取部位的体外抗乙肝病毒(HBV)作用。方法:取各萃取部位作用于乙肝病毒DNA转染人肝癌细胞系2215细胞,以细胞病变(CPE)考察药物对该细胞的毒性,采用酶联法(ELISA)检测药物对2215细胞分泌的表面抗原(HBsAg)和e抗原(HBeAg)表达的抑制作用。结果:石油醚部位、乙酸乙酯部位和正丁醇部位的半数毒性浓度(TC50)分别为125、375、62.5μg/mL。最大无毒浓度(TC0)分别为62.5、125、31.3μg/mL;石油醚部位、乙酸乙酯部位对2215细胞的HBsAg表达抑制作用的半数有效浓度(IC50)分别为48.6、14.0μg/mL,对2215细胞的HBeAg表达抑制作用的半数有效浓度(IC50)52.4、19.7μg/mL,而正丁醇部位均大于125μg/mL。石油醚部位的治疗指数(TI)值分别为2.57和2.43,乙酸乙酯部位的治疗指数分别为26.7和19.04,正丁醇部位均小于2。结论:复方肝舒康提取物乙酸乙酯部位体外抗乙肝病毒的作用最强,石油醚部位抗乙肝病毒作用较弱,正丁醇部位对乙肝病毒无作用。     

大黄虫胶囊辅助抗病毒治疗慢性乙型肝炎临床研究

目的:观察大黄?虫胶囊辅助抗病毒治疗慢性乙型肝炎(CHB)的治疗效果。方法:选取97例CHB患者,采用随机数字表法分为对照组47例及观察组50例。对照组给予抗病毒治疗,观察组给予大黄?虫胶囊辅助抗病毒治疗。比较2组治疗前、治疗6个月后肝功能水平、肝纤维化指标及T细胞亚群表达的变化情况。结果:与同组治疗前比较,治疗后2组丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、总胆红素(TBil)、层粘连蛋白(LN)、透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、CD8~+水平及乙肝病毒的脱氧核糖核酸(HBV-DNA)载量均降低(P0.05),CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+均升高(P0.05);与对照组治疗后比较,观察组治疗后ALT、AST、TBil、HA、LN、Ⅳ-C、PCⅢ、CD8~+水平及HBV-DNA载量均较低(P0.05),CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+均较高(P0.05)。结论:大黄?虫胶囊辅助抗病毒治疗CHB患者效果显著,可有效改善患者肝功能及肝纤维化,降低HBV-DNA载量,调节淋巴细胞亚群,提高机体免疫功能。     

乙肝Ⅱ号治疗慢性乙型肝炎临床与实验研究

目的：观察乙肝Ⅱ号治疗慢性乙型肝炎的临床疗效,并探讨其作用机理。方法：采用乙肝Ⅱ号治疗慢性乙型肝炎60例,并与乙肝宁颗粒剂组26例作对照,同时进行实验研究,观察乙肝Ⅱ号对实验性肝损伤及免疫性肝损伤小鼠抗氧化功能的影响。结果：临床治疗组治疗后症状积分及血 清ALT、AST、TBIL有明显改善（P＜0．05）,HBeAg阴转率达41．7％,HBV－DNA阴转率达35％,均优于对照组（P＜0．05）;实验研究表明,乙肝Ⅱ号防治组与模糊组相比,肝损伤明显减轻,血清（肝匀浆）MDA含量下降,SOD活力上升,GSH－PX活力上升,变化程度与用药量呈明显的量关系,且抗自由基的作用优于乙肝宁颗粒剂组。结论:乙肝Ⅱ号慢性乙型肝炎患者有明显疗效,其机理可能与抑制过氧化反应有关。     

慢性乙型肝炎中医辨治思考

目的：探讨慢性乙型肝炎中医辨治的理论，寻求更有效的防治方法。方法：参阅中医古籍中相关论述。结合现代医学对慢性乙型肝炎的认识、研究成果，对命题进行探讨分析。结论：慢性乙型肝炎的治疗是医学难题。病因病机认为外感“疫毒”是发病的根本条件，正气不足是发病基础，湿热、虚实、瘀相互夹杂共同为病；辨证论治首先为抗“疫毒”，其次为补正气，最后辨证论治要兼顾湿热、虚实、瘀兼症。本病的研究方向应该是筛选有直接杀灭乙肝病毒的中药（或有效成分）或复方，是彻底解决治疗慢性乙型肝炎的关键。     

联用黄芪注射液和复方丹参注射液治疗乙型病毒性肝炎并心肌炎

乙型肝炎病毒 (ＨＢＶ)感染造成肝外器官的损伤已越来越引起医学界人士的重视 ,临床上乙型病毒性肝炎合并心肌炎者并不少见。 1999年以来 ,我们联用黄芪注射液、复方丹参注射液治疗乙型病毒性肝炎合并心肌炎取得一定疗效 ,现总结如下。1　临床资料1.1　病例选择观察治疗 6 0例均系本院住院病人 ,乙型病毒性肝炎诊断均符合 1995年全国传染病与寄生虫病学术会议修订的肝炎防治方案[1] ,心肌炎诊断均符合1995年全国心肌炎心肌病专题研讨会提出的病毒性心肌炎诊断参考标准[2 ] 。并排除甲状腺功能亢进症、风湿性心肌炎、中毒性心肌炎、冠心病等…     

华蟾素治疗慢性乙型肝炎病毒携带者临床研究

采用华蟾素治疗慢性乙型肝炎病毒(HBV)携带者147例,每日肌肉注射4ml,30天为1疗程,用药1～3个疗程。结果治疗组HBsAg、HBeAg、PHSA-R、DNAP阴转率分别为21.09%、38.89%、63.64%、50%,明显高于对照组(143例,以维丙肝、山豆根或甘草甜素治疗)的2.1%、10.87%、33.33%及7.7%(P<0.001～0.02)。抗-HBS、抗-HBe的阳转率前者为19.29%及23.45%,亦明显高于后者的4.26%及7.14%(P<0.001)。表明华蟾素对HBV复制有较明显的抑制作用。     

中医药抗乙型肝炎病毒研究概况

综合近年来有关文献可知：中医药在抗乙型肝炎病毒的研究方面取得了一定进展，主要从辨证论治和实验研究两大方面进行了探讨。中医药治疗本病不但能控制病情的发展，而且能改善近期症状；提高HBeAg、HBVDNA阴转率。但也有不足之处，需要进一步深入研究，应严格在科研设计下，确定本病的基本位型，发挥中西医各自优势，取长补短。     

解毒护肝汤抗鸭乙型肝炎病毒的实验研究

目的:观察解毒护肝汤体内抗鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的作用.方法:采用人工感染鸭乙型肝炎病毒的武汉麻鸭为动物模型,用解毒护肝汤口服治疗2W,观察用药前后血清DHBV-DNA含量及肝组织HE染色的病理改变,并以阿昔洛韦作阳性对照.结果:解毒护肝汤治疗后鸭血清DHBV-DNA的含量明显低于给药前,有显著性差异(P＜0.05);治疗组、阿昔洛韦组的中位抑制率与模型组比较有显著性差异(P＜0.05);治疗组的肝细胞点状坏死和碎屑样坏死与阿昔洛韦组相比有显著性差异(P＜0.05).结论:解毒护肝汤连续用药后在鸭体内有抗乙型肝炎病毒作用.     

苍耳子提取物抗鸭乙型肝炎病毒作用的实验研究

目的 研究苍耳子提取物对鸭乙型肝炎的抗病毒作用.方法 选1日龄北京雏鸭,人工感染鸭乙型肝炎病毒(DHBV)后随机分为5组:苍耳子提取物3个剂量组(1,0.1和0.01 g·kg-1·d-1),对照组采用生理盐水和拉米夫定(3TC,2 mg·kg-1·d-1),每组6只,灌胃10 d,观察不同剂量苍耳子提取物抗DHBV作用效果.结果 苍耳子提取物(1 g·kg-1·d-1)剂量组对延缓鸭肝病理改变有一定的作用,但对DHBV DNA无作用.结论 苍耳子提取物对控制鸭乙型肝炎病毒引起的病理改变有一定作用.