输尿管部分梗阻后平滑肌细胞中游离Ca^2＋浓度改变

目的：测定大鼠单侧部分输尿管梗阻后输尿管平滑肌细胞中游离Ca^2＋浓度改变。方法：将Wistar雄性大鼠80只随机分为4组：8周PUUO组20只,16周PUUO组20只,同期对照组各20只。PUUO组采用将大鼠左侧上1＼2段输尿管包埋入腰大肌造成单侧输尿管部分梗阻的动物模型,对照组仪分离左侧输尿管。成模后分别于8周和16周分离取出输尿管．分离单个输尿管平滑肌细胞应用Fura-2／AM荧光探针负载检测输尿管平滑肌细胞中游离Ca^2＋的浓度。结果：输尿管平滑肌静态细胞内Ca^2＋荧光比值测定结果显示：8周的PUUO大鼠组与对照组大鼠之间细胞内游离Ca^2＋浓度的差异无统计学意义,而16周的PUUO大鼠组细胞内游离Ca^2＋的浓度显著升高,且差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论：细胞内钙超载是输尿管梗阻后平滑肌功能损害病理过程的重要原因,但是发生较晚,可能在输尿管部分梗阻后期起着重要作用。     

单侧输尿管部分梗阻后输尿管平滑肌细胞中M3受体改变的实验研究

目的测定大鼠单侧输尿管部分梗阻（PUUO）后输尿管平滑肌细胞中M3受体mRNA的转录水平和蛋白表达水平改变的规律,以探讨PUUO后输尿管平滑肌细胞中M3受体的作用。方法 Wistar雄性大鼠80只,随机分为4组：8周PUUO组、16周PUUO组、8周对照组及16周对照组,每组各20只。两PUUO组（n=40）采用把大鼠输尿管左侧上1/2段埋入腰大肌做成PUUO的大鼠模型,两对照组（n=40）只游离左侧输尿管。模型制作成功后于8周和16周时取出输尿管,分别用RT-PCR检测输尿管平滑肌M3受体mRNA的含量,Western-blotting检测输尿管平滑肌M3受体蛋白的含量。结果 RT-PCR结果示：M3受体mRNA的表达8周PUUO组高于8周对照组（55.16±3.94）vs（36.48±3.87）,16周PUUO组低于16周对照组（19.37±3.70）vs（37.39±3.65）,8周PUUO组高于16周PUUO组,差异均有统计学意义（均P〈0.05）。Western-blotting结果示：M3受体蛋白的表达8周PUUO组高于8周对照组（27.13±1.77）vs（21.36±2.69）,16周PUUO组低于16周对照组（19.41±1.37）vs（23.43±1.58）,差异均有统计学意义（均P〈0.05）,8周对照组与16周对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论梗阻8周时大鼠输尿管平滑肌中M3受体的生物合成上调,梗阻至16周时输尿管平滑肌中M3受体生物合成下调,为后续与临床相结合的研究做了更进一步的铺垫。     

梗阻性肾病肾纤维化与血清中Ⅲ型胶原变化的相关性研究

目的探讨梗阻性肾病时血清中Ⅲ型前胶原（PCⅢ）及Ⅲ型前胶原氨基末端肽（PⅢNP）浓度的变化与肾组织纤维化的相关性。方法将健康雄性新西兰大白兔40只通过手术分为单侧输尿管部分梗阻组、单侧输尿管完全梗阻组、假手术组、正常对照组,每组10只。术前及术后1～8周抽取大白兔静脉血,放射免疫法测定血清中PCⅢ及PⅢNP含量。术后第8周提取动物肾脏组织,免疫组化SP法染色测定Ⅲ型胶原含量,HE染色测定肾小管肾间质纤维化程度。结果①术后1～8周PCⅢ及PⅢNP值较术前升高（P＜0.05）。单侧输尿管部分梗阻组、单侧输尿管完全梗阻组PCⅢ及PⅢNP值较同期对照组、假手术组值升高（P＜0.05）;②单侧输尿管部分梗阻组、单侧输尿管完全梗阻组肾小管肾间质病变比率较对照组差异有统计学意义（P＜0.05）;③血清PCⅢ及PⅢNP浓度与病变肾小管肾间质比率呈正相关（P＜0.05）。结论血清PCⅢ及PⅢNP与肾积水时肾脏间质纤维化密切相关。在排除其他脏器纤维化的前提下,血清PCⅢ及PⅢNP可以作为早期判断肾积水肾脏纤维化的无创性检查指标。     

输尿管部分梗阻与肾小管间质纤维化

目的：研究单侧输尿管部分梗阻（PUUO）后肾间质纤维化的发生机制及梗阻解除后肾间质纤维化的恢复情况。方法：144只雄性SD大鼠，24只作为对照组，另外120只大鼠建立单侧PUUO动物模型，其中梗阻组24只，在术后1、2、4和8周各随机选取6只，行肾组织病理学检查，免疫组化测定肾间质内Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白（Col Ⅰ、ColⅢ）；梗阻解除组96只，于梗阻后1、2、4和8周各为24只大鼠解除梗阻，分别于解除后1、2、4和8周各随机选取6只，行病理学观察及免疫组化分析。结果：输尿管部分梗阻后1周，肾间质ColⅠ、ColⅢ表达明显增加（与对照组比较，P〈0．01），并随时间延长而逐渐加重（与前一时间段比较，P〈0．01）。1、2和4周时解除梗阻，ColⅠ、colⅢ逐渐恢复，与梗阻解除前比较差异有显著性意义（P〈0.01），8周时解除梗阻，胶原蛋白无显著变化。结论：PUUO后肾间质纤维化进行性发展，早期解除梗阻，肾间质纤维化可有不同程度的恢复；若梗阻超过8周，则成为不可逆性改变。     

离断性肾盂成形术后吻合口蠕动功能恢复的实验研究

目的探讨离断性肾盂成形术后吻合口蠕动功能的恢复过程。方法建立新西兰兔梗阻性肾积水模型(32只),行离断性肾盂成形术,按术后1、2、3、4周分4组,每组兔8只。术前、术后分别行肾盂输尿管压力与肌电测量及吻合口组织学检查。正常对照组为正常兔32只。计量资料用t检验和方差分析处理。结果正常兔肾盂静止压(10.8±l.3)mmHg,收缩压差(1.6±0.4)mmHg,肌电幅值(0.39±0.10)mV,肌电频率(5.4±1.0)/min;输尿管静止压(11.7±l.7)mmHg,收缩压差(1.8±0.5)mmHg,肌电幅值(0.38±0.08)mV,肌电频率(5.3±0.9)/min。术后第1周肾盂静止压（14.4±1.3）mmHg较正常高（P<0.05）,收缩压差（1.1±0.4）mmHg,低于正常（P<0.05）;肾盂肌电幅值（0.19±0.05)mV及输尿管肌电幅值（0.26±0.04)mV均较正常明显减低（P<0.05）。吻合口有薄层粘膜上皮覆盖。术后第2周肾盂静止压（11.9±1.9）mmHg、收缩压差（1.4±0.3)mmHg、肌电幅值（0.31±0.06)mV,肌电频率（5.4±0.7)/min与正常相比,差异无显著意义(P＞0.05)。吻合口见新生的平滑肌细胞贯通吻合口,肌细胞间出现紧密接触。术后第3周肾盂输尿管压力与肌电与正常差异无显著意义(P＞0.05)。吻合口旁见有神经末梢。术后第4周吻合口新生的平滑肌细胞成熟,排列规则,紧密接触丰富。结论术后第1周未见有蠕动通过吻合口;术后第2周吻合口新生的平滑肌细胞已初具收缩和传导功能,有部分蠕动通过吻合口;术后第3周吻合口蠕动功能基本恢复。     

影响胃肠动力秘验单方的筛选

目的观察萹蓄等9味中药对大鼠离体胃肠运动的影响。方法制备大鼠十二指肠离体肠段和胃底肌条标本,观察各药对大鼠十二指肠和胃底自发收缩活动的影响,测定给药前后肠段和胃底平滑肌收缩强度和频率的变化情况。结果萹蓄等9味中药均对大鼠胃底肌条收缩幅度有一定的影响（P〈0.05或P〈0.01）;火麻仁、芥子、玫瑰花、柿蒂、刘寄奴、薤白和皂角对大鼠十二指肠收缩幅度和频率有一定的影响（P〈0.05或P〈0.01）。结论萹蓄等9味中药可以调节胃肠平滑肌的收缩活动。     

输尿管部分梗阻家兔上尿路尿动力学研究

目的：探讨家兔经输尿管灌注测压方法的可行性,并对输尿管部分梗阻后输尿管的功能进行评价。方法：32只家兔随机分为对照组和实验组,对照组8只,为假手术组;实验组按术后时间分为3组,每组8只,建立输尿管部分梗阻模型。在梗阻不同时间点,用经输尿管灌注测压的方法对输尿管功能进行研究,并观察输尿管及肾脏的形态变化。结果：在5ml／min灌注时,梗阻组输尿管静息压力均高于对照组（P〈0．05）。梗阻2周时,不灌注、不同流速灌注时的静息压力均高于对照组（P〈0．05）。梗阻4周时,在不灌注、5ml／min灌注时静息压力高于对照组（P〈0．05）,而在1ml／min灌注时的静息压力与对照组比较,无显著性差异（P〉．05）。梗阻4周时,肾脏明显出现肾间质纤维化等病理变化。结论：该实验方法能评价输尿管功能的变化。在梗阻4周时,输尿管功能出现不协调,这可能是4周时肾脏病变进展的原因。     

慢性胰腺炎大鼠胃运动功能的变化及机制研究

目的：探讨慢性胰腺炎（CP）大鼠胃运动功能的变化及可能机制。方挂：健康Wistar大鼠30只,随机分为对照组、假手术组、实验组,每组10只。实验组应用油酸经胰胆管灌注的方法制作慢性胰腺炎模型,造模时间为6周。分别检测各组粪脂肪滴计数,粪弹力蛋白酶I（FE—1）及胰腺病理检查验证实验;检测血清胆囊收缩素（CCK）水平;观测胃窦环行平滑肌肌条收缩能力、环行平滑肌细胞收缩反应的变化;测定胃肌层诱导型一氧化氮合酶（iNOS）mRNA的表达量和平滑肌细胞培养基中一氧化氮（N0）含量的变化。结果：与假手术组比较,实验组大鼠粪脂肪滴个数明显增加、粪FE-1水平明显降低,胰腺呈典型慢性胰腺炎改变。胃窦环行平滑肌条收缩能力、环行平滑肌细胞收缩反应明显下降（P〈0．05）,血清CCK水平,iNOSmRNA的表达量,细胞培养基中NO含量均明显升高（P〈0．05）。结论：慢性胰腺炎大鼠胰腺外分泌功能不全可导致CCK分泌增加,而CCK通过上调胃窦肌层iNOSmRNA的表达并产生过量的NO,抑制胃窦环行平滑肌的收缩能力可能是慢性胰腺炎胃运动功能障碍的机制之一。     

评价肾盂尿RBP、Alb在不同时间段输尿管梗阻解除后的意义

目的：在不同时间段输尿管梗阻解除后,通过检测肾盂尿中视黄醇结合蛋白（Retinoid-binding-protein,RBP）、白蛋白（Albumin,Alb）的水平变化,来探讨梗阻解除后肾功能的恢复情况。方法将102只雄性新西兰大白兔随机分组,假手术组（对照组）6只,分离出左侧输尿管上段后直接关腹;手术组96只,随机平均分成A、B、C、D周组四个组,每组24只,分别用输尿管套管法建立左侧输尿管部分梗阻模型后1、2、4、8周解除梗阻,然后每组分别在解除梗阻后0、1、2、4周（每个时间点随机选择6只）留取左侧肾盂尿液检测Alb、RBP、Cr含量,假手术组行同样方法检测作为对照。结果随着解除梗阻时间的延长,A、B、C组肾盂尿中RBP、RBP/Cr逐渐下降,其中A组RBP、RBP/Cr至2周时分别下降至（2.15±0.19）mg/L、（0.48±0.05）（与对照组比较, P〉0.05）,B、C组4周后仍高于正常水平（P〈0.05）,梗阻解除后各个时间点间两两比较,除A组外,差异均有统计学意义（P〈0.05）;尿Alb 2周内有所升高,2周后开始下降,经过内生肌酐校正后,A、B、C组Alb/Cr逐渐下降,至4周时A组尿Alb/Cr下降至（0.16±0.03）（较对照组比较,P〉0.05）,B、C组尿Alb/Cr均仍高于正常水平（P〈0.05）,并且尿Alb/Cr梗阻解除后各个时间点间两两比较,只有至4周时才有统计学意义（P〈0.05）。D组各项指标在梗阻解除后各时间段均基本无变化（P〉0.05）。结论在输尿管梗阻4周内解除梗阻,随着解除时间的延长,肾功能可逐渐恢复,并且肾小管功能比肾小球功能恢复较早;若梗阻超过8周,即使解除梗阻,肾功能也难以恢复。     

体外冲击波对兔输尿管功能的影响

目的：研究体外冲击波对兔离体输尿管功能的影响，探讨输尿管体外实验的方法。方法：以体外冲击波刺激兔输尿管，制造体外冲击波碎石术的动物模型。用输尿管体外实验方法观察不同时间输尿管平滑肌收缩强度和频率的变化。结果：输尿管受冲击波冲击后第1、2天，其收缩强度明显降低(P＜0．05)，收缩频率有上升趋势。冲击后第5天，输尿管收缩力基本恢复正常。结论：冲击波对输尿管的舒缩蠕动功能可造成短期影响，5天后舒缩蠕动功能基本恢复正常。     

基于RhoA/Rho信号通路探讨产妇子宫平滑肌组织 Thr38、KCa3.1、KLF4表达水平与产后出血的关系

目的：基于RhoA/Rho信号通路探讨产妇子宫平滑肌组织CPI-17(Thr38)、KCa3.1、Krüppel样因子4(KLF4)表达水平与产后出血的关系。方法：选择80例宫缩乏力性产后出血产妇为观察组,选择同期80例无产后出血产妇为对照组。采用肌条等长张力测定法检测离体子宫平滑肌的自发收缩活动力,以及加入Rho激酶抑制剂(Y-27632)后的子宫平滑肌收缩活动力。采用实时荧光定量反转录聚合酶链反应法检测子宫平滑肌组织中RhoA、ROCKⅠ以及ROCKⅡmRNA表达水平,采用蛋白质印迹法检测RhoA、ROCKⅠ以及ROCKⅡ以及Thr38、KCa3.1、KLF4表达水平。采用Pearson相关分析RhoA蛋白以及子宫平滑肌收缩活动力与Thr38、KCa3.1、KLF4的关系。结果：观察组的子宫平滑肌收缩活动力、收缩频率以及收缩幅度均低于对照组(P<0.05～P<0.01),加入Y-27632后,2组子宫平滑肌收缩活动力均低于加入前(P<0.05)。观察组RhoA/Rho信号通路相关mRNA以及蛋白(RhoA、ROCKⅠ、ROCKⅡ)表达水平均低于对照组(P<0...     

胃动素对Cajal间质细胞引起的大鼠胃平滑肌收缩的作用

目的 观察Cajal间质细胞（ICC）在胃平滑肌收缩的关键作用,以及胃动素及ICC引起胃平滑肌细胞收缩的影响。方法：（1）采用大鼠胃体上1/3起博区及胃窦环行肌条在恒温灌流Kreb液中,通过张力换能器输入生理记录仪记录胃肌条的机械运动。（2）用美蓝 光照选择性损伤ICC对胃平滑肌收缩的影响 。（3）损伤ICC后胃动素对胃肌收缩的影响。结果：（1）带有ICC的胃体起搏区和胃窦肌条记录到稳定的收缩活动,胃窦收缩频率和振幅较胃体起搏区高。（2）损伤胃环肌层ICC后,导致胃体起搏区和胃窦平滑肌收缩频率与振幅下降80%-90%,运动几乎消失。（3）胃动素0.03-0.25μg/ml明显增加胃体起搏区和胃窦的收缩频率和振幅,呈剂量依赖性增加。损伤ICC后几乎完全取消胃动素对胃肌的收缩作用。抗胃动素血清和阿托品可阻断胃动素的作用。结论 ICC是胃平滑肌运动的起搏细胞。胃动素通过ICC对胃肌收缩进行调节。     

骨髓间充质干细胞经肾动脉移植修复小鼠输尿管损伤的方法学研究

目的：从方法学上研究骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells，BMSCs)经肾动脉移植对小
鼠输尿管损伤的修复作用，探讨经肾动脉移植BMSCs的有效性。方法：显微血管夹夹毕49只3~4周龄Balb/c小鼠的
左侧输尿管，10 d后取出显微血管夹以解除左侧输尿管梗阻，然后将这些实验小鼠随机分为实验组(n=25)及对照组
(n=24)。实验组小鼠取出显微血管夹后立即经肾动脉移植荧光素酶标记的Balb/c小鼠BMSCs，对照组小鼠取出显微血
管夹后随即关闭切口，不移植BMSCs。磁共振成像对实验小鼠进行扫描，通过测量不同时间点的实验小鼠的左肾盂
容积，比较实验组与对照组小鼠左侧输尿管梗阻解除后的左输尿管复通率，评估BMSCs对输尿管损伤的修复作用。
结果：实验小鼠左侧输尿管梗阻后的左肾盂容积明显大于梗阻前(P﹤0.01)；实验组与对照组小鼠左侧输尿管梗阻后10
d的左肾盂容积差异无统计意义(P=0.693)；实验组小鼠左侧输尿管梗阻解除后的左输尿管复通率较对照组小鼠明显增
高(P=0.012)。结论：BMSCs经肾动脉移植可促进小鼠输尿管损伤的修复。     

芍药甘草汤影响梗阻输尿管基础压力的实验研究

目的：通过观察实验家兔正常、梗阻给药后各时期的输尿管内基础压力的变化,来探讨芍药甘草汤对输尿管平滑肌的解痉作用。方法：采用周水生等结扎家兔单侧输尿管的方法复制输尿管急性梗阻的动物模型,分别记录各时间点的输尿管内基础压力变化。结果：结扎给药后各时间点与结扎给药前比较：输尿管内基础压力均显著升高（P〈0.01）;与绞痛模型组比较：芍药甘草汤大、中剂量组、阿托品阳性对照组输尿管内基础压力显著降低,并且差别具有统计学意义（P〈0.05）;芍药甘草汤大、中剂量组与阿托品阳性对照组比较：芍药甘草汤大剂量组输尿管内基础压力值较阿托品阳性对照组略低,但二者差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：芍药甘草汤能明显降低梗阻输尿管内基础压力,对输尿管平滑肌痉挛具有解痉作用。而此作用与芍药甘草汤剂量有一定依赖性,大剂量芍药甘草汤作用最强,小剂量芍药甘草汤则无明显作用。     

多层螺旋CT灌注评价单侧输尿管梗阻解除后肾功能早期恢复的初步应用

目的:研究单侧输尿管梗阻解除后肾功能早期恢复的规律,分析多层螺旋CT(MSCT)灌注参数在肾积水肾功能可复性评估中的临床应用价值。方法:建立大白兔右侧输尿管部分梗阻肾积水模型。分对照组、梗阻2周组、梗阻4周组及梗阻8周组,后3组在解除梗阻后饲养4周,各组在梗阻解除前、后均行MSCT灌注扫描、彩色多普勒超声显像(CDFI)及单光子正电子发射计算机体层成像(SPECT)测定,后处死试验动物制成普通病理切片。结果:①各梗阻组的总肾小球滤过率(GFR)均明显低于正常对照组,解除梗阻后,各组总GFR与解除梗阻前无显著性差异;②梗阻2周、4周组及8周组右肾GFR均显著低于正常对照组,梗阻解除后,2周组的右肾GFR有所恢复;③梗阻4周组和8周组在梗阻解除后,其肾动脉的舒张末速度(EDV)显著低于正常对照组,梗阻2周组在梗阻解除后,肾动脉EDV与正常对照组无显著性差异;④梗阻2周组在梗阻解除后,其右肾皮质、髓质的血流量(BF)、血容量(BV)值较梗阻解除前明显上升,接近正常对照组水平,而梗阻4周组、8周组在梗阻解除4周后,其右肾BF、BV则未见明显恢复,明显低于正常对照组;⑤随着梗阻时间的延长,患肾病理学改变愈明显。结论:MSCT灌注成像能够提高积水肾脏形态学和血流灌注的信息,其与CDFI相结合有望成为预测肾功能可复性的金标准。     

经膀胱颈部分结扎建立膀胱输尿管返流性肾损害动物模型

  目的  建立一种膀胱出口梗阻导致的返流性肾损害动物模型。  方法  取6～8周龄雄性C57BL/6小鼠60只,随机划分为对照组、假手术组和膀胱颈部分结扎（PBOO）组,每组20只,PBOO组小鼠麻醉后开腹分离膀胱颈,用0.3 mm直径的金属棒引导部分结扎膀胱颈,假手术组仅开腹分离膀胱颈,不结扎,对照组不做处理。术后7 d,每组随机挑选12只存活的小鼠,观察膀胱、输尿管、肾盂和肾脏大体变化,行经膀胱逆行性尿路造影,取肾组织进行组织病理学分析,Western blot、免疫荧光和免疫组化分别检测波形蛋白、增殖细胞核抗原（PCNA）、α平滑肌肌动蛋白 （α-SMA）表达水平。  结果  与对照组和假手术组相比,PBOO组小鼠膀胱、输尿管、肾盂明显扩张,膀胱输尿管返流明显,肾脏体积和质量增加（P<0.001）,肾实质变薄（P<0.000 1）;组织病理学检查可见肾小球萎缩,肾小管扩张,小管间质炎细胞浸润,肾小球基底膜增生,间质纤维化明显;Western blot、免疫荧光和免疫组化分别测得肾组织中波形蛋白、PCNA、α-SMA的表达水平均升高（P<0.000 1）。  结论  小鼠行PBOO术后,膀胱、输尿管、肾脏均发生明显形态改变,并出现返流性肾纤维化样损害,可以作为研究膀胱出口梗阻导致的肾纤维化病理改变机制及治疗措施的动物模型。