深绿卷柏和江南卷柏HPLC指纹特征及3种成分的含量测定研究

目的:建立深绿卷柏和江南卷柏的HPLC特征图谱及其中穗花杉双黄酮、橡胶树双黄酮、7,4',7″,4-四-O-甲基穗花杉双黄酮3种成分的含量测定方法,对两药材进行质量比较分析。方法:采用HPLC法研究两种药材的特征图谱和含量测定方法,并对样品进行分析。结果:深绿卷柏与江南卷柏的HPLC特征图谱中分别有12个和11个共有峰,但两者的共有峰仅有3个,说明化学成分差异显著。深绿卷柏中穗花杉双黄酮、橡胶树双黄酮及7,4',7″,4-四-O-甲基穗花杉双黄酮的含量分别为1.12~1.79 mg/g、0.38~0.60 mg/g、0.14~0.27 mg/g,而江南卷柏中没有检测到橡胶树双黄酮,且7,4',7″,4-四-O-甲基穗花杉双黄酮含量极低。结论:深绿卷柏和江南卷柏的HPLC指纹图谱中化学成分种类及共有成分含量具有显著差异。研究结果为两类药材的鉴别及质量控制提供了参考依据。     

卷柏及垫状卷柏的HPLC指纹图谱及穗花杉双黄酮的含量测定研究

目的 建立卷柏及垫状卷柏的HPLC指纹图谱分析方法并进行穗花杉双黄酮的含量测定.方法 采用HPLC方法测定24批不同产地的卷柏及垫状卷柏药材,分析两者的指纹图谱特征及穗花杉双黄酮的含量.结果 以穗花杉双黄酮为主的不同的7个特征峰分别共同构成卷柏及垫状卷柏的HPLC指纹图谱概貌,卷柏及垫状卷柏中穗花杉双黄酮的含量分别为1...     

HPLC测定千柏鼻炎片中穗花杉双黄酮的含量

目的：建立测定千柏鼻炎片中穗花杉双黄酮含量的方法。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱为Hanbon Lichrospher C18（4．6×150mm,5μm）,流动相为甲醇-0．1％甲酸水,流速为1．0mL·min-1,检测波长为337nm,柱温为30℃。结果：穗花杉双黄酮在0．052-0．234μg（r=-O．9996）范围内线性良好,平均加样回收率为100．20％,RSD为1．30％。结论：本法方便、快速、准确,可用于千柏鼻炎片的质量控制。     

千柏鼻炎片质量标准的研究

目的：建立千柏鼻炎片的质量标准。方法：采用TLC法鉴别处方中的千里光、卷柏、决明子；用高效液相色谱法测定制剂中大黄酚含量。结果：在TLC图谱中千里光、卷柏、决明子的特征斑点明显，无干扰；大黄酚上样量在0．12～4．04μg间线性关系良好，r=0.9998；平均回收率为98．73％，RSD为1．02％。结论：所建立的方法准确可靠，可用于该制剂的质量控制。     

含千里光中药制剂中肝毒性成分阿多尼弗林碱的含量分析

吡咯里西啶生物碱(PAs)是一种天然毒性物质,可导致显著的肝毒性、肺脏毒性、遗传毒性、神经毒性和胚胎毒性等,甚至死亡。因此含PAs的中草药及制剂一直是世界卫生组织等国际组织及国家严密监控的对象。PAs广泛存在于我国多种药用植物中,涉及中药成方制剂数百种。《中国药典》2015年版明确规定了千里光药材中阿多尼弗林碱的限量,但对含有该药材的制剂并未做任何规定,对其他数十种相关制剂中阿多尼弗林碱的限量也未做规定。该研究收集了包括《中国药典》收录的千柏鼻炎片、千柏鼻炎胶囊等常用的14种含千里光的中药制剂,并采用UPLC-MS技术检测了阿多尼弗林碱的含量。结果在8种制剂中均检测到了阿多尼弗林碱,包括千柏鼻炎片、千柏鼻炎胶囊等,其平均含量远高于德国、荷兰和新西兰的相关标准。且同一复方不同批次间含量差异较大,最高质量分数为156.10μg·g~(-1),按该批制剂推荐用量每日摄入阿多尼弗林碱最高达1 030.26μg,提示服用含千里光的制剂需注意其用药安全,对复方中千里光药材含量较高的制剂尤其应该注意阿多尼弗林碱的限量检查。     

千柏鼻炎片质量标准的研究

目的:建立千柏鼻炎片的质量标准,以更好控制产品质量。方法:采用薄层色谱法进行千柏鼻炎片中千里光、决明子、麻黄的鉴别;采用高效液相色谱法测定大黄酚的含量。结果:薄层色谱法可检出千里光、决明子、麻黄,斑点清晰,阴性对照无干扰,专属性强。大黄酚在0.054～0.54μg范围内线性良好,加样回收率为97.54%,RSD为1.57%;结论:质控方法操作简单,可以用来评价千柏鼻炎片质量。     

HPLC同时测定卷柏药材中炔多酚和双黄酮的含量

目的:采用HPLC-DAD,同时测定不同产地的10批卷柏和12批垫状卷柏中2种炔多酚(selaginellin,selaginellinB)和4种双黄酮(穗花杉双黄酮,穗花杉双黄酮-7-甲醚,扁柏双黄酮,异柳杉双黄酮)的含量。方法:采用Agilent 1100高效液相色谱系统,Waters Cosmosil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱,流速1.0 mL.min-1,检测波长280,337 nm,柱温30℃。结果:所测样品中6种活性成分的量差异较大,穗花杉双黄酮在卷柏中的质量分数(5.628～9.184 mg.g-1)普遍高于垫状卷柏(0.823～7.131 mg.g-1),而selaginellin在垫状卷柏中的质量分数(0.123～0.593 mg.g-1)普遍高于卷柏(0.067～0.133 mg.g-1)。此方法加样回收率和线性范围均符合要求。结论:该方法简便快速、分离效果好、灵敏度高、重现性好,可为全面控制卷柏药材的质量提供参考。     

千柏鼻炎胶囊质量标准研究

目的 研究修订千柏鼻炎胶囊(千里光、卷柏、决明子、麻黄、羌活等)的质量标准.方法采用薄层色谱法对制剂中千里光、决明子、麻黄和羌活进行定性鉴别,采用高效液相色谱法测定千里光中金丝桃苷和对羟基桂皮酸,色谱柱为Kromasil C18(250 mm ×4.6 mm,5 μm);流动相为乙腈-0 2％冰醋酸(15∶85);体积流量为1.0 mL/min;柱温35℃;检测波长310 nm (0～20 min),360nm(20～30 min)结果 薄层鉴别专属性强;对羟基桂皮酸在0.03575～0.89375μg范围内与其峰面积线性关系良好(r=1),平均回收率为99.0％,RSD为1.6％(n=6);金丝桃苷在0.03286～0.8215μg范围内与其峰面积线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为103.7％,RSD为1.7％(n=6).结论 所用方法简便、准确,完善了千柏鼻炎胶囊的质量标准,可作为千柏鼻炎胶囊的质量控制标准.     

深绿卷柏中的穗花杉双黄酮和橡胶树双黄酮的反相高效液相色谱法同时测定

目的测定深绿卷柏中穗花杉双黄酮和橡胶树双黄酮的含量。方法采用梯度洗脱的反相高效液相色谱法,选用Agilent ZORBAX-SB C18(5μm,4.6 mm×250 mm)色谱柱,以乙腈-0.1%冰醋酸为流动相,在25℃柱温,检测波长为254nm时检测,建立了深绿卷柏药材的质量评价标准。结果穗花杉双黄酮、橡胶树双黄酮分别在0.33～3.3μg/ml和0.27～2.7μg/ml浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数分别为r=0.993和r=0.990;回收率分别为:95.36%(n=6,CV=1.79%)和95.49%(n=6,CV=2.61%)。结论 RP-HPLC法同时测定深绿卷柏中穗花杉双黄酮和橡胶树双黄酮的含量,方法灵敏、简便、准确;可用于评价深绿卷柏药材的品质。     

千柏鼻炎颗粒质量标准的研究

采用双波长薄层扫描法测定了千柏鼻炎颗粒中麻黄的有效成分麻黄碱的含量;采用薄层层析法对千里光、麻黄、羌活、决明子进行了定性鉴别。方法简便,专属性强,重现性好,可作为千柏鼻炎颗粒的质量控制     

卷柏总黄酮片的质量控制研究

目的建立卷柏总黄酮片质量控制标准。方法采用薄层色谱法(TLC)对卷柏总黄酮片进行定性鉴别;用紫外分光光度法(UV)测定卷柏总黄酮片中卷柏总黄酮的含量;用高效液相色谱法(HPLC)测定卷柏总黄酮片中穗花杉双黄酮的含量;并对检查项中的重量差异、崩解时限进行控制。结果 TLC法斑点清晰,专属性强;卷柏总黄酮在1.571～11.781μg/mL范围内呈良好的线性关系(r=0.999 8),平均回收率为98.25%,RSD为1.02%。穗花杉双黄酮在6.545～327.246μg/mL范围内呈良好的线性关系(r=1.000 0),平均回收率为96.03%,RSD=0.49%。检查项中的重量差异、崩解时限符合规定。结论建立了较为完善的卷柏总黄酮片质量标准,方法快速正确,重现性好,专属性强。     

江南卷柏及同属植物的HPLC指纹图谱鉴别及穗花杉双黄酮测定研究

目的建立江南卷柏及同属植物的HPLC指纹图谱并同步进行穗花杉双黄酮的含量测定。方法色谱柱:ZORBAXSB-C18(4.6mm×250mm,5μm);流动相:乙腈(A)-0.5%冰醋酸水溶液(B)梯度洗脱;检测波长:270nm;流速:1.0mL·min-1;穗花杉双黄酮含量测定与指纹图谱同步进行。结果以穗花杉双黄酮为主的18个特征峰共同构成江南卷柏的HPLC特征指纹图谱概貌;穗花杉双黄酮含量为0.8%～1%。结论13批江南卷柏具有高度的相似性,相似度大于0.98。5种卷柏属植物全草的色谱与江南卷柏的指纹图谱接近,结合主成分分析可与江南卷柏归为一类,推测有类似的生理活性。另3种(黑顶卷柏、薄叶卷柏、翠云草)指纹图谱有明显差异,不宜与江南卷柏混用。     

响应面法优选垫状卷柏中穗花杉双黄酮提取工艺

目的:建立垫状卷柏中穗花杉双黄酮乙醇提取的最佳工艺条件。方法:以穗花杉双黄酮提出量为考察指标,从乙醇浓度、提取时间、提取次数、加醇倍量4个方面进行单因素考察,选取最优条件设计垫状卷柏醇提工艺的响应面试验,确定最佳提取条件。结果:乙醇浓度70.6%、提取时间60 min、提取次数3次、加醇倍量12倍,穗花杉双黄酮提出量可以达到17.97 mg/g。结论:采用响应面法预测垫状卷柏醇提工艺的模型准确有效,可以较好的优选出垫状卷柏中穗花杉双黄酮的最佳提取工艺。     

卷柏总黄酮及穗花杉双黄酮对人脐静脉内皮细胞增殖及VEGF蛋白表达的影响

 目的 观察卷柏总黄酮、穗花杉双黄酮对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）增殖及血管内皮细胞生长因子（VEGF）表达的影响。方法 采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测不同浓度卷柏总黄酮及穗花杉双黄酮对HUVEC细胞增殖的影响;流式细胞仪检测细胞周期;Western blot检测VEGF蛋白的表达。结果 不同质量浓度的卷柏总黄酮（1、5、10、15、20 μg·mL-1）和穗花杉双黄酮（0.3,1,2,4,5 μg·mL-1）可以剂量依赖地促进HUVEC细胞增殖,其中卷柏总黄酮10 μg·mL-1、穗花杉双黄酮1 μg·mL-1在36 h时显著促进细胞增殖,提高S期细胞比例,VEGF蛋白表达明显升高。结论 细胞实验结果提示卷柏中黄酮类物质可能具有促血管新生的作用。     

4 种卷柏类药材中 2 种特征性成分研究

 目的 在 对 4 种卷柏类药材中 2 种特征性成分 selaginellin 和穗花杉双黄酮进行结构确证的基础上,首次建立同时测定此 2 种成分含量的 HPLC 方法。 方法 采用岛津 VP-ODS 色谱柱 ( 4.6 mm × 250 mm , 5 μm) ,流动相为乙腈 -0.2% 醋酸水溶液,梯度洗脱,流速为 1.2 m L ·min^-1 ,检测波长为 432 和 338 nm ,柱温为 30 ℃ 。 结果 在此色谱条件下, selaginellin 和穗花杉双黄酮得到完全分离,分别在 0.025 ～ 1.016 和 0.221 ～ 8.853 μg 内线性良好 (<>r 均为 1.000 0) ,平均回收率分别为 98.64% 和 99.34% , RSD 分别为 0.86% 和 0.94% (<>n=6) 。 结论 Selaginellin 为首次从垫状卷柏中分离得到。 含量分析方法操作简单、快速、准确,灵敏度高,重现性好,可为卷柏类药材质量评价和控制提供参考;对 4 种卷柏类药材进行了测定,所测样品含量差异较大。     

HPLC法同时测定江南卷柏中3种双黄酮成分

目的建立江南卷柏中3种双黄酮成分的含量测定方法。方法色谱柱为Shim-pack VP-ODS C_(18)柱;流动相为2%冰醋酸(A)乙腈(B),梯度洗脱;检测波长为337 nm。结果穗花杉双黄酮、2,3-二氢穗花杉双黄酮、银杏双黄酮的线性范围分别为0.019 72~0.788 8、0.012 44~0.497 6、0.003 16~0.126 4μg;平均加样回收率分别为101.74%、101.86%、102.87%。结论该方法简便准确、重复性好,可用于江南卷柏的质量控制。     

旱生卷柏化学成分的研究(Ⅰ)

目的研究旱生卷柏的化学成分.方法旱生卷柏的乙醇提取物,经水混悬后的不溶物的醋酸乙酯提取部位,用硅胶柱色谱、薄层色谱制备以及Sephadex LH-20柱色谱分离纯化,得到4种化学成分.结果经理化测试和光谱分析确定了化学结构,分别是:大黄素、银杏双黄酮、扁柏双黄酮、穗花杉双黄酮.结论这些化合物均为首次从该植物中分得,大黄素系首次从卷柏科中分离得到.     

HPLC法测定江南卷柏片中穗花杉双黄酮的含量

目的：建立高效液相色谱法测定江南卷柏片中穗花杉双黄酮的含量。方法：C18柱（250mm×4．6mm，51μm）；流动相：乙腈（A）-0.5％冰醋酸溶液（B），梯度洗脱；检测波长：338nm；流速：1ml/min。结果：穗花杉双黄酮在5.25～262．5μ/ml间，峰面积与其质量呈良好的线性关系，回归方程为A=62621C＋39、79，r^2=1；平均回收率为97．1％，RSD为1．9％。结论：该方法可以用来控制江南卷柏片的质量，方法简便、准确。     

"鼻炎通"滴鼻剂治疗鼻炎80例

将鼻炎患者 14 0例随机分成两组 :治疗组 80例用“鼻炎通”滴鼻剂治疗 ,配合口服千柏鼻炎片 ;对照组6 0例单纯口服千柏鼻炎片治疗 ,均以 10天为一疗程。结果 :治疗组总有效率为 92 5 % ,对照组为 73 3% ,P <0 0 1。鼻炎通滴鼻剂加口服千柏鼻炎片疗效优于单纯口服千柏鼻炎片。     

高效液相色谱法测定千柏鼻炎分散片中大黄酚的含量

千柏鼻炎分散片由千里光、卷柏、羌活、决明子、麻黄、川芎、白芷七味中药组成,功能清热解毒,活血祛风,宣肺通窍.用于风热犯肺,内郁化火,凝滞气血所至的鼻塞,流涕黄稠,或持续鼻塞,嗅觉迟钝;急慢性鼻炎,急慢性鼻窦炎见上述症候者.由于方中盐酸麻黄碱,及异欧前胡素含量较低,实验条件不易控制,决明子为方中主药,有效成分明确,笔者选择测定决明子的大黄酚含量建立标准,采用高效液相色谱法测定决明子中大黄酚的含量,取得满意效果.