TGF-β1对大鼠角膜移植后免疫排斥和白介素的影响

目的 探讨转化生长因子β1(TGF-β1)对IL-1,2,6,8表达的影响及TGF-β1的免疫抑制作用.方法 采用建立大鼠穿透性角膜移植模型,分为实验组(同种异体角膜移植,使用TGF-β1眼液),实验对照组(同种异体角膜移植,使用氯霉素眼液)及空白对照组(自体角膜移植,使用氯霉素眼液)3组,分不同时间点用免疫组化法、ELISA法及RT-PCR法检测角膜植片中TGF-β1、IL-1β及IL-2mRNA的含量变化,以及大鼠外周血中IL-6,IL-8含量的变化,并进行显微镜观察,根据角膜移植植片水肿,混浊,新生血管3项指标进行排斥指数评分(RI).结果 实验组大鼠植片存活时间较实验对照组明显延长(19.3±1.4)dvs(13.7±2.6)d,P＜0.01;实验组各个时间点IL-1β,IL-6,IL-8及IL-2mRNA的表达较实验对照组均有明显降低(P＜0.01).结论 TGF-β1对大鼠穿透性移植术后的免疫排斥反应有明显抑制作用,并能下调植片中多种白介素的表达.     

TGF-β1对大鼠高危角膜移植免疫排斥反应中植片IL-10表达的影响

目的 研究重组腺相关病毒介导的转化生长因子-β1(recombinant adeno-associated virus mediated transforming growth factor-β1,rAAV-TGF-β1)对大鼠高危角膜移植免疫排斥反应的抑制作用以及对白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)表达的影响.方法 构建rAAV-TGF-β1真核表达质粒载体.40只角膜新生血管化的SD大鼠行穿透性角膜移植术.实验组(20只):角膜植片预浸泡在rAAV-TGF-β1(10×1012v.g·L-1)的达尔伯克必需基本培养液F12混合培养液中37℃孵育30 min;对照组(20只):角膜植片预浸泡在0.1 mol·L-1磷酸盐缓冲液中37 ℃孵育30 min.裂隙灯观察TGF-β1对大鼠角膜植片存活时间、排斥反应指数的影响.术后第1周、第2周、第4周、第2个月对角膜植片行组织病理学检查,免疫组织化学方法检测角膜组织中IL-10的表达.结果 对照组角膜植片平均存活时间为(10.40±2.45)d,实验组为(18.70±1.51)d,比对照组显著延长,差异具有显著统计学意义(P＜0.01);术后第2周实验组角膜植片排斥反应指数(3.48±0.86)明显低于对照组(7.65±0.42),差异具有显著统计学意义(P＜0.01).IL-10在术后主要表达于角膜的上皮层与内皮层.术后各时期实验组IL-10的表达明显高于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 rAAV-TGF-β1能显著延长角膜植片存活时间,抑制大鼠高危角膜移植免疫排斥反应,其机制与提高角膜组织中IL-10的表达有关.重组腺相关病毒是眼科基因治疗的有效载体.     

TGF-β1对大鼠高危角膜移植排斥反应及超微结构的影响

目的 探讨重组腺相关病毒介导的转化生长因子-β1(recombinant adeno-associated virus mediated transforming growth factor-β1,rAAV-TGF-β1)抑制大鼠高危角膜移植术后免疫排斥反应的作用及对植片超微结构的影响.方法 构建rAAV-TGF-β1真核表达质粒栽体.碱烧伤的方法建立角膜新生血管化动物模型,52只角膜新生血管化的SD大鼠接受穿透性角膜移植手术,分为2组,实验组(26只)Wistar大鼠角膜植片浸泡在含rAAV-TGF-β1(10 × 1012v.g.·L-1)的DMEM/F12培养液中,37℃孵育30 min,移植到SD大鼠角膜植床上;对照组(26只)Wistar大鼠角膜植片浸泡在DMEM/F12培养液中,37℃孵育30 min,移植到SD大鼠角膜植床上.术后裂隙灯显微镜观察植片排斥情况,比较2组角膜植片的平均存活时间和各时间点排斥反应指数.术后9 d、14 d角膜植片行超微结构检查,免疫组织化学方法检测角膜组织中IFN-γ、TGF-β1的表达.结果 对照组角膜植片平均存活时间为(10.75±1.91)d,实验组为(22.85±3.48)d,2组比较差异有显著统计学意义(P＜0.01);实验组术后各时间点角膜植片排斥反应指数均明显低于对照组,差异均有显著统计学意义(均为P＜0.01).术后9 d、14 d角膜植片超微结构检查显示,实验组角膜植片基质层成纤维细胞凋亡与坏死明显减轻;免疫组织化学分析显示,实验组植片内IFN-γ表达低于对照组,TGF-β1表达高于时照组,差异均有统计学意义(P＜0.05或0.01).结论 rAAV-TGF-β1能显著延长角膜植片存活时间,抑制大鼠高危角膜移植免疫排斥反应,改变植片的超微结构.     

大鼠穿透性角膜移植术后TGF-β1及IL-1β的表达变化

目的 探讨转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)对大鼠穿透性角膜移植术后免疫排斥反应的影响,角膜植片中TGF-β1和白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)的分布及含量的变化.方法 供体雌性Wistar大鼠20只,受体健康雌性SD大鼠60只,建立大鼠穿透性角膜移植模型,分为实验组、实验对照组及空白对照组3组,每组SD大鼠各20只,均选右眼手术,分别于术后1周、2周、3周、4周4个时间点,用HE染色及免疫组化法检测角膜植片中TGF-β1及IL-1β的含量变化.结果 实验组1-4周TGF-β1的表达较实验对照组和空白对照组均明显增高(13.88±1.74,5.12±0.31,5.24±0.54;15 84±2.56,5.86±0.64,6.96±0.55;18.46±2.36,6.67±1.73,8.26±0.98;17.06±2.02,4.61±0.23,7.22±0.39;P均<0.01);实验组术后2-4周3个时间点IL-1β的表达较实验对照组和空白对照组均有明显降低(7.74±0.73,18.55±1.84,15.76±0.44;5.94±0.64,16.00±0.76,12.44±0.55;5.24±0.35,11.06±0.09,10.49±0.56,P均<0.01).结论 TGF-β1能通过显著下调植片中IL-1β的表达,从而发挥免疫抑制作用.     

TGF-β与角膜移植诱导的免疫耐受

角膜移植术后免疫排斥反应是角膜移植失败的主要原因.如何诱导免疫耐受是角膜移植成功的关键.许多研究表明,TGF(转化生长因子)-β不仅与角膜移植免疫耐受有密切关系,而且在其它器官移植免疫耐受中也发挥重要作用.本文就TGF-β的生物学特性及其角膜移植中TGF-β的作用作一综述.     

IL-1RA对大鼠角膜移植免疫排斥反应的抑制作用

目的研究白细胞介素－１受体拮抗剂（ ＩＬ－ＩＲＡ）对大鼠角膜移植排斥反应的防治作用。方法建立大鼠穿透角膜移植排斥反应的动物模型,观察ＩＬ－ＩＲＡ对大鼠角膜植片存活和排斥反应指数（ ＲＩ）的影响,并与阴性对照组和环抱霉素 Ａ（ＣｓＡ）治疗组相比较。结果阴性对照组角膜植片平均存活时间为 １２． ２３５天± １． ６７４天,而 ＣｓＡ治疗组为１７．６７６天±１．５２８天,ＩＬ－１ＲＡ治疗组为１９．２５０天±１．４５６天,均比阴性对照组显著延长（Ｐ＜０．０１）;ＩＬ－１ＲＡ治疗组角膜植片新生血管指数明显低于对照组和ＣｓＡ治疗组（Ｐ＜０．０１）。结论ＩＬ－１ＲＡ能抑制大鼠穿透角膜移植免疫排斥反应,显著地延长角膜植片的存活时间,并具有抑制角膜植片新生血管生长的作用。     

Leflunomide抑制大鼠角膜移植免疫排斥反应的研究

目的研究Leflunomide对大鼠角膜移植排斥反应的防治作用。方法建立大鼠穿透性角膜移植排斥反应的动物模型,观察Leflunomide对大鼠角膜植片存活和排斥反应指数（RI）的影响,并与阴性对照组和CsA治疗组相比较。结果阴性对照组角膜植片存活时间为12.375d±1.768d,而CsA组为17.375d±1.408d,Leflunomide组为18.250d±1.356d,均比阴性对照组显著延长（P<0.01）。结论Leflunomide能抑制大鼠穿透性角膜移植免疫排斥反应,显著延长角膜植片的存活时间。     

Leflunomide抑制大鼠角膜移植排斥反应的免疫病理学研究

目的：研究角膜移植排斥反应的免疫病理学变化,阐明Ｌｅｆｌｕｎｏｍｉｄｅ的免疫抑制机理。方法：应用免疫组织化学染色方法检测环孢霉素Ａ、Ｌｅｆｌｕｎｏｍｉｄｅ及对照组角膜移植片中ＣＤ４＾＋细胞、ＣＤ８＾＋细胞、白细胞介素－２受体及主要组织相容性Ⅱ类抗原的表达。结果：排斥的角膜组织大量表达上述免疫细胞和分子,Ｌｅｆｌｕｎｏｍｉｄｅ可以对这些细胞和分子产生明显的抑制作用。结论：迟发型超敏反应和细胞毒性Ｔ细     

转化生长因子β1在角膜移植术后的免疫抑制作用

对转化生长因子β1的分子结构及生物学功能进行必要介绍,结合角膜移植术后排斥反应的发生特点,以及从T淋巴细胞、树突状细胞、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素等多方面对转化生长因子β1在角膜移植术后的免疫抑制作用进行了综述。     

IL-10基因修饰的未成熟树突状细胞在大鼠角膜移植排斥反应中的作用

目的：通过建立大鼠角膜穿透性移植模型,探讨IL－10基因修饰的未成熟树突状细胞在大鼠角膜移植排斥反应中的作用及其作用机制。方法：建立大鼠同种异体穿透性角膜移植模型,将受体SD大鼠随机分为：阳性对照组、GFP－DC组、8－DC组及IL－10－GFP－DC组,分别于角膜移植术前3 d尾静脉注射等量的PBS、供体Wistar 大鼠骨髓源8－DC （培养8d的DC）、转染48h的GFP－DC及IL－10－GFP－DC。术后每天在裂隙灯下观察角膜植片情况,记录排斥反应指数及角膜植片存活时间,在移植术后第14 d行各组角膜组织的病理学检查及免疫组织化学检查。结果：IL－10－GFP－DC组角膜植片存活时间较GFP－DC组、8－DC组比较显著延长（ P＜0．01）。术后第14 d时IL－10－GFP－DC组角膜植片的混浊、水肿、新生血管及排斥指数均显著降低（P＜0．01）。病理组织学检查结果显示各实验组角膜植片的炎症反应较阳性对照组轻,植片中央未见明显新生血管。免疫组织化学结果显示：IL－10－GFP－DC组的CD4＋、CD8＋、CD25＋、IL－2＋、NK＋及NF－κB＋阳性细胞数量较阳性对照组、GFP－DC组、8－DC组减少,差异均具有显著统计学意义（P＜0．01）。结论：经过供体来源未成熟树突状细胞预处理的受体,角膜植片的存活时间显著延长,成功诱导角膜移植免疫耐受。 CD4＋、CD8＋、CD25＋、IL－2＋、NK＋及NF－κB＋阳性细胞参与了同种异体角膜移植排斥反应的调控,IL－10－GFP－DC可降低CD4＋、CD8＋、CD25＋、IL－2＋、NK＋及NF－κB＋阳性细胞的浸润,抑制角膜移植排斥反应的发生。     

TGF-β2局部应用对大鼠角膜碱烧伤后CD44和E-selectin表达的影响

目的研究TGFβ2局部应用对大鼠角膜碱烧伤后CD44和Eselectin的mRNA合成的影响,探求其对角膜碱烧伤的治疗作用。方法制备Wistar大鼠角膜碱烧伤模型,一组给予TGFβ2(浓度为1mg·L-1)局部滴眼,每日3次,一组未给予TGFβ2治疗。于角膜碱烧伤后3d和2周应用RTPCR方法检测TGFβ2治疗组与未治疗组角膜CD44和Eselectin的mRNA合成情况。结果角膜碱烧伤3d时CD44mRNA表达无显著变化,碱烧伤2周时CD44表达量增加,同正常对照组相比差异显著(P<0.01)。TGFβ2治疗组3d和2周时CD44的mRNA合成同未治疗组相比均有增加,2组差异显著。角膜碱烧伤3d时EselectinmRNA的表达量低于正常对照组,碱烧伤2周时Eselectin表达量高于正常对照组,有显著差异(P<0.01)。TGFβ2治疗组3d和2周时Eselectin的mRNA合成同未治疗组相比均有增加,3d时增加明显,差异极显著。结论TGFβ2能促进急性期和营养紊乱期CD44和EselectinmRNA的合成,减轻碱烧伤后的炎症反应。TGFβ2能够通过影响角膜局部粘附分子的合成和表达来减轻病理损伤,促进创伤愈合。     

转化生长因子β2(TGF-β2)对大鼠角膜损伤愈合的影响

目的：探讨转化生长因子β2(TGF-β2)对大鼠角膜针刺损伤愈合的影响。方法：雄性wistar大鼠20只，均取右眼制造角膜针刺创伤模型后随机分成实验组和对照组，实验组用转化生长因子β2(TGF-β2)点眼，对照组用生理盐水点眼，每日6次、至创面愈合止。计算剩余损伤面积、行组织学检查及透射电镜观察。结果：术后两组创面愈合面积比较实验组均快于对照组，且差异显著，组织学检查及电镜观察均显示两组差异。结论：TGF-β2有促进角膜损伤愈合的作用，其可能的机制为TGF-β2是胶原溶酶的主要抑制剂，可抑制基质中胶原酶的合成，降低胶原分解，促进胶原的分泌。     

穿透性角膜移植术后内皮免疫反应患者房水中可溶性Fas配体和转移生长因子β2的检测

背景：穿透性角膜移植物长期良好预后的解释是角膜和前房的免疫赦免。动物模型中转移生长因子β2(transforminggrowth factor TGF-β2)分泌人前房以及Fas配体在角膜内皮细胞上表达被确认对免疫赦免的完整性是重要的。     

TGF—β1基因在高危角膜移植术后对移植排斥反应的作用

目的研究高危角膜移植术后,重组腺相关病毒（rAAV）携载的TGF—β1基因（rAAV—TGF—β1）在角膜中的表达及对免疫排斥反应的影响。方法用碱烧伤的方法建立受体角膜新生血管（CNV）化模型。20只Wistar大鼠角膜为供体,40只SD大鼠为受体进行大鼠穿透角膜移植。治疗组术前将20只供体植片置于含rAAV—TGF-β1的DMEM／F12混合培养液中常温培养30min,对照组术前将20只供体植片置于DMEM／F12培养液中常温培养30min,术后裂隙灯下观察植片排斥反应及存活情况。免疫组织化学染色观察2组术后1、2、4周TGF—β1在角膜中的表达。Western blot检测2组术后1、2、4、8周TGF—β1的表达量。结果治疗组角膜平均存活时间为（17．60±2．31）d,对照组为（9．27±1．50）d,治疗组角膜植片混浊及血管化程度明显低于对照组（P〈0．01）。免疫组织化学染色显示治疗组术后1周TGF-v在角膜上皮呈弱阳性表达,术后2～4周角膜上皮及内皮细胞层呈阳性表达并高于对照组。对照组术后1～4周TGF—β1在角膜上皮及基底膜呈弱阳性表达。Western blot检测显示术后1周2组角膜TGF—β1含量差异无统计学意义（P〉0．05）,术后2、4、8周治疗组角膜TGF—β1的表达较对照组增高（P〉0．05）。结论rAAV-TGF—β1能减轻高危角膜移植的排斥反应。     

TGF-β1和TGF-β RⅡ在视网膜母细胞瘤的表达

目的　探讨视网膜母细胞瘤的TGF β1和TGF βRⅡ的表达及其与临床病程和预后的关系。方法　应用免疫组织化学SP法检测TGF β1和TGF βRⅡ在 37例视网膜母细胞瘤瘤组织中的表达 ;用HPIAS 10 0 0彩色病理图像分析系统测量其平均积分吸光度值。结果　在 37例视网膜母细胞瘤组织切片中 ,均可见瘤细胞TGF β1表达强阳性 ,其表达水平明显高于正常视网膜 ,视神经浸润组的瘤组织中TGF β1的表达水平明显高于无视神经浸润组 (P <0 .0 5 ) ,眼外期组TGF β1的表达水平明显高于眼内期组和青光眼期组。TGF βRⅡ在 37例瘤组织中均为阴性。 结论　TGF β1的表达水平增高与临床分期和视神经浸润有关 ;高表达TGF β1可能意味预后不良 ;对TGF β1增殖抑制作用反应的丧失与视网膜母细胞瘤的发病有关     

PRK术后泪液中EGF、TGF-β1、IL-1α含量的变化

目的 :探讨表皮生长因子 (EGF)、转化型生长因子 β1(TGF β1)、白细胞介素 1α(IL 1α)三种与角膜关系密切的细胞因子于PRK手术前后在泪液中的含量 ,并寻求其术后短期内的变化规律。方法 :于PRK术前及术后 1d ,2d ,10d及 1个月在患者下睑结膜囊内抽取泪液标本。采用双抗体夹心ABCELISA法进行检测。结果 :在PRK术前至术后 1个月的随访期间 ,EGF和IL 1α无明显变化 (P >0 .0 5 )。术后第1天泪液中TGF β1含量较术前降低 (P <0 .0 5 )。结论 :PRK手术前后EGF和IL 1α无明显变化 ,可能是该种细胞因子对维持细胞稳态起作用 ,或是通过其他细胞因子发挥作用。而TGF β1在术后 1d含量较术前下降 ,致使其对EGF的抑制作用相对减低 ,给细胞增殖移行提供机会 ,尽快恢复其屏障功能 ,之后TGF β1又恢复至术前水平 ,与其他因子形成新的动态平衡 ,共同调节术后角膜创面的修复愈合。     

FK-506抑制大鼠角膜移植免疫排斥反应的研究

目的建立近交系大鼠穿透性角膜移植动物模型,观察结膜下注射ＦＫ５０６对角膜移植免疫排斥反应的抑制作用。方法将近交系Ｌｏｕ大鼠２８只作受体,１４只Ｆ３４４大鼠作供体,分为３组,术后结膜下分别按每公斤体重注射０．１ｍｇＦＫ５０６、３ｍｇＣｓＡ及生理盐水,共２周。对角膜植片进行临床观察,以混浊、水肿和新生血管３项指标作为临床评估标准。结果３组角膜植片的存活时间分别为（２２１±５１７）、（１８４±１４）及（１２１±２１３）天,三者间差异有显著性（Ｐ＜０．０１）。结论ＦＫ５０６能显著延长大鼠角膜植片的存活时间,是一种有效的新型免疫抑制剂。     

霉酚酸酯对大鼠角膜移植术后排斥反应的抑制

目的研究霉酚酸酯(MMF)对大鼠角膜移植术后临床参数变化的影响.方法建立大鼠穿透性角膜移植排斥反应的动物模型,观察MMF对大鼠角膜植片存活和各排斥反应临床指数的影响,并与阴性对照组和环胞霉素A(CsA)治疗组相比较.结果阴性对照组角膜植片平均存活时间为11.375±1.685天,CsA治疗组为18.625±1.598天,MMF治疗组为16.500±1.852天,CsA±MMF组为24.500±1.773天,均比阴性对照组显著延长(P＜0.05);阴性对照组排斥反应指数(RI)、浑浊、水肿三项临床指标明显高于各用药组(P＜0.05),但新生血管指数与MMF组、CsA组相比较,差异无显著性意义(P＞0.05).结论MMF对大鼠穿透性角膜移植排斥反应具有明显的抑制作用,显著地延长角膜植片的存活时间,降低角膜植片浑浊、水肿的程度.     

TGF-β1/TGF-βRⅡ和Smad4在葡萄膜黑色素瘤中的表达

目的探讨转化生长因子β1(TGF—β1)／转化生长因子β受体Ⅱ(TGF—βRⅡ)和Smad4在葡萄膜黑色素瘤中的表达以及它们在葡萄膜黑色素瘤发病过程中可能的机制。方法应用免疫组织化学SP法检测TGF—β1／TGF-βRⅡ和Smad4在24例葡萄膜黑色素瘤瘤组织石蜡切片中的表达，并累计其表达的阳性率。结果24例葡萄膜黑色素瘤组织切片中，可见瘤组织TGF-β1阳性率为24／24，TGF-βRⅡ阳性率12／24，Smad4阳性率11／24，后两者双阳性率为5／24。结论葡萄膜黑色素瘤组织中TGF—β1表达高于瘤旁组织；TGF-βRⅡ和(或)Smad4的表达异常与葡萄膜黑色素瘤发病有关。     

TGF-β1短期眼部应用对兔眼角膜碱烧伤后整合素β1表达的作用

目的：研究TGF—β1短期眼部应用对兔角膜碱烧伤后整合素β1表达和角膜上皮愈合的影响，探求其对角膜碱烧伤的治疗作用。方法：制备大耳自家兔角膜碱烧伤模型，一组给予TGF—β1（浓度为200ng／m1）局部滴眼，每日3次，连续7日；另一组给予PBS溶液代替，处理相同。于角膜碱烧伤后每13观察角膜上皮愈合面积，并于烧伤后6h、1d、3d、7d和14d5个时间点应用免疫组化方法检测TGF—β1实验组与PBS组角膜整合素β1表达情况。结果：烧伤后4d、10d、11d、12d和14d实验组和对照组上皮愈合率比较，差异有统计学意义（P〈0．05），两组随着上皮修复过程的进行，整合素B1的表达均逐渐增加，烧伤后7d、14d两个时间点实验组和对照组整合素B1平均灰度值比较，差异有显著性（P〈0．05）。结论：TGF—β1在活体实验中能促进整合素β1的表达，而后者的增加可以促进角膜上皮细胞向损伤区域的移行和粘附，从而减少碱烧伤愈合过程中上皮再次脱落现象，有利于创伤愈合。