重组SRH融合蛋白工程菌发酵工艺分析

目的：对SRH融合蛋白工程茵发酵表达的影响因素进行研究和分析,并建立适宜的sRH融合蛋白工程菌发酵工艺。方法：优化SRH发酵过程中的诱导时机、诱导温度、诱导时间、溶氧调控和pH值,建立SRH融合蛋白工程茵发酵工艺,采用SDS-PAGE电泳对其表达情况进行分析;纯化目的蛋白,方法为凝胶过滤层析和离子交换,检测纯化后目的蛋白的抗凝活性和溶栓活性。结果：优化后发酵条件如下：溶氧为45％,发酵pH为7．0,菌体浓度为OD640=8时开始诱导,诱导时间为4．5h,诱导温度为41℃。在此发酵条件下,细菌获得量为25g／L,SRH蛋白的表达量为45％,可溶性表达为90％;目的蛋白经过纯化后,纯度超过95％,100AU／mg和1.80×10-4AU／mg分别为SRH的抗凝活性和蛋白溶栓活性。结论：建立了SRH融合蛋白工程茵发酵工艺,蛋白表达量在该发酵条件下具有较高值,发酵蛋白中含有少量的杂蛋白,大部分为可溶性表达,发酵产物具有生物学活性。     

纳豆菌产糖苷酶的发酵工艺优化

目的:优选纳豆菌产糖苷酶的发酵工艺.方法:采用TLC检测发酵后纳豆中大豆异黄酮变化情况.以酶活力为指标,在单因素试验基础上,通过正交试验考察发酵时间、加水量、接种量、初始pH对发酵工艺的影响.结果:TLC确定使用纳豆菌产的糖苷酶为胞内酶.最佳发酵工艺为发酵时间36 h,加水量70％,接种量10％,初始pH7.5,酶活力达205 U·mL-1.结论:大豆异黄酮经纳豆菌发酵能由糖苷形式转化为苷元形式,纳豆菌所产的胞内酶转化染料木苷为染料木素的酶活力高于胞外酶.     

基质pH值和接种量对西洋参愈伤组织悬浮培养物的影响

本实验探讨了基质初始pH值和接种量对西洋参愈伤组织悬浮培养物生长及皂苷合成的影响，结果表明：基质初始pH6．0～6．5，鲜、干重及皂苷含量均较高；0．8g／瓶的接种量效果最佳。     

凹叶厚朴细胞悬浮培养的研究

目的研究凹叶厚朴MagnoliaofficinalisRehd.etils.Subsp.biloba（Rehd.etwils.）Law的细胞悬浮培养。方法以凹叶厚朴茎段诱导的愈伤组织为材料,应用L9（34）正交设计研究植物生长调节剂对凹叶厚朴悬浮细胞生长的影响,通过单因素试验,考察初始接种量、蔗糖浓度、pH值对凹叶厚朴悬浮细胞生长的影响。结果植物生长调节剂6-BA是影响凹叶厚朴悬浮细胞生长的主要因素;最佳初始接种量为8ml;最佳蔗糖浓度为30g/L;最佳pH值为6.5时。结论初步建立了适合凹叶厚朴悬浮细胞培养的体系。     

灵芝液体发酵产漆酶最佳培养基和培养条件研究

目的研究灵芝液体发酵产漆酶的最佳培养基和培养条件。方法以灵芝S3号菌株为试验材料,以灵芝漆酶活性为衡量指标,通过正交试验分别对灵芝液体发酵培养基及培养条件进行优化筛选。结果筛出最佳培养基组成为葡萄糖30g/L、棉花0.2%、磷酸氢二铵0.66g/L、干酪素0.5%、聚山梨酯-800.15%;优化培养条件为初始pH5.5、装液量75mL、接种量12.5%、菌龄5×24h、培养时间9×24h。结论优化培养基及培养条件后,发酵液中灵芝漆酶活性显著提高。     

玉米中红曲色素的生产工艺研究

目的研究利用玉米生产红曲色素的新技术,探讨红曲色素的最佳提取工艺。方法以红曲霉为菌种,种子液体培养发酵、红曲固体发酵生产红曲色素。结果选育优势变异菌种M-04株,红曲固体发酵最佳条件是接种量6%,玉米初始水分35%,发酵温度28~32℃。最佳浸取工艺为:溶剂为70%乙醇水溶液,提取温度60℃,提取时间2 h。结论得出了玉米中红曲色素生产的最佳外界条件。     

高产绿原酸杜仲细胞悬浮培养体系优化研究

目的优化杜仲细胞悬浮培养及其产绿原酸的条件。方法研究基本培养基种类、激素质量浓度、碳源种类及质量浓度、pH值、接种量和摇床转速等因素对杜仲细胞生长和绿原酸产量的影响,建立了高产绿原酸的悬浮细胞培养体系。结果B5培养基+0.5 mg/L NAA+0.6 mg/L 6-BA、蔗糖30 g/L、初始pH 5.0~5.5、接种量20g.FW/L以及摇床转速110 r/min为杜仲细胞悬浮培养的适合条件。结论优化后的培养条件为杜仲细胞大规模悬浮培养生产天然活性成分奠定了基础。     

肉苁蓉种子愈伤组织诱导条件的研究

目的　对肉苁蓉种子愈伤组织的诱导条件进行研究。方法　用不同方法处理肉苁蓉种子使之诱导出愈伤组织。结果　最适条件为 :将种子剥去种皮 ,在 5 0℃下进行 1h热处理激活 ,然后接种在添加 2 ,4 D (1mg·L-1) +KT (0 .5mg·L-1) +GA3 (1mg·L-1) +CH (5 0 0mg·L-1)的MS固体培养基上 (pH6 .0 ) ,诱导时温度为 2 5℃ ,暗培养 ,此条件下肉苁蓉种子愈伤组织的发生率为 2 5 %。结论　剥去种皮及热处理是肉苁蓉种子愈伤组织形成的关键 ,其最佳条件是 5 0℃处理 1h。     

发酵乳杆菌发酵人参工艺优化及人参皂苷抗氧化活性测定

目的优化发酵乳杆菌发酵人参的工艺,分析发酵前后人参皂苷抗氧化活性。方法以人参为发酵基质,发酵乳杆菌为发酵菌株,活菌数为响应值,对发酵时间、人参添加量、发酵温度、接种量等因素进行设计及响应面分析。采用HPLC法对人参皂苷含有量进行测定,利用T-SOD试剂盒测定发酵前后SOD活性变化。结果最佳条件为发酵时间42 h,人参添加量8.03%,温度28.24℃,接种量2%,乳酸菌活菌数为4.5×10~(13)CFU/mL。发酵后人参皂苷含有量均有一定升高,表明发酵过程存在其转化。人参匀浆SOD活性较发酵前提高了26%。结论益生菌发酵人参具有潜在的应用价值。     

诱导HEK293细胞增殖中钙离子及TRPC6的变化及意义

目的建立AngⅡ诱导人胚肾细胞增殖模型,探讨增殖效果与Ca2+变化及TRPC6表达的关系。方法用不同浓度AngⅡ诱导细胞,在不同时间(0,6,12,24,48 h),予LOS干预24 h后用激光扫描共聚焦显微镜测Ca2+变化,RT-PCR、Western Blot检测TRPC6表达情况。采用MTT法及台盼蓝法检测细胞增殖及活性,确定最适浓度及时间构建增殖模型。结果 AngⅡ10-6mol/L诱导HEK293 24 h后细胞增殖及Ca2+升高明显,LOS干预后细胞增殖及Ca2+明显下降。TRPC6表达(+/-),胞膜、胞质定位不清。结论 HEK293细胞自身无明显表达TRPC6,可利用此表达系统进一步研究外源性TRPC6与Ca2+变化的关系。AngⅡ诱导HEK293细胞增殖与Ca2+升高有关,具有一定的时间和剂量依赖性。     

《老老恒言》论老年养生

简要论述了《老老恒言》中有关老年养生的思想和方法 ,认为饮食以调理脾胃为要 ,应注意饮食有节、五味调和、清淡为补 ;起居以养静为要 ,应注意调顺四时、起居有常、静养与导引相结合 ;养性以安命为要 ,应注意清心寡欲、修心养性     

珍珠母超微粉蛋白及寡肽对小鼠镇静安眠作用比较

目的比较珍珠母超微粉蛋白、寡肽对小鼠镇静安眠作用。方法利用PCPA制造小鼠失眠模型,观察小鼠的自主活动情况,ELISA法测小鼠血中ATCH含量并计算脑及脑系数。结果阳性对照组、寡肽组小鼠的自主活动次数显著降低,小鼠血中ACTH的含量增加,但脑干系数无影响。结论超微粉寡肽类成分(MCP)镇静安眠活性最强,为镇静安眠主要活性部位,调节ACTH可能是其镇静安眠机制。     

病性变化和转化的哲理数学原理

病性的变化和转化以及疾病的传变是中医病理学的2个核心问题。它们可分别从阴阳五行数学的公理1和公理2、3得到圆满的解释。病性变化,其症结在于主导属性明晰度的大小发生变化;病性转化,其症结则在于主导属性明晰度的正负号发生变化。     

丁香苦苷不同给药途径的药物动力学研究

目的:研究并比较丁香苦苷单体两种给药途径在家兔体内的药物动力学过程,考察丁香苦苷单体口服后的绝对生物利用度。方法:家兔静脉注射丁香苦苷注射液和灌胃给予丁香苦苷水溶液,采集血样,固相萃取小柱活化方法处理血浆后高效液相色谱法测定丁香苦苷血浆浓度,采用药动学软件3P97进行数据处理,确定药动学参数。结果:丁香苦苷静脉给药后在体内符合二室模型分布,其主要药动学参数分别如下:T1/2α为2.41min,T1/2β为15.38min。灌胃给药后丁香苦苷的药动学行为符合一级吸收二室模型,Cmax为17.91min,T1/2(α)为9.642min,T1/2(β)31.748min。绝对生物利用度为35.9%。结论:丁香苦苷单体经口服和静脉两种给药途径给药后,吸收和消除均较快。     

腹腔镜诊治不孕症58例分析

目的:探讨腹腔镜诊治不孕症的临床意义和疗效。方法:选取2008年8月—2009年1月入住我院的98名不孕症妇女,将其分为腹腔镜组和经腹手术组,比较两组术后妊娠情况。结果:输卵管粘连Ⅰ～Ⅲ级者,不孕时间要短于输卵管Ⅳ级的患者。腹腔镜组术后妊娠23例,其中临床正常妊娠18例,异位妊娠5例;经腹术组术后妊娠13例,其中临床正常妊娠10例,异位妊娠3例。两组输卵管粘连Ⅰ～Ⅲ级的妊娠率均明显高于Ⅳ级者,差异有统计学意义(P<0.05);两组疗效比较无显著性差异(P>0.05)。结论:腹腔镜诊治不孕症临床疗效确切,值得推广应用。     

对中医学科建设与学科带头人培养的思考

通过中医学术发展的历史沿革回顾,提出了中医药学科建设的总体构思,指出要发展一个大的一级学科,首先要有教育,这是发展学科的基础;其次是科研来提高教育水平,并指导临床;再次是临床;三者缺一不可。同时提出了学科带头人应具备的条件及如何培养学科带头人。     

肩周炎的经筋病机实质与治疗探讨

[目的]探讨肩周炎的经筋病机实质与治疗方法。[方法]从《黄帝内经》原文及现代相关文献出发,分析经筋与肩关节的生理解剖联系、肩周炎发病机制及治疗方法。[结果]生理上,肩关节与手六经之经筋和足少阳、足太阳经筋相联属;病理上,分为"瘀沫期"、"经筋拘急期"、"筋结病灶形成期",但三病理过程相互杂揉与绞结;治疗上,宜遵循"以痛为俞"、采用粗银质针温针治疗,是解除瘀、沫、筋结病灶的重要手段与方法,临床疗效显著。[结论]认真探讨中医生理、解剖学,有利于中医理论的深入理解及拓展临床治疗思路。     

中医方剂学考试改革的探索与实践

传统的闭卷考试不能很好地反映方剂学教学的效果,因此,我们试行了以多种形式相结合的考试改革,考试成绩由笔试、机试、平时3个方面组成。结果大大提高了学生分析问题和解决问题的能力,激发了学生学习的兴趣,提高了教师教学水平,带动了教学改革和教学研究的全面进行。     

针灸治疗椎动脉型颈椎病的取穴规律分析

目的:探寻椎动脉型颈椎病针灸取穴规律。方法:检索CNKI、VIP,建立椎动脉型颈椎病针灸取穴数据库,采用SPSS17.0统计软件统计描述。结果:治疗椎动脉型颈椎病的针灸穴位共计72个,使用频次为1005次;所用腧穴归属为督脉、足少阳胆经、经外奇穴、足太阳膀胱经及足阳明胃经频次最多,其累积频率达82.29%;其中风池穴的频率为19.11%;夹脊穴的频率为17.13%;百会穴的频率为12.3%,三穴累积频率达64.28%。结论:针灸治疗本病,以疏通局部经络,调节阴阳气血,临床选取督脉、足少阳胆经、奇穴以及风池、夹脊、百会三穴治疗最多。     

明代医家脾阴论探讨

脾阴论是明代医家在继承丹溪养阴思想的基础上对东垣的脾胃学说的一次创新,由于后世胃阴学说的兴起,这部分理论逐渐被忽视。文章通过系统整理这部分理论,揭示了其中所蕴含的致中和的治疗理念,以期能被合理地应用到某些疾病证候的治疗当中去,在实践中得到进一步深化。