胃炎消对胃癌癌前病变P16mRNA水平表达的影响

目的:观察胃癌癌前病变(PLGC)组织中P16抑癌基因mRNA水平的表达及胃炎消的调控作用.方法:采用原位分子杂交标记技术检测胃炎消治疗组及维酶素对照组共35例胃癌癌前病变患者治疗前后p16mRNA转录水平.结果:抑癌基因P16mRNA表达阳性率均随着胃粘膜病变的进展逐渐递减.胃炎消能使抑癌基因P16mRNA的表达上调.结论:胃炎消对PLGC有良好的治疗作用,该作用可能与本方上调PLGC组织中与细胞周期调控因子相关抑癌基因P16mRNA的表达有关.     

胃炎消对胃癌癌前病变bcl-2癌基因mRNA表达的影响

观察胃炎消对胃癌癌前病变(PLGC)的治疗作用及其对PLGC组织中bcl-2凋亡相关癌基因表达的影响。方法:采用随机双盲法,将40例PLGC患者分为治疗组(胃炎消治疗)25例和对照组(维酶素治疗)15例,治疗前、后胃黏膜活检标本采用原位分子杂交标记法作bcl-2癌基因mRNA转录水平的检测。结果:治疗组临床总有效率为84.00%,病理疗效以中度异型增生为好,作用优于对照药(P"0.05);治疗组患者治疗后bcl-2癌基因mRNA转录水平表达下调(P"0.05)。结论:胃炎消对PLGC有良好的治疗作用,其机制可能与下调PLGC组织中bcl-2癌基因mRNA转录水平的表达有关。     

健脾养阴活血法对胃癌前病变p16,c-myc蛋白影响的实验研究

目的 明确健脾养阴活血法对胃癌前病变p16,c-myc蛋白影响,并探讨影响机理.方法 将大鼠分为正常组、模型组、维酶素组和中药治疗组,取材做病理检查及免疫组化检验.结果 中药组与模型组及维酶素组均有统计学意义;维酶素组在部分标准下与模型组有统计学意义.结论 以健脾养阴活血法为指导的中药方剂能增强抑癌基因p16的表达,同时使原癌基因c-myc的表达减弱;抑癌基因p16的表达增强和原癌基因c-myc的表达减弱是健脾养阴活血法组方有效治疗胃癌前病变机制之一.     

云母单体颗粒对萎缩性胃炎大鼠胃黏膜癌相关基因蛋白表达的影响

目的:研究云母单体颗粒剂对实验性萎缩性胃炎大鼠癌相关基因表达的调控作用。方法:运用云母高、中、低3种不同剂量的单体颗粒剂,对实验性萎缩性胃炎大鼠进行了分组干预治疗,采用免疫组织化学方法的EnVision系统二步法,观察模型大鼠胃黏膜突变型抑癌基因p53、癌基因p21、抑癌基因p16及细胞凋亡抑制基因bcl-2等基因蛋白表达变化情况。结果:云母3种不同剂量有降低p53,p21表达的倾向,对p16的缺失和bcl-2的高表达有明显调节作用,并能减轻胃黏膜炎症,促进腺体的再生。结论:云母对萎缩性胃炎的治疗和逆转作用可能与对癌相关基因蛋白表达的调控作用有关。     

化浊解毒方对慢性萎缩性胃炎大鼠Hippo/TAZ信号通路及相关蛋白TAZ、LATS2、MST1的影响

目的:研究化浊解毒方对慢性萎缩性胃炎大鼠胃组织Hippo/TAZ信号通路及其相关蛋白转录共激活因子PDZ结合基序(TAZ)、肿瘤抑制激酶(LATS2)、哺乳动物不育系20样激酶(MST1)表达的影响。方法:采用联合造模法建立慢性萎缩性胃炎(CAG)大鼠模型成功后随机分为模型组、维酶素0.06 g/kg组、化浊解毒方7、14、28 g/kg组,灌胃治疗12周。采用HE染色法观察胃黏膜组织病理改变,蛋白质印记法(Western Blot)、实时荧光定量PCR技术检测胃黏膜组织中TAZ、LATS2、MST1蛋白和mRNA的表达。结果:与正常组相比,模型组大鼠胃组织TAZ mRNA和蛋白表达水平显著升高,LATS2、MST1 mRNA和蛋白表达水平显著降低;与模型组相比,化浊解毒方组和维酶素组大鼠一般状态、胃黏膜组织病理变化均改善,胃黏膜组织TAZ蛋白和基因表达水平降低,LATS2、MST1蛋白和基因表达水平升高,并且治疗组中以化浊解毒方28 g/kg组作用最为显著。结论:化浊解毒方在CAG大鼠模型中可通过下调胃黏膜组织中TAZ蛋白和基因表达水平,上调LATS2、MST1蛋白和基因的表达水平而起作用,28 g/kg化浊解毒方能显著改善胃黏膜病理情况,在Hippo/TAZ信号通路的调节过程中,下调TAZ蛋白和基因,上调LATS2、MST1均优于维酶素组。     

丹芪祛瘀止痛颗粒对慢性萎缩性胃炎癌前病变大鼠PTEN、RUNX3基因甲基化的影响

目的:探讨丹芪祛瘀止痛颗粒对PLGC大鼠胃黏膜组织PTEN、RUNX3基因甲基化及PTEN、RUNX3基因mRNA表达的影响。方法:将80只大鼠按体质量随机分为空白组、模型组、维酶素组、丹芪祛瘀止痛颗粒组。除空白组外,其余各组均创建实验性大鼠PLGC模型。造模后,维酶素组和丹芪祛瘀止痛颗粒组给予相应药物灌胃,空白组和模型组以0.9%Nacl溶液灌胃,1次/d。灌胃12周后,观察各组胃组织病理学改变,MSP法检测PETN、Runx3基因甲基化及RT-PCR法检测PETN、Runx3 mRNA表达。结果:维酶素组、丹芪祛瘀止痛颗粒组均能改善胃黏膜组织炎症、萎缩、肠上皮化生、异型增生,其中以丹芪祛瘀止痛颗粒组最佳;造模后,模型组PTEN、RUNX3基因甲基化比率明显高于空白组(P<0.01),药物干预后,维酶素组甲基化比率下调,与模型组比较,差异具有统计学意义(P<0.05);丹芪祛瘀止痛颗粒组与模型组比较,差异具有显著统计学意义(P<0.01),且丹芪祛瘀止痛颗粒组PTEN、RUNX3基因甲基化比率明显低于维酶素组(P<0.01)。RT-PCR结果显示,模型组大鼠PTEN mRNA、RUNX3 mRNA较模型组显著下降(P<0.01),药物干预后PTEN mRNA、RUNX3 mRNA显著上调,其中以丹芪祛瘀止痛颗粒组效果最佳,差异具有统计学意义(维酶素组P<0.05,丹芪祛瘀止痛颗粒组P<0.01)。结论:丹芪祛瘀止痛颗粒可明显改善PLGC大鼠胃黏膜组织萎缩、肠上皮化生及异型增生情况,其作用机制可能是通过降低基因甲基化比率,上调PTEN、RUNX3基因mRNA表达实现的。     

化痰消瘀方通过调节自噬对大鼠癌前病的改善作用

目的探究化痰消瘀方通过调节自噬对大鼠癌前病的改善作用。方法构建大鼠PLGC模型,将大鼠随机分为对照组、模型组、胃复春组(0.5 g/kg)及化痰消瘀方低、高剂量组(5、10 g/kg),灌胃给药4个月。记录大鼠在治疗过程的生存状况、体质量;HE染色观察胃窦部组织病理状态,免疫组化、Western blot及RT-PCR检测LC3、Raptor、Beclin-1蛋白及mRNA表达。结果与模型组比较,化痰消瘀方提高PLGC大鼠体质量(P0.05),抑制PLGC大鼠胃组织LC3、Raptor、Beclin-1蛋白及mRNA表达(P0.05),以上三者蛋白均在细胞核或细胞中表达,化痰消瘀方能改善PLGC大鼠胃窦部组织病理状态。结论化痰消瘀方能改善PLGC大鼠胃窦部组织病理状态,其可能机理在于降低胃组织LC3、Raptor、Beclin-1自噬相关蛋白及mRNA表达。     

基于“毒瘀交阻”探讨金果胃康胶囊对PLGC大鼠Wnt/Lgr5通路调控的影响

目的研究基于"毒瘀交阻"理论组方金果胃康胶囊对胃癌前病变大鼠模型Wnt/Lgr5信号通路调控的分子机制。方法选用SD雄性大鼠随机分为空白组、模型组、金果胃康胶囊(高、中、低剂量)治疗组、维酶素治疗组,我们使用MNNG结合饥饱失常等综合造模法复制PLGC大鼠病理模型,确定模型复制成功,连续灌胃治疗6周后,使用蛋白免疫印迹法检测大鼠胃粘膜组织Wnt/Lgr5信号通路基因及蛋白表达水平。结果与模型组相比较,金果胃康胶囊治疗组大鼠胃黏膜上皮组织中Wnt1mRNA、β-cateninmRNA、Lgr5mRNA表达水平均显著降低,有统计学意义(P0.01)。结论金果胃康胶囊能够有效治疗PLGC,降低胃癌发生风险,可能与通过调控Wnt/Lgr5信号通路,降低大鼠胃黏膜组织Wnt1、β-catenin、Lgr5的蛋白表达及基因转录相关。     

萎胃消对萎缩性胃炎癌前病变患者PTEN和ERK_2蛋白表达的影响

目的:观察萎胃消对慢性萎缩性胃炎伴胃黏膜上皮异型增生或/和不完全型结肠上皮化生的治疗效果及PTEN和ERK2蛋白表达的影响。方法:60例患者随机分为治疗组和对照组。治疗组给予萎胃消颗粒,对照组给予维酶素,疗程3个月。观察临床症状和体征、胃镜和病理组织学变化及PTEN和ERK2的表达。结果:治疗前后症状缓解总有效率:治疗组90.00%,对照组55.67%;胃镜和病理改变总有效率:治疗组70%,对照组33.33%;2组间比较差异均有显著性(P0.01)。PTEN和ERK2表达:治疗组治疗前后PTEN和ERK2表达差异有统计学意义(P0.01或P0.05),而对照组治疗前后PTEN和ERK2表达水平变化不明显。结论:萎胃消具有良好的胃癌前病变逆转治疗效应,其上调抑癌基因蛋白PTEN的表达和有效抑制ERK信号通路的异常激活可能是萎胃消治疗萎缩性胃炎癌前病变的部分作用机理。     

赤芍总苷诱导肿瘤细胞凋亡机制的研究

目的:采用赤芍总苷(TGC,从赤芍中提取的中药单体),作用于荷瘤小鼠,较系统对TGC诱导肿瘤细胞凋亡进行观察,为TGC的开发应用提供实验依据.方法:采用SABC免疫组化法检测bcl-2、p16及原位杂交法测定c-myc mRNA表达.结果:瘤鼠造模后,采用赤芍总苷作用,实验组与模型组bcl-2、c-myc阳性表达显著性差异,下调相关基因bcl-2蛋白和c-myc mRNA表达水平,上调相关基因p16蛋白表达水平.结论:赤芍总苷诱导肿瘤细胞凋亡,其机理可能与下调bcl-2和c-myc,上调p16基因蛋白mRNA表达水平密切相关.     

胃康舒宁对胃癌前病变大鼠胃黏膜上皮细胞凋亡及其相关调控基因表达的影响

目的:探讨胃康舒宁对大鼠胃癌前病变(PLGC)的治疗机制,为临床应用提供依据。方法:将60只Wistar大鼠随机分为4组(正常组、模型组、维酶素组和胃康舒宁组),采用饮用N-甲基-N-亚硝基-N-硝基胍(MNNG)建立大鼠胃癌前病变模型,用维酶素和胃康舒宁治疗12周后,观察各组实验大鼠胃黏膜细胞凋亡指数、Bcl-2和Bax蛋白表达情况及Bcl-2/Bax比值的变化。结果:与模型组大鼠相比,用药组大鼠胃黏膜细胞凋亡指数和Bax蛋白表达明显提高,而Bcl-2蛋白表达及Bcl-2/Bax比值显著降低,胃康舒宁组明显优于维酶素组。结论:胃康舒宁通过调节病变细胞Bcl-2和Bax蛋白的异常表达,改变Bcl-2/Bax比值,使细胞凋亡趋于正常,而对大鼠胃癌前病变具有良好的治疗和逆转作用,其疗效优于维酶素。     

中药治疗胃癌癌前病变的相关药理作用机理

中药通过增强胃黏膜屏障、调节胃肠运动、阻止胆汁反流、抗幽门螺旋杆菌感染、调节免疫功能、调节细胞周期调控因子的表达、抑制胃癌癌前病变组织细胞过度增殖、阻断胃癌前期病变近一步向胃癌转化、上调相关抑癌基因的表达、下调相关癌基因的表达、降低ICAM-1蛋白表达等多种作用机制，能够显著改善胃癌癌前病变患者的征状，逆转其病理改变。积极治疗胃癌癌前病变，阻断其向胃癌发展，对于降低胃癌发病率其有重要的意义。     

CDX2基因在胃癌癌前病变不同中医证型中的表达

目的通过检测胃癌癌前病变（PLGC）不同中医证型患者胃黏膜组织CDX2基因的表达,探讨不同中医证型与CDX2基因表达之间的相关性及CDX2表达与不同病理类型之间的关系。方法将24例健康人及120例PLGC患者分为健康对照组、脾虚气滞证组、阴虚有热证组、胃络瘀阻证组,每例取新鲜胃黏膜6块,包括胃体、胃角和胃窦各2块,经免疫组织化学染色观察CDX2基因的表达。结果 CDX2基因阳性表达在脾虚气滞证中为16.67%（6/36）,阴虚有热证中为52.17%（24/46）,胃络瘀阻证中为63.16%（24/38）,健康对照组无表达;其在Ⅰ型肠化生表达为33.33%（18/54）,Ⅱ型肠化生表达为25.93%（14/54）,Ⅲ型肠化生表达为27.78%（15/54）,异型增生表达为12.96%（7/54）。结论 CDX2基因的表达与病理类型有关,在不同中医证型的表达有统计学意义,可为PLGC的中医证型客观化提供依据。     

胃灵颗粒对胃癌前病变患者血清生长激素影响的研究

目的:观察胃灵颗粒治疗胃癌前病变(PLGC)的临床疗效及其对胃癌前病变患者血清生长激素(GH)水平的影响,探讨胃灵颗粒对胃癌前病变的可能作用机理。方法:将60例胃癌前病变患者随机分为治疗组与对照组各30例,治疗组予胃灵颗粒,对照组予胃复春片治疗,对两组患者治疗前后的临床症状、胃镜病理和血清GH水平进行比较、分析及评价。结果:胃灵颗粒能显著改善胃癌前病变患者的临床症状,治疗3月后临床症状、综合疗效的总有效率分别为96.67%、90.00%,与胃复春组比较有统计学意义(P<0.05)。治疗前后血清GH测定结果显示,胃灵颗粒使患者血清GH水平显著升高(P<0.01),与对照组比较有统计学差异(P<0.05)。临床试验中两组均未见不良反应。结论:胃灵颗粒治疗胃癌前病变疗效肯定,能显著改善胃癌前病变患者的临床症状,提高患者血清GH水平。     

基于蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白通路观察化浊解毒方对胃癌前病变大鼠肿瘤血管新生机制的影响

目的基于胃黏膜组织蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白(AKT/mTOR)通路观察化浊解毒方对胃癌前病变(PLGC)大鼠肿瘤血管新生机制的影响。方法将48只雄性SD大鼠按随机分组法分为正常组、模型组、维甲酸组、化浊解毒组,每组12只。采用胃癌前病变模型的建立法复制PLGC模型成功后,模型组、正常组给予0.9%氯化钠注射液10 mL/kg,维甲酸组予维甲酸药液40 mg/kg、化浊解毒组予化浊解毒方水煎液10 g/kg,均每日1次灌服,连续16周。采用免疫组织化学法,检测化浊解毒方对PLGC大鼠胃黏膜组织AKT、mTOR的影响。结果给药16周后,模型组AKT、mTOR表达高于正常组,比较差异有统计学意义(P0.05);与模型组比较,化浊解毒组、维甲酸组AKT、mTOR的表达均有不同程度下降,比较差异有统计学意义(P0.05);化浊解毒组与维甲酸组比较,AKT、mTOR表达明显降低,比较差异有统计学意义(P0.05)。结论化浊解毒方可能是通过降低AKT、mTOR的表达,从而调控AKT/mTOR通路,达到抗肿瘤血管新生以逆转PLGC的治疗效果。     

益气养阴活血法对胃癌前病变大鼠VEGF影响的研究

目的:探讨益气养阴活血法对胃癌前病变大鼠VEGF的影响。方法:Wistar雄性大鼠,随机分成模型组、正常对照组、中药低剂量组、中药高剂量组和维霉素组,每组15只。采用N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)、35%无水乙醇及热面糊灌胃等方法造模,时间为16周。结果:益气养阴活血法可降低胃癌前病变大鼠VEGF的表达。结论:益气养阴活血法干预可下调胃癌前病变大鼠的VEGF水平,从而抑制内皮细胞生长和血管生成,起到防治胃癌前病变的作用。     

补肾、健脾、益气、活血法对衰老细胞周期基因表达的调控作用

目的：比较补肾、健脾、益气、活血法对衰老细胞周期基因表达的调控作用。方法：采用上述4种不同的含药血清对衰老的人胚肺二倍体成纤维细胞2Bs细胞株进行处理,通过细胞寿命实验、流式细胞仪、RT—PCR、Westemblot方法研究不同中药对衰老细胞周期及其相关基因(P16^INK4、Cyclin D1及PCNA)的mRNA转录和蛋白表达的影响。结果：补肾、益气中药对衰老细胞周期有一定的促进作用,并可下调衰老细胞增殖抑制基因P16和周期蛋白Cyclin D1的mRNA／蛋白表达;上调细胞周期促进增殖基因PCNAmRNA／蛋白的表达。而健脾、活血中药对细胞周期及其相关基因和蛋白表达的作用不明显。结论：补肾、益气方药对细胞周期有促进作用,其中的作用可能是通过促进P16途径的基因表达来实现。     

复方中药白龙对G1期人胃癌细胞中抑癌基因的影响及与PKA信号通路的相关性

目的：探讨复方中药白龙对人胃癌ＢＧＣ８２－３Ｇ１期细胞周期蛋白激酶抑制因子（ＣＫＩ）ｐ１６＾ＩＮＫ４ａ，ｐ２１以及Ｒｂ，ｃ－ｍｙｃ等基因转录的影响和ｃＡＭＰ－ＰＫＡ信号通路的调节关系。方法：通过实验室常规分子生物学手段（细胞同步化，分子杂交－Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交，Ｗｅｓｔｅｒｎ杂交等）检测相关基因的表达变化。     

动脉粥样硬化家兔蛋白质硝基化修饰及补肾抗衰片干预研究

目的：研究补肾抗衰片对家兔动脉粥样硬化（AS）病变后血管组织蛋白质硝基化修饰的影响。方法：56只日本大耳白兔随机分为正常组（NOR）、模型组（CHOL）、补肾抗衰片组（BSKS,1 g·kg^-1·d^-1）、辛伐他汀组（SIMVA,5 mg·kg^-1·d^-1）;各组分别于给药前、给药后8,12,16周采血,最后1次采血后处死动物,无菌条件下取主动脉,检测血清环氧合酶-2（COX-2） 活性以及一氧化氮（NO）、3-硝基酪氨酸（3-NT）水平,检测主动脉诱导型一氧化氮合酶（iNOS）mRNA、p38 MAPK mRNA的表达,p38 MAPK阳性面积以及eNOS蛋白水平。结果：与正常组比较,动脉粥样硬化造模的不同时期都可检测到 iNOS表达和蛋白质酪氨酸的硝基化,模型组内膜明显增厚、纤维帽较薄,斑块内有大量脂质沉积,血清3-NT水平明显升高,补肾抗衰片干预后,血清3-NT水平下降,NO水平明显升高,而COX-2活性没有明显变化;免疫组化染色发现,主动脉p38 MAPK mRNA,iNOS mRNA基因在正常组仅有少量表达,AS病变组p38 MAPK mRNA,iNOS mRNA表达增加;与模型组比较,补肾抗衰片也明显降低了家兔p38 MAPK水平;p38 MAPK mRNA,iNOS mRNA基因表达明显下降,辛伐他汀也有类似的抑制硝基化效应。结论：动脉粥样硬化时,组织蛋白质酪氨酸发生硝基化损伤,中药复方制剂补肾抗衰片在AS病变中具有重要的抗硝基化作用,其保护机制可能是通过调控p38 MAPK mRNA,iNOS mRNA基因的表达以及影响iNOS/NO-COX-2通路中相关酶的活性,同时补肾抗衰片可能通过对抗硝基化反应稳定动脉粥样硬化斑块。