软脉煎对氧化低密度脂蛋白造成血管内皮细胞损伤的影响

目的：为了探讨具有补肾益气作用的中药复方软脉煎干预动脉硬化(AS)的机制，主要是对氧化低密度脂蛋白(OX—LDL)造成血管内皮细胞(VEC)损伤的影响。方法：采用人脐静脉内皮细胞原代培养，加OX—LDL共同孵育造成血管内皮细胞损伤模型，用中药血清药理学方法将药物血清作用于细胞模型。用M1vr法测细胞生存率，并设舒降之(辛伐他汀)组进行对照。结果：OX—LDL组内皮细胞生存率明显降低(P＜0．01)：软脉煎组和舒降之组均能显著提高细胞生存率(软脉煎组P＜0．01，舒降之组P＜0．05)；软脉煎组细胞生存率高于舒降之组(P＜0．01)。结论：软脉煎能改善OX—LDL对内皮细胞的毒性作用，且优于舒降之组。     

补肾益气方对氧化低密度脂蛋白损伤血管内皮细胞的保护作用

目的:探讨补肾益气方防治动脉粥样硬化(AS)的部分机理.方法:采用氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)致血管内皮损伤为AS细胞病理模型,采用MTT法、3H-Tdr掺入法观察细胞增殖能力与生命活力,通过胞内丙二醛(MDA)含量及细胞培养液乳脱氢酶(LDH)活力的测定,分析比较细胞的受损程度.结果:ox-LDL损伤的血管内皮细胞内MDA含量明显增多,细胞培养液内LDH活力增强,细胞增殖能力及生命活力下降,DNA合成减慢,补肾益气方对此均有明显的改善作用.结论:抗氧化损伤、保护血管内皮细胞是补肾益气方防治AS的部分机理.     

补肾益气方及其拆方对氧化低密度脂蛋白损伤血管内皮细胞的影响

目的　观察比较补肾益气方及其拆方对氧化低密度脂蛋白 (OX -LDL)损伤血管内皮细胞的保护作用 ,以筛选有效单味药或最佳配伍方。方法　用体外法 ,以OX -LDL损伤血管内皮细胞为动脉粥样硬化 (AS)细胞病理模型 ,采用噻唑蓝 (MTT)法 ,通过测定细胞丙二醛 (MDA)含量及其培养液乳酸脱氢酶 (LDH)活力来评估各处理因素的药效。结果　补肾益气方与黄芪首乌配伍方具有明显抗OX -LDL损伤血管内皮细胞的作用 ,可提高OX -LDL损伤血管内皮细胞的活力 ,单味药黄芪具有提高OX -LDL损伤血管内皮细胞增殖能力 ,补骨脂黄芪配伍方能降低OX -LDL损伤血管内皮细胞的MDA含量 ,其他单味药和交叉配伍方均无明显作用。结论　补肾益气方抗OX -LDL对血管内皮细胞损伤作用主要是首乌黄芪协同作用的结果     

黑果枸杞花色苷对氧化低密度脂蛋白损伤血管内皮细胞的保护作用

 目的 探讨黑果枸杞花色苷对体外氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)所致人脐静脉内皮细胞(HUVECs)氧化损伤的保护作用。方法 利用体外培养人脐静脉血管内皮细胞,建立了氧化低密度脂蛋白氧化损伤模型。将细胞分为6组：正常组、氧化低密度脂蛋白组、辛伐他汀组、花色苷低剂量+氧化低密度脂蛋白组,花色苷中剂量+氧化低密度脂蛋白组和花色苷高剂量+氧化低密度脂蛋白组。各剂量组经实验处理后进行细胞计数及形态观察,利用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测细胞增殖能力,运用流式细胞术（FCM）检测内皮细胞增殖周期及凋亡率,并对细胞代谢中的超氧化物歧化酶(SOD) 、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH -Px)、丙二醛（MDA）、过氧化物酶（POD）的活性进行检测。结果 中高浓度的花色苷可以有效的抑制氧化低密度脂蛋白对血管内皮细胞的损伤,减缓被损伤细胞的G₀/G₁比率及凋亡率,增高S期细胞比率、G₂/M 比率;同时提高细胞代谢中超氧化物歧化酶、过氧化物酶、谷胱甘肽过氧化酶的活性,降低丙二醛的含量。结论 黑果枸杞花色苷对氧化低密度脂蛋白所损伤的人脐静脉内皮细胞具有保护作用,其机制可能与抗氧化作用有关。     

补气化痰方对氧化低密度脂蛋白诱导血管内皮细胞损伤的保护作用

目的:研究补气化痰方对氧化低密度脂蛋白诱导血管内皮细胞损伤后的影响及可能的机制.方法:将经氧化低密度脂蛋白损伤血管内皮细胞分为5组:补气化痰方药物血清低、中、高剂量组,模型组和正常对照组.用MTT法观察补气化痰方药物血清对经氧化低密度脂蛋白损伤血管内皮细胞抑制作用的保护;采用west-ernblot检测法测定细胞VEGF蛋白水平探讨其可能的机制.结果:补气化痰方药物血清能减少经氧化低密度脂蛋白诱导血管内皮细胞损伤生长的抑制,并通过上调VEGF蛋白途径达到抑制氧化低密度脂蛋白对血管内皮细胞的损伤.结论:补气化痰方对氧化低密度脂蛋白诱导的血管内皮细胞损伤有保护作用,其可能的机制是上调VEGF蛋白表达实现.     

软脉煎对凝血酶诱导的家兔胸主动脉血管平滑肌细胞增生的影响

目的：探讨具有补肾益气作用的软脉煎对与家兔胸主动脉血管平滑肌细胞增生有关的血小板源生长因子-A链（PDGF—A）mRNA以及细胞超微结构的影响。方法：用贴块法培养家兔胸主动脉血管平滑肌（VSMC），用药物血清学方法将药物血清作用于细胞模型。设立正常组，模型组，软脉煎5倍、10倍、20倍成人剂量组和舒降之10倍成人剂量组。逆转录一聚合酶联反应法测定各组血小板源生长因子A链mRNA表达水平。电镜观察各组超微结构的改变。结果：软脉煎能够使家兔VSMCs PDGF—A链的mRNA表达降低并改变其超微结构。结论：肾中精气亏虚可能是动脉粥样硬化病变发生的根本原因之一，补肾益气可能是治疗动脉粥样硬化的有效原则。     

补气化痰方对氧化低密度脂蛋白损伤血管内皮细胞的抑制及凋亡保护作用

目的 研究补气化痰方对氧化低密度脂蛋白诱导血管内皮细胞损伤后的保护及可能的机制.方法 将经氧化低密度脂蛋白损伤血管内皮细胞分为5组:补气化痰方药物血清低、中、高剂量组,模型组和正常对照组.用MTT法观察补气化痰方药物血清对经氧化低密度脂蛋白损伤血管内皮细胞抑制作用的保护;采用westernblot检测法测定细胞Bax与Bcl-2蛋白水平探讨其可能的机制.结果 补气化痰方药物血清能减少经氧化低密度脂蛋白诱导血管内皮细胞损伤生长的抑制,并通过上调Bax蛋白及下调Bcl-2蛋白途径达到抑制氧化低密度脂蛋白对血管内皮细胞的损伤.结论 补气化痰方对氧化低密度脂蛋白诱导血管内皮细胞损伤具有一定的保护作用.     

泽泻对ox-LDL致血管内皮细胞损伤的保护作用

目的观察泽泻含药血清对ox-LDL诱导损伤的血管内皮细胞活性、形态学、NO、NOS及SOD的影响,探讨泽泻含药血清保护血管内皮细胞的可能机理。方法 100μmol/L ox-LDL造成血管内皮细胞氧化应激损伤模型,cck-8法检测各组细胞增殖情况;试剂盒检测各组细胞上清液中SOD的活力和NOS、NO含量。结果 100μmol/L ox-LDL可抑制血管内皮细胞活性,降低SOD活力,降低NOS含量和NO的分泌,而泽泻则能改善100μmol/L ox-LDL对血管内皮细胞的损伤,对血管内皮细胞具有一定的保护作用。结论泽泻可以通过调控抗氧化损伤机制保护血管内皮细胞,这可能是泽泻抗氧化损伤机理所在。     

氧化型低密度脂蛋白对内皮细胞增殖和凋亡的影响

目的 研究氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)对内皮细胞损伤的可能机制.方法 用不同质量浓度的ox-LDL处理体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)24h,观察HUVECs的形态学变化,评价细胞增殖,观察PI染色后细胞核的形态改变.使用流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 与对照组相比,100mg/L ox-LDL能够促进细胞增殖,200mg/L ox-LDL对细胞增殖无影响,400mg/L ox-LDL明显抑制细胞增殖并可明显引起细胞凋亡,与空白对照组比较差异有统计学意义.结论 ox-LDL能抑制内皮细胞增殖并引起细胞凋亡,这可能与其致动脉粥样硬化(AS)作用机制有关,可用ox-LDL刺激体外培养的内皮细胞进行AS研究.     

天麻素对氧化低密度脂蛋白诱导牛主动脉内皮细胞损伤的保护作用

目的：研究天麻素对氧化型低密度脂蛋白（Ox-LDL）所致牛主动脉内皮细胞损伤的保护作用。方法：本实验采用Cu^2＋体外介导人低密度脂蛋白（LDL）模型,利用Ox—LDL诱导新生牛主动脉内皮细胞损伤,观察天麻素对LDL的氧化修饰以及对Ox—LDL所致内皮细胞毒性和O2-产生的抑制作用。结果：Ox-LDL对血管内皮细胞的毒性作用得到有力证实：Ox-LDL可以剂量依赖性地降低内皮细胞存活率,并可损伤细胞膜,引起乳酸脱氢酶的泄露;同时观察到Ox-LDL损伤内皮细胞的形态变化。天麻素能够显著抑制LDL氧化过程中的脂褐素和维生素E含量,并从生化和形态学方面显著减轻Ox-LDL对内皮细胞的细胞毒性;其作用可能与降低O2-的产生量有关。结论：天麻素在保护人血浆中LDL、抑制LDL的过氧化修饰并减少Ox-LDL对细胞损伤方面具有重要作用。     

血浆内氧化低密度脂蛋白在肺癌和血管损伤性疾病中特异性变化的实验研究

目的 研究不同种氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)在肺癌(Ca)和动脉硬化性血管损伤性疾病(As)病人血液中的特异性变化,探讨不同种氧化低密度脂蛋白与肿瘤及动脉硬化发病之间的相互关系.方法 以临床确诊肺癌的16例患者为Ca组,12例患者为As组,选择健康大学生20名作为正常对照组.分别检测血浆内LPO含量、SOD活性及各组氧化脂质的峰线位置.结果 Ca组、As 组LPO含量与正常组比较差异有显著性,As组SOD活性与正常组比较差异有显著性;在薄层层析中Ca组、AS与正常组的过氧化低密度脂蛋白分布均有不同.结论 Ca与As患者和正常人比较其细胞氧化低密度脂蛋白代谢特征表现为代谢率增强,过氧化低密度脂蛋白具有不同的特异性变化.     

银杏黄酮苷元对氧化型低密度脂蛋白诱导的人主动脉内皮细胞氧化损伤的影响

目的 观察银杏黄酮苷元（Ginkgo flavone aglycone,GA）对氧化型低密度脂蛋白（oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL）诱导的人主动脉内皮细胞（human aortic endothelial cells,HAECs）氧化应激损伤的保护作用及其机制。方法 体外培养HAECs,分为6组,即空白对照组、ox-LDL组、VitE组以及GA30、60、90 mg/L组。除空白对照组外,其余5组均加入ox-LDL 150 mg/L复制氧化损伤模型;GA30、60、90 mg/L组分别给予相应剂量GA干预;VitE组给予VitE 200 μmol/L干预。采用MTT法检测细胞存活率;CM-H2DCFDA荧光探针测定细胞内活性氧（ROS）含量;酶联免疫吸附法检测NADPH氧化酶含量;硫代巴比妥酸法检测丙二醛（MDA）水平;Griess reagent法测定一氧化氮（NO）含量;黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶（SOD）的含量。结果 与空白对照组（100.00%）比较,ox-LDL组（70.68%）细胞存活率明显降低（P<0.05）;VitE组、GA30 mg/L组、GA60 mg/L组细胞存活率分别为88.95%、83.25%、94.93%,均明显高于ox-LDL组（P<0.05）,以60 mg/L GA作用更强。与空白对照组比较,ox-LDL组细胞内ROS、MDA及NADPH氧化酶水平增加,NO含量及SOD活性降低,差异均有统计学意义（P<0.05）;与ox-LDL组比较,GA30 mg/L组、GA60 mg/L组及VitE组细胞内ROS、MDA及NADPH氧化酶水平降低,NO含量及SOD活性增加,差异均有统计学意义（P<0.05）,以60 mg/L GA作用更强。结论 GA可明显抑制ox-LDL诱导的ROS合成,降低MDA水平,升高NO。其作用机制可能与SOD活性增加及NADPH氧化酶活性降低有关。     

加味补阳还五汤对氧化型低密度脂蛋白损伤血管内皮细胞的保护作用

目的:观察加味补阳还五汤(BHT)含药血清和含药血浆对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)损伤血管内皮细胞(VEC)的保护作用及机制,同时比较加味BHT含药血清和含药血浆对VEC生成影响的差异。方法:制备加味BHT含药血清和含药血浆,体外培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs),采用ox-LDL造模,通过噻唑蓝(MTT)法观察细胞活力和Hoechst33258染色法、流式细胞术观察细胞凋亡率,并通过测定一氧化氮(NO),丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活力,探讨加味BHT含药血清和含药血浆对ox-LDL损伤VEC的保护作用及含药血清和含药血浆之间的差异。结果:与空白组比较,模型组细胞死亡和凋亡率明显升高(P0.05),和模型组比较,加味BHT含药血清组和含药血浆组能显著降低ox-LDL造成的HUVECs的凋亡和死亡率(P0.05),细胞活性显著增强(P0.05),NO含量,SOD和GPx活力显著提高,MDA含量均显著下降(P0.05)。此外,含药血清组与含药血浆组比较细胞凋亡和死亡率更低(P0.05),含药血浆组与含药血清组比较产生NO含量明显增加(P0.05)。结论:加味BHT含药血清和含药血浆对于oxLDL损伤的VEC具有一定保护作用,其机制可能与改善内皮细胞功能、抗氧化损伤、抑制细胞凋亡有关。在一定条件下对于加味BHT含药血浆保护VEC的作用强于含药血清。     

氧化型低密度脂蛋白影响人脐静脉内皮细胞生存率和两种细胞因子的分泌

目的：研究氧化型低密度脂蛋白对体外培养的人脐静脉内皮细胞的影响及其可能机制。方法：采用人脐静脉内皮细胞原代培养，加氧化低密度脂蛋白（Og-LDL）共同孵育，用MTT法测细胞生存率、EHSA法测白介素（IL-6）和单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1），并设空白组进行对照。结果：ox-LDL能造成血管内皮细胞具有某些动脉粥样硬化（AS）特征的改变，如内皮损伤、IL-6、MCP-1水平升高，与对照组相比有显著差异（P〈0．01）。结论：可用ox-LDL刺激体外培养的内皮细胞来进行动脉粥样硬化的研究。     

软脉煎治疗颈动脉粥样硬化的临床研究

目的 :为了探讨具有补肾益气作用的中药复方软脉煎干预动脉硬化 (AS)的作用 ,主要是对颈AS患者观察治疗前、后颈动脉内膜中层厚度 (IMT)、斑块面积的变化 ,氧化低密度脂蛋白 (ox -LDL) ,一氧化氮 (NO) ,内皮素(ET)以及中医辨证分值。方法 :采用经彩色多普勒超声确诊有颈AS证据 ,且符合中医肾气虚的患者作为观察对象。彩色多普勒超声检测治疗前、后颈AS灶的变化 ,酶联免疫吸附法测氧化低密度脂蛋白 (ox -LDL) ,硝酸还原酶法测一氧化氮 (NO) ,放免法测内皮素 (ET)以及观察治疗前、后中医辨证分值 ,并设舒降之 (辛伐他汀 )组进行对照。结果 :AS患者应用软脉煎治疗后 ,其颈动脉IMT减小 (P <0 0 1 ) ,粥样斑块面积缩小 (P <0 0 5 ) ,舒降之对照组无上述作用。治疗前后血清ox -LDL、ET、NO、ET/NO的变化无显著意义 (P >0 0 5 )。软脉煎组治疗后中医症候分值明显改善且优于舒降之对照组 (P <0 0 1 )。结论 :提示软脉煎能使AS病变在一定程度上得到消退 ,同时说明中医辨证论治的重要性。     

不同程度氧化修饰的低密度脂蛋白对血管平滑肌细胞增殖的影响

目的:研究不同程度氧化修饰的低密度脂蛋白在诱导血管平滑肌细胞增殖时的影响.方法:采用消化法培养血管平滑肌细胞,Cu2 氧化制备弱氧化型低密度脂蛋白(mox-LDL)和氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL),用3H-TdR掺入法检测血管平滑肌细胞DNA合成率.结果:在比较n-LDL和mox-LDL、ox-LDL诱导VSMC增殖时,发现mox-LDL组和n-LDL组相似,DNA合成率先上升到最高后快速下降,但mox-LDL组始终明显高于n-LDL组,ox-LDL组则随着时间的推移呈上升趋势.结论:mox-LDL与n-LDL、ox-LDL在诱导VSMC增殖时具有不同的作用方式,其差异与其所含的过氧化脂质种类及不同的受体途径两种因素有密切关系.     

软脉煎联合西药治疗颈动脉粥样硬化的临床研究

目的评价具有补肾益气功效的中药复方软脉煎治疗肾精亏虚型颈动脉粥样硬化的临床疗效和安全性。方法将98例肾精亏虚型颈动脉粥样硬化患者随机分为治疗组和对照组,每组49例;对照组给予西医常规治疗,治疗组在西医常规治疗基础上加用复方软脉煎,疗程均为6个月。比较两组患者治疗前后颈动脉内中膜厚度(IMT)、斑块面积、终点事件发生率等疗效指标和安全性指标。结果治疗后,治疗组IMT较治疗前降低(P0.01),对照组较治疗前增厚(P0.01);治疗组IMT治疗前后差值较对照组大(P0.01)。治疗组斑块面积较治疗前缩小(P0.05),且其治疗前后斑块面积差值较对照组增大(P0.01)。治疗组累积终点事件发生率、次要终点事件发生率较对照组低(P0.05)。结论软脉煎联合西医常规治疗可抑制颈动脉粥样硬化增厚,延缓斑块面积进展,降低临床终点事件发生率。     

葛根素对oxLDL诱导的血管内皮细胞凋亡的防护作用

目的:研究中药葛根素抑制氧化低密度脂蛋白(oxLDL)诱导的血管内皮细胞凋亡及其介导机制。方法:应用大鼠模型,低密度脂蛋白(LDL)体内诱导血管内皮细胞凋亡,葛根素进行干预,观察其对LDL诱导血管内皮细胞凋亡的影响。原位末端标记技术(TUNEL)法检测凋亡细胞,比色法测半胱天冬蛋白酶3(Caspase-3)酶的活性。结果:LDL组与氯化钠对照组比较血管内皮细胞凋亡数显着增加,caspase-3酶活性显着增高,葛根素干预组与LDL组比较凋亡细胞数显着减少,caspase-3酶活性下降。结论:LDL可能通过激活caspase-3使大鼠血管内皮细胞凋亡;中药葛根素可通过抑制caspase-3酶活性抑制LDL诱导细胞凋亡。     

软脉煎治疗动脉粥样硬化的临床和实验研究述评

动脉粥样硬化的病因病机以肾中精气亏虚为本,痰瘀交阻为标;治疗当补益肾中精气,兼化痰祛瘀,创立中药复方软脉煎。临床和实验研究证实,软脉煎可通过多种途径防治动脉粥样硬化。     

小檗碱对氧化型低密度脂蛋白诱导的内皮细胞损伤的保护作用

目的探讨小檗碱是否具有保护内皮细胞的作用。方法用不同浓度的小檗碱预处理人脐静脉内皮细胞(HUVECs),再用400mg/L的氧化型低密度脂蛋白(OX-LDL)诱导HUVECs损伤,通过评价细胞增殖、上清液中一氧化氮(NO)及内皮素(ET-1)含量来评价小檗碱对内皮细胞的保护作用。结果 400mg/LOX-LDL能明显抑制HUVECs增殖,下调细胞分泌NO含量,上调ET-1含量;而与模型组相比,小檗碱预处理组细胞增殖活性明显增加,NO含量增加,ET-1含量降低,但随着小檗碱浓度的增加,这种保护作用逐渐减弱。结论小檗碱能够减轻OX-LDL对HUVECs的损伤,对HUVECS具有一定的保护作用。